INTEGRANTES:

 MARITZA ADRIANO (712)

 DENNIS CHAMORRO (719)
 JOEL ALVAREZ ()
INTRODUCCIÓN
Bienvenidos al estudio de la biología molecular, campo de la Biología que resulta
sumamente interesante y fascinante. La información genética dirige el funcionamiento de
la célula, determina la apariencia externa de un organismo y sirve de unión entre
generaciones en todas las especies. El conocimiento de cómo se dan estos procesos es
importante para el entendimiento de la vida y de la biosfera, es por tanto imprescindible en
la formación del Biofísico.
Los temas que estudia la genética tienen una relación directa con la biología molecular, la
biología celular, la fisiología, la evolución, la ecología, la sistemática y la etología. Y
determina un mejor y completo entendimiento de estas.
OBJETIVO(S):
GENERAL
Comprender las leyes propuesta por Mendel y la herencia ligada al sexo.
ESPECÍFICOS
El alumno adquirirá la información y destreza necesaria para manipular, mantener y
reconocer las cepas de Drosophila melanogaster que se le entreguen para experimentos
posteriores.
El alumno demostrará experimentalmente la primera y segunda leyes de Mendel y
empleará la prueba estadística de x2 para determinar la probabilidad de que los resultados
observados se apegan a los teóricamente esperados en la segregación fenotípica de la
descendencia.
El alumno demostrará experimentalmente la segregación de un rasgo cuyo Locus se halla
en el cromosoma sexual (X) y probará que existe diferencia en la descendencia al realizar
cruzas recíprocas en contraste de lo que ocurre con rasgos autosómico.
METODOLOGÍA
EXPERIMENTAL
Permite explicar fenómenos, establecer relaciones, enunciar leyes que describen el
fenómeno.
ANALÍTICO
Permite conocer el desarrollo de un evento experimental por sus partes para llegar a un
todo.
 EQUIPOS Y MATERIALES:

Recipient
Frascos de Algodón, e de
Vidrio de Gasa o plástico
500 mL Esponja. de 30 cm
x 20 cm .
Fruta (plátano
- manzana –
guayaba)
Acetona Gelatina sin
sabor o Agar -
Agar

Estereosco
Vinagre Eterizador
pio

Foco de 25
Eter Pincel
W.

MATERIAL BIOLÓGICO
Moscas Drosophila melanogaster tipo silvestre en sus diferentes estadios de desarrollo.
Cepas mutante de Drosophila melanogaster en sus diferentes estadios de desarrollo:
White, Vestigial, Yellow, Ebony. Star, Brown y Black
MARCO TEORICO:
CICLO DE VIDA Drosophila melanogaster
Se ha designado a Drosophila melanogaster con varios nombres comunes como son:
mosca de la fruta y mosca del vinagre. Phylum: Artropoda Clase: Hexapoda Orden:
Diptera Familia: Drosophilidae Género: Drosophila Especie: melanogaster
El ciclo de vida de Drosophila melanogaster incluye cuatro fases: huevo, larva pupa y
adulto. La duración del ciclo varia con la temperatura de cultivo. A 25o C. el ciclo dura
alrededor de 10 días, pero a 20o C, puede durar alrededor de 15 días. Los cultivos de
Drosophila no deben exponerse a altas temperaturas 30o C. Lo cuál resulta en la
esterilización o muerte de las moscas, ni a bajas temperaturas (10o C. ) lo cual resulta en
ciclos de vida prolongados (tal vez de 57 días), y reducir viabilidad. La temperatura
óptima de cultivo es de 25o C.
Figura 1. Ciclo de la mosca de fruta
HUEVO (0.5 mm.)
Las hembras adultas son capaces de poner huevos dos días después de emerger del estado
de pupa, la puesta aumenta por día durante una semana hasta 50 o 75 huevecillos por día.
Los ponen sobre la superficie del alimento. El huevo es ovoide, con dos pequeñas
proyecciones que emergen de un extremo, éstas son aplanadas y la sirven al huevecillo
para que no se hundan en el medio de cultivo. Los huevos se pueden ver a simple vista
sobre la superficie del alimento. El desarrollo embrionario del huevo tarda
aproximadamente 1 día a 25o C. La larva emerge del huevo.
LARVA (4-5 mm.)
Es blanca, segmentada y vermiforme. Tiene partes bucales de coloración negra (ganchos
mandibulares) en una región cefálica estrecha, que penetran en el alimento comiendo
vorazmente. No tiene ojos por lo que este animal es completamente ciego. Las larvas
tampoco tienen apéndices y deben empujarse comiendo para desplazarse por su ambiente.
Respiran por tráqueas y poseen un par de espiráculos visibles (poros aéreos) en los
extremos anteriores y posteriores del cuerpo.
La fase larvaria en el ciclo de Drosophila es una de rápido comer y crecer. Consiste de tres
subdivisiones llamadas estadios. El primero y segundo estadio terminan en mudas cada
muda implica una eliminación completa de la piel y partes orales de la larva y es el
mecanismo por medio del cual esta crece. El tercer estadio termina en la pupación.
Inmediatamente antes de la pupación la larva deja de comer, se arrastra hacia una
superficie relativamente seca, y se revierte sus espiráculos anteriores. La fase larvaria dura
alrededor de 4 días a 25o C. es ese momento el tercer estadío y mide aproximadamente 4.5
mm de largo.
PUPA (3mm.)
La pupa es considerada la fase re organizativa del ciclo de las mosca, durante el cual la
mayoría de las estructuras larvarias son destruidas y las estructuras adultas se desarrollan a
partir de tejidos embrionarios llamados anlagen (o también discos imaginables). Estos
tejidos embrionarios han permanecido latentes en el animal desde su diferenciación en el
huevo. El animal empupa dentro de la última piel larvaria, la cual es en un inicio suave y
 blanca pero gradualmente se endurece y adquiere un color más oscuro.
Los cambios anteriores resultan en el desarrollo de un individuo con la
forma corporal y las estructuras del adulto (imago). La fase de pupa tarda alrededor de 4
días a 25o centígrados, el adulto emerge del pupario.
ADULTO (2 mm.)
El adulto es considerado la fase reproductiva del ciclo. La mosca emerge o eclosiona del
pupario forzando su salida por el extremo anterior del pupario. En un inicio, la mosca
adulta es de forma elongada con las alas no expandidas. Es una hora, las alas se expanden
y el cuerpo gradualmente adquiere una forma de adulto más definitiva. En un inicio los
adultos son de un color relativamente claro, dentro de las primeras pocas horas se
obscurecen y adquieren el color característico.
Los adultos de D. melanogaster pueden aparearse 6 horas después de haber emergido del
pupario. El esperma es almacenado en las espermatecas y en los receptáculos ventrales de
la hembra y es liberado gradualmente al oviducto a medida que se producen los huevos
pasados por el oviducto a la vagina. La hembra empieza a depositar huevos
aproximadamente a los 2 días de haber emergido, puede depositar hasta 50 a 75 huevos
por días durante los primeros días. Después la producción de huevos disminuye. El
promedio de vida de las moscas adultas es de 37 días a 25o C.
REPRODUCCIÓN
Es una especie dioica (con sexos separados), polígama (los machos y las hembras pueden
aparearse múltiples veces) y de fecundación interna. Existe un cortejo bastante sofisticado,
previo a la cópula, que puede variar mucho de especie a especie. Las hembras suelen
copular unas 3 o cuatro veces a lo largo de su vida, aunque son capaces de guardar el
esperma de su primera cópula durante toda la vida.
DIFERENCIACIÓN DEL SEXO

Figura 2. Macho y hembra adultos. Tomada de www.sepiensa.org.mx

Tamaño: Las hembras son generalmente más grandes que los machos.
Forma: En el macho el extremo caudal es redondeado, mientras que en la hembra es
alargado y poco protuyente.
 Color: La pigmentación oscura es más extensa en el extremo caudal del
macho y los anillos rodean el abdomen, mientras que en la hembra solo
son dorsales
El abdomen de la hembra tiene 7 segmentos, mientras que el del macho tiene solo 5
segmentos.
Los machos tienen un peine sexual que consiste en una fila de aproximadamente 10 cerdas
gruesas en la superficie distal del segmento tarsal basal de la pata anterior.
Si se requieren hembras vírgenes para una cruza, éstas pueden colectarse 10 a 12 horas
después de que terminó la pupación, ya que en este tiempo las hembras no permiten la
cruza.
MEDIOS DE CULTIVO
Drosophila melanogaster crece sobre frutos suaves como la uva, el plátano y la ciruela,
especialmente cuando éstos están demasiado maduros y la fermentación se ha iniciado.
Los adultos y las larvas se alimentan con los jugos de las frutas fermentadas y de ahí que
las levaduras parecen ser un factor fundamental de su dieta. La D. melanogaster puede
crecer prácticamente en cualquier medio de fermentación.

PROCEDIMIENTO:
Medio de cultivo.
Solución 1. Agregar en un recipiente de vidrio o aluminio 500 ml de agua de la llave,
póngalos a calentar en una parrilla eléctrica, Hervir de 10 a 20 minutos), adicionar la
gelatina sin sabor (tener cuidado de agitar durante toda la ebullición)
Solución 2. En una licuadora adicionando una pequeña porción de agua homogenizar la
fruta hasta que tenga una contextura blanda.
Mezclar la solución 1 con la solución 2 y para evitar el crecimiento de hongos adicionar
10 mL de Vinagre agitar inmediatamente, posteriormente vaciar el medio de cultivo a los
frascos previamente esterilizados (esterilización térmica), secarlos perfectamente vierta en
ellos aproximadamente 2 cm de altura de medio en cada frasco, una vez vertida la solución
colocar en un lugar fresco hasta su solidificación y colocar dentro del frasco un pedazo de
cartón en forma de U invertida para que las moscas puedan descansar y tapar con algodón,
gasa o esponja.
MANEJO DE LAS MOSCAS
Una vez que el medio de cultivo esté listo colocar el recipiente en un lugar abierto por un
lapso de tiempo aproximadamente de 24 horas, para que las moscas de la fruta puedan
depositarse en el medio, una vez que se observe la presencia de un número considerable de
Drosophila melanogaster cerrar el frasco para evitar que se escapen.
 Para el examen y selección de las moscas el primer paso es anestesiarlas,
esto se hace poniendo unas gotas de éter en el algodón del eterizador y
uniendo la boca de éste a la boca de la botella de cultivo. Debe hacerse pasar a las moscas
de un frasco a otro por movimiento; se coloca rápidamente la tapa del eterizador y se
mantiene una forma vertical con la tapa hacia arriba por 30 s. Después de que haya cesado
el movimiento de las moscas son transferidas a la placa del estereoscopio para analizarlas.
En caso de que empiecen a reaccionar antes de haber terminado el análisis se usa el
eterizador en el que se han puesto unas gotas de éter y se pone sobre el conjunto de
moscas por unos segundos. Se debe tener cuidado para evitar una sobre anestesia que
mataría a las moscas.
COMPARACIÓN ENTRE CEPAS MUTANTES Y EL TIPO SILVESTRE DE D.
melanogaster.
Para el desarrollo de esta práctica se utilizarán las siguientes cepas de Drosophila
melanogaster:

FIGURA 3. Cepas de Drosophila melanogaster:

Una vez que las moscas son anestesiadas se procede a comparar el fenotipo de las moscas
mutantes con el de las silvestres manipulándolas con mucho cuidado y con la ayuda de un
pincel delgado, también realizar la comparación de los sexos de las moscas utilizando para
esto los esquemas adjuntos.
Pasar las moscas de cada una de las cepas a frascos con medio de cultivo diferentes,
evitando que las moscas escapen tapándolos inmediatamente.
PROCEDIMIENTO PARA LA PRIMERA LEY DE MENDEL
En un frasco con medio de cultivo sembrar 2 hembras silvestres y 2 machos Ebony rotular
con la simbología adecuada la cruza e incluir los datos de la fecha de siembra y el nombre
del grupo con un marcador indeleble.
En un segundo vial realizar la cruza inversa 10 machos silvestres y 10 hembras Ebony.
Rotular con la simbología adecuada la cruza e incluir la fecha de siembra y el nombre del
alumno con marcador indeleble.
Mantener los cultivos a temperatura constante de 25°C anotar cuando se observen los
huevos sobre el medio, las larvas, las pupas y los adultos. Cuando se tengan larvas, sacar y
sacrificar a los progenitores.
Cuando emerjan todas las moscas de los cultivos (F1) observarlas al microscopio
estereoscópico contar y anotar el número de hembras y machos y el fenotipo que
presenten.
 Sembrar 10 parejas de la generación obtenida en frascos con medio de
cultivo nuevo. Cuando se obtengan los adultos de la segunda generación
(F2) observarlas, contar y anotar el número de hembras y machos de cada fenotipo.
Elaborar el reporte de la práctica.
PROCEDIMIENTO PARA LA SEGUNDA LEY DE MENDEL
En un frasco con medio de cultivo sembrar 2 hembras silvestres vírgenes ébano con alas
vestigiales (e vg) y 10 machos silvestres. Rotular con la simbología adecuada la cruza e
incluir la fecha de siembra y el nombre del alumno con marcador indeleble.
En un segundo frasco realiza la cruza inversa sembrar 10 machos ébano vestigiales y 10
hembras silvestres. Rotular con la simbología adecuada la cruza e incluir los datos de la
fecha de siembra y el nombre del alumno con marcador indeleble.
Mantener los cultivos a temperatura constante de 25°C anotar cuando se observen los
huevos sobre el medio, las larvas, las pupas y los adultos. Cuando se tengan larvas, sacar y
sacrificar a los progenitores.
Cuando emerjan todas las moscas de los cultivos (F1) observarlas al microscopio
estereoscópico contar y anotar el número de hembras y machos y el fenotipo que
presenten.
Sembrar 10 parejas de la generación obtenida en frascos con medio de cultivo nuevo.
Cuando se obtengan los adultos de la segunda generación (F2) observarlas, contar y anotar
el número de hembras y machos de cada fenotipo. Elaborar el reporte de la práctica.
PROCEDIMIENTO PARA HERENCIA LIGADA AL SEXO
Realizar una cruza utilizando 10 hembras vírgenes normales y 10 machos con ojos
blancos. Al quinto día eliminar a los progenitores y esperar a que emerja la F1. Observar
los fenotipos de las hembras y de los machos de la F1, y anotar sus observaciones en las
hojas de registro. Colocar en frasco con medio de cultivo nuevo toda la F1
Al quinto día eliminar a los progenitores y esperar que emerja la F2. Observar con ayuda
del microscopio de disección, los fenotipos de las hembras y de los machos. Anotar las
observaciones en la hoja de registro
REPORTE DE RESULTADOS: Anote las diferencias fenotípicas de las cepas mutantes
y tipo silvestre observadas. Anote las características fenotípicas que permiten diferenciar
el sexo de las moscas. Dibuje esquemas de las moscas observadas, haciendo notar las
características fenotípicas que permiten diferenciar cepas mutantes y el sexo de las
mismas. Reporte el resultado de las cruzas de la siguiente forma:
Actividad Fecha
Cruza progenitora
Retirar a los progenitores
Emerge F1
Sembrar F1 x F1
Retirar a los progenitores
Emerge F2

REPORTE
 Lo primero que realizamos fue el medio de cultivo, capturar a las
moscas que se encontraban en el frasco y luego procedimos a cerrar con
gasas y a la vez colocamos un algodón untado de éter para dormirlas, posteriormente
observamos las características para aparearse y obtener moscas puras.
En un frasco de boca grande que tenía el medio de cultivo se introdujeron dos Drosophila
(un macho y una hembra con las características siguientes

Macho Hembra
Antenas cortas Antenas cortas
Ojos rojos Ojos rojos
Alas largas Alas escarpeladas
Patas largas Patas largas
Abdomen redondeado Abdomen puntiagudo

Se obtuvieron un buen desarrollo y reproducción dando en la F1 67 individuos. 39

hembras y 28 machos, que tenían las siguientes características:

Machos Hembras
Antenas cortas Antenas cortas
Ojos rojos Ojos rojos
Alas largas Alas largas
Patas largas Patas largas
Abdomen redondeado Abdomen puntiagudo
Total de moscas obtenidas 67
Pudimos observar que las alas largas es una mutación, y que es trasmitida a todos los
descendientes de la F1; es decir, concluimos que el alelo que posee esta característica es
dominante sobre el alelo que posee la hembra de alas escapeladas.
Durante el tiempo que se desarrollaron los individuos de F2, se pudo observas que
algunas larvas muertas y pupas que nunca eclosionaron y después de un tiempo se
despegaban de la pared del frasco y caían al medio, se creen que estos individuos
muertos prematuramente presentaban mutaciones
RESULTADOS Y DISCUSION
En el transcurso de la práctica se incubaron huevos de la mosca de la fruta (Drosophila
melanogaster), del tipo ebony y silvestre, luego aparecieron las larvas, las pupas y
finalmente se convirtieron en adultas para así poder cruzarlas. El primer cruze se realizó
con hembras ebony y machos silvestre, donde se obtuvo una descendencia de 39
hembras silvestres y 28 machos ebony, luego se apareo entre si la descendencia para
obtener la F2 y su descendencia fue 51 hembras silvestre, 50 hembras ebony, 27 machos
silvestres, y 17 machos ebony (Imagen 1). Luego se realizó un segundo cruze en el cual se
utilizaron hembras silvestres por machos ebony donde se obtuvieron para la F1 38
hembras silvestres y 40 machos silvestres. Seguido se apreo la descendencia para así
obtener la F2 arrojando como resultado 93 hembras silvestres, 23 machos silvestres y 31
machos ebony (Imagen 2).
Imagen 1: Cruce 1 hembras ebony por machos silvestres.

Imagen 2: Cruce 1 hembras silvestre por machos ebony.

 GUÍA DE CRUZAS EN EL LABORATORIO
Escribir, con la nomenclatura adecuada, la cruza de los espacios destinados en la
figura de la siguiente para una cruza monohíbrida.

P ♂ Silvestre x ♀ Ebony
Fenotipo Fenotipo
Genotipo FF _x ff

Gametos
F
f

GenotipoF1: Ff
Fenotipo: Silvestre

F1 X F1 ♂ Ff x♀ Ff

Fenotipo Fenotipo
Gametos FF f F f
1 2

Cuadro de Punnett

♂ 1 F 2 f
♀

F FF Ff
1

2 f Ff ff
 Escribir, con la nomenclatura adecuada, la cruza de los espacios
destinados en la figura de la siguiente para una cruza dihíbrida

P ♂ Silvestre x♀ Ebony
Fenotipo Fenotipo

Genotipo SSEE _x ssee

Gametos
SE se

Genotipo F1 SsEe

Fenotipo Silvestre

F1 X F1 ♂ Silvestre x♀ Ebony
Fenotipo Fenotipo

SE Se sE se
Gametos
1 2 3 4 1 2 3 4
RECOMENDACIONES:
 Realizar el medio de cultivo un poco espeso para que las moscas se puedan
alimentar con facilidad y no se mueran ahogadas.
 Al momento de hacerlas dormir a las moscas colocar la suficiente cantidad de éter
para que no se mueran.
 Mantener cerrada la botella del cultivo, para evitar que las moscas no se escapen o
que entren otras y el cultivo se contamine.
 Si durante una observación o recuento las moscas empiezan a despertarse, se
pueden reeterificar, con cuidado de no matarlas.
 Para facilitar la observación de los individuos es recomendable alinear todas las
moscas y colocar el foco de la lupa. Así se pueden ir separando según nuestro
interés.

BIBLIOGRAFÍA:
Hidalgo Miguel Ángel, Laboratorio de Física; Editorial Pearson Prentice Hall, 2008.
Gutiérrez Aranzeta Carlos, y otros; Introducción a las Mediciones: prácticas de
laboratorio; Instituto Politécnico Nacional, 2008.