Cabrosi D., De Piano G., Robirosa J. y Semelak J.

(Grupo 3)

Trabajo práctico N°2 Determinación de

toxicidad

Toxicología y química legal - 2do cuatrimestre 2016

Objetivos
 Cuantificación del efecto tóxico de una sustancia sobre seres vivos.
Se cuantificara el efecto tóxico de un insecticida de la familia de los
piretroides sobre moscas, mediante técnicas de laboratorio que permiten
calcular CL50 y el TV50. Estos parámetros toxicológicos permiten comparar la
potencia tóxica de distintos compuestos como asimismo la diferente
susceptibilidad de especies o cepas a un mismo tóxico. Se utilizan insectos
para este fin.

Introducción
En el análisis del grado de toxicidad de una determinada sustancia, es necesario
discernir entre ensayo de toxicidad agua y de toxicidad crónica.

Los ensayos de toxicidad aguda son el primer ensayo a realizar y corresponden a la

determinación de la dosis a la que es letal un agente potencialmente tóxico.

En el caso de los ensayos de toxicidad crónica se mide el riesgo del animal al

exponerse por períodos largos a dosis subletales de un determinado tóxico.

Este tipo de pruebas se realizan midiendo para diferentes concentraciones de

tóxico, que porcentaje de animales presentan alguna respuesta negativa en su
organismo. A partir de ellos, se puede graficar dichos resultados y calcular algunos
parámetros de interés como por ejemplo:

 DE50: Es aquella dosis que produce un cambio determinado en el 50% de los

organismos ensayados.
 DL50: Dosis que produce la muerte en el 50% de los animales en el ensayo.
 CL50: Concentración que produce la muerte en el 50% de los animales en
ensayo.
 TV50: Tiempo en el cual se produce un 50% de volteo en los animales al ser
expuestos a una dosis determinada de una sustancia

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Desarrollo experimental
Se prepararon dos papeles de filtro impregnados cada uno con 2ml de la solución de
insecticida (Muestra) y 2ml de agua (control). Se dejó evaporar el agua y luego se
colocaron los papeles dentro de frascos limpios.

Se utilizaron 15 moscas machos en cada frasco, cepa RAC, inicialmente

inmovilizadas por enfriamiento. Se taparon los frascos con gasa y bandas elásticas.
A partir del momento en que recuperan se toma el tiempo de exposición al film,
efectuando el recuento de animales volteados cada 3 minutos.

Resultados y discusiones
A partir de la concentración de moscas machos volteadas en el intervalo de tiempo
usado (57 minutos), se calculó el porcentaje de esas moscas (Tabla 1).

Tiempo (minutos)
21 42 45 48 51 54 57
3 6 9 12 15 18 a
39
Contr 0 0 0 0 0 6,6 6,6
% 0 0 0 0 0 0
ol 7 7
de
Muest
volt 6,6 33, 53, 73, 93,
ra 0 0 0 0 0 0 0 100
eo 7 3 3 3 3
Tabla 1: Porcentaje de volteo de las muestras evaluadas. Se observan valores de 39 y 42
minutos para NOAEL y LOAEL, respectivamente.

En base a los datos recogidos se realizó la interpolación lineal con el fin de obtener
el TV50, graficando el % de volteo en probit en función del tiempo para la muestra
(Figura 1). La tabla de pasaje de porcentajes a grados probit se muestra en el
apéndice (Tabla A-1).

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Figura 1: Gráfico del % de volteo en función del tiempo (en escala logarítmica)
para la muestra.

En el caso del control, dada la distribución de los resultados obtenidos

experimentalmente no fue posible realizar un análisis estadístico con ellos. Sin
embargo, la mortalidad en el control fue lo suficientemente baja como para
considerarse despreciable.

Los valores de la regresión lineal para la muestra se pueden ver en la tabla 2.

Pendiente Ordenada R2
Muestra 31 ± 4 -47 ± 6 0,934
Tabla 2: Parámetros del ajuste lineal por cuadrados mínimos del % de volteo en función del
tiempo para la muestra.

En base a los datos obtenidos se determinaron el valor del TV 50 y de los intervalos

de confianza teniendo en cuenta la formula detallada en la guía de la materia Tabla
3.

Intervalo de
TV50 (min)
confianza
Muestra 46,4 (42,2 ; 51,0)
Tabla 3: TV50 determinado experimentalmente.

Los cálculos del TV 50 y del intervalo de confianza se puede ver en el apéndice

(Tabla A-2).

Conclusiones
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Se observó el efecto del insecticida por contacto. Es decir, el insecticida ingresó al

animal cuando este se apoyó sobre el papel embebido en el formulado de
cipermetrina. El mecanismo de acción de la cipermetrina paraliza el sistema
nervioso del insecto impidiendo el paso de los átomos de sodio.

Se logró cuantificar el efecto tóxico de un formulado de cipermetrina sobre una

población de moscas maschos pudiéndose calcular diversos parámetros estadísticos
como el Tiempo de volteo 50 y el intervalo de confianza correspondiente a ese
tiempo.

Bibliografía
Guía de la materia Toxícología y Química Legal, 2do cuatrimestre 2016

Apéndice
Tabla A1:

Tiempo % volteo en
(min) probit
0 0
3 0
6 0
9 0
12 0
15 0
18 0
21 0
24 0
27 0
30 0
33 0
36 0
39 0
42 3,52
45 4,56
48 5,08

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51 5,61
54 6,48
57 8,09

Tabla A2:

TV50 TL 84 TL16 s f TV 50 inf TV 50 sup

46,4 49,9 43,1 1,1 1,1 42,2 51,0

Donde:

Con n’ el número de moscas tratadas entre TL16 y TL84.