UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE INGENIERÍA

AGRÓNOMA

PRÁCTICA Nº2: EXTRACCIÓN DE ADN

AUTORES:
ARICA GONZALES LUIS MANUEL
HERVIAS CORDOVA FABIO RICHARD
SALVADOR OSORIO JEANPIER JOSEPTH
VALVERDE MENDOZA CARLOS YANDIR

CURSO:
BIOLOGÍA GENERAL

CICLO:
III

ASESOR:
BLGA. ACUI. CARMEN YZÁSIGA BARRERA

NUEVO CHIMBOTE – PERÚ

2018
 I. INTRODUCCIÓN

En la práctica se podrá realizar la extracción del ADN a partir de un hígado de un pollo,

para lo consiguiente se dará unos conceptos de lo que es el ADN.

En realidad, el ADN está formado por dos polinucleótidos enormes, cada uno de ellos con
forma de hélice, es decir, que se trata de una doble hélice. El hecho de que la molécula de
ADN sea doble resulta esencial para obtener sus funciones replicativas y transcripcionales
y además para comprender sus propiedades básicas, la “desnaturalización” y la
“renaturalización”.

Cada nucleótido es un compuesto orgánico formado a su vez por tres componentes: un

radical del ácido fosfórico o fosfato, un azúcar y una base nitrogenada. Para el ADN un
azúcar es la desoxirribosa y las bases nitrogenadas usualmente son solo cuatro: adenina (A),
guanina (G), citosina (C) y timina (T).

Las dos primeras bases, que son mayores y están formadas por dos ciclos, se llaman bases
puricas o purinas, mientras que las dos últimas, más pequeñas, se denominan bases
pirimidicas o pirimidinas.
II. OBJETIVOS

 Extraer el ADN a partir de una muestra biológica.

 Comprobar la existencia de ADN mediante espectrofotometría.

III. MATERIALES Y MÉTODOS

A) MATERIALES:
 Espectrofotómetro de UV.  Cloruro de sodio 2M.
 Mortero con pilón.  Agua destilada.
 Vasos de precipitación.  10 gr de hígado de pollo fresco.
 Varillas de agitación.  2 gr. De detergente común.
 Embudos de vidrio.  Alcohol etílico de 96%.
 Pipetas.  Gasas.
 Solución salina fisiológica.
B) MÉTODOS.

Se pesó 10 gr de hígado de pollo, se machacó en un mortero y se echó 15 ml de solución

salina fisiológica. Se filtró la mezcla usando 3 capas de gasa, luego se le agregó 10 ml de
cloruro de sodio y 2 gr de detergente. Se agitó el contenido hasta que se disolvió
completamente el detergente.

Se tomó una muestra de las moléculas de ADN obtenidas, se le agregó etanol absoluto y se
leyó en el espectrofotómetro de UV a 260nm obteniendo 0.503.

Luego la misma solución se hizo a 280nm obteniendo 0.349

Se considera ADN de buena calidad si la proporción 260/280 está entre 1,8 y 2,0.

Entonces haciendo la proporción 0.503/0.349 = 1,44

En este caso nuestra muestra de ADN no es de buena calidad para poder seguir haciendo
más pruebas.
V. DISCUSIÓN

Según Curtis (2000), todas las células son básicamente muy semejantes. Todas tienen ADN
como material genético, desempeñan los mismos tipos de reacciones químicas, y están
rodeadas por una membrana celular externa que se ajusta al mismo plan general, tanto en
las células procariotas como en las eucariotas. La membrana celular, como todas las
membranas biológicas, consiste en una delgada capa de fosfolípidos y proteínas, tiene entre
7 y 9 nm. En el laboratorio se comprobó la existencia del ADN en una muestra de hígado
de pollo mediante espectrofotometría.

VI. CONCLUSIONES
 Se reconoció la molécula de ADN en una muestra de hígado de pollo.
 Se comprobó la existencia del ADN mediante el espectrofotómetro.

VII. BIBLIOGRAFÍA
 Curtis, Helena.2000. Biología sexta edición. Edit. Peruanamericana. 1526 pág.
 Solari, A. 2007. Genética humana: Fundamentos y aplicaciones en medicina. Edit.
Panamericana. 557 pág.

VIII. CUESTIONARIO
 ¿Qué otras muestras biológicas podrían utilizarse para extraer el ADN?
- Muestra de saliva.
- Huella digital.
- Muestra de sangre.
- Muestra de cabello.
 ¿Cuál es el modelo estructural del ADN?
- El modelo estructural del ADN es el siguiente:

 ¿El ADN que se extrae siguiendo el procedimiento planteado es puro? ¿Por qué?
- No, porque estamos contaminando al ADN en distintos pasos del experimento y
este no llega a su pureza total al momento de ser revelado.
 ¿Qué otros colorantes podrían ser usados para visualizar el ADN?
- Hematoxilina
- Bromuro de etidio
- SYBR Gold
- SYBR Green
 Explique la aplicación de la característica estudiada en la técnica aplicada.

- Técnica estudiada: Espectrofotometría.

La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en

las investigaciones químicas y bioquímicas. El espectrofotómetro es un
instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una
solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia.

- Aplicaciones:

 Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún compuesto

utilizando las fórmulas ya mencionadas.
 Para la determinación de estructuras moleculares.
 La identificación de unidades estructurales especificas ya que estas tienen
distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomerías).
 Determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base.