 BACTERIAS REDUCTORAS DE SULFATO, MINERALIZADORAS Y OXIDADORAS DE

AZUFRE.

Método: Número más probable de bacterias mineralizadoras anaeróbicas del azufre

Para la realización de este método se pesara 10 g de sedimento y diluir en 90 mL de solución
salina estéril, mezclar y hacer diluciones hasta 10-7.

a) Mineralización

 Inocular 1 mL de cada una de las diluciones 10-1, 10-2 y 10-3 una vez que en cada tubo
contenga medio para la mineralización anaeróbica de azufre, dejar un testigo, agregar a cada
tubo 1 mL de nujol.
 Incubar a 28°C de 3 a 4 semanas.

INTERPRETACIÓN: Formación de un precipitado negro, presencia de sulfuro de fierro,

proceder al NMP

b) Oxidación

 Inocular 1 mL de cada una de las diluciones 10-3, 10-4 y 10-5 a cada uno de los tubos
conteniendo medio para oxidadores de azufre, dejar u testigo, agregar a cada 50 en
condiciones de esterilidad 50 mg de flor de azufre.
 Incubar a 28°C de 3 a 4 semanas.

INTERPRETACIÓN: Tomar de cada tubo 1 mL del medio y colcar en un tibo de Kahn, agregar
3 gotas de BaCl2 al 5%. La presencia de sulfatos se detecta por la formación de un
precipitado blanco, proceder al NMP

c) Reducción de sulfatos

 Inocular 1 mL de cada una de las últimas 3 diluciones con medio de Starkey, dejar un testigo,
agregar a cada tubo en condiciones de esterilidad un trozo de fierro metálico.
 Incubar a 28°C de 3 a 4 semanas.

INTERPRETACIÓN: observar la formación de sulfuro de fierro alrededor del trozo de fierro

metálico, cuantificar y proceder al NMP.

Tabla . Bacterias Oxidadoras de Azufre

Estación
Diluciones Tubos No. NMP NMP/g
positivos por característico (Valor en
cada dilución tablas)

1 10−2 10−3 10−4 2 1 2 2-1-2 15.0 150

2 10−4 10−5 10−6 0 0 0 0-0-0- <3.0 <3.0x103

3 10−2 10−3 10−4 2 3 0 2-3-0 240 280.70

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 4 10−2 10−3 10−4 3 3 2 3-3-2 23 28.05
5 10−2 10−3 10−4 3 2 0 3-2-0 27 36
1 10−2 10−3 10−4 2 2 0 2-2-0 290 475.40
2 10−3 10−4 10−5 2 1 1 2-1-1- 240 315.78
3 10−2 10−3 10−4 2 3 1 2-3-1 1100 1375
4 10−1 10−2 10−3 1 3 1 1-3-1 35 41.17
5 10−4 10−5 10−6 3 3 3 3-3-3 9.1 10.96

Log NMP/g Vs Estación

7

5
Log NMP/g

Estación

FIGURA. Log (NMP/g) de Bacterias Oxidadoras que participan en el ciclo de azufre por estación.

DISCUSIÓN

Las muestras de sedimento se analizaron desde un enfoque de la cantidad de bacterias reductoras de

sulfato, bacterias mineralizadoras y oxidadoras del azufre, sin embargo al término de la incubación se
encontró con la contaminación de las muestras reductoras y mineralizadoras de sulfato, orillándonos
a descartar éstas últimas y continuar solamente con el análisis de las bacterias oxidadoras; de éstos
últimos obtuvimos resultados satisfactorios, observando que existió una gran presencia de bacterias
oxidadoras de azufre en los sitios de muestreo, estos organismos son Quimiótrofos, al tener poco O 2,
usan el H2S como fuente de energía, produciendo azufre elemental y agua; indicando que en las
estaciones se puede encontrar acumulación de H2S.

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La importancia de esta práctica radica en que existen compuestos azufrados que impactan
negativamente al ambiente, y conocer cada etapa del ciclo del azufre, las condiciones y las bacterias
específicas que la efectúan, nos permite emplear técnicas de aislamiento y utilizar dichas bacterias
para oxidar azufre en compuestos inorgánicos, por ejemplo. Las plantas incorporan azufre en su
estado más oxidado, en forma de sulfatos, por lo tanto, una gran cantidad de microorganismos
reductores, significa un factor limitante para el desarrollo de la plantas. Una considerable presencia de
microorganismos reductores de azufre en el agua, favorece la precipitación de metales tóxicos. Y la
deficiencia de azufre en suelos también es un problema, reflejado en la baja productividad, mayor
susceptibilidad a plagas y menor resistencia a cambios bruscos de la intemperie, por lo que es
importante determinar los niveles de azufre de suelos agrícolas y proponer soluciones a los
desequilibrios de este elemento. Finalmente, los conocimientos que se adquieren del estudio del ciclo
del azufre enfocado a la microbiología tienen una extensa aplicación en el aspecto ambiental.

CONCLUSIONES

No se logró demostrar de forma experimental la presencia de Bacterias Mineralizadoras Anaerobias

del Azufre ni de las Bacterias Reductoras de Sulfato.

Se logró demostrar la presencia de las Bacterias Oxidadoras de Azufre y en las muestras de sedimento
que provienen de los sitios de muestreo, las cuales participan en el ciclo del azufre.

Con los valores obtenidos de NMP/g en cada estación, nos ayuda a entender cómo es que el Ciclo del
Azufre se lleva a cabo en cada estación, es decir, que procesos se ven favorecidos y en cuales ocurre
lo contrario.

Un factor importante que determinara que microorganismo se ve favorecido para su desarrollo, será si
el lugar brinda condiciones oxicas u anóxicas.

La importancia de esta práctica radica en que existen compuestos azufrados que impactan
negativamente al ambiente, y conocer cada etapa del ciclo del azufre, las condiciones y las bacterias
específicas que la efectúan, nos permite emplear técnicas de aislamiento y utilizar dichas bacterias
para oxidar azufre en compuestos inorgánicos, por ejemplo. Las plantas incorporan azufre en su
estado más oxidado, en forma de sulfatos, por lo tanto, una gran cantidad de microorganismos
reductores, significa un factor limitante para el desarrollo de la plantas. Una considerable presencia de
microorganismos reductores de azufre en el agua, favorece la precipitación de metales tóxicos. Y la
deficiencia de azufre en suelos también es un problema, reflejado en la baja productividad, mayor
susceptibilidad a plagas y menor resistencia a cambios bruscos de la intemperie, por lo que es
importante determinar los niveles de azufre de suelos agrícolas y proponer soluciones a los
desequilibrios de este elemento. Finalmente, los conocimientos que se adquieren del estudio del ciclo
del azufre enfocado a la microbiología tienen una extensa aplicación en el aspecto ambiental.

CUESTIONARIO.

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 1. Explique cómo participan las bacterias del azufre en la corrosión de metales.

Las bacterias reductoras de sulfato son las más representativas en cuanto se refiere a la
corrosión metálica. Tres géneros anaerobios causan la mayor parte de la corrosión,
Desulfovibrio, Desulfuromonas y Desulfotomaculum, las bacterias reductoras de sulfatos
sobreviven en hábitats muy extremos. Forzosamente deben estar presentes los sulfatos o
azufre para su crecimiento, toleran temperaturas altas hasta 80°C y un pH entre 8 y 9.
El mecanismo de la corrosión incluye la despolarización catódica, en donde se remueve al
hidrógeno de los sitios catódicos mediante enzimas capaces de utilizar el hidrógeno.

2. Mencionar las diferencias entre la reducción asimilatoria y la reducción desasimilatoria

de sulfatos. (haga una tabla comparativa)

Reducción asimilatoria Reducción desasimilatoria

 Reducción de sulfato para  sulfato como aceptor externo

utilizarlo en la biosíntesis de
aminoácidos y de proteínas.
 Muchos organismos pueden
llevar a cabo la reducción
asimilatoria de sulfato.
 Produce pequeñas
concentraciones de sulfuro de
hidrógeno, que se incorpora
inmediatamente a los
compuestos orgánicos
 Muchos organismos y plantas
pueden utilizar los iones
sulfato como fuente del azufre.
de electrones para formar
sulfuros.
 Géneros: Desulfovibrio,
Desulfotomaculum,
Desulfobacter, Desulfobulbus,
Desulfococcus, Desulfonema,
Desulfosarcina, Bacillus,
pseudomonas,
Saccharomyces.
 Se puede dar en un amplio
margen de pH, presión,
temperatura y salinidad.
 El hidrógeno y sulfatos sirven
como fuente de energía para
el crecimiento.
 Los donadores de más
comunes son el piruvato,
lactato y el hidrógeno
molecular.
 Es inhibida por la presencia de
iones oxígeno, nitrato o
férricos.
 Activan el sulfato a 5’-
fosfosulfato de adenosina

3. ¿Bajo qué condiciones se produce la reducción desasimilatoria de sulfatos?

En condiciones anóxicas.
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 4. ¿Qué importancia ecológica tienen (es decir, cuál es su función en el ambiente) a las
bacterias verdes y púrpuras del azufre?

Estas bacterias pueden llevar a cabo la fotosíntesis en condiciones anóxicas, produciendo

sulfatos, también pueden actuar como reguladores de los factores físico-químicos como la
tempera del agua, oxígeno disuelto y pH.

BIBLIOGRAFIA

 DIVERSIDAD MICROBIANA. Consultado de la página:

http://www.diversidadmicrobiana.com/index.php?option=com_content&view=article&id=38&Ite
mid=53
 MICROBIOLOGIA. Consultado de la página:
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/03forma.htm#_Toc53149798

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