Facultad Ciencias de la Salud

Escuela Profesional de Farmacia y Bioquímica

CINETICA ENZIMATICA

CURSO:
BIOQUÍMICA I

PROFESOR:

Jack Calderón Gómez

ALUMNOS:

• Pacheco Arroyo Rosa Lucia

• Bados Alarcón Vanessa.
• Flores Zurita, Fanny.
• Altamirano Tincopa Edwar

CICLO: V

LIMA – PERÚ

2010
 Practica n°3

CINETICA ENZIMATICA
Estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas. Estos estudios
proporcionan información directa acerca del mecanismo de la reacción catalítica y
de la especifidad del enzima. La velocidad de una reacción catalizada por un
enzima puede medirse con relativa facilidad, ya que en muchos casos no es
necesario purificar o aislar el enzima. La medida se realiza siempre en las
condiciones óptimas de pH, temperatura, presencia de cofactores, etc, y se utilizan
concentraciones saturantes de sustrato. En estas condiciones, la velocidad de
reacción observada es la velocidad máxima (Vmax).

Las enzimas son proteínas que realizan la catálisis de las reacciones químicas
que se llevan a cabo en los seres vivos. Aunque las reacciones enzimáticas
obedecen a los mismos principios de la cinética química, se diferencian de éstas
por el hecho de que las enzimas son saturadas por los substratos.
Durante una reacción enzimática, el substrato S se une químicamente a la enzima
E para formar un complejo "enzima-substrato" (ES). Luego de sufrir varias
reacciones químicas, el complejo ES se rompe para dar origen al producto P,
liberando a la enzima E, que puede volver a iniciar otro ciclo catalítico.

E + S \=====\ ES \=====\ E + P

Se supone que estas reacciones son reversibles.

En 1913, Michaelis y Menten desarrollaron la teoría cinética general que explica el
comportamiento de las reacciones enzimáticas.
Transaminasas, en el catabolismo de más de una docena de aminoácidos, el
grupo alfa-amino es removido mediante catálisis enzimática. Ya que la reacción es
una transaminación, las enzimas responsables son designadas como
aminotransferasas o transaminasas

Las reacciones enzimáticas se caracterizan porque aunque se aumente la

concentración de sustrato la velocidad no aumenta linealmente, aparece un efecto
de saturación. La saturación se debe a que todos los centros activos están
ocupados. La velocidad depende de la cantidad de enzima con sustrato suficiente.
Consideraremos sólo la velocidad inicial de las reacciones para cada
concentración de sustrato cuano se construya una gráfica, evitando el error
introducido por el deterioro del enzima. Como en el primer momento no hay
producto no consideraremos la reacción contraria.
 I. OBJETIVOS:

• Observar como actúa la concentración de enzimas frente a la velocidad de

reacción y que resultados obtenemos

• Observar y analizar como actúa la velocidad de reacción de una muestra

frente a la temperatura

II. MATERIALES:

• Tubos de ensayo

• Gradilla

• Agua destilada

• Almidón

• amilasa salival

• hielo

• Lugol
 CINÉTICA ENZIMÁTICA

20ml de H2O dest + enjuague bucal x 2´

1) V Rxn Vs [ ] de enzima

RESULTADOS
 10´
- - - - -
20´
+ - - - -
30´
+ - - - -
40´
++ - - - -
50´
+++ - - - -

• El que tiene tres cruces presenta hidrólisis total.

• La concentración de enzima tiene que ser más concentrada es

más rápida

2) V Rxn Vs T°
RESULTADOS:

 Tubo n°1: De color azul marino intenso, la enzima fue desnaturalizada presenta una
reacción de hidrólisis negativa sufrió una desnaturalización, porque no hay enzima
que catalice el sustrato. Encontramos “almidón”.

 Tubo n°2: De color amorronado la concentración optima de enzima, optima del

almidón todos son óptimos, presenta una reacción (positiva) de hidrólisis total.
Encontramos “glucosas”.

 Tubo n°3: De un color azul violaceo. La enzima se ha sometido a una inhibición

por el hielo siendo la reacción (positiva) hidrólisis de tipo parcial. Encontramos
“glucosas y dextrinas”.
REPRESENTACIONES GRAFICAS

1/VRx VELOCIDAD DE REACCIÓN VS TEMPERATURA

37OC

Óptima

OO C
VRx
Inhibición

100OC

100OC

Desnaturalización

VELOCIDAD DE REACCIÓN VS CONCENTRACIÓN DE ENZIMA

 20´

70´

120´

170´

220´

1/160 1/80 1/40 1/20 1/10

1/[E]

A <[E] >TRx<VRx
>[E] <TRx>VRx mayor

concentración de enzima será

menor la temperatura de la reacción, por lo tanto la velocidad de reacción
será mayor.

Nota: Siempre los resultados son contrarios al graficar. Aquí los datos están distribuidos
inversamente.

VRx Vs PH
 0

VRx Optimo pH

Conclusiones:
En la velocidad de reacción vs la concentración de enzimas nuestro objetivo era
ver hasta donde llegaría a hidrolizarse totalmente en que punto exactamente de
tiempo nuestro tubo de muestra daría resultados ps avanzando los 10 minutos
consecutivos llegando a los 50 a 60 mints nuestra muestra tubo 1/10 fue dándonos
un color azul violacio ps si seguíamos pasando el tiempo nuestra muestra llegaría
darnos un color rojo rocella algo así aclarándose asi. Recordar que nuestros
resultados dependen de: >[E] <TRx>VRx

En la velocidad de reacción frente a la temperatura, la reacción es negativa

cuando la enzima de desnaturaliza, cuando es positiva la reacción de la enzima
esta a condiciones optimas y va a presentar una hidrólisis total pero cuando
presenta una hidrólisis parcial quiere decir que se ha producido una inhibición de
la enzima mediante la reacción. Ps en cada caso se han producido colores
característicos en las cuales hemos podido determinar nuestros resultados.