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Práctica 2: El microscopio
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2.1
Laboratorio de Óptica (Óptica Instrumental)
Figura 2.1: Escala milimetrada que al imprimirla en papel vegetal constituye el objeto test, y al
imprimirla en un soporte transparente constituye el retículo. Como pantalla difusora se utiliza la
misma que en la práctica de la lupa. A la derecha se muestra la fotografía de la sección transversal
de un ojo. En la parte final de la práctica se utiliza el microscopio para medir el espesor de la
córnea.
Se recomienda realizar primero todas las experiencias para la configuración (a), poste-
riormente para la configuración (b) y finalmente para la (c).
Para comenzar, en cada caso, se dispondrán en el banco de óptica, tal y como se muestra en la
Fig. 2.2, el objetivo y el ocular separados una distancia e = f 'ob +t + f 'oc .
Figura 2.2: Para construir el microscopio se sitúan el objetivo y el ocular perfectamente alineados
sobre el banco de óptica.
2.2
Práctica nº 2: El microscopio
Es muy importante determinar con gran precisión la posición de la pupila de salida, ya que la
pupila del ojo del observador ha de situarse sobre ella para poder realizar una observación de máxima
calidad. Para determinar la posición y el tamaño de la pupila de salida basta con obtener la imagen, a
través del ocular, de la montura de la lente que actúa como objetivo. Para ello, tal y como se muestra
en la Fig. 2.3, se ilumina el objetivo con la luz difundida por una hoja de papel vegetal situada justo
delante de éste. Es necesario que el haz de luz esté lo suficientemente expandido para iluminar toda la
montura del objetivo. A continuación, se desplaza la pantalla, situada detrás del ocular, hasta que apa-
rezca enfocada nítidamente sobre ella la imagen de la montura del objetivo. Dado que la pantalla está
construida con papel vegetal, la forma más cómoda de efectuar la medición es observando la imagen
por transmisión (es decir, mirando la pantalla por su parte posterior). Como el diámetro de esta imagen
resulta ser menor que el del ocular, se puede concluir que dicha imagen constituye la pupila de salida
del microscopio y, por tanto, que el objetivo es el diafragma de apertura.
El microscopio es un instrumento óptico subjetivo que proporciona al ojo imágenes muy au-
mentadas tras un proceso en doble etapa. La primera etapa la lleva a cabo el objetivo, que proporciona
una imagen intermedia, real e invertida, sobre el plano focal objeto del ocular, con un aumento
t
β ob = − . (2.1)
'
f ob
Esta imagen intermedia constituye el objeto para el ocular, que en su forma más simple está constitui-
do por una lupa. El ocular aumenta el tamaño de la imagen en un factor
250
Γoc = . (2.2)
f 'oc
El aumento visual del microscopio viene dado por el producto entre los dos factores, esto es
2.3
Laboratorio de Óptica (Óptica Instrumental)
250 t
Γ = β ob Γoc = − . (2.3)
f 'ob f 'oc
El valor negativo del aumento visual indica que la imagen final está invertida.
Figura 2.4: Dispositivo para la medida del aumento lateral del objetivo. Esta configuración tam-
bién permite medir las dimensiones del campo visual.
Para medir experimentalmente el aumento lateral del objetivo, se procede del modo siguiente.
En primer lugar se sitúa el objeto test delante del objetivo –aproximadamente a una distancia 2 f 'ob –,
centrado sobre el eje óptico del microscopio, y el ojo del observador en la pupila de salida de éste, tal
como se muestra en la Fig. 2.4. A continuación se desplaza el objeto lentamente hacia el objetivo,
hasta la primera posición en que el observador ve nítidamente la imagen (ver Fig. 2.5(a)).
Seguidamente, se coloca la transparencia retículo, debidamente centrada en su soporte, en el
plano focal objeto del ocular. Para ello, con ayuda de la reglilla se comprueba que la distancia desde el
retículo hasta el ocular es igual a f 'oc . Con el ojo situado en la pupila de salida, se comprueba si la
imagen del retículo es nítida. En caso de no serlo (lo que puede ser debido a una miopía mal compen-
sada), se acercará lentamente el retículo hacia el ocular hasta alcanzar la primera posición en que la
imagen sea nítida [1].
(a) (b)
Figura 2.5: (a) Imagen del vista por el observador cuando el objeto está en foco; (b) Imagen vista
por el observador cuando tanto el objeto como es retículo están situados correctamente. En este
ejemplo la imagen intermedia es 3 veces mayor que la escala del retículo. Por tanto el aumento late-
ral del objetivo es β ob = −3.0 . Nótese que la imagen intermedia está invertida.
Al observar ahora a través del microscopio se verán enfocadas, tal y como se muestra en la
Fig. 2.5(b), las imágenes superpuestas del objeto y del retículo. Comparando ambas escalas se puede
determinar directamente el valor del aumento lateral del objetivo. Las medidas las anotamos en la
tabla siguiente. Parar comprobar la bondad de las medidas, es conveniente comparar el valor medio de
las tres mediciones realizadas con el valor predicho por la teoría.
[1]
Este proceso de enfoque también se puede realizar del siguiente modo: situar, en primer lugar, el retículo en el
plano focal objeto del ocular y, a continuación desplazar el objeto hasta conseguir una imagen nítida de ambos.
2.4
Práctica nº 2: El microscopio
Una vez establecido el aumento lateral del objetivo, lo que implica que la escala del retículo
queda calibrada, se puede proceder a la medición de objetos (como, por ejemplo, el espesor de la
córnea en la fotografía de la sección de un ojo). Para ello basta con medir con la escala del retículo el
tamaño de la imagen intermedia, y' . El tamaño del objeto viene dado por y = y' / βob .
[2]
Estrictamente, lo que se está midiendo es el diámetro del campo límite. Sin embargo, dado que la pupila de
salida del microscopio es muy pequeña, no existen diferencias sustanciales entre el campo de media y el límite
2.5
Laboratorio de Óptica (Óptica Instrumental)
Desde el punto de vista teórico la profundidad de enfoque de un microscopio viene dada por
2
0.25
∆e = Am . (2.6)
Γ
Para las configuraciones con las que estamos trabajando, y suponiendo un valor para la amplitud de
acomodación, Am = 10 D (usual para una persona de 20 años), la profundidad de enfoque es del orden
de ∆ e = 2 mm . Esto implica que, contrariamente a lo que sucede con la lupa, pequeños desplazamien-
tos del objeto provocan un gran desenfoque en la imagen final. Para constatar este hecho, se sitúa de
nuevo el objeto test sobre el plano objeto del microscopio y se retira el retículo. A continuación se
desplaza lentamente el objeto hacia el objetivo hasta alcanzar la primera posición en que la imagen se
ve desenfocada. La distancia entre estas dos posiciones extremas es la profundidad de enfoque ∆ e .
Con el fin de comprobar las diferencias entre el diafragma de apertura y el de campo, se proce-
derá del modo siguiente. Primero se sustituye el retículo por un diafragma iris (que en este caso actúa
como diafragma de campo) y se observa que el abrir y cerrar el diafragma gradualmente produce una
variación del campo visual, sin que se modifique la luminancia de la imagen. A continuación se des-
plaza el diafragma iris hasta que esté junto al objetivo (en este caso actúa como diafragma de apertura)
y se comprueba que al abrir y cerrar el diafragma se produce una variación de la luminancia de la ima-
gen sin que varíe apreciablemente el campo visual.
Con el fin de aumentar el campo visual del microscopio y minimizar la influencia del viñeteado,
los oculares suelen incluir una segunda lente, denominada lente de campo. La lente de campo se sitúa
en el plano focal objeto del ocular. Ahora el ocular está compuesto por dos lentes; la lente de campo
(LF) y la lente de ojo (LE). La lente de campo no afecta ni al aumento visual ni al tamaño de la pupila
de salida. Sin embargo sí que se produce una disminución de la emergencia pupilar, que ahora vale
f ' 2E f ' 2E
a ' p = a 'p − , donde a 'p = f 'E + (2.7)
f 'F f 'ob +t
Consecuentemente, se produce un incremento del valor del diámetro del campo visual de iluminación
media, que ahora vale
250 φ E
2ρ m = . (2.8)
Γ a 'p
Para comprobar experimentalmente cómo aumenta el campo visual al utilizar oculares consti-
tuidos por dos lentes, a continuación se retira el diafragma iris y se coloca sobre el plano focal objeto
del ocular una lente de campo de distancia focal f 'F = 100 mm (véase Fig. 2.6).
Una vez preparado el sistema, se coloca el ojo en la pupila de salida, que ahora se halla más cer-
ca del ocular, y se mide nuevamente el diámetro del campo visual. Se comprueba que el campo mejora
substancialmente con respecto al caso anterior. Naturalmente, también en este caso se debe comparar
el valor medio de las mediciones del campo con el valor predicho por la teoría.
2.6
Práctica nº 2: El microscopio
Figura 2.6: Para trabajar con un microscopio cuyo ocular es doble, se debe situar la lente de campo
en el plano de la imagen intermedia. Nuestro ocular doble está constituido, pues, por una lente de
campo de focal f 'F = 100 mm y una lente de ojo de focal f 'E = 50 mm .
2.3.8 Aumento visual del microscopio con ocular simple y con ocular doble
Para medir este parámetro, es necesario hacer uso de un “ojo artificial” compuesto por una lente
de focal f ' A = 200 mm , que hace las funciones del acoplamiento córnea-cristalino, y una pantalla
milimetrada, que hace las veces de retina. Tal y como se muestra en la Fig. 2.7, este “ojo artificial” se
sitúa en el dispositivo de forma que la lente este centrada sobre la pupila de salida del microscopio. A
continuación, con la ayuda de la reglilla, se sitúa la “retina” en el plano focal imagen de la lente “ojo”.
Si la práctica se ha realizado correctamente, sobre la “retina” aparecerá nítidamente enfocada la ima-
gen del objeto. Si no es así, se debe corregir ligeramente la posición del objeto.
Nótese que en la pantalla sólo se forma la imagen de una fracción del objeto test. Para la deter-
minación del aumento normal del microscopio, es necesario entonces seleccionar la fracción del Test
que actúa como objeto para el experimento. Para el caso del microscopio (a) una buena selección es
tomar el objeto de tamaño y = 1.0 mm . Con ayuda de la escala impresa en la pantalla, se mide entonces
el tamaño, y ' r , de la imagen retiniana. Este dato permite calcular el valor del tamaño angular de ima-
gen, esto es
y'
tan w ' = r . (2.9)
f 'A
2.7
Laboratorio de Óptica (Óptica Instrumental)
A continuación ya se puede proceder al cálculo del aumento normal del microscopio, que al
igual que para el caso de la lupa, se define como
tan w '
Γ= , (2.10)
tan wA
donde ω A representa el tamaño angular del objeto cuando está situado a 250 mm del ojo del observa-
dor, es decir
y
tan wA = . (2.11)
250
Para la presentación ordenada de los resultados de este último apartado se recomienda hacer uso
de la tabla siguiente.
Por último, para comprobar que el uso de la lente de campo no afecta al valor del aumento vi-
sual, se repetirá este mismo experimento situando la lente de campo en el foco objeto del ocular.
2.8