Unidad3 Metodosdetransformaciongeneticadeteccionidentificacion

Programa de la asignatura:
Biodiversidad y bioseguridad
Métodos de transformación
U3 genética, detección, identificación y
cuantificación de los OGMs
Ciencias de la Salud Biológicas y Ambientales | Ingeniería en Biotecnología

U3 Métodos de transformación genética, detección,
identificación y cuantificación de los OGMs
Índice
Presentación de la unidad ......................................................................................................... 2

Propósitos.................................................................................................................................. 2
Competencia específica ............................................................................................................ 3
Temario ..................................................................................................................................... 3
Manipulación genética de animales: transgénesis y clonación …………………………...……..4
Diseño y construcción de los primeros animales transgénicos ................................................ 5
Metodología para la construcción de animales transgénicos………………………………….....7
Animales transgénicos con fines de investigación básica y aplicada…………………..……....12
Ejemplos de transgénesis con fines comerciales……...…………………………….……….......14
Industria biotecnológica de animales transgénicos…………………………………….………....18
Plantas transgénicas………..…………………………………………………………….…………..17
La importancia de las técnicas de fitomejoramiento para incrementar la producción
agrícola…………….………………………………………………………………..………………....17
Métodos de transformación genética de plantas……………………………………………….....20
Aplicaciones de la ingeniería genética de plantas……………………………………………..….29
Mejoramiento de la composición y cualidades de semillas y frutos…………………………..…30
Resistencia a virus, bacterias y hongos fitopatógenos………………………………………..….31
Alteración de la vida de anaquel de frutos……………………………………………………..…..33
Plantas transgénicas resistentes al ataque de insectos……………………………………..…...34
Las plantas como biorreactores…………………………………………………………………..…37
Producción de vacunas orales en plantas transgénicas……………………………………..…..38
Uso comercial de plantas transgénicas……………………………………………………….…...39
Transferencia de la tecnología………………………………………………………………….…..41
Detección, identificación y cuantificación de un OGM…………………………………………...42
Técnicas, recursos e instrumentos empleados…………………………………………………...43
Medidas para la resolución de las problemáticas de biodiversidad y bioseguridad……….….44
Recursos para tu ruta de aprendizaje……………………………………………………………...46
Actividades .............................................................................................................................. 47
Autorreflexiones....................................................................................................................... 48
Cierre de la unidad .................................................................................................................. 48
Para saber más ....................................................................................................................... 49
Fuentes de consulta ................................................................................................................ 51
Universidad Abierta y a Distancia de México 1

Presentación de la unidad
En esta tercera unidad se pretende distinguir las metodologías de transformación genética

generadoras de OGMs, lo cual nos permitirá dilucidar el tipo de transfección que
corresponde a cada tipo de organismo vivo. Para ello, se identificarán las entidades
Federativas y/o particulares encargadas de regular y monitorear la generación y uso de
los OGMs, además de la detección, identificación y cuantificación de los mismos.
Con lo anterior, el objetivo final es distinguir las implicaciones ecológicas del flujo genético
derivado de las diferentes ramas de la biotecnología, a través de la revisión y análisis de
casos particulares.
Propósito
 Describir las técnicas de transformación genética de los OGMs.

 Distinguir los métodos de detección, identificación y cuantificación de los OGMs
 Identificar las instituciones mexicanas encargadas de detectar OGMs.

Competencia específica
Identificar los métodos de la transformación genética de los OGMs y

la forma de detección, identificación y cuantificación de un OGM, para
distinguir las implicaciones ecológicas del flujo genético derivado de
las diferentes ramas de la biotecnología, a través de la revisión y
análisis de casos particulares.
Temario
Unidad 3. Métodos de transformación genética, detección, identificación y

cuantificación de los OGMs.
Manipulación genética de animales: transgénesis y clonación

 Diseño y construcción de los primeros animales transgénicos
 Metodología para la construcción de animales transgénicos
 Animales transgénicos con fines de investigación básica y aplicada
 Ejemplos de transgénesis con fines comerciales
 Industria biotecnológica de animales transgénicos
Plantas transgénicas
 La importancia de las técnicas de fitomejoramiento para incrementar la producción
agrícola
 Métodos de transformación genética de plantas
 Aplicaciones de la ingeniería genética de plantas
 Mejoramiento de la composición y cualidades de semillas y frutos
 Resistencia a virus, bacterias y hongos fitopatógenos
 Alteración de la vida de anaquel de frutos
 Plantas transgénicas resistentes al ataque de insectos
 Las plantas como biorreactores
 Producción de vacunas orales en plantas transgénicas
 Uso comercial de plantas transgénicas
Transferencia de la tecnología
Detección, identificación y cuantificación de un OGM

 Técnicas, recursos e instrumentos empleados.
Medidas para la resolución de las problemáticas de biodiversidad y bioseguridad.

Manipulación genética de animales: transgénesis y clonación
Desde siempre los humanos hemos hecho uso de otros seres vivos para satisfacer
nuestra necesidad de alimento, salud y vivienda, y en este proceso hemos mermado la
biodiversidad, realizando manejos inadecuados con la idea errónea de que los recursos
naturales eran inagotables. Aunado a esto, tenemos que los recursos naturales se agotan,
la actividad agropecuaria es insuficiente y el crecimiento desmedido de la población
mundial exige, año tras año, más alimentos y más medicamentos. Debido a lo anterior, la
Biotecnología tiene y tendrá una importancia relevante en un futuro no muy lejano,
conjuntamente con otras tecnologías (Bolívar, 2011).
Como lo define Bolívar (2011), la biotecnología es una multidisciplina fundamentada en el

conocimiento generado de disciplinas diferentes, lo que ha permitido el estudio integral, la
modificación y la utilización de los seres vivos del planeta, como son los microorganismos,
las plantas y los animales (Figura 1).Es por lo anteriormente citado que la biotecnología
busca hacer uso responsable y sustentable de la biodiversidad, mediante el desarrollo de
tecnologías eficaces, limpias y competitivas para facilitar la solución de problemas de gran
relevancia en materia de salud, producción agropecuaria, industrial y remediación del
medio ambiente.
Figura 1. La biotecnología es una actividad multidisciplinaria, ya que está basada en varias

disciplinas. Recuperado de:
http://www.uam.mx/librosbiotec/uso_responsable_ogm/uso_responsable_ogm/files/assets/downloa
ds/files/uso_responsable_OGM.pdf

Figura 2. El ADN es la molécula en donde reside la información genética de todos los seres vivos.
Las técnicas de ingeniería genética permiten sintetizar y aislar genes de cualquier origen y con
estos genes es posible construir los organismos transgénicos.
Recuperado de:
http://www.uam.mx/librosbiotec/uso_responsable_ogm/uso_responsable_ogm/files/assets/downloa
ds/files/uso_responsable_OGM.pdf
Diseño y construcción de los primeros animales transgénicos
El funcionamiento de los organismos vivos está gobernado por conjuntos de genes. Las
diferencias en su contenido y las variaciones en cómo estos se organizan a lo largo de los
cromosomas determinan las características de cada una de las especies. Al cambiar esta
disposición, se modifica la estructura y el desempeño original de los organismos. Este
proceso puede darse al transferir un gene responsable de determinada característica de
un organismo a otro, al cual se le pretende incorporar la nueva característica. De ahí el
nombre Organismo Transgénico o Genéticamente Modificado (OGM). Esta tecnología
permite transferir información genética de plantas, bacterias o virus hacia otros
organismos, combinar genes de vegetales con otros vegetales, de animales entre sí o de
vegetales con animales, superando las llamadas “barreras naturales” que diferencian a
unas especies de otras (Gordon, 1982; citado por Barrera, et al. 2011).

Los animales modificados genéticamente son aquellos a los cuales fueron modificados
sus genomas por la inserción de fragmentos de ADN al inicio de su desarrollo
embrionario, para eliminar, cambiar o combinar características genéticamente deseables
de la misma especie o de otra (Barrera, 1992). Los animales transgénicos se han
empleado para estudiar la función de genes y para generar modelos de estudio de
enfermedades humanas. También se han podido emplear como biorreactores industriales
para producir elementos biológicos de uso humano, como son las hormonas, proteínas de
importancia médica y órganos, para trasplantes que no presenten el rechazo inmune
(Barrera, 2011).
En el área pecuaria se está trabajando intensamente para generar transgénicos que

mejoren la calidad y cantidad de los alimentos de origen animal. Los animales
transgénicos no se han estudiado tanto como las plantas (las cuales ya se pueden
encontrar en el mercado), pero sus estudios resultan muy relevantes por las
contribuciones que pueden hacer al conocimiento de la fisiología y genética de los
animales, extrapolándola en suma a la raza humana (Barrera, 1992).
Los primeros ensayos para generar ratones transgénicos fueron publicados en 1980
(Gordon, 1980, citado por Barrera, et al. 2011) y consistieron en la inyección de ADN de
ratón en uno de los pronúcleos de un cigoto de la misma especie (generalmente el
masculino por ser el de mayor tamaño). Con esto se inició una nueva era en la
manipulación genética de embriones de mamíferos.
En 1981 se demostró la integración y transmisión estable a través de la línea germinal de

genes inyectados en pronúcleos de cigotos de ratón obtenidos por fertilización in vitro. El
paso siguiente consistió en demostrar que también se podían obtener ratones
transgénicos que incorporaran en su genoma un gene de otra especie. Pero tal vez el
experimento más dramático consistió en demostrar que el producto de un transgene, el
correspondiente a la hormona del crecimiento (GH), inducía un cambio fenotípico
dramático en el ratón transgénico (Palmiter, 1982, citado por Barrera, et al. 2011) (Figura
3).

Figura 3. Ratones transgénicos para la hormona del crecimiento. El ratón de la izquierda es

transgénico al portar el gene de la hormona del crecimiento de la rata, mientras que el de la
derecha no lo es y pertenece a la misma camada. Recuperado de:
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/ModuloX.pdf
El método de transgénesis más empleado ha sido la microinyección de ADN en el

pronúcleo de cigotos según lo indican las estadísticas. A pesar de ello, la eficiencia de la
transgénesis es baja, debido a que una proporción de animales transgénicos por lo
regular no presentan el patrón de expresión génica esperado. Por lo tanto la importancia
de comprender desde el punto de vista de la biología básica cómo se puede mejorar y
optimizar la expresión de un transgén es relevante, además de la importancia para las
aplicaciones en biotecnología y terapia génica, donde solamente del 1 al 3% de los
animales poseen las características buscadas (Barrera, 2011).
Metodología para la construcción de animales transgénicos
La transgénesis es una herramienta útil para el estudio de la expresión tejido-específico

de genes, el desarrollo de modelos de enfermedades del humano y para fabricar
proteínas terapéuticas (Behringer, 1988, citado por Barrera, et al. 2011). En la actualidad
se puede llevar acabo por varias técnicas que presentan ventajas y desventajas,
dependiendo de lo que se quiera lograr. En general se dividen en tres grupos: físicos,
químicos y biológicos; en la mayoría de las ocasiones es común la utilización de dos y
hasta de tres de estos procedimientos a la vez (Barrera, 2011).
a) Métodos físicos
Los métodos físicos de transgénesis se caracterizan por la utilización de adyuvantes

como la corriente eléctrica directa (en el caso de la electroporación) y ondas sonoras de

baja frecuencia (como en el caso de la sonicación), por mencionar algunas de las técnicas
integrantes de este apartado. Sin embargo, la técnica más utilizada tanto para
transgénesis como para clonación es la microinyección directa (Hammer, 1985, citado por
Barrera, et al. 2011: p 135).
Microinyección
La técnica de transferencia de genes más utilizada en mamíferos y la más exitosa es la

microinyección directa de “ADN desnudo” en los pronúcleos del óvulo recién fecundado,
o en el citoplasma en el caso de vertebrados inferiores e invertebrados (Figura 4). Una
vez realizada la microinyección, los óvulos se introducen en los oviductos de hembras
receptoras en las que se han sincronizado las condiciones del oviducto mediante el
apareamiento previo con un macho vasectomizado (Gordon, 1981, citado por Barrera, et
al. 2011: p 136).
Los ovocitos pueden tolerar la microinyección de genes y ser cultivados in vitro hasta un
estado de desarrollo más avanzado (blastocisto) (Hoshi ,2003; Krimpenfort, 2001, citado
por Barrera, et al. 2011: p 136). La principal ventaja de este método es la facilidad con
que se aplica en una amplia variedad de especies, siendo los ratones los primeros
organismos transgénicos obtenidos mediante este método (Barrera, 2011). La eficiencia
inicial obtenida fue del 2% de integración génica en el total de embriones tratados, la que
posteriormente ha aumentado a niveles del 30%. La obtención de embriones transgénicos
mediante esta técnica también se ha logrado en animales superiores (Barrera, 2011).
Figura 4. Microinyección de ovocitos de ratón para insertar un gene foráneo. Mientras un capilar
succiona para fijar al ovocito, otro en forma de aguja penetra hasta el pronúcleo masculino (el más
grande) para depositar la solución con el gene de interés.
Recuperado de: http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/ModuloX.pdf

Sonicación
La sonicación se basa en la transferencia de genes en protoplastos y en células intactas

de vegetales. Su mecanismo está basado en las características acústicas de las ondas
sonoras, particularmente a bajas energías (Hammer, 1985, citado por Barrera, et al.
2011). Empleando este método se ha introducido ADN plasmídico en protoplastos,
lográndose una expresión transitoria de un gene. El mecanismo preciso de
permeabilización de la membrana inducido por la sonicación es aún desconocido, pero
por la sencillez del equipo requerido y la posibilidad de poder ser utilizada en ovocitos,
células en suspensión y fragmentos de tejido, esta técnica tiene un gran potencial en el
área pecuaria. Los efectos colaterales de este proceso involucran la formación de
radicales libres, daños en la pared celular, alteraciones en la permeabilidad de la
membrana, y cambios de tipo fisiológico (Monti, 1987; Ryman, 1979, citado por Barrera, et
al. 2011).
Electroporación
Una manera práctica de introducir medicamentos, ADN y otras moléculas en las células
es la electroporación, muy popular en los años 80´s. Sólo hasta finales de esa década, los
científicos la utilizaron en tejido fino multicelular (Trezise, 2002, citado por Barrera, et al.
2011, p 137) (Figura 5). La incorporación eficiente del ADN del medio mediante los
blastocistos, se logra si se les somete a electroporación. Si se dispone de blastocistos que
contengan células competentes, el ADN exógeno es integrado fácilmente vía
recombinación no-homóloga (Inoue, 2002 citado por Barrera, et al. 2011: p 137). La
inducción de electroporos es afectada por factores importantes, eso ha sido demostrado
mediante la investigación, tales como la variabilidad biológica que pudiera existir entre
célula y célula, aunque los cambios tanto fenotípicos como genotípicos resultaran
mínimos. Algunos parámetros a tomar en cuenta al utilizar esta técnica para manipular
cada uno de los diferentes tipos celulares son el voltaje, el tiempo y el diámetro del poro.
Es una de las técnicas más socorridas en materia de aplicación a pesar de su poca
explotación (Taghian, 1995, citado por Barrera, et al. 2011: p 138).

Figura 5. Diagrama de flujo en la electroporación. La membrana celular es permeabilizada al ADN

y a proteínas por el pulso eléctrico al que se someten por instantes. Recuperado de:
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/ModuloX.pdf
b) Métodos químicos
En la actualidad se están diseñando productos, monoméricos y poliméricos, útiles para la

transferencia de ADN al interior de la célula. (Barrera, 2011).
Fibras. Es un método reciente de transferencia de ADN mediante fibras que

actúan como micro agujas. Consiste en un bombardeo con partículas que pueden
ser de oro o tungsteno recubiertas con ADN dirigidas hacía los tejidos, células y
órganos. Así, el bombardeo del ADN se realiza y se obtiene la expresión transitoria
del gene (Dileo, 2000; Qiu, 1996, citados por Barrera, et al. 2011).
Liposomas. Este método ofrece como ventaja la protección contra las nucleasas
que proporciona la membrana con respecto a la transferencia directa de ADN. Sin
embargo, la desventaja es la baja eficacia de transfección por el alto grado de
toxicidad celular (Carballada, 2000, citado por Barrera, et al. 2011).
c) Métodos biológicos
Existen diferentes métodos de incorporación de ADN externo en animales, mediante las

técnicas de transfección celular y la tecnología de transferencia nuclear. La generación de
estos nuevos animales transgénicos se puede lograr mediante vectores tales como virus,
vectores espermáticos y células estaminales (Rojas- Martínez, 2002, citado por Barrera,
et al. 2011).

Virus. Los virus, por su gran capacidad de infección, se han empleado como
vectores para introducir genes dentro del embrión (aves, ratones) en experimentos
in vitro (Inesi, 1998; MacKay, 1987, citado por Barrera, et al. 2011). Los retrovirus
son capaces de transportar la secuencia génica que se quiera insertar hasta el
núcleo de las células receptoras. La integración del gene es aleatoria en el
genoma y la expresión depende de la función de los sitios que se integre. Los
animales que nacen con este método se conocen como quimeras y no siempre
expresan el nuevo gene insertado, porque no todas sus células lo portan. Después
se cruzan los animales quiméricos y se obtiene organismo con el gen transferido
en todas sus células. (Williams, 1998, citado por Barrera, et al. 2011).
Vectores espermáticos. El uso de los espermatozoides para transportar genes

hacia el interior de los óvulos ha dado lugar a animales transgénicos. Esta técnica
se ha utilizado en varios animales, entre ellos aves, bovinos, peces y porcinos en
los que se reportan resultados todavía pobres y los transgenes han sufrido
modificaciones severas en la estructura. En los ovinos esta técnica ha dado
buenos resultados, obteniendo embriones transgénicos sin modificaciones en el
genoma. (Perry, 1999, citado por Barrera, et al. 2011).
Células estaminales. Las células estaminales (CE) son células indiferenciadas

capaces de generar cualquier tipo de células del organismo. En condiciones
adecuadas pueden ser cultivadas en el laboratorio para someterse a
modificaciones genéticas en forma predeterminada y la eliminación o sustitución
de un gene. Esto se logra con la selección en los cultivos de aquellas células en
cuyos genomas se efectuaron los procesos de recombinación diseñados
(Thompson, 1989, citado por Barrera, et al. 2011). Las CE modificadas se inyectan
en embriones, en etapa de blastocisto, esto es, dependiendo de la especie, 4 a 7
días después de la fecundación, el animal resultante (quimera) posteriormente se
somete a cruzas, buscando que algunos espermatozoides positivos para la
modificación genética fertilice un óvulo igualmente modificado, con lo que se
obtendrá el transgénico con las características deseadas (Gossler, 1986 citado por
Barrera, et al. 2011). Este método ha dado buenos resultados en ratones, pero
todavía no se han realizado este tipo de pruebas en animales superiores.
(Mansour, 1998, citado por Barrera, et al. 2011).

Animales transgénicos con fines de investigación básica y

aplicada
En las universidades e institutos de investigación en conjunto con la industria
farmacéutica se realizan investigaciones con animales, modificando el genoma
introduciendo, inactivando y reemplazando genes en los animales, con la finalidad de
modificar sus genes creando animales transgénicos. Las aplicaciones del uso de estos
animales (investigación, medicina y la biotecnología) son una herramienta importante para
conocer la función y expresión de los genes.
Entre los animales transgénicos que se han generado con el propósito de una aplicación
específica destacan las vacas (mejores productoras de leche), las ovejas (mejores
productoras de lana) y los peces (crecen más grandes y toleran temperaturas más frías)
(Barrera, 2011).
La investigación en transgénesis aplicada a la producción animal está siendo abordada

principalmente en los siguientes temas:
a) Modificación de la utilidad de la leche mediante de la incorporación de proteínas

foráneas
Para la industria lechera una gran alternativa es la producción de proteínas de interés

farmacéutico mediante animales transgénicos, ya que se requieren pocos animales para
esos efectos y el costo disminuye cincuenta veces respecto a los métodos clásicos de
producción de dichos compuestos (Brink, 2000, citado por Barrera, et al. 2011).
Cerca de 50 proteínas para uso humano, como son algunas de las cerca de 50 proteínas
heterólogas para uso humano, se han producido a partir de leche de conejas, cerdas y
cabras transgénicas. Pero estos productos aún no se han comercializado debido a que no
son completamente funcionales. Se espera que las técnicas de transgénesis se
perfecciones para hacer realidad su producción en la industria farmacéutica. (Wilkins,
1992, citado por Barrera, et al. 2011) (Tabla 1).
Tabla 1. Producción de proteínas recombinantes en la leche de mamíferos

transgénicos en diferentes especies
Animales transgénicos producidos

Especie % % embriones Meses para Costo en Proteína
descendencia inyectados y obtener la F2 dólares producida en
transferidos estimado de la leche (por
lactación)

cada animal
transgénico
Ratón 17.3 2.6 7.5 US $121 1g
Conejo 12.8 1.5 17 1 Kg
Porcino 9.2 0.9 38 US $25 000 200 Kg
Ovino 8.3 0.9 52 US $60 000 100 Kg
Bovino 3.6 0.7 100 US $546 000 1000 Kg
b) Mejoramiento de respuesta inmunitaria a ciertas enfermedades
Principalmente por tradición es como se ha llevado a cabo el control de enfermedades en

producción animal mediante erradicación, vacunación y selección genética. Por lo tanto el
empleo de las técnicas de ingeniería genética aplicada, como puede ser la vacunación
directa con ADN desnudo, tiene como objetivo inducir la formación de anticuerpos
específicos para cierto patógeno (Mendoza, 1997, citado por Barrera, et al. 2011).
c) Mejoramiento de ciertas funciones biológicas importantes, como la reproducción

y el desarrollo
Debemos conocer la ubicación de un gene y sus efectos fisiológicos para aislarlo y

transferirlo a animales de diferente especie o de la misma, y de esta manera mejorar su
respuesta productiva. Un ejemplo de esta situación se realizó en salmones, donde se
aisló y transfirió el gen responsable de la síntesis de la hormona del crecimiento en el
salmón, lográndose individuos transgénicos que en promedio crecieron un 20 a 30 % más
que los individuos normales (Mori, 1999, citado por Barrera, et al. 2011: p 140).
Por otro lado, cabe señalar que los ratones son excelentes modelos debido a su fácil
manejo y bajo costo. Por ejemplo: la Universidad de Rochester ha creado un tipo de
animal manipulado genéticamente que muestra síntomas de distrofia muscular miotónica,
la distrofia se caracteriza por una debilidad muscular progresiva, contra la cual no hay
tratamiento en la actualidad. La generación de los ratones transgénicos acelerará el
proceso del desarrollo para el tratamiento. Sin un modelo animal apropiado, podría llevar
décadas encontrar un tratamiento para dicha enfermedad (Seznec, 2001; Mankodi, 2000,
citado por Barrera, et al. 2011).

Ejemplos de transgénesis con fines comerciales
Porcinos
En la actualidad se han producido cerdos transgénicos para la producción de órganos

para xenotrasplantes. Los animales deben ser transgénicos, ya que se tiene que modificar
sus genes de histocompatibilidad para que el órgano trasplantado no produzca rechazo
(Figura 6) (Vanhove, 1996, citado por Barrera, et al. 2011).
Figura 6. Cerdo transgénico con órganos transplantables. La creación y el diseño de modelos

transgénicos porcinos alterados en los genes involucrados en la histocompatibilidad, está
demostrando ser una alternativa viable para la generación de órganos “humanizados” para
transplantes. Recuperado de: http://web.cua.uam.mx/docs/CNI/profesores/archivos/295.pdf
Bajo circunstancias normales, un trasplante del órgano de un animal sería rechazado por
el sistema inmune del paciente debido a que las células del órgano animal se detectan
como extrañas. Sin embargo, insertando genes que sinteticen glicoproteínas idénticas a
las humanas, se espera que el órgano sea reconocido como propio por el sistema inmune
del paciente y que no sea atacado por las células que protegen al cuerpo. La utilización
de cerdos transgénicos como reservorio de órganos para trasplantes podría ser la
solución a la escasez de órganos. Así se lograría cubrir las demandas de los pacientes
que requieran un órgano sin estar en largas listas de espera a que haya un donador
(Barrera, 2011).

Aves transgénicas
Los pollos transgénicos se usan para mejorar las líneas y conferir resistencia a virus,
bacterias, menor contenido graso y menos colesterol en los huevos (Ivarie, 1998, por
Barrera, et al. 2011, p 144). Una empresa biotecnológica estadounidense ha producido
gallinas transgénicas capaces de poner huevos que sintetizan anticuerpos humanos, esto
permitirá producir fármacos más económicos de difícil producción (Barrera, 2011).
Actualmente las compañías Gene Works y AviGenics intentan convertir los oviductos de
las aves en Biorreactores logrando producir proteínas humanas de interés biomédico en
los huevos de las gallinas transformadas. Para lograr gallinas transgénica los
investigadores microinyectan genes humanos en el blastodermo de embriones de un día
de desarrollo, utilizando de transferencia un virus desactivado (Shuman, 1991, citado por
Barrera, et al. 2011: p 144). Los genes humanos insertados alcanzan las células
primordiales del blastodermo, posteriormente se convertirán en células espermáticas y
ovocitos. De esta forma se garantiza que la manipulación de las gallinas sea heredada a
su descendencia (Barrera, 2011).
Industria biotecnológica de animales transgénicos
El potencial de los animales transgénicos mediante el empleo biotecnológico radica en

que se pueden producir grandes cantidades de sustancias que anteriormente sólo se
obtenían en diminutas cantidades, abaratar los costos de producción, tener mayor
seguridad en los productos obtenidos y mejorar de caracteres de resistencia a
enfermedades (Barrera, 2011).
La biotecnología ha aplicado técnicas experimentales de transgénesis estableciendo las

primeras granjas farmacéuticas en que se crían ovejas, cabras, vacas o cerdas
transgénicas que producen leche con proteínas terapéuticas humanas (Velander, 1997,
citado por Barrera, et al. 2011).
Clonación animal
Barrera (2011) menciona que en el origen de la evolución, la reproducción de los seres

vivos se llevaba a cabo asexualmente, los seres con los que se inició la vida eran
idénticos a sus padres y que Biológicamente nuestros orígenes fueron clones. El principio
de la clonación está fundamentado en la obtención de organismos idénticos
genéticamente y por lo tanto morfológica y fisiológicamente muy similares, como en el
caso de dos gemelos univitelinos (Barrera, 2011).

Métodos de clonación
Los métodos de clonación han sido cuestionados por numerosas organizaciones, lo cierto
es que estos métodos han facilitado y limpian el camino para el entendimiento de la
diferenciación celular y para mejoramiento de las especies, a través de la explotación de
las características de cada especie y a la rediferenciación del genoma (Figura 7). A
continuación se mencionan los principales enfoques metodológicos de la clonación animal
(Cibellie, s.f.).
Figura 7. La primera generación de mamíferos clonados. La oveja Dolly (a la izquierda del panel
izquierdo) fue el primer animal clonado y Polly (a la izquierda del panel de la derecha, junto a su
madre adoptiva) el primer transgénico en serlo. Recuperado de:
http://web.cua.uam.mx/docs/CNI/profesores/archivos/295.pdf
Disgregación celular. Es el mismo principio por el que nacen gemelos de forma

natural. Se separan las células de un embrión en las primeras etapas del
desarrollo, cada célula separada por ser una célula indiferenciada, permite
desarrollarse para dar lugar a un individuo completo (Bertolini, 2002, citado por
Barrera, et al. 2011, p 153).
Transferencia nuclear. Se toman células embrionarias en fase de mórula obtenidas

por disgregación, se cultivan in vitro y después se trasladan a ovocitos a los que se
les ha quitado el núcleo. Se provoca la disolución de las dos células animales de
modo que el núcleo de la célula embrionaria quede en el interior del ovocito,
pudiendo éste funcionar como un cigoto (Wolf, 2001, citado por Barrera, et al.
2011, p 153).

Aplicaciones de la clonación
Algunas de las aplicaciones de la clonación se mencionan a continuación, en diferentes

áreas de impacto:
Producción pecuaria. Obtener copias de animales de alto valor productivo como

mayor producción de leche, mejor calidad de carne, mayor velocidad de
crecimiento.
Sanidad animal. Animales con r resistencia a ciertas enfermedades del ganado.
Resguardo y salvaguarda de especies animales en peligro de extinción: Por medio

de la clonación permitirá reproducir especies que estén en peligro de extinción.
Xenotransplantes: La clonación de animales transgénicos permitirá obtener

órganos como corazón, riñones e hígado que puedan trasplantarse a los humanos
(Barrera, 2011).
Plantas transgénicas
La constante demanda de alimento, vestido y obtención de materias primas para la

elaboración de diversos productos por parte de la raza humana ha propiciado que las
plantas de interés para el hombre hayan sido cultivadas, seleccionadas y
consecuentemente mejoradas desde el inicio de la agricultura para obtener mayor
rendimiento, calidad nutricional, facilidad de cultivo y resistencia a los agentes bióticos o
abióticos que las afectan (Herrera y Martínez, 2011).
La importancia de las técnicas de fitomejoramiento para

incrementar la producción agrícola
Desde el comienzo de la agricultura y la aplicación de técnicas agrícolas, el ser humano
ha estado en la búsqueda de nuevas y mejores variaciones biológicas. Mediante las
técnicas agrícolas de hibridación se ha logrado crear combinaciones muy difíciles de
obtener de otra manera (Figura 8).
La distribución de genes alrededor del mundo se ha logrado al plantar cultivos que no son
nativos del lugar. Este mejoramiento ha llegado hasta la aplicación de la ingeniera
genética, que tiene como objetivo primordial ayudar a resolver problemas tales como el
fitomejoramiento con la premisa de elevar el rendimiento de producción o aumentar el

contenido de algún compuesto en específico, mejorar la resistencia a plagas,

enfermedades y condiciones adversas como la sequía y el frío (Raney et al, 2004).
Figura 8. En la figura se muestra en método para hacer la selección de los mejores híbridos.
Recuperado de: http://asabiotecnologia.com.ar/fitomejoramiento
Como lo mencionan Herrera y Martínez (2010), el fitomejoramiento comienza con los

experimentos realizados por Gregor Mendel, en los que concluyó que las características
de los organismos están dadas por factores discretos heredables (en este caso hablamos
de los genes), con este conocimiento comenzó la producción de cultivares mejorados
mediante cruzas dirigidas entre individuos de la misma especie o de especies
estrechamente relacionadas. Por medio de numerosos eventos de cruzas y retrocruzas en
ciclos subsecuentes de cultivo, se seleccionan los individuos sobresalientes mediante
laboriosas pruebas de campo hasta obtener una generación que tenga la característica
buscada y es entonces cuando se reconoce como una nueva variedad (Figura 9). Una
limitante en este proceso de producción de nuevas variedades es la incompatibilidad
sexual entre las especies de plantas seleccionadas como progenitores, y que si la
divergencia genética entre las especies involucradas es muy grande, la probabilidad de

obtener semillas viables de tal cruza es demasiado baja y mayor será el número de
generaciones requerido para incorporar en la progenie el carácter elegido.
Figura 9. En la figura se muestra cómo se lleva a cabo la selección de plantas con características
interesantes para obtener una línea pura después de sucesivas autofecundaciones. Recuperado
de: http://asabiotecnologia.com.ar/fitomejoramiento
Las técnicas de fitomejoramiento tradicional resultan ya insuficientes para incrementar la

producción agrícola para satisfacer la creciente demanda de alimentos y además tienen el
inconveniente de haber producido variedades vegetales extremadamente dependientes
de agroquímicos. Los programas de fitomejoramiento actuales siguen teniendo como
premisa aumentar el rendimiento, disminuir las pérdidas por plagas y enfermedades y
reducir los costos de producción. Pero hoy en día el interés se centra en la generación de
cultivos agrícolas para generar productos de alto valor agregado para usos en la industria
química, alimenticia y farmacéutica y es aquí donde la ingeniería genética se presenta
como una poderosa alternativa para obtener cultivares transgénicos que superen en su

productividad y calidad a sus contrapartes obtenidas por métodos tradicionales (Herrera y

Martínez, 2011).
Para los investigadores Herrera y Martínez (2011) la ingeniería genética abre la

posibilidad de manipular directamente la información genética de cualquier ser vivo, e
incluso posibilita la creación de genes sintéticos rompiendo las barreras impuestas por la
incompatibilidad sexual y esto hace que se puedan introducir genes provenientes de otras
especies vegetales evolutivamente distantes, incluso de hongos, virus, bacterias y
animales; teniendo la ventaja de que esta modificación se lleva a cabo en un ciclo, por lo
tanto para la obtención de plantas transgénicas empleando alguna de las técnicas
disponibles representa hoy en día uno de los medios más versátil y preciso para producir
variedades vegetales mejoradas.
Métodos de transformación genética de plantas
Herrera y Martínez (2011) hacen referencia a que la generación de los OGMs ahora es
posible gracias a las metodologías del ADN recombinante mediante su manipulación en el
laboratorio, y que en el caso de las plantas para poder introducir nueva información
genética se deben de cumplir dos requisitos:
a) Disponer de un método para la regeneración in vitro de la especie de interés, y

b) Contar con un método de transformación eficiente para la misma.
Para lograr la transformación requerida es necesario que el método empleado permita la

correcta introducción del material genético, que sea una integración estable, funcional y
heredable en el genoma vegetal. Una vez logrado esto se debe de llevar a cabo la
regeneración de individuos transgénicos que contengan la nueva información genética,
esto se puede lograr gracias a las técnicas de cultivo de tejidos que hacen posible que a
partir de cualquier célula o tejido se puedan regenerar plantas completas (Herrera y
Martínez, 2011).
Herrera y Martínez (2011) exponen que existen diversos métodos de transformación

genética de los cuales se han obtenido las plantas transgénicas, entre los cuales se tiene
un método biológico y por lo tanto natural, que está basado en el empleo de una bacteria
llamada Agrobacterium tumefaciens. Pero existen métodos alternativos entre los cuales
se pueden mencionar protocolos fisicoquímicos de transformación directa, como la
electroporación de protoplastos y los tratamientos con polietilenglicol (PEG) y cloruro de
calcio (CaCl2), y métodos físicos, como el bombardeo con micropartículas recubiertas de
ADN también llamado biobalística (Tabla 2).

Tabla 2. Especies vegetales transformadas y métodos de transformación
Nombre común Nombre Científico Método de transformación

Angiospermas Monocotiledóneas
Maíz Zea mays Agrobacterium, Biobalística,
Electroporación, fibras de carbón
Trigo Triticum aestivum Agrobacterium, Biobalística
Tritordeum Hordeum X Triticum Biobalística
anfiploide
Cebada Hordeum vulgare Agrobacterium, Biobalística
Arroz Oryza sativa Agrobacterium, Biobalística,
Electroporación, Microinyección
Avena Avena sativum Biobalística
Centeno Secale cereale Biobalística
Caña de azúcar Saccharum officinarum Biobalística
Espárrago Asparagus officcinalis Agrobacterium, Biobalística
Ajo Allium sativum Agrobacterium
Cebolla Allium cepa Agrobacterium
Pasto Dactylis glomerata Biobalística
Pasto Panicum virgatum Biobalística
Pasto Paspalum notatum Biobalística
Pasto Agrostis palustris Biobalística
Pasto bandera Boutelua gracilis Biobalística
Orquídea Dendrobium x Jaquelyn Biobalística
Thomas hybrid
Piña Ananas comosus Agrobacterium
Platano Musa spp. Agrobacterium, Biobalística
Cassava Manihot esculenta Biobalística
Ginseng Panax quinquefolius Agrobacterium
Angiospermas Dicotiledóneas
Tobaco Nicotiana tabacum, Agrobacterium, Biobalística,
Electroporación, PEG
Papa Solanum tuberosum Agrobacterium, Biobalística
Tomate Lycopersicon Agrobacterium, Biobalística
esculentum
Petunia Petunia hybrida Agrobacterium
Soya Glycine max Agrobacterium, Biobalística
Frijol Phaseolus vulgaris Biobalística
Alfalfa Medicago sativa Agrobacterium, Biobalística
Cacahuate Arachis hypogea Agrobacterium
Acacia Acacia mangium Agrobacterium
Algodón Gossypium hirsutum Biobalística

Lino Linum usitatissimum Agrobacterium

Girasol Helianthus annus Agrobacterium
Arabidopsis Arabidopsis thaliana Agrobacterium
Zanahoria Daucus carota Agrobacterium
Repollo chino. Brassica campestris ssp Agrobacterium
pekinensis
Canola Brassica napus Agrobacterium, Electroporación,
Microinyección
Lechuga Lactuca sativa Agrobacterium
Jute Corchorus capsularis Biobalística
Camote Ipomoea batatas Agrobacterium
Papaya Carica papaya Biobalística
Mandarina Citrus reticulata Agrobacterium
Toronja Citrus paradisi Agrobacterium
Lima Citrus aurantifolia Agrobacterium
Pera Pyrus communis Agrobacterium
Ciruelo Prunus domestica Agrobacterium
Manzano Malus x domestica Agrobacterium
Almendro Prunus dulcis Agrobacterium
Berries Rubus ideaus Agrobacterium
Frambuesa Rubus spp. Agrobacterium
Alerce europeo Larix kaempferi Agrobacterium
Pepino Cucumis sativus Biobalística
Melón Cucumis melo Agrobacterium
Vid Vitis vinifera Agrobacterium
Café Coffea canephora C. Agrobacterium
arabica
Té Camellia sinensis Agrobacterium
Menta Mentha x piperita L. Agrobacterium
Opio Papaver somniferum Agrobacterium
Álamo blanco Populus alba Agrobacterium, Biobalística
Nogal Carya illinoensis Agrobacterium
Nuez de la india Juglans regia Agrobacterium
Eucalipto Eucalyptus Agrobacterium, Biobalística
camaldulensis
E. globulus
Árbol del hule Hevea brasiliensis Biobalística
Gimnospermas
Abeto noruego Picea abies Biobalística
Abeto blanco Picea glauca Biobalística
Pino Pinus radiata Biobalística
Recuperado de: http://www.redalyc.org/pdf/730/73000202.pdf

El señalamiento de Herrera y Martínez (2011) es que mediante el estudio detallado del

mecanismo de infección de la bacteria fitopatógena Agrobacterium tumefaciens se diseñó
el primer método para la transformación de células vegetales, que ha resultado el más
exitoso y por consecuencia el más usado, pero la supuesta incapacidad de Agrobacterium
para infectar plantas monocotiledóneas, fue la limitante por mucho tiempo para
transformar cultivos de interés como arroz, trigo y maíz.
En ese lapso de tiempo, entonces, ¿Qué generó esa disyuntiva de no poder emplear
Agrobacterium en plantas monocotiledóneas?, pues, como lo afirman Herrera y Martínez
(2011):
“[Este hecho] impulsó la búsqueda de técnicas alternativas y así surgieron

la introducción de ADN a células desprovistas de pared celular
(protoplastos), utilizando sustancias permeabilizantes de la membrana
plasmática, como el polietilenglicol, la aplicación de pulsos eléctricos de
alto voltaje que abren poros en la membrana (electroporación) y la
microinyección, que no es otra cosa que la introducción directa de ADN en
el núcleo de las células vegetales.
La aplicación de estos métodos ha sido muy limitada, ya sea por las

inconveniencias que representan el poder regenerar plantas completas a
partir de protoplastos o por lo difícil e impráctico que resulta utilizar la
microinyección con fines masivos y comerciales.
Las dificultades para la transformación de cereales fueron vencidas

cuando, en 1987, se diseñó un acelerador de partículas con el cual es
posible bombardear células o segmentos de tejido vegetal con
micropartículas recubiertas de ADN. Este método, también conocido como
biobalística, que permitió la transformación de maíz y arroz, también se ha
empleado exitosamente para transformar diferentes especies vegetales de
gran importancia alimenticia a escala mundial” (Herrera y Martínez, 2011).
El sistema de Agrobacterium tumefaciens
Herrera y Martínez (2011) describen que las bacterias A. tumefaciens y A. rhizogenes son
los agentes causales de las enfermedades denominadas “agalla de la corona” (A.
tumefaciens) que se caracteriza por la formación de un tumor y de la “raíz pilosa” (A.
rhizogenes) por el crecimiento anormal de raíces, en zonas circundantes a las heridas.
Agrobacterium por lo tanto representa al ingeniero genético de la naturaleza, ya que su
mecanismo de infección es muy singular, una vez que la bacteria penetra en la planta por
alguna herida el microorganismo inserta un segmento de su ADN, denominado T-ADN

(ADN transferido), en el genoma de las células infectadas (Figura 10). Dicho T-ADN,
contenido en plásmidos llamados Ti (inductor de tumores) en A. tumefaciens, y Ri
(inductor de raíces) en A. rhizogenes, contiene tanto genes responsables de la síntesis de
reguladores del crecimiento vegetal, causantes del crecimiento anormal típico de las
enfermedades causadas por estas bacterias, como genes para la síntesis de productos
inusuales nitrocarbonados denominados opinas, que el microorganismo utiliza como
alimento para su desarrollo y reproducción.
Figura 10. Formación de un tumor (crown gall o agalla de la corona) en una planta infectada
por Agrobacterium tumefaciens. Recuperado de:
http://apuntesbiologiamol.blogspot.mx/2014/05/aplicaciones-de-la-biologia-molecular_16.html
Con este conocimiento, varios investigadores se dedicaron a realizar modificaciones a los

plásmidos Ti/Ri, conservando solo las secuencias necesarias para la transmisión e
integración del T-ADN en el genoma vegetal, para ello removieron los genes bacterianos
responsables de la formación de tumores o raíces (cepas no oncogénicas o desarmadas).
Con estas modificaciones a los plásmidos se pudieron crear los vectores binarios que no
son más que los bordes del T-ADN transferidos a plásmidos pequeños de 8 a 10 kb para
poder realizar más fácilmente la inserción de los genes heterológos. Por lo tanto, la
generación de plantas transgénicas se logra “infectando” segmentos de una planta, que
pueden ser de hoja, tallo o cotiledón con cepas de Agrobacterium desarmadas y vectores
binarios, para recuperar plantas completas por medio de un proceso de regeneración por
cultivo de tejidos (Herrera y Martínez, 2011).
En todo proceso de transformación genética pueden presentar algunos eventos, entre los
cuales se pueden mencionar los efectos de la región genómica donde se lleva a cabo la

inserción y el número de genes que se logran integrar, que alteran la expresión de los
genes transferidos.
Usualmente se obtienen entre 50 y 100 eventos independientes de transformación y para

garantizar que las plantas transformadas expresen el transgén de interés en un nivel
adecuado al fin específico que se persigue y evitar usar plantas que hayan sufrido
alteraciones debidas a la inserción del T- ADN, todas esas plantas deben ser
ampliamente probadas, primero a nivel de laboratorio e invernadero y después a nivel de
campo, y de esta forma seleccionar las plantas que expresen adecuadamente la nueva
característica genética y que todas sus propiedades agronómicas y alimentarias sean
indistinguibles de la planta original (Herrera y Martínez, 2011).
Este sistema de transformación mediante Agrobacterium, como lo exponen Herrera y

Martínez (2011), aún se considera la mejor opción en cuanto a recuperación de plantas
transgénicas de especies sobre la que no existen antecedentes al respecto. Ha sido
exitosamente empleada para la obtención de plantas transgénicas de gran variedad de
especies dicotiledóneas y, actualmente este sistema es posible de emplearse en cualquier
especie vegetal (Figura 11), ya que con él se ha logrado la transformación de maíz y arroz
que son especies monocotiledóneas.

Figura 11. En la imagen se muestra en método de transformación in vitro mediante Agrobacterium

tumefaciens. Recuperado de:
http://www.porquebiotecnologia.com.ar/?action=cuaderno&opt=5&tipo=1&note=18
El uso de esta bacteria como herramienta en ingeniería genética de plantas ha

proporcionado cimientos en la formulación de modelos de señalización celular, transporte
de célula a célula, importe nuclear de proteínas y ADN y mecanismos de integración
genómica (Tzfira y Citovsky, 2000; citado por Gonzales, s.f.).
Biobalística
El método no biológico diseñado más recientemente es el bombardeo con

microproyectiles o biolística, que consiste en recubrir partículas esféricas de oro o
tungsteno (entre 0.4 y 1.2 μ de diámetro) con ADN, este ADN previamente precipitado
con CaCl2, espermidina o PEG. Mediante un equipo especial llamado pistola de

partículas, las esferas de oro recubiertas con ADN son aceleradas a altas velocidades
(300-600 m/s), usando helio a altas presiones para generar la propulsión (Figura 12). Lo
que se busca es que los proyectiles acelerados penetren la pared celular y la membrana
de la célula, dicha penetración puede controlarse regulando la potencia del estallido,
alterando la distancia que las partículas han de atravesar para alcanzar la célula o
utilizando partículas de diferentes tamaños (Carranza, s.f.).
Figura 12. En la imagen se muestra en funcionamiento del equipo empleado para realizar la
transformación genética de plantas llamado biobalística.
Recuperado de: http://apuntesbiologiamol.blogspot.mx/2014/05/aplicaciones-de-la-biologia-
molecular_16.html
Como lo explica Carranza (s.f.), cuando las partículas están ya dentro de la célula, el ADN
que recubría las partículas se separa y es integrado en el genoma de las plantas, aunque
no en todos los casos. La biobalística se puede emplear para transformar suspensiones
celulares de plantas, cultivos de callos, tejidos meristemáticos, embriones inmaduros y
polen, que pueden obtenerse a partir plantas diferentes, incluidas monocotiledóneas y
coníferas, que son plantas con menor grado de susceptibilidad de infección por
Agrobacterium. También ha sido utilizado para transferir ADN a cloroplastos y
mitocondrias. Por cada bombardeo se obtienen aproximadamente 10,000 células
transformadas, pero, las células transformadas obtenidas, a veces solo expresan el ADN

transferido de forma transitoria, y son detectadas por la expresión de un gen marcador

(Figura 13).
Figura 13. Generación de una planta transgénica mediante transformación con el método de
biobalística. Recuperado de: http://apuntesbiologiamol.blogspot.mx/2014/05/aplicaciones-de-la-
biologia-molecular_16.html
La importancia de la correcta configuración de los vectores utilizados en biobalística es

crucial debido a que eso influye en la integración y en la expresión de dichos genes. Por
lo tanto resulta más eficaz la transformación genética cuando se usa ADN linear en vez
de circular. Un inconveniente es que si se usan plásmidos de tamaños superiores a 10
Kb, estos pueden ser fragmentados durante el bombardeo, generando menor cantidad de
células transformadas. La alternativa que existe para incorporar fragmentos de ADN de
gran tamaño es el empleo de cromosomas artificiales de levadura (YACs), que son
específicamente diseñados para portar marcadores de selección de la planta, así como
marcadores de selección de levaduras (Carranza, s.f.).
Este método, al ser un método físico, no discrimina el tipo de célula y se ha usado

ampliamente en especies que no se han podido transformar empleando Agrobacterium
tumefaciens, por ello se ha empleado no solo en células vegetales, sino también en
células bacterias, algas, hongos, células animales, y aún animales y plantas intactas
(González, s. f.).

Pero con estas bondades, ¿Qué otras limitantes podría tener este método?, como lo
menciona González:
“[Las limitantes del empleo de Agrobacterium tumefaciens son] la

resistencia natural a la penetración de las partículas, dada por cutículas
endurecidas, paredes celulares lignificadas o superficies vellosas y la baja
relación entre el total de células sometidas al bombardeo y el número de
células que logran incorporar de manera permanente la información
genética transferida, como así también la alta frecuencia de múltiple
inserción de copias del transgén o rearreglos del mismo, dentro del genoma
vegetal”.
Para Herrera y Martínez (2011) la biobalística ha demostrado ser el mejor método de

transformación de plantas de interés comercial como es el caso de la soya, el maíz, el
sorgo, la papaya, el espárrago, la caña de azúcar, el arroz y el trigo, que por otros
métodos había sido más complicada.
A últimas fechas se ha objetado el uso de la biobalística para generar plantas modificadas

genéticamente destinadas a uso comercial, todo debido a que se incorporan fragmentos
de ADN no deseados y se integran en el genoma vegetal copias múltiples de los genes
introducidos. Con base en lo anterior se ha postulado que el método ideal de
transformación es mediante el plásmido Ti de Agrobacterium, ya que se integra un
fragmento bien definido de ADN obteniendo con cierta facilidad plantas que contienen
una sola copia de los genes introducidos (Herrera y Martínez, 2011).
Aplicaciones de la ingeniería genética de plantas
Herrera y Martínez (2011) nos explican que la biotecnología se ha centrado en los

incrementos en la producción y en la protección de cultivos contra plagas y
enfermedades. Pero en el futuro próximo la industria, el ambiente y la salud humana y
animal, también se verán beneficiados por los adelantos de las técnicas de biología
molecular. La obtención de variedades vegetales tolerantes a plagas, enfermedades y
condiciones ambientales adversas que permitan mejorar los rendimiento es lo que hasta
la fecha se ha buscado con la implementación de esta tecnología, pero ahora se busca
además la generación de plantas capaces de producir insumos de alto valor económico y
ambiental. De los productos que se pueden obtener en las plantas transgénicas
actualmente podemos mencionar a las enzimas, alimentos mayor valor nutritivo,
productos farmacéuticos, vacunas y plásticos biodegradables. Las expectativas de la

producción y uso de plantas transgénicas se discuten a continuación.
Mejoramiento de la composición y cualidades de semillas y frutos
Si tomamos en cuenta que las fuentes principales de proteínas, para la mayoría de la

población humana son las semillas de cereales y leguminosas, sin embargo los cereales
son deficientes en lisina, y las leguminosas de cisteína y metionina. Una solución sería el
consumo en proporciones idóneas de ambas semillas, pero debido a tradiciones y
factores económicos se hace poco práctica esta solución.
Una alternativa para paliar esta situación sería cambiar la composición y contenido de las
proteínas las semillas por métodos convencionales de mejoramiento genético o mediante
el uso de la ingeniería genética. Con esta última, puede incrementarse hasta un 33% en
contenido de metionina en las proteínas de las semillas de plantas transgénicas de canola
y lupino, expresando en éstas semillas una proteína de maíz rica en metionina. Por otro
lado, mediante la introducción y expresión de un gene sintético que codifica una proteína
rica en lisina, el contenido de la misma se incrementó hasta en 43% en semillas de soya.
De esta forma posteriormente se podrá modificar exitosamente plantas como maíz, arroz,
y frijol (Herrera y Martínez, 2011).
Lo expresado por Ye (2000), es que por medio de la ingeniería genética se puede mejorar
la calidad nutricional de los alimentos, aumentando el contenido de vitaminas. Un
problema importante en varios países, principalmente en los países asiáticos, es la
deficiencia en vitamina A, lo cual conduce a la ceguera. Esto se podría solucionar si se
produce esta vitamina en la semilla de arroz modificada genéticamente, el cual es de
consumo cotidiano en estas poblaciones. Introduciendo tres genes foráneos en plantas de
arroz, se ha podido producir β-caroteno (pro-vitamina A) en el endospermo de las semillas
de este cereal. El cultivo de esta variedad transformada o bien la transferencia de los
genes a otras variedades mediante cruzamiento y selección permitirá el cultivo extensivo
del arroz dorado (como se le conoce comúnmente) rico en pro-vitamina A (Figura 14).

Figura 14. Producción de β-caroteno en arroz transgénico. La introducción de tres diferentes

genes heterólogos en arroz se llevó a cabo utilizando el sistema de Agrobacterium. Las enzimas
codificadas por los tres genes introducidos transforman el geranil difosfato en β-caroteno y lo
acumulan en el endospermo, produciendo el color amarillo del llamado arroz dorado. Recuperado
de: http://web.cua.uam.mx/docs/CNI/profesores/archivos/295.pdf
Para Herrera y Martínez (2011), los lípidos de origen vegetal tienen mayor valor
nutricional que los lípidos de animales, debido a que no contienen colesterol y a que
tienen mayor proporción de ácidos grasos poli-insaturados. Mediante la obtención de
plantas transgénicas de canola con alto índice de ácidos grasos poli-insaturados (40% de
ácido láurico) se busca disminuir la incidencia de enfermedades coronarias causadas por
el consumo de grandes cantidades de ácidos grasos saturados.
Resistencia a virus, bacterias y hongos fitopatógenos
Herrera y Martínez (2011) aducen que la ingeniería genética ha sido la más explorada
tanto en laboratorios públicos para producir plantas resistentes a enfermedades, pero su
éxito de estos estudios está basado principalmente en la generación de plantas
resistentes a enfermedades virales donde se han obtenido plantas resistentes a más de
30 enfermedades de este tipo, no así en las enfermedades causadas por hongos donde
aún es muy incipiente.
A continuación se describen algunos de los avances obtenidos en este respecto.
Los virus son los agentes fitopatogénicos más destructivos que se conocen porque no
existe medida alguna capaz de controlar su ataque. Es por ello que el control de las
enfermedades virales es el campo más promisorio donde la ingeniería genética de plantas
puede tener su mayor impacto (Figura 15). El desarrollo de resistencia por el uso de
genes virales y su introducción en plantas se conoce como resistencia derivada del
patógeno, este fenómeno se debe a que la planta reconoce un exceso en la expresión de

los genes virales introducidos y evita su expresión, por lo tanto impide la infección por el
virus de la cepa utilizada y cepas relacionadas con el mismo (Herrera y Martínez, 2011).
Figura 15. Campo de experimentación de la papaya transgénica hawaiana. A la izquierda, plantas

infectadas con el virus de la mancha anillada. A la derecha, plantas transgénicas resistentes.
Recuperado de: http://felixmoronta.com/papaya-transgenico-venezuela/
Entonces, ¿cuáles son los productos transgénicos producidos para amortiguar estas
enfermedades?, Herrera y Martínez (2011) detallan lo siguiente:
“Usando el gene que codifica para la proteína de la cápside se obtuvieron

en 1986 las primeras plantas de tabaco resistentes al virus del mosaico del
tabaco. Usando una estrategia similar se obtuvieron plantas de calabacita
amarilla y de sandía, resistentes a virus. La papaya ha sido severamente
atacada por el virus de la mancha anular y los esfuerzos para generar
plantas resistentes usando las técnicas convencionales de hibridación han
fracasado, por lo que fue necesario transformar plantas con el gene que
codifica para la proteína de la cápside de este virus. A partir de 1994 se
obtuvieron plantas resistentes al virus y ha sido posible mantener cultivos
redituables de papaya en diferentes lugares, como es el caso de Hawaii.
Actualmente, la papaya y la calabacita amarilla han sido comercializadas.
Además, tomates transgénicos resistentes al virus del mosaico del tabaco,
papas transgénicas resistentes a los virus X y Y de la papa y pepinos

transgénicos resistentes al virus del mosaico del pepino, han sido

producidos (Herrera y Martínez, 2011)”.
Las enfermedades causadas por bacterias se han considerado menos importantes que
las causadas por virus y hongos, pero las infecciones bacterianas causan pérdidas muy
importantes en algunas especies a nivel regional. Para disminuir el daño causado por las
enfermedades bacterianas se han implementado diferentes estrategias, entre ellas está la
creación de plantas transgénicas resistentes a toxinas o que expresan genes de
resistencia a la infección por las bacterias. Un ejemplo es el arroz silvestre Oryza
longistaminata que es resistente a Xanthomonas oryzae pv. Oryzae (Xoo) causante de la
enfermedad del tizón del halo, la cual causa importantes pérdidas en la producción
comercial de arroz en Asia. El gene de resistencia a esta bacteria (Xa21), se identificó y
aisló en 1995 y se transfirió a variedades de arroz. (Herrera y Martínez, 2011).
Como lo mencionan Herrera y Martínez (2011), a pesar de que los hongos generan
pérdidas cuantiosas en cultivos de plantas, los logros en la producción de plantas
transgénicas resistentes a estos patógenos no son significativas. Una estrategia para
controlar a estos organismos es mediante la expresión de genes que codifican enzimas
que puedan degradar los principales componentes de la pared celular de los hongos
(quitina y β-1,3 glucanos). Con base en ello se logró que en plantas de tomate se tuviera
un nivel útil de resistencia al ataque por el hongo Fusarium mediante la expresión de dos
genes que codifican para estas enzimas.
Alteración de la vida de anaquel de frutos
Como es sabido, la maduración de los frutos es continua e irreversible, aunado a que se

dispone de tiempo limitado para el traslado y distribución de los frutos frescos desde los
lugares de cosecha a los sitios de venta y consumo. En los intentos de la ingeniería
genética por retardar la maduración y reducir las pérdidas pos-cosecha al aumentar la
llamada vida de anaquel, se han usado genes antisentido para transformar plantas y
bloquear la expresión de genes involucrados en el proceso de maduración. Los más
importantes están relacionados en la biosíntesis de etileno (hormona vegetal que dispara
el proceso de maduración de muchos frutos) o de enzimas hidrolíticas directamente
relacionadas con el ablandamiento de los frutos. Usando estos métodos de
transformación se han generado tomates, melones y otros frutos cuya vida de anaquel se
ha prolongado desde unos días hasta varias semanas.
Esta estrategia tiene un campo de aplicación muy basto principalmente en frutos

tropicales, producidos esencialmente en países en vías de desarrollo, donde las pérdidas

son severas por el deficiente sistema de almacenamiento y transporte (Herrera y

Martínez, 2011).
Plantas transgénicas resistentes al ataque de insectos
Las interacciones planta-insecto son de vital importancia para ambos organismos. Debido
a ello las plantas se ven beneficiadas en procesos de polinización, eliminación de tejido
muerto y de insectos dañinos, esto es un evento común en la naturaleza. Las perdidas
agrícolas mundiales causadas por insectos, se deben a que las plantas, en su mayoría,
son cultivadas en regiones diferentes a su sitio de origen, por lo tanto se vuelven
susceptibles de ser atacadas por especies regionales de insectos. Aunado a eso, son más
graves las pérdidas que los insectos causan durante el periodo de almacenamiento de
los granos y semillas. Esto es lo que incentiva a cualquier programa de fitomejoramiento a
obtener cultivares resistentes a plagas (Herrera y Martínez, 2011).
Mediante la ingeniería genética se han realizado estudios enfocados en grupos de genes

procedentes de la bacteria Bacillus thuringiensis (Bt), que codifican para proteínas
cristalinas con propiedades insecticidas conocidas como δ-endotoxinas. Estas δ-
endotoxinas, al ser ingeridas por los insectos, se unen a células intestinales del tracto
digestivo de los mismos ocasionando una lisis osmótica. Estas proteínas se caracterizan
por su especificidad a diferentes grupos de insectos, las proteínas Cry I son efectivas
contra lepidópteros (polillas y mariposas) y los Cry III solamente contra coleópteros
(escarabajos) (Estruch, et al., 1997; citado por Herrera y Martínez, 2011).
Herrera y Martínez (2011) explican que a partir de la creación del primer cultivo resistente
a insectos, que en este caso fue el tabaco en 1987, la creación de este tipo de cultivos se
ha incrementado notablemente y en la actualidad también se tienen cultivos resistentes al
insecto de tomate, algodón, papa, maíz, canola, soya y arroz, cultivos importantes a nivel
mundial (Figura 16). El éxito biotecnológico del maíz, no lo excluye de los rigurosos y
necesarios ensayos de campo para evaluar la efectividad para el control de insectos en
diferentes ambientes, debido a que los insectos que atacan este cultivo cambian con la
región geográfica. En México ya se han realizado algunos ensayos por parte de algunas
compañías privadas.

Figura 16. Imagen que muestra un comparativo de la planta de algodón normal del lado izquierdo
siendo atacada por insectos y una planta transgénica resistente a insectos en la derecha.
http://agrobio.org/fend/index.php/index.php?op=YXA9I2JXbDQmaW09I05ETT0=
La producción de plantas híbridas de arroz comenzó a partir del año 2001, con cualidades
como resistencia a dos de las más importantes plagas de lepidópteros, sin disminuir la
productividad. En Cuba se ha desarrollado caña de azúcar con resistencia al ataque de
insectos, un cultivo de suma importancia para ese país y otros en vías de desarrollo.
Muchas especies de insectos no son afectados por las proteínas Cry, por lo tanto la
biotecnología vegetal está en la búsqueda constante de otros genes cuyos productos
tengan propiedades insecticidas. Entre ello podemos mencionar a los inhibidores de
proteasas que interfieren con el funcionamiento de las enzimas digestivas de los insectos
y que forman parte del sistema de defensa de algunas plantas. Empleando este tipo de
inhibidores ha sido posible crear plantas transformadas genéticamente de canola, papa,
alfalfa y tomate, aunque aún no han sido comercializadas (Herrera y Martínez, 2011).
Plantas transgénicas con mayor tolerancia a factores ambientales
Los factores abióticos que impactan en la producción agrícola son la sequía, la salinidad y
el frío. La tolerancia al estrés causada por estos factores se puede mitigar mediante el
incremento en la producción de metabolitos osmoprotectores (azúcares, alcoholes,
aminoácidos y compuestos cuaternarios de amonio (glicinbetaína)) que incrementan el
potencial osmótico de la célula y estabilizan las membranas y las estructuras
macromoleculares. Esto se puede lograr mediante la producción de plantas transgénicas
con un incremento en la producción de osmolitos (Figura 17). En plantas de tabaco y

Arabidopsis se ha producido la glicinbetaína mostrando una mejor tolerancia al estrés por

NaCl y frío. La tolerancia a la sequía se ha logrado en plantas de tabaco mediante la
sobreproducción del azúcar trehalosa y, el manitol ha sido sobreproducido en Arabidopsis
mejorando la germinación de las semillas en condiciones de alta salinidad (Nuccio, et al.,
1999; citado por Herrera y Martínez, 2011).
Figura 17. Plantas de tabaco sometidas a déficit hídrico.

Recuperado de: http://www.bioavan.com/Tolerancia-al-deficit-hidrico-en-plantas-basada-en-la-
regulacion-de-la-homeostasis-del-anion-Cl-y-e.82.0.html
A nivel molecular ¿Qué sucede con las plantas que están sometidas a condiciones de
estrés abiótico?, para explicar esto Herrera y Martínez comentan lo siguiente:
“Los mecanismos de tolerancia que permiten el crecimiento de una planta

bajo esas condiciones desfavorables, involucran el establecimiento de
cambios bioquímicos y celulares, que requieren la participación coordinada
de muchos genes. Esta expresión orquestada de genes está controlada por
factores de transcripción. La manipulación de los factores de transcripción,
que regulan la expresión de genes de tolerancia al estrés abiótico es, por
ende, una estrategia muy prometedora para la generación de plantas con
mayor tolerancia al frío y a la sequía” (Herrera y Martínez, 2011).
Un elemento metálico muy abundante en el suelo y que presenta toxicidad para muchas
plantas es el aluminio, algunas plantas presentan mecanismos para tolerar las
concentraciones tóxicas de este metal, lo hacen mediante la producción y exudación de
ácidos orgánicos al suelo (citrato y otros), permitiendo la formación de compuestos
quelados que carecen de toxicidad. Mediante el empleo de un gene bacteriano que
codifica para la enzima citrato sintasa, que sintetiza citrato, se han podido transformar
plantas de tabaco y papaya que producen hasta cinco a seis veces más cantidad de

citrato en las raíces, y por lo tanto se genera tolerancia a concentraciones tóxicas de

aluminio, dichas concentraciones son hasta diez veces más que las toleradas por las
plantas originales (De la fuente, et al., 1997; citado por Herrera y Martínez, 1997).
La contaminación de suelos con metales pesados producto de diversas actividades

industriales cada vez se convierte en un problema ambiental más agudo. Para tratar de
resolverlo, se han propuesto diversas estrategias, entre las cuales se encuentra la
biorremediación.
La biorremediación es un proceso mediante el cual se utilizan organismos vivos para

extraer los metales pesados que contaminan el suelo y así limpiarlo, dicha contaminación
es generada por las actividades industriales y es actualmente un problema de salud
importante. Se ha propuesto el uso de plantas para eliminar la contaminación por metales
pesados principalmente porque producen raíces que penetran hasta capas muy profundas
del suelo. En este aspecto se tiene que las plantas transgénicas de Arabidopsis, que han
sido transformadas con el gene bacteriano mera, un gene que codifica para la enzima
reductasa del ion mercúrico, permite la transformación de la forma catiónica del metal a
Hg(0), la cual es una forma volátil y no tóxica de este elemento (Chaney, et al., 1997;
citado por Herrera y Martínez, 2011).
Las plantas como biorreactores
Una aplicación importante de las plantas es su empleo como Biorreactores para producir
metabolitos de interés comercial (entre ellas podemos mencionar la producción de
proteínas heterólogas). Su producción en plantas tiene varias ventajas, ya que puede
realizarse en semillas, frutos o tubérculos, con la posibilidad de colectarlos y almacenarlos
para ser consumidos directamente o ser procesados para obtener el producto de interés.
Otras ventajas son:
a) El bajo costo a una escala agrícola.

b) La reducción de los costos de capitalización con relación al uso de métodos de
fermentación.
c) Es un escalamiento relativamente sencillo de la producción.
d) La producción de proteínas multiméricas complejas (anticuerpos), que son
perfectamente ensamblados.
e) La producción segura de las proteínas, considerando que las plantas no son
hospederos naturales de patógenos de humanos (Larrick & Thomas, 2001;
Gidding, et al., 200; citado por Herrera y Martínez, 2011).

Pero, ¿los productos biofarmacéuticos se pueden producir en las plantas?, en este

aspecto Herrera y Martínez nos mencionan lo siguiente:
“Los productos biofarmacéuticos son la mejor elección para ser producidos

en plantas, por el alto costo de utilizar otros sistemas, como las células de
mamíferos, para su producción. Algunos ejemplos se mencionan a
continuación:
1) El b-interferón se ha producido en plantas de nabo y puede ser

potencialmente utilizado en el tratamiento de la hepatitis B y C.
2) La ausencia de la enzima glucocerebrosidasa en el humano produce la
enfermedad de Gaucher, un desorden heredado recesivamente, y la
enzima ha sido tradicionalmente extraída de las placentas a costos muy
altos; la producción de esta enzima en tabaco transgénico apoya
fuertemente la viabilidad comercial en el futuro para esta terapia.
3) La hirudina, un anticoagulante para tratar la trombosis se produce
actualmente en semillas de canola y se encuentra disponible en forma
comercial;
4) La somatotropina, una hormona humana usada en el tratamiento del
enanismo de personas, ha sido tradicionalmente producida en bacterias y
recientemente su expresión en cloroplastos de tabaco en altos niveles
convierte a este organelo como un eficiente vehículo para la producción de
proteínas farmacéuticas” (Herrera y Martínez, 2011).
Producción de vacunas orales en plantas transgénicas
En los frutos de plantas transgénicas se pueden sintetizar y acumular proteínas

antigénicas debido a que tiene la capacidad para realizarlo, y con base en ello podrían ser
usadas como vacunas orales contra agentes infecciosos como virus y bacterias.
Las principales causas de mortalidad infantil son las infecciones gastrointestinales y

respiratorias en los países en vías de desarrollo, en los cuales se presentan muchas
enfermedades diarreicas causadas principalmente por bacterias como Escherichia coli,
que producen toxinas responsables de esas enfermedades. Para paliar este aspecto, los
genes de dichas toxinas se han aislado e introducido a plantas de papa logrando su
acumulación en los tubérculos (Figura 18). Mediante la alimentación a Ratones, con
papás transgénicas con los genes de las toxinas, estos mostraron resistencia a la
infección debido a que produjeron niveles elevados de anticuerpos contra la toxina Para
los humanos aún se encuentran en desarrollo los ensayos con antígenos producidos en
plantas, particularmente con la toxina termolábil de E. coli, virus de la hepatitis B y virus

de Norwalk; en los tres casos mencionados existen respuestas sistémicas mucosales

inmunes, sin efectos adversos demostrados, lo que permitirá en un futuro próximo su uso
como vacunas (Walmsley &. Rnatzen, 2000; citado por Herrera y Martínez, 2011).
Figura 18. La producción de vacunas comestibles es una realidad y se pueden producir mediante
la transformación genética de plantas usando Agrobacterium tumefaciens.
Recuperado de: http://blogs.eluniversal.com.mx/wweblogs_detalle.php?p_fecha=2012-04-
24&p_id_blog=139&p_id_tema=16185
Uso comercial de plantas transgénicas
Herrera y Martínez (2011) exponen que las plantas transgénicas empezaron a

comercializarse en 1994 con el primer producto transgénico liberado para consumo
humano por parte de la compañía Calgene, y fue el tomate denominado Flavr savr® de
maduración retardada. Este tomate se comercializó durante el año 1995 en los EEUU,
pero se retiró del mercado debido a problemas en su cultivo, ya que era una cepa
susceptible al ataque de patógenos. En ese mismo año la empresa Zeneca lanzó al
mercado un tomate similar con propiedades nutritivas iguales al tomate convencional pero
sin problemas alergénicos, dicho tomate se vende en la actualidad como puré de tomate
con un etiquetado que menciona su procedencia transgénica.

Figura 19. Puré de tomate y salsa cátsup elaborados con tomates genéticamente modificados.
Tomado de: http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/GMFood/tomato.html
En 1996 se liberó la soya (Roundup) con tolerancia a un herbicida de rápida

descomposición en el suelo. Fue rechazada inicialmente por algunos países de la Unión
Europea entre ellos Dinamarca, pero la mayoría de los países la aceptó considerando que
no tiene diferencias nutritivas con respecto a la soya producida de manera convencional.
Esto deja claro que los consumidores no se oponen al empleo de la tecnología moderna si
ellos pueden ver las ventajas y beneficios de la misma.
Y entonces, ¿cómo ha sido la producción de los cultivos transgénicos a nivel mundial

desde la primera generación de los mismos?, para ello debemos mencionar lo que
Herrera y Martínez presentan en la siguiente información:
“El área global de cultivos transgénicos comercializados se ha

incrementado gradualmente: en 1996 se cultivaban 1.7 millones de
hectáreas, 11 en 1997, 27.8 en 1998, 39.9 en 1999, 44.2 en 2000 y 52.6 en
2001, lo que representa un incremento de más de treinta veces en cinco
años. Los países industrializados tienen las tres cuartas partes de la
superficie cultivada con plantas transgénicas, principalmente EEUU (68%) y
Canadá (6%) mientras que los países en desarrollo tienen una cuarta parte,
destacando Argentina (22%) y China (3%). Por lo que respecta al número
de países, en 1996 sólo seis aceptaban el cultivo de plantas transgénicas, y
se ha incrementado a trece en 2001 (EEUU, Argentina, Canadá, China,
Sudáfrica, Australia, Rumania, México, Bulgaria, España, Alemania,

Francia, Uruguay e Indonesia). Las plantas transgénicas más cultivadas de

acuerdo con reportes del año 2001 son la soya (63%), maíz (19%), algodón
(13%), y canola (5%); en menor proporción se encuentran la papa,
calabacita y papaya, con menos de 1% cada una de ellas. Los fenotipos de
las plantas transgénicas que más se cultivan son la tolerancia a herbicidas
(77%), resistencia a insectos (15%), combinación de tolerancia a herbicidas
y resistencia a insectos (8%), resistencia a virus y otros (menos 1%). Las
superficies cultivables de plantas transgénicas con respecto a no
transgénicas para algunos cultivos fueron en el año 2001: 46% de soya,
20% de algodón, 11% de canola y 7% de maíz; el área global de estos
cuatro cultivos (transgénicos y convencionales) es de 271 millones de has.,
por lo que los cultivos transgénicos representan el 19%” (Herrera y
Martínez, 2011).
Transferencia de la tecnología
Desde los años 90’s la mayoría de los agricultores han permanecido escépticos a los
cultivos transgénicos y esto aún prevalece en los países en desarrollo. Pero el nivel de
confianza que los agricultores han depositado en los cultivos transgénicos debido a que
pueden hacer una contribución de vital importancia a la alimentación global ha logrado de
que los agricultores de algunos países de primer mundo y de países en desarrollo
tomaran la iniciativa de incrementar sus áreas de cultivos transgénicos hasta en treinta
veces de lo que regularmente lo hacían (Herrera y Martínez, 2011).
Entonces, si el incremento de los cultivos transgénicos es evidente, ¿qué sucede con la

transferencia de esta tecnología?, en este tenor Herrera y Martínez mencionan que:
“La transferencia de la tecnología de plantas transgénicas a los países en

desarrollo tiene aspectos económicos, políticos y sociales, no obstante que
desde el punto de vista técnico los problemas son menores. La creación de
centros de investigación agrícola en países en desarrollo (Filipinas, México,
Colombia, Nigeria, India, Perú, Siria, Taiwán y Costa de Marfil) y la
participación de organizaciones internacionales tales como la FAO,
representan las etapas iniciales en la transferencia y el desarrollo local de
esta tecnología” (Herrera y Martínez, 2011).

Detección, identificación y cuantificación de un OGM
En nuestro país, la SEMARNAT cuenta con un laboratorio diseñado exclusivamente para

atender la demanda de información técnica y científica en cuanto a transgénicos se
refiere, y de esta manera ayudar a quienes toman las decisiones en relación con los
riesgos asociados a la liberación al ambiente de OGMs. La función preponderante de este
organismo es el análisis de OGM a través de la detección, cuantificación e identificación
de los mismos Dicho laboratorio está equipado para poder implementar y desarrollar de
manera rutinaria diferentes técnicas moleculares. La reacción en cadena de la polimerasa
(PCR) es el método principal de análisis empleado para amplificar ácidos nucleicos
insertados en los OGM, este laboratorio cuenta con un equipo de PCR punto final y otro
de tiempo real (INECC, s.f.).
Mediante esta infraestructura se respalda el desarrollo de proyectos de investigación que

apoyen la toma de decisiones en cuestiones de bioseguridad para la liberación de OGMs
al ambiente, y dando cumplimiento a los compromisos adquiridos por parte del gobierno
de México en la implementación del Protocolo de Cartagena, en las competencias del
Instituto Nacional de Ecología como integrante del sector gubernamental ambiental. Este
laboratorio está acreditado por la Entidad Mexicana de Acreditación en el método de
detección de OGM en maíz, y ahí mismo se llevan a cabo los procedimientos para
identificar eventos específicos y la cuantificación de OGM mediante PCR tiempo real.
Estas técnicas son implementadas posteriormente en otros cultivos de importancia para
nuestro país (INECC, s.f.).
Para llevar a cabo un análisis acertado y efectivo se debe de contar con personal
capacitado en temas modernos de biotecnología y un laboratorio con la infraestructura
física suficiente con la capacidad para montar cualquier técnica de análisis que se genere
con la biotecnología moderna y que cumpla los estándares internacionales de calidad
vigentes, todo esto debido a que la detección, identificación y cuantificación de un OGM
requiere utilizar la misma tecnología de punta con la cual se desarrolló (SENASICA,
2013).
Es imprescindible contar con una mínima cantidad de ADN intacto de la muestra a

analizar, incluido el gen de interés. Una vez realizada la extracción de los ácidos
nucleicos, el análisis de OGM consiste en la identificación y cuando se desee, la posterior
cuantificación de las secuencias genéticamente modificadas que estén presentes en las
muestras analizadas. Es necesario desarrollar un método de análisis para cada uno de los
eventos de modificación genética autorizados a nivel mundial (SENASICA, 2013).

Técnicas, recursos e instrumentos empleados
La presencia o ausencia de los elementos genéticos bajo estudio en la porción de la

muestra analizada se determinan cualitativamente empleando controles apropiados y
dentro de los límites de detección del método analítico empleado. Para todos los ensayos
deben siempre utilizarse materiales de referencia certificados (MRC) para OGM y los
controles apropiados (SENASICA, 2013).
El análisis generalmente consiste en:
 La amplificación de una o más secuencias especificas diana.

 La detección y confirmación del evento específico mediante PCR.
 La cuantificación de los fragmentos amplificados relativos a los MRC.
 Reporte de los resultados sobre ausencia o presencia y porcentaje en caso de un
análisis cuantitativo.
Las técnicas del análisis de los OGM según lo describe SENASICA (2013) son las
siguientes:
Basadas en ADN. Mediante la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (PCR-

TR) puede llevarse a cabo la cuantificación, mediante esta técnica se puede expresar
claramente la cantidad del elemento genético diana en la muestra analizada, relativo a la
cantidad de una referencia específica (gene endógeno).
Los métodos analíticos que hacen uso de la técnica de la PCR permiten la detección,
identificación y cuantificación de secuencias de ADN asociadas con OGM, y se puede
lograr una amplificación selectiva de segmentos de ADN presentes en una muestra. Por lo
tanto se requiere de personal capacitado y equipo especializado para implementar esta
técnica. Se deben extremar las medidas de bioseguridad en la manipulación de las
muestras, evitando la contaminación cruzada, lo cual puede generar falsos positivos ya
que esta técnica permite detectar la presencia de una sola secuencia de ADN presente en
una muestra (SENASICA, 2013).
Basados en Proteínas. Para el método que está basado en proteínas se emplean

anticuerpos específicos de la proteína de interés. La técnica de ELISA (por sus siglas en
inglés Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay), detecta o mide la cantidad de proteína de
interés presentes en una muestra que puede contener una gran cantidad de proteínas
diferentes. Mediante un anticuerpo liga la proteína específica, un segundo anticuerpo
amplifica la detección y mediante un conjugado de un anticuerpo con una enzima se
genera una reacción colorida fácil de observar y cuantificar y que se compara con una

curva patrón de la proteína de interés. Es una técnica menos sensible que la PCR; en un
principio se tienen costos elevados para el desarrollo del ensayo y la obtención de
anticuerpos y patrones de proteínas, pero cuando se elaboran los reactivos su costo se
reduce; el inconveniente que presenta es que no discrimina entre diferentes productos
transgénicos que expresan características proteínicas similares, debido a esto la PCR y el
ELISA no se deben excluir, deben considerarse mutuamente complementarios
(SENASICA, 2013).
Medidas para la resolución de las problemáticas de biodiversidad

y bioseguridad
Muñoz (1998) considera que las controversias que se han generado por el uso creciente y
la comercialización de los OGMs, se enfocan en dos causa principales:
 Indudablemente la generación de los OGMs es intencionada e incluye la

transferencia de material genético desde un organismo a otro, aunado al problema
del ADN que se utiliza como marcador o vector para detectar o llevar a cabo la
transferencia. Podemos centrarnos entonces en lo concerniente a la estabilidad
del ADN, que cifra o codifica el nuevo carácter, y efectos que pudieran generarse
por el material transferido en el genoma del organismo huésped, como puede ser
pleiotropía o relaciones de posición. Esto generaría ventajas selectivas de los
organismos diseminados intencionadamente o de modo inadvertido en ecosistema
de nuestro país, lo que conllevaría a cambios de naturaleza y consecuencias que
serían impredecibles (Muñoz, 1998).
 El escape de los OGMs, del control humano cuando se utilizan en laboratorios o
fábricas, así como en el medio ambiente pueden afectar cuando se liberan de un
modo intencionado y podrían reproducirse de una forma descontrolada o transferir
la nueva información que portan a la misma especie o especies relacionadas lo
que posibles riesgos para el medio o para la salud de seres humanos o de
animales.
Entonces, ¿Cómo se pueden para afrontar estos problemas? La investigación sobre estos
puntos cruciales no es sencilla ya que, entre otras cosas, debe intentar ofrecer respuestas
a las siguientes cuestiones como lo menciona Wöhrmann et. al. (1996; citado por Muñoz,
1998).
 “¿Qué fenómeno puede tener lugar?, ¿son los genes estables?, ¿se pueden
producir efectos pleiotrópicos?, ¿es plausible que exista transferencia horizontal
de genes?
 ¿Son los organismos transgénicos susceptibles de pervivir al margen de las
condiciones específicas para las que fueron diseñadas?

 ¿Cuál es la probabilidad de que estos fenómenos tengan lugar?

 ¿Cuáles son las consecuencias para los organismos relacionados, para el medio
ambiente o para los seres humanos?” (Wöhrmann, et. al., 1996; citado por Muñoz,
1998).
Para Muñoz (1998) dar resolución de estas cuestiones no es sencillo debido a que las
dificultades son muchas y variadas por lo cual menciona lo siguiente
 Dificultad para elegir el entorno en que realizar el experimento (el nivel de

laboratorio es insuficiente)
 Las múltiples variables involucradas.
 La fragilidad de los OGMs al modificar las condiciones del medio para el que han
sido diseñados.
 La poca atracción de estos problemas para la comunidad científica, por la
complejidad de las cuestiones y por la dificultad de obtener resultados
espectaculares (los buenos resultados son los negativos).
 La multidisciplinariedad requerida para abordar la resolución de estas cuestiones,
con lo que se hace precisa la colaboración de científicos de diferentes
especialidades que muchas veces están en conflicto epistémico y, en cualquier
caso, compiten por recursos escasos (Muñoz, 1998).
Para poder contestar las preguntas formuladas anteriormente se han involucrado

disciplinas científicas como la genética clásica y molecular, la genética de poblaciones y la
genética evolutiva. A la vez se debe mencionar la importancia de los transposones que
provocan efectos variados que van desde las mutaciones puntuales hasta la
reorganización cromosómica. Dichos transposones son responsables de la creación de
variabilidad genética y por lo consecuencia influyen en la evolución de los organismos en
que asientan y tienen un comportamiento análogo a como lo hace el "ADN extraño"
insertado por ingeniería genética. Este es un ejemplo de los difícil que resulta en
ocasiones poder distinguir entre lo natural y lo no natural.
La pregunta a formular sería entonces, ¿existe alguna otra constatación de estos

problemas?, de acuerdo a lo que expone Muñoz (1998) si la hay y argumenta lo siguiente:
“Otra importante constatación, derivada de la reciente acumulación de

evidencia experimental, es la existencia de un grado de ‘transferencia
génica horizontal’ entre los microorganismos. Una prueba de ello radica en
el hecho de que el número de marzo de 1998 de la revista Investigación y
Ciencia incluya un artículo sobre este punto. El artículo de R. V. Miller -jefe
del Departamento de microbiología y genética molecular de la Universidad
estatal de Oklahoma- pasa revista a los problemas y resultados que se
están obteniendo en el curso de las investigaciones sobre la transferencia

génica horizontal en la naturaleza. Señala el autor que su interés por el

tema data de 1976, pero que hasta 1985 tuvo incontables dificultades para
encontrar financiación para sus proyectos. Los tres pasos biológicos, los
procesos de conjugación (descubiertos por Lederberg y Tatum); la
transformación (a través de ADN asociado con componentes del suelo); y
la transducción (con la identificación de bacteriófagos en concentraciones
elevadas en hábitats insospechados) intervienen en la naturaleza para el
intercambio de material genético entre bacterias. La conclusión de Miller es
optimista, aunque no excluye la conveniencia de la precaución. Señala, en
efecto, que "los estudios realizados con bacterias en su medio natural
permiten asegurar que no hay peligro en soltar organismos sometidos a
manipulación genética. Lo importante es saber si cumplirán la misión
asignada. En cualquier caso, no sobra la prudencia. Cuanto mejor
conozcamos la transferencia génica horizontal, más información tendrán los
biotecnólogos para reducir los riesgos al mínimo" (Muñoz 1998).
Recursos para tu ruta de aprendizaje
Bolivar- Zapata, F. (2004). Fundamentos y casos exitosos de la

Biotecnología Moderna. México, D.F. Recuperado de:
En este libro coordinado por Bolívar Zapata se describen detalladamente los casos
documentados que han teñido éxito en la Biotecnología moderna.
Rodríguez R., P. & González R., O. (2007). Plantas transgénicas:

una revisión de los principales cultivos básicos en México. e-Gnosis,
(5) Recuperado de http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=73000509
El artículo escrito por Paulina Rodríguez y Orfil González hace una revisión de los
principales cultivos de México y las plantas transgénicas, mencionando las principales

modificaciones genéticas en los cultivos y las compañías productoras de organismos

transgénicos.
Carranza, D. (s.f.) Trasformación de células vegetales Obtención de

plantas transgénicas. 38 pp. Recuperado de: http://ciencia-en-
red.uncachodeciencia.org/biologia/Transformacion%20de%20celulas
%20vegetales%20obtencion%20de%20plantas%20transgenicas.pdf
En este documento Diana Carranza expone los métodos para la creación de plantas
transgénicas mediante la transformación de las células vegetales.
Narbón, P. (2008). Transferencia génica en animales. 53 pp.

Recuperado de: http://www.uned.es/experto-biotecnologia-
alimentos/TrabajosSelecc/PatriciaNarbon.pdf
El presente documento escrito por Cristina Narbón, se centra en el estudio de las técnicas
de transformación genética disponibles y su aplicación para la obtención de animales
manipulados genéticamente viables y seguros.
Actividades
La elaboración de las actividades estará guiada por tu docente en línea, mismo

que te indicará, a través de la Planeación didáctica del docente en línea, la dinámica
que tú y tus compañeros (as) llevarán a cabo, así como los envíos que tendrán que
realizar.
Para el envío de tus trabajos usarás la siguiente nomenclatura: BBYB_U3_A1_XXYZ,

donde BBYB corresponde a las siglas de la asignatura, U3 es la unidad de
conocimiento, A1 es el número de actividad, el cual debes sustituir considerando la
actividad que se realices, XX son las primeras letras de tu nombre, Y la primera letra
de tu apellido paterno y Z la primera letra de tu apellido materno.

Autorreflexiones
Para la parte de autorreflexiones debes responder las Preguntas de

Autorreflexión indicadas por tu docente en línea y enviar tu archivo. Cabe
recordar que esta actividad tiene una ponderación del 10% de tu evaluación.
Para el envío de tu autorreflexión utiliza la siguiente nomenclatura:

BBYB _U3_ATR _XXYZ, donde BBYB corresponde a las siglas de la asignatura,
U3 es la unidad de conocimiento, XX son las primeras letras de tu nombre, y la
primera letra de tu apellido paterno y Z la primera letra de tu apellido materno.
Cierre de la unidad
El enfoque de la tercera unidad se plasmó con base en la comprensión de las

metodologías de transformación genética generadoras de OGMs, lo cual nos permitió
dilucidar el tipo de transfección acorde a cada tipo de organismos vivo, además de
consultar las entidades Federativas y/o particulares encargadas de regular, monitorear la
generación y uso de los OGMs, la detección, identificación y cuantificación de los mismos.
A partir de ello se podrá obtener un protocolo para generar un OGM que pueda ser de
utilidad en México. También se debe de tomar en cuenta las implicaciones económicas,
los marcos regulatorios y los impactos ambientales y ecológicos que se pueden generar
por el uso del OGM generado, como ya se ha visto en las unidades anteriores.
Tu capacidad de análisis, de crítica y de propuesta e innovación tuvo que ser primordial

para comprender el bagaje de conocimientos, desarrollo científico e implementación
tecnológica que pueden generar estas áreas del saber, tuviste que seleccionar la
información obtenida correctamente, pero ante todo debiste ser ético y honesto con la
información obtenida de las diferentes fuentes de información las cuales te permitieron
culminar esta tercera unidad de la materia de Biodiversidad y Bioseguridad.

Para saber más
Bolívar, F., et. al. (2011). Por un uso responsable de los organismos genéticamente
modificados. Academia Mexicana de Ciencias, AC. México, D.F.
Recuperado de:
http://www.uam.mx/librosbiotec/uso_responsable_ogm/uso_responsable_ogm/files/assets/
downloads/files/uso_responsable_OGM.pdf
Blanco, M., Valverde, R. & Gómez, L. (2003). Optimización de la transformación genética

con Agrobacterium rhizogenes. Agronomía Costarricense, 27(1) 19-28. Recuperado de
http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=43627102
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Cuantificación de Organismos Genéticamente Modificados (RNLD-OGM). Disponible en:
http://www.conacyt.gob.mx/cibiogem/index.php/redes/red-nacional-de-laboratorios-de-
deteccion-identificacion-y-cuantificacion-de-organismos-geneticamente-modificados-rnld-
ogm
Forero, G. (2009). Ingeniería genética agropecuaria. Universidad Nacional Abierta y a

Distancia, Bogotá. Disponible en:
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/203027/Modulo_en_PDF/IGA_MODULO.pdf
Instituto Nacional de Ecología. (s.f.). Centro Nacional de Referencia en Detección de

Organismos Genéticamente Modificados (CNRDOGM). Disponible en:
http://www.inecc.gob.mx/descargas/bioseguridad/act_bioseguridad.pdf

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Genéticamente Modificados (CNRDOGM). Recuperado de:
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Terrón, M. (2008) Técnicas moleculares en la detección de organismos genéticamente

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En: Organización mundial de la salud oficina regional para Europa.
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Buscando La Verdad. (2013). OGM (Organismos Genéticamente Modificados) Alerta

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Disponible en: http://podcast.unam.mx/

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3. Bolivar- Zapata, F. (2004). Fundamentos y casos exitosos de la Biotecnología

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4. Carranza, D. (s.f.) Trasformación de células vegetales Obtención de plantas

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5. González, I. (s.f.). Métodos de transformación en plantas mediado por

Agrobacterium tumefaciens y bombardeo de partículas “biolística”. 12 pp.
Recuperado de:
http://www.univallecaicedonia.edu.co/web/investigacion/TransformacionYMejorami
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6. INECC. (s.f.). Laboratorio de Ecología. Recuperado de:

http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones/libros/492/laboratorio.pdf

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http://digital.csic.es/bitstream/10261/1998/1/dt-9804.pdf
8. Narbón, P. (2008). Transferencia génica en animales. 53 pp. Recuperado de:

http://www.uned.es/experto-biotecnologia-
alimentos/TrabajosSelecc/PatriciaNarbon.pdf
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Agricultura [online], Vol. 35. Recuperado de:
http://www.fao.org/docrep/006/y5160s/y5160s00.htm.
10. Rodríguez R., P. & González R., O. (2007). Plantas transgénicas: una revisión de
los principales cultivos básicos en México. e-Gnosis, (5) Recuperado de
http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=73000509
11. SENASICA. (2013). Detección de OGM. Recuperado de:

12. SENASICA. (2013). Técnicas de análisis. Recuperado de:


Unidad3 Metodosdetransformaciongeneticadeteccionidentificacion

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Programa de la asignatura:

Ciencias de la Salud Biológicas y Ambientales | Ingeniería en Biotecnología

Presentación de la unidad ......................................................................................................... 2

Universidad Abierta y a Distancia de México 1

En esta tercera unidad se pretende distinguir las metodologías de transformación genética

 Describir las técnicas de transformación genética de los OGMs.

Universidad Abierta y a Distancia de México 2

Identificar los métodos de la transformación genética de los OGMs y

Unidad 3. Métodos de transformación genética, detección, identificación y

Manipulación genética de animales: transgénesis y clonación

Detección, identificación y cuantificación de un OGM

Medidas para la resolución de las problemáticas de biodiversidad y bioseguridad.

Universidad Abierta y a Distancia de México 3

Manipulación genética de animales: transgénesis y clonación

Como lo define Bolívar (2011), la biotecnología es una multidisciplina fundamentada en el

Figura 1. La biotecnología es una actividad multidisciplinaria, ya que está basada en varias

Universidad Abierta y a Distancia de México 4

Diseño y construcción de los primeros animales transgénicos

Universidad Abierta y a Distancia de México 5

En el área pecuaria se está trabajando intensamente para generar transgénicos que

En 1981 se demostró la integración y transmisión estable a través de la línea germinal de

Universidad Abierta y a Distancia de México 6

Figura 3. Ratones transgénicos para la hormona del crecimiento. El ratón de la izquierda es

El método de transgénesis más empleado ha sido la microinyección de ADN en el

Metodología para la construcción de animales transgénicos

La transgénesis es una herramienta útil para el estudio de la expresión tejido-específico

Los métodos físicos de transgénesis se caracterizan por la utilización de adyuvantes

Universidad Abierta y a Distancia de México 7

La técnica de transferencia de genes más utilizada en mamíferos y la más exitosa es la

Universidad Abierta y a Distancia de México 8

La sonicación se basa en la transferencia de genes en protoplastos y en células intactas

Universidad Abierta y a Distancia de México 9

Figura 5. Diagrama de flujo en la electroporación. La membrana celular es permeabilizada al ADN

En la actualidad se están diseñando productos, monoméricos y poliméricos, útiles para la

Fibras. Es un método reciente de transferencia de ADN mediante fibras que

Existen diferentes métodos de incorporación de ADN externo en animales, mediante las

Universidad Abierta y a Distancia de México 10

Vectores espermáticos. El uso de los espermatozoides para transportar genes

Células estaminales. Las células estaminales (CE) son células indiferenciadas

Universidad Abierta y a Distancia de México 11

Animales transgénicos con fines de investigación básica y

La investigación en transgénesis aplicada a la producción animal está siendo abordada

a) Modificación de la utilidad de la leche mediante de la incorporación de proteínas

Para la industria lechera una gran alternativa es la producción de proteínas de interés

Tabla 1. Producción de proteínas recombinantes en la leche de mamíferos

Animales transgénicos producidos

Universidad Abierta y a Distancia de México 12

b) Mejoramiento de respuesta inmunitaria a ciertas enfermedades

Principalmente por tradición es como se ha llevado a cabo el control de enfermedades en

c) Mejoramiento de ciertas funciones biológicas importantes, como la reproducción

Debemos conocer la ubicación de un gene y sus efectos fisiológicos para aislarlo y

Universidad Abierta y a Distancia de México 13

Ejemplos de transgénesis con fines comerciales

En la actualidad se han producido cerdos transgénicos para la producción de órganos

Figura 6. Cerdo transgénico con órganos transplantables. La creación y el diseño de modelos

Universidad Abierta y a Distancia de México 14

Industria biotecnológica de animales transgénicos

El potencial de los animales transgénicos mediante el empleo biotecnológico radica en

La biotecnología ha aplicado técnicas experimentales de transgénesis estableciendo las

Barrera (2011) menciona que en el origen de la evolución, la reproducción de los seres

Universidad Abierta y a Distancia de México 15

Disgregación celular. Es el mismo principio por el que nacen gemelos de forma

Transferencia nuclear. Se toman células embrionarias en fase de mórula obtenidas