Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán

Departamento de Ciencias Químicas
Sección de Química Analítica

Química Analítica III

Ingeniería Química
Profesores:
•Hernández Matamoros Pablo
•Dolores Hernández Mariana

Reporte 7: “Cromatografía de gases; separación de alcoholes y

análisis de licores por cromatografía de gases capilar”

Equipo 1:

 Guerrero Moreno Daniel

27 de octubre del 2015

 Introducción

La cromatografía de gases es una técnica muy utilizada para separar los diferentes
compuestos volátiles de una muestra. La fase móvil es un gas inerte, (nitrógeno o helio)
que transporta la muestra volatilizada en el inyector a través de la columna
cromatográfica. La fase estacionaria generalmente está constituida por una columna de
metil polisiloxano, o derivados de éste. Los diferentes compuestos se separan en
función de su grado de volatilidad (punto de ebullición, peso molecular) y su afinidad
por la fase estacionaria. Entre los detectores más utilizados caben mencionar el
detector FID (ionización de llama) que por su alta versatilidad, hace posible la detección
de un elevado tipo de compuestos.

La primera técnica cromatografía fue ideada por el botánico ruso Mikhail Tswett en
1906, quien utilizó alúmina para separar los pigmentos coloreados de las hojas de las
plantas. Tswett en su experimento original, metió dentro de un tubo de vidrio un fino
polvo (sacarosa) para producir una columna de una altura deseada. Posteriormente,
extrajo los pigmentos de hojas y los colocó en un solvente (éter de petróleo) y agregó
un poco de la solución dentro de la columna. Cuando toda la solución había pasado a
través de la columna se formó una estrecha zona inicial bajo la capa inicial del
adsorbente. Después agregó más solvente y aplicó presión en la parte de arriba de la
columna. Mientras el solvente iba pasando a través de la columna, los pigmentos se iban
separando individualmente. La clave del éxito de la columna de Tswett, fue la aplicación
de la mezcla dentro de la columna en una zona inicial estrecha y la posterior aplicación
del solvente fresco.
Básicamente un cromatógrafo de gases consiste de seis partes:

1. Un suministro de gas portador en un tanque a alta presión, con los reguladores de

presión y medidores de flujo necesario. El gas portador preferible (helio, o
nitrógeno).
2. Un sistema de inyección de la muestra. La muestra se introduce como vapor en el
volumen más pequeño posible y en un mínimo de tiempo, sin descomponerla o
fraccionarla. La técnica para la inyección debe de ser reproducible con alto grado de
precisión.
3. La columna de separación.
o Empacadas. Son tubos rellenos de un soporte inerte recubierto con una fase
líquida no volátil para utilizarse con gas-liq , o rellenas de un adsorbente para la
cromatografía gas-sol.
o Tubulares abiertas. El trayecto del gas a través de la columna es un orificio sin
restricciones, y el medio separador está en forma de recubrimiento sobre las
paredes del tubo.
4. El detector. (De ionización de flama o de captura de electrones etc.) El detector
utilizado debe de ser el que mejor opere dependiendo del gas transportador.
5. Un electrómetro y registrador de gráfica deslizante (quizá con un integrador).
6. compartimientos separados con termostatos para contener las columnas y el
detector, y poder regular la temperatura. Éste registra el arribo de los componentes
separados a medida que salen de la columna, y produce la correspondiente señal
eléctrica. La temperatura aquí debe de ser alta para evitar la condensación de los
vapores de la muestra.
Objetivos

 Estudiar los parámetros que afectan la elusión, la resolución y la eficiencia

de los picos en la cromatografía de gases.
 Separar, identificar y cuantificar etanol y metanol en licores comerciales
por cromatografía de gases.
Material, equipo y reactivos

Material Reactivos Equipo Servicios

3 matraces Vol. 10ml Metanol 1 cromatógrafo de gases Gases inertes

1 micro pipeta Etanol 1 jeringa para electricidad

cromatógrafo
1 piseta n-propanol Vacío

n-butanol

n-amílico
Muestra de alcohol
problema (35% tequila)
marca “100 años”

Para la obtener el factor de
respuesta se utilizara n-
propanol como estándar
interno, por lo que se
prepararan los siguientes
sistemas de la Tabla 3.
Inyectar cada uno de los
sistemas bajo las condiciones
de corrida del apartado C
número 3 (gradiente del
horno). Resultados obtenidos
de los cromatogramas de la
determinación de
MeOH y EtOH por el método
de factor de respuesta en la
tabla 4
Prepara la siguiente
tabla de los sistemas
para las 5 diferentes
concentraciones de la
curva de calibración y
los sistemas problema:
Tabla 5. Preparación
de los sistemas para la
cuantificación de MeOH
y EtOH por el
método de curva de
calibración
Inyectar cada uno de los sistemas bajo las
condiciones de corrida del apartado C número
3 (gradiente del horno). Resultados obtenidos de los
cromatogramas de la determinación de MeOH y
EtOH por el método de curva de calibración en la
tabla 6
PARTE EXPERIMENTAL
Se realizó la inyección de 1 μl de STD de
cada uno de los siguientes alcoholes
Metanol, Etanol, n-propanol, n-butanol y
n-amílico, con el fin de identificar el
orden de elusión de cada compuesto.
Condiciones de la corrida:
Flujo de Nitrogeno 2.8 ± 0.2 ml/min
Temperatura del Horno de la
columna: isotérmico 100 oC
Temperatura del inyector (front
inyector type 1079): 200 oC, hold time
1 parte superior trasera del equipo.
Split ratio: 20
Temperatura del Detector: 250 oC,
FID, rango 9
Influencia de la temperatura en la
resolucion Prepare una mezcla de 100
μl de cada uno de los STD de
alcoholes y realice la inyección de 1 μl
de esta muestra a las mismas
condiciones del apartado anterior
(isotérmica a 100 oC). Inyecte 1 μl de
la misma mezcla anterior pero en
condiciones isotérmicas a 200 oC
(recuerde cambiar la temperatura en el
método) Inyecte 1 μl de la misma
mezcla anterior pero realizando un
gradiente de temperatura del horno de
80 oC por 2 min. Con una rampa de 15
oC/min, hasta 180 oC,
Diagrama de flujo
Se abrio los gases del equipo (llave del
tanque) y ajustar la presión a 40 psi
para H2, 60 psi para Aire y 80 psi para
N2. Abrir los gases de las válvulas de
la parte frontal del equipo.
Encender la computadora y seleccionar
el icono STAR (aparecerá la ventana
del programa). Entrar en la opción de
System Control.
Subir la palanca del interruptor de
la caja gris (colocado en la parte
inferior de la mesa).
Encender el interruptor de la
En el software del equipo el icono
al centro deberá cambiar a azul.
Entonces se puede seleccionar el
método 8 en el panel frontal del
equipo, seleccionando método y
activar el número 8.
En el software ir a Instrument y
seleccionar CG 3800. Aparecerán 4
pantallas, en caso de que NO
aparezcan ir a Instrument y
seleccionar show modules. Ir a File,
seleccionar method y entrar a la
opción activate, seleccionar el
método Esperar a que los
indicadores de cada parámetro
pasen de rojo a verde. Del panel
frontal del equipo ir a GC control y
seleccionar detector y apretar
encender (vera usted que ya tiene
cambio en la señal del detector).
Del menú principal seleccione
inject, apriete OK y ponga el
nombre de la muestra, el
subdirectorio donde estará, el
nombre del archivo como se
salvaran los datos y en browse
busque el archivo isot100. El
método tomará medio minuto en
estabilizarse.
 Análisis de resultados

En la actividad experimental se realizó la cuantificación de etanol y metanol en una

muestra comercial mediante cromatografía de gases empleando una columna tubular
abierta, con un gas portador y un detector de ionización de llama.

La cromatografía se realizó a un barrido de temperaturas (gradiente) inicialmente se

realizó una cromatografía de cada alcohol (patrón) en las cuales se determinó el tiempo
de retención. Los tiempo de retención (tr) de un componente es el tiempo que
transcurre desde la inyección de una mezcla en la columna hasta que ese componente
llegue al detector.

Los tiempos registrados de retención permiten hacer un análisis cualitativo de los

componentes de la mezcla.

Alcohol Metanol etanol Propanol Butanol n-amílico

isoamilico
Tr 3.166 3.183 3.783 4.733 5.650
(minutos) 6.650

Podemos notar que 𝑡𝑟𝑛−𝑎𝑚𝑖𝑙𝑖𝑐𝑜 > 𝑡𝑟𝑏𝑢𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 > 𝑡𝑟𝑝𝑟𝑜𝑝𝑎𝑛𝑜𝑙 > 𝑡𝑟𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 > 𝑡𝑟𝑚𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 lo cual
señala la afinidad que tienen estos compuestos con la fase estacionaria siendo más
retenido el n-amílico.

Tal comportamiento se puede explicar de igual forma debido a os puntos de ebullición

de cada alcohol, entre mas pequeña es la temperatura de ebullición, el componente es
más volátil, por lo que tiende a estar en la fase gaseosa, por ello, el metanol eluye más
rápido que los otros alcoholes.

Al correr los cromatogramas correspondientes a las muestras problema y la mezcla

podemos notar desviaciones al tiempo de retención de cada alcohol, para el caso del
metanol los tiempos se notaron muy juntos sin embargo se pudo distinguir tal tiempo.

Con el objetivo de cuantificar metanol, se comparan los tiempos de retención

obteniendo que en el cromatograma del metanol de la muestra de los tres estándar es
de 5.316 min y el de la muestra problema da un tr de 5.250 min el cual está por encima
del tiempo registrado en el cromatograma de los tres estándares.
Para realizar al cuantificación de MeOH y EtOH en la muestra problema, se realiza lo
siguiente:

Metanol

Para los estándares se realizó:

99.8 R. P MeOH 10 mL V
0.2 mL R. A MeOH [ ][ ] = 1.996 % MeOH
100 R. A MeOH 1 V

99.5 R. P EtOH 10 mL V
0.1 mL R. A EtOH [ ][ ] = 0.995 % Propanol
100 R. A EtOH 1 V

Para calcular el factor respuesta:

MeOH AMeOH [Propanol]

F = x
Propanol Apropanol [MeOH]

MeOH 11414.1980 [0.995]

F = x = 0.4397
Propanol 12938.3605 [1.996]

Despejando MeOH, tenemos:

AMeOH [propanol]
[MeOH]problema = x
Apropanol F MeOH
Propanol

899.2220 [0.995]
[MeOH]problema = x = 0.03475 % V de Metanol en la bebida
58555.3340 0.4397

La norma NOM-142-SSA1-1995 nos dice que el contenido máxmo de metanol en una

300 𝑚𝑔
bebida alcohólica no debe de pasar de 100 𝑚𝐿
lo que nos da una concentración de:

La densidad del metanol es: 0.82 g/mL

300 𝑚𝑔 1𝑔 1 𝑚𝐿 𝑉
× × × 100% = 0.3659%
100 𝑚𝐿 1000 𝑚𝑔 0.82 𝑔 𝑉

Por lo que decimos que nuestra muestra está muy por debajo de la cantidad de metanol
permitida por lo que sería seguro ingerirlo sin riesgo alguno.
Etanol

Para los estándares se realizó:

99.9R. P EtOH 10 mL V
0.2 mL R. A EtOH [ ][ ] = 1.998 % EtOH
100 R. A EtOH 1 V

99.5 R. P EtOH 10 mL V
0.1 mL R. A EtOH [ ][ ] = 0.995 % Propanol
100 R. A EtOH 1 V

Para calcular el factor respuesta:

EtOH AEtOH [Propanol]

F = x
Propanol Apropanol [EtOH]

EtOH 16756.4200 [0.995]

F = x = 0.6449
Propanol 12938.3605 [1.998]

Despejando EtOH, tenemos:

AEtOH [propanol]
[EtOH]problema = x
Apropanol EtOH
F
Propanol

12437.0080 [0.995]
[EtOH]problema = x = 1.0978 % V de etanol en la bebida
17479.0540 0.6449
Para calcular el % de etanol que tiene la bebida analizada realizamos lo siguiente:

(1.0978)(10 mL)
%V EtOH en la bebida = = 𝟒𝟓. 𝟕𝟒% de EtOH
(0.240)

Para el caso del metanol, no podemos comparar con la muestra comercial analizada; ya
que para el metanol se utilizó la muestra del equipo 4, y para el etanol se utilizó la
muestra que el equipo trajo.
Para calcular el número de platos teóricos realizamos el análisis correspondiente
2
𝑡𝑅
𝑁 = 5.54 ( )
𝑊1
2

Donde tR es el tiempo de retención del pico y W1/2 es la anchura a la mitad de altura

desde la base.

A 100 °C:

tiempo
Compuesto w 1/2 N
(s)
Metanol 193.98 15 926.490897
etanol 201 15 994.7624
propanol 232.98 7 6136.92713
butanol 292.98 12 3302.35093
amílico 348 8 10483.065

A 200 °C

Compuesto tiempo w 1/2 N

(s)
Metanol 187.98 26 289.591866
etanol 280.98 242 7.46843919
propanol 313.56 242 9.30080083
butanol 339.96 149 28.8398415
amílico 357.9 128 43.3270205
Gradiente

tiempo
Compuesto w 1/2 N
(s)
metanol 313.98 8 8533.62906
etanol 354 9 8570.99556
propanol 456.96 11 9560.50352
butanol 558.96 12 12020.1181
amílico 604.98 7 41380.4987
En cromatografía, se espera tener una separación eficiente; entiéndase por ello que sea
más rápida, con elevado número de platos teóricos, y con una buena resolución
podemos observar que en un gradiente de temperatura se obtiene mayor número de
platos, por lo que podemos inferir que esta es la condición adecuada de temperatura
para la separación de los alcoholes. Teóricamente, la temperatura correcta es el
promedio de los puntos de ebullición de los componentes de la mezcla. El gradiente de
temperaturas se utiliza cuando los puntos de ebullición de la muestra varían en demasía

El grado de separación o resolución de dos bandas adyacentes se define como la distancia

entre los picos de las bandas (o centros) dividida entre el ancho promedio de las bandas.
Si la retención y el ancho de la banda se miden en unidades de tiempo, como en la Fig.
2.3, la resolución está dada por:

A 100°C

tiempo
Compuesto w Rs
(s)
Metanol 193.98 10 0.36
etanol 201 29 0.76142857
propanol 232.98 55 1.12149533
butanol 292.98 52 1.03811321
amílico 348 54 -----
A 200°C

Compuesto tiempo w Rs
(s)
Metanol 187.98 94 1.72222222
etanol 280.98 14 1.58926829
propanol 313.56 27 1.2
butanol 339.96 17 0.65454545
amílico 357.96 38 ----

A gradiente

tiempo
Compuesto w Rs
(s)
metanol 313.98 37 0.71464286
etanol 354 75 1.34588235
propanol 456.96 78 1.59375
butanol 558.96 50 1.09571429
amílico 604.98 34 -------

Debido a las propiedades de ciertos compuestos y las semejanzas de estos, en algunas

ocasiones lo más adecuado es usar el programa de temperatura, en este caso para
separar mezclas de alcohol cuyas propiedades se acercan ; es decir que sus puntos de
ebullición(de líquido a gas) se acercan de tal manera que tenerlos en una solución
provoca que se dificulte su adecuada separación es decir que parte del etanol se
arrastre en el etanol y genere fluctuaciones en el gráfico de la cromatografía, denotados
como impurezas en estas ocasiones y cuando se tiene a formar azeotropos es
conveniente llevar la temperatura en función de tiempo para optimizar los resultados
y los picos cromatograficos salgan de manera limpia y sin impurezas, Cuando se eleva
demasiado la temperatura no se le da el tiempo suficiente de separación, por lo que la
carga elevada de temperatura provoca que los picos se junten y sea imposible su
identificación.

Las mejores condiciones son a temperaturas no tan altas fueron a 100°C se programó
para que llegara a esa temperatura lentamente desde 50°C para que le diera suficiente
tiempo para que el alcohol en cuestión fuera arrastrado por la fase móvil lentamente.

Conclusiones
Un cromatógrafo de gases es un equipo muy útil cuando se busca separar, identificar o
cuantificar componentes volátiles o con punto de ebullición bajos, mezclas simples o
complejos de estos.

En una cromatografía de gases el parámetro más importante es la temperatura ya que a

partir de esta variable nosotros podemos modificar la resolución y eficacia de los picos, por
lo que la experimentalmente una parte fue realizada para determinar el mejor programa
de temperatura; a 200°C no hubo una buena separación de los picos, a 100°C los picos de
metanol y etano, no estaban totalmente separados.

En la actividad experimental se logró cuantificar la cantidad de etanol presente en una

muestra comercial de tequila 100 años; respecto a la cuantificación se obtuvo un 45%
de etanol presente en la muestra lo cual concuerda con la cantidad que reporta el
fabricante, en el caso del metanol, no se puede inferir mucho sobre él, debido que por
cuestiones de tiempo solo se cuantifico metanol de la muestra del equipo 4 por lo tanto
no podemos afirmar que nuestra muestra analizada se encuentre alterada por la
presencia de metanol.

Se logró identificar las mejores condiciones para que se llevara de la manera más adecuada
la separación de los alcoholes, así como el comportamiento de este a través de la
temperatura, además de cómo afecta está a la retención de cada sustancia volátil a través
de la fase móvil.

Bibliografía

Harris C.D. “Análisis Químico Cuantitativo”. Ed. Reverté S.A, 2da edición, México 1999