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MEDIOS DE CULTIVO EN

MICROBIOLOGÍA
Camilo Moreno
Microbiología & Enfermedades Infecciosas
Facultad de Medicina
Universidad Antonio Nariño
Producto patológico Contaminación ambiental Productos industriales

Microorganismos

Necesidades metabólicas

Fuentes de Carbono Nitrógeno Minerales Factores de crecimiento

MEDIO DE CULTIVO

Sustrato o solución de nutrientes que logran cubrir con todas las


necesidades nutricionales de los microorganismos

• Multiplicación
• Aislamiento
• Identificación y diagnóstico
Page  2 • Pruebas complementarias
• Investigación
Componentes

Hidratos de Fracciones Agentes


Agua Peptonas Extractos
carbono sanguíneas solidificantés

Suero
* Medios
Fuente de Fuente de Carne:
Solvente solidos o
carbono energía Vitaminas
semisólidos

Plasma

Hidrolisis Levaduras:
Equilibrio acida o AA, factores
Glucosa Agar
osmótico enzimática de
de proteínas crecimiento GR

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Solidos

Según su estado
Líquidos Semisólidos
(consistencia)

Conservación
Clasificación Naturales
Transporte

Multiplicación
Según su utilidad Según su
origen
Identificación
Básicos
Sintéticos
Diferenciales
Semi-
Selectivos Enriquecidos sinteticos
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Clasificación
1. Según su consistencia

Líquidos Solidos Semisolidos


- Caldos – - Gelatinas –
* Nutrientes disueltos * Agar en cajas de petri * Agar en baja proporción
* Ausencia de sustancias * Sustancias solidificantes * Medios de transporte
solidificantes * Nutrientes básicos * Útil en el estudio de
* Recuperación de * Útil para aislamiento características
microorganismos microbiológicas
exigentes * Ventajas para
observación de
* Imposibilidad de características
aislamientos inicial morfológicas

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RELACIÓN DE LAS BACTERIAS CON
EL OXIGENO EN TIOGLICOLATO

Tubo # 1: Aerobio estricto


Tubo # 2: Anaerobio facultativo
Tubo # 3: Anaerobio aerotolerante
(Microaerofílico)
Tubo # 4: Anaerobio estricto

Tipos de crecimiento
en medios líquidos

Grumoso Uniforme Intermedio Deposito Velo superficial

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Clasificación
1. Según su Origen

Semisinteticos
Sintéticos
Naturales Se les añaden factores
Medios que contienen
Preparados a partir de de crecimiento bajo una
una composición química
sustancias naturales forma
definida cuali y
de un extracto orgánico
- No se conoce su cuantitativamente. Se
complejo, como por
composición exacta - utilizan para obtener
ejemplo extracto de
resultados reproducibles.
levadura.

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Clasificación
1. Según su utilidad

Poseen los componentes mínimos para que pueda producirse el


Medios
MediosBásicos
Básicos crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos especiales.

Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas normales,


incorporan una serie de factores indispensables para el crecimiento
Medios Enriquecidos de microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por
adición de sangre u otros productos biológicos. Líquidos

pH Lactobacillus
pH
Condiciones
físicas Temperaturas disgenésicas

Medios Selectivos
Condiciones Concentraciones osmóticas
químicas

Antisépticos
Favorecen el crecimiento de ciertas
bacterias contenidas en una población Antibióticos
polimicrobiana
Page  8 Potenciadores
Clasificación
3. Según su utilidad

Se utilizan para poner en evidencia características bioquímicas que


Diferenciales ayuden a diferenciar géneros o especies (fermentación)

Son los destinados a comprobar alguna cualidad específica que


puede servirnos para reconocer la identidad de un microorganismo.
Identificación Estos medios han de poseer los elementos necesarios para
asegurar el crecimiento de los microorganismos, el sustrato
específico que vaya a ser metabolizado y el indicador que nos
muestre el resultado

Sirven para obtener una gran cantidad de células a partir de un


Multiplicación microorganismo ya aislado. Se emplean en la obtención de
vacunas, en la investigación y en la industria

Conservación Mediante liofilización de una suspensión bacteriana ó congelando


las cepas en leche descremada estéril al 0,1%

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Clasificación
3. Según su utilidad

Se usan para el transporte de muestras clínicas que no pueden


Transporte sembrarse inmediatamente. Su utilización debe hacerse introduciendo
la torunda con la que se obtuvo la muestra en el interior del medio
(generalmente en un tubo). Son ejemplos típicos de este grupo los
medios de Stuart-Amies,Cary-Blair, etc.

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Medios de Identificación : CROMOAGARES

A) C. albicans (grün) B) C. glabrata (hellviolett) C) C. tropicalis (blau) D) C. krusei (blass rosa)


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Medios Selectivos

Agar MacConkey
Cristal violeta y sales biliares - lactosa
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Medios Basicos

Agar Sangre
Sangre de cordero
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MANIFESTACIONES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
EN LOS MEDIOS DE CULTIVO

En medios de cultivo líquidos

En general el crecimiento se manifiesta por turbidez, la cual podrá opacar todo el cultivo
o darle un aspecto granuloso o nebuloso.

En medios de cultivos sólidos

Como la bacteria se encuentra impedida de desplazarse por la solidez del medio, al


multiplicarse en un punto especifico, sus descendiente que alcanzan magnitudes
millonarias en menos de 24 horas, ocasionan agregados bacterianos, que dan lugar a
estructura visibles de diferente formas, aspecto y colores, denominados colonias
bacterianas, cuyos caracteres serán típicos para cada genero o especies.

UFC UFP

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Métodos de siembra

El método de siembra a emplear dependerá de los objetivos que se pretendan


alcanzar con el cultivo, ya que en ocasiones se requiere que el desarrollo del
microorganismo se produzca de forma masiva, mientras que en otras resulta
indispensables que las colonias queden aisladas o que las manifestaciones del
metabolismo tengan lugar con tensiones reducidas o privadas de oxígeno.

AISLAMIENTO DE COLONIAS

MASIFICAR EL CRECIMIENTO

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Tipos de siembra
Estría en placa – Estría múltiple por agotamiento -

• Asa
• Espátula
• Hisopo

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Tipos de siembra
Estría en placa – Estría por agotamiento -

Page  17
Tipos de siembra
Estría en cuatro cuadrantes

Page  18
Tipos de siembra
Vertido en placa

Técnica de Barry

Page  19
Tipos de siembra
Siembra en medios sólidos en cuñas (tubos de ensayo)

Page  20
Tipos de siembra
Siembra por punción

Page  21
Tipos de siembra
Siembra Masiva

Espátula de Driglaski.

Page  22
ESTUDIO CUALITATIVO DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
CARACTERISTICAS MORFOLÓGICAS

Superficie Forma

Características de UFC

Borde
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ESTUDIO CUALITATIVO DEL CRECIMIENTO BACTERIANO
CARACTERISTICAS MORFOLÓGICAS

Klebsiella sp Staphylococcus aureus

Colonias grandes planoconvexa,


mucoides, brillantes, forma irregular, Colonias medianas, convexas, de color
también se observan redondeadas, blanco, forma circular, bordes
bordes ondulados redondeados

• Tamaño
• Consistencia
• Transparencia y coloración
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CULTIVO PURO Y CULTIVO MIXTO

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REPIQUES O PASES MICROBIOLOGICOS

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