Prospect. Vol. 15, No. 1, Enero - Junio 2017, págs.

93-99

Uso de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión

en la decoloración del agua residual de una empresa textil

Using the microalgae Chlorella sp. live suspended in

decoloration wastewater from a textile factory
Víctor A. Vacca Jimeno1, Edgardo R. Angulo Mercado2, Diana M. Puentes Ballesteros3,
José G. Torres Yépez4, Martin E. Plaza Vega5
1
Mg. Ingeniería Ambiental. Universidad del Atlántico, Grupo de Investigación en Biotecnología de Microalgas, Fisicoquímica Aplicada y
Estudios Ambientales, Barranquilla, Colombia.
2
M.Sc. Universidad del Atlántico, Grupo de Investigación en Biotecnología de Microalgas, Fisicoquímica Aplicada y
Estudios Ambientales, Barranquilla, Colombia.
3
Químico, Hada International, Barranquilla, Colombia.
4
Químico, ACI Proyectos, Barranquilla, Colombia.
5
Ingeniero de Materiales, Universidad Autónoma del Caribe, Grupo Interdisciplinario e Interinstitucional de Ingeniería
Mecánica con Énfasis en la Preservación del Medio Ambiente, Barranquilla, Colombia
Email: vaccavictor@mail.uniatlantico.edu.co.

Recibido 08/09/2016 Cite this article as: V. Vacca, E. Angulo, D. Puentes, J. Torres, M. Plaza “Using the microalgae
Aceptado 10/11/2016 Chlorella sp. live suspended in decoloration wastewater from a textile factory”, Prospect,
Vol 15, N° 1, 93-99, 2017.

RESUMEN
Esta investigación evaluó la capacidad de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión para remover el color del
efluente de una empresa textil en el departamento del Atlántico (Colombia). La metodología empleada consistió
inicialmente en cultivar la microalga en un biorreactor de 2,5 L de capacidad efectiva, empleando un fertilizante
comercial como medio de cultivo bajo aireación continua a la temperatura del laboratorio, con fotoperiodos de
luz/oscuridad de 12 horas. Luego el agua residual se sometió a tratamiento usando diferentes concentraciones de
microalga equivalentes a 0,10, 0,20 y 0,30 en absorbancia con sus respectivos controles. Los resultados muestran
que el bioensayo de 0,30 en absorbancia removió el 97,2% del colorante presente y disminuyó en un 94,6% la DQO
y 95,4% la DBO5, entre otros parámetros de caracterización antes y después del tratamiento, mostrando la mejor
bioremoción en este estudio. Estos resultados permiten sugerir que el tratamiento biológico con la microalga
Chlorella sp. del agua residual es un método eficiente.

Palabras clave: Microalga Chlorella sp; Colorante; Biodegradación; Absorbancia; Bioensayo.

ABSTRACT
This research evaluated the ability of the life suspended microalgae Chlorella sp. to remove the color from
the effluent of a textile company in the department of Atlantic (Colombia). The microalgae was cultured in
a bioreactor of 2,5 L of effective capacity, using a commercial fertilizer as growth medium under continued
aeration at laboratory temperature, in light/dark photoperiods of 12 hours each. Then the wastewater was
treated using different concentrations of microalgae equivalent to 0,10, 0,20 and 0,30 absorbance units, with
their respective controls. The results show that at the absorbance 0,30 bio-test, it was removed 97,2% of
the dye originally present, COD decreased by 94,6% and BOD5 by 95,4%. These results suggest that the
biological treatment with microalgae Chlorella sp. in wastewater is an efficient method.

Key words: Microalgae Chlorella sp.; Dye; Biodegradation; Absorbance; Bio-test.

Doi: http://dx.doi.org/10.15665/rp.v15i1.829

93
Uso de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión en la decoloración del agua residual de una empresa textil
1. INTRODUCCIÓN
Los problemas ambientales creados por la industria
textil han recibido mayor atención en las últimas
décadas porque es una de las industrias que más genera
efluentes contaminados [1]. Las aguas residuales
resultantes de estos procesos tienen impactos negativos
en términos del carbono orgánico total (COT), la
demanda bioquímica de oxígeno (DBO), la demanda
química de oxígeno (DQO), sólidos en suspensión,
salinidad, color, una amplia gama de pH (5-12) y la
persistencia de compuestos orgánicos, tales como los
colorantes azoicos [2, 3, 4, 5].
Hasta la fecha se conocen más de 100.000 tipos de
colorantes con una producción anual mayor a los 7 x 105
ton.año-1 [6]. El consumo total de colorante en la industria
textil en todo el mundo es aproximadamente de 10.000
ton.año-1, los datos exactos sobre la cantidad de colorantes
descargados a los cuerpos de agua se desconocen, pero se
estima que pueden ser alrededor de 100 ton.año-1 [7]. En
la coloración de fibras celulosas los tintes tina (índigo) y
tintes sulfurosos representan una gran parte del mercado
mundial (alrededor del 31%); el índigo ocupa un 7%,
representando cerca de las 120.000 ton de tintes tina
usadas anualmente. En el año 2002, se produjeron 17.000
toneladas de índigo sintético [8].
Las principales preocupaciones de los efectos adversos
de los colorantes azoicos en el medio ambiente, incluyen
su acción inhibitoria de la fotosíntesis acuática, la
capacidad de agotar el oxígeno disuelto y la toxicidad
para la flora, la fauna y los seres humanos [9]. Estos
compuestos aromáticos complejos con diversidad
estructural se han mejorado para proporcionar un alto
grado de estabilidad química, estabilidad biológica,
fotocatalítica y resistencia al paso del tiempo, la
exposición a la luz solar, los microorganismos, agua y
jabón, de manera que sean cada vez más resistentes a la
degradación [2, 10].
Los tratamientos biológicos han sido reconocidos como
métodos efectivos para la decoloración y degradación
de colorantes en aguas residuales industriales
altamente contaminadas, adicionalmente se consideran
muy efectivos y amigables con el medio ambiente, de
baja producción de lodos y competitivos en cuanto a
los costos requeridos [11]. Actualmente son utilizados
sistemas aerobios y anaerobios, con hongos, bacterias
y microalgas para la decoloración de aguas residuales.
Durante estos tratamientos biológicos, los contaminantes
pueden ser metabolizados por los microorganismos
por reacciones bioquímicas redox, aunque también
se pueden establecer reacciones de hidroxilación,
hidrólisis, deshalogenación y desalquilación [12].
Las microalgas son ampliamente utilizadas en el
tratamiento de diversos tipos de efluentes (doméstico,
agrícola, industrial, etc.) ya que estos desechos son un
94
medio adecuado que favorece la proliferación rápida,
gracias a su tolerancia a elevadas concentraciones de
nutrientes (N y P), y materia orgánica. Las microalgas
también son empleadas para la eliminación de
sustancias tóxicas, como pesticidas, herbicidas, metales
pesados, etc., debido a su resistencia y capacidad de
acumular importantes concentraciones de compuestos
tóxicos, sin afectar su actividad biológica.
A nivel industrial se han patentado diversos procesos
biotecnológicos para el tratamiento de efluentes
industriales, procedentes de textileras, o bien utilizados
para la recuperación de metales preciosos (oro y plata),
mediante el empleo de los sistemas enzimáticos de las
microalgas [13].
En este estudio se evaluó la capacidad de la microalga
Chlorella sp., en la eliminación del colorante índigo
presente en el agua residual de una industria textil.
2. EXPERIMENTACIÓN
2.1 Obtención de biomasa y condiciones de cultivo
La microalga utilizada en este estudio fue suministrada
por el Laboratorio de Microorganismos Fotosintéticos
de la Universidad del Zulia, Maracaibo (Venezuela).
Se cultivó en recipientes de vidrio de 3,0 L con un
volumen efectivo de 2,5 L, empleando agua potable
previamente esterilizada y, como medio de cultivo
el fertilizante comercial “Nutrifoliar”, el cual
suministra los macronutrientes K, Mg, S, P, Cl y los
micronutrientes Fe, Cu, Zn, Mn, B y Mo, necesarios
para un normal crecimiento celular. Los bioreactores
se mantuvieron bajo iluminación superficial mediante
tubos fluorescentes de 125 µEm-2s-1 (Philips TL 65W
25, luz blanca) sometidos a un ciclo de 12h luz/12h
oscuridad y con aireación permanente con el objeto
de proporcionarles suficiente oxígeno disuelto. El
crecimiento de la microalga se evaluó midiendo la
absorbancia de la clorofila a una longitud de onda
(λ) igual a 647 nm. La temperatura promedio de los
bioensayos fue de 25ºC.
Diariamente se tomó una alícuota del cultivo y se realizó
la medición del crecimiento con un espectrofotómetro
UV-vis (Genesis 20 Thermo Spectronic), en donde
se midió la absorbancia que es proporcional a la
concentración de las microalgas en el cultivo.
2.2 Muestra del agua residual
La muestra de agua residual fue colectada en un
punto localizado antes del vertimiento final de una
empresa textil ubicada en el municipio de Juan de
Acosta, departamento del Atlántico, dedicada al teñido
de prendas de vestir tipo jean. Se tomó una muestra
representativa y se guardó en un envase plástico
para la realización de los bioensayos y las respectivas
caracterizaciones sin ningún tipo de tratamiento
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preliminar. La muestra de agua residual, se caracterizó porcentaje de colorante removido, reemplazando los
antes y después del tratamiento con microalga Chlorella valores correspondientes en la ecuación 1 [14, 15].
sp., determinando los parámetros DBO5, DQO,
nitrógeno total, fosfatos y concentración del colorante.
(1)
2.3 Colorante

El colorante precursor del utilizado en esta
investigación es el color índigo (CI Vat Blue I) o índigo
tina, con fórmula química C12H10O2N2, (figura 1), que
es un polvo cristalino azul oscuro. La estructura del
color producido es un sistema conjugado o grupo
H-cromóforos que consiste de un enlace doble entre
carbonos sustituidos por dos donadores NH y dos
aceptores CO. Su principal aplicación es en la industria
de los blue jeans y otros productos del Denim azul [8].
El colorante índigo fue suministrado por la empresa
textil cuyo nombre se mantendrá en reserva.
Figura 1. Estructura química del colorante índigo.
Figure 1. Chemical structure of indigo dye.
2.4 Curva de calibración del colorante
Para la elaboración de la curva de calibración, se preparó
por duplicado soluciones del colorante a diferentes
concentraciones (1, 10 y 100 mg.dm-3), a cada una de
ellas se le midió la absorbancia a la longitud de onda (λ)
de máxima absorción, previamente determinada por
un barrido completo en el espectrofotómetro UV-vis.
Donde Ao es la absorbancia inicial del medio y Ae es la
absorbancia del medio decolorizado.
Todos los bioensayos se realizaron por triplicado y se
trabajaron a las mismas condiciones de laboratorio.
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1 Curva de crecimiento
La curva de crecimiento de la microalga Chlorella sp.
se muestra en la figura 2. Teniendo en cuenta las fases
de una curva típica de crecimiento no se observa la
fase de latencia, esto es posible porque la microalga
que se tomó para el estudio se encontraba en fase de
crecimiento exponencial y al colocarse en un medio
de cultivo similar en presencia de nutrientes como el
nitrógeno y el carbono que influyen en la composición
bioquímica, permitió que su adaptación fuera más fácil.
Posteriormente entre los días 13, 14 y 15 se presenta la
fase estacionaria, alcanzando su máximo crecimiento el
día 15. En esta fase se muestra un desarrollo pausado
atribuido al agotamiento de nutrientes por el aumento
de la población algal. Finalmente el crecimiento
disminuye apreciablemente entre los días 17 y 18, lo
cual se conoce como la fase de muerte.
Figura 2. Curva de crecimiento de la microalga Chlorella sp.
Figure 2. Growht curve of the microalgae Chlorella sp.

2.5 Bioensayos de decoloración del agua residual con

la microalga Chlorella sp.

Para los bioensayos de crecimiento biológico de

la microalga viva y en suspensión se trabajó con
el cultivo “stock” adaptado de la Chlorella sp. Bajo
el sistema de estudio en “batch” se colocaron en
diferentes frascos de vidrio previamente esterilizados
250 cm3 de agua residual y biomasa algal a 0,10, 0,20
y 0,30 de absorbancia medidos a una λ igual a 647
nm, en presencia de nutrientes a la temperatura del
laboratorio de 25 ± 1ºC, con agitación constante a
3.2 Curva de calibración del colorante
través de bombas de aire y fotoperiodos de luz día/
noche de 12 h. Simultáneamente se realizó un control A una solución patrón del colorante se le realizó un
de crecimiento con un cultivo de Chlorella sp. en un barrido entre 400 y 700 nm alcanzando su máxima
medio estéril a los mismos valores de absorbancia de absorción a los 493 nm, tomándose este valor para
los bioensayos. El seguimiento de la evolución del medir la absorbancia del colorante en los bioensayos
proceso de bioremoción consistió en tomar alícuotas posteriores. La figura 3 muestra el ajuste de los
de los biorreactores, luego se centrifugaron a 3.000 rpm datos experimentales a una línea recta. El factor de
por 10 segundos. Al líquido sobrenadante se le midió correlación (R2) de 1, muestra la relación directa entre la
su absorbancia por espectrofotometría y se calculó el concentración del colorante y su absorbancia.

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Uso de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión en la decoloración del agua residual de una empresa textil

Figura 3. Curva de calibración del colorante. Figura 4. Curvas de crecimiento de la microalga Chlorella
Figure 3. Colorant calibration curve. sp. en el agua residual y sus respectivos controles.
Figure 4. Growth curves of the microalgae Chlorella sp.
in wastewater and their respective controls.

3.3 Análisis del crecimiento de la microalga Chlorella

sp. en el agua residual coloreada
y 2,4 mgdm-3, para cada una de las absorbancias
La figura 4 muestra las diferentes curvas de crecimiento
estudiadas. El bioensayo con absorbancia inicial de
de la microalga Chlorella sp. a diferentes absorbancias
0,3 logró remover el mayor porcentaje de colorante del
iniciales y sus respectivos controles. Al comparar las
agua residual correspondiente al 97,2%. Sin embargo,
curvas de crecimiento se observa una notoria inhibición
las absorbancias de 0,1 y 0,2 lograron remover el 90,0 y
de la Chlorella sp. en el agua residual debido a los
93,1% del colorante respectivamente.
niveles de toxicidad y contaminación a los cuales se
ven sometidas. Mientras los bioensayos de 0,1, 0,2 y 0,3 A pesar que la presencia del colorante inhibe el
de absorbancia inicial llegan a alcanzar valores de 0,84, crecimiento normal de la microalga, se observa en los
1,16 y 1,54 de absorbancia máxima respectivamente, bioreactores la disminución paulatina del color.
para los mismos días las lecturas de los controles
fueron de 1,73, 2,03 y 2,37. Estos resultados muestran Figura 5. Variación de la concentración del colorante en
la importancia del efecto de la luz en la productividad el agua residual en presencia de la microalga Chlorella
del cultivo. sp. D1, D2 y D3 representan los bioensayos a 0,1, 0,2
y 0,3 de absorbancia inicial y, Cc es el bioensayo de
Los colorantes disueltos en el agua actúan como control.
compuestos xenobióticos que interfieren en el
Figure 5. Variation of the dye concentration in the waste
metabolismo de la microalga, reduciendo notablemente
water in the presence of the microalgae Chlorella sp. D1,
la penetración de la luz al medio y en consecuencia,
D2 and D3 represent bio-test at 0.1, 0.2 and 0.3 of initial
se disminuye la actividad fotosintética y la velocidad
absorbance and Cc is the control bio-test.
de crecimiento [16]. Además, se ha reportado que esta
inhibición puede ser causada por la interacción de los
colorantes con las paredes de la célula de la Chlorella sp.
interfiriendo en su actividad enzimática y celular [17].

3.4 Remoción del color en el agua residual por la

microalga Chlorella sp.

La figura 5 muestra los resultados de los bioensayos

para remover el color del agua residual, comparando
la variación de la concentración del colorante en el
tiempo. De la figura se observa que en los primeros días
de los bioensayos la microalga en su fase de latencia
elimina gran parte del color, es así como al tercer día se
había removido el 19,5, 35,6 y 48,3% de la concentración
inicial de colorante (87 mgdm-3), para las absorbancias
de 0,1, 0,2 y 0,3 respectivamente. A partir del día 18
no se registraron modificaciones en la concentración Se sugiere que la degradación del colorante índigo se
de colorante alcanzando valores finales de 8,67, 5,14 debe al proceso oxidativo realizado por la enzima lacasa

96
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[18]. La oxidación implica la transferencia de electrones
hasta obtener isatina que luego por descarboxilación
produce el ácido antranílico como producto estable
final de la oxidación (figura 6). La degradación procede
por vía deshidroíndigo como una reacción intermedia
donde la función de la lacasa consiste en incrementar la
susceptibilidad del colorante hacia el ataque hidrolítico
del agua [8, 18]. Posteriormente es posible realizar la
mineralización del colorante a CO2 y H2O por medio
de la degradación del anillo bencénico obteniendo
intermediarios como benceno dihidrodiol, catecol,
hasta obtener acetaldehído y piruvato entrando al ciclo
de Krebs [19].
Por otro lado, es posible que en los últimos días de
la fase de declinamiento en la microalga Chlorella sp.
se establecieran procesos de remoción mediante la
adsorción y absorción de los colorantes por la pared
celular. La figura 5 en su curva de control muestra que
el colorante no sufre proceso de fotodegradación al
mantenerse constante la absorbancia durante los días
que duró el experimento.

Figura 6. Posible mecanismo de degradación del colorante índigo por la enzima lacasa. Tomado y adaptado de la referencia [18].
Figure 6. Possible mechanism of degradation of indigo dye by laccase enzyme. Taken and adapted from reference [18].

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Uso de la microalga Chlorella sp. viva en suspensión en la decoloración del agua residual de una empresa textil

Tabla 1. Análisis fisicoquímico del agua residual antes y después del tratamiento con Chlorella sp.
Table 1. Physicochemical analysis of wastewater before and after treatment with Chlorella sp.

Absorbancia 0,1 Absorbancia 0,2 Absorbancia 0,3

Parámetro Unidad Valor
inicial Valor % Valor % Valor %
final Remoción final Remoción final Remoción
DBO5 mg O2 dm-3 425 62,8 85,2 37,6 91,1 19,6 95,4
DQO mg O2 dm-3 864 103,7 88,0 74,7 91,3 46,6 94,6
NKT mgdm-3 0,94 0,017 98,2 0,011 98,8 0,003 99,8
Fosfatos mgdm-3 74,0 25,4 65,6 20,4 72,4 16,0 78,3

3.5 Evaluación de los parámetros DBO, DQO5,
nitrógeno total y fosfatos
En la tabla 1, se resumen los datos obtenidos en la
evaluación de algunos parámetros fisicoquímicos
del agua residual de la empresa textil. Los resultados
muestran una disminución de los parámetros
analizados a todas las absorbancias estudiadas, pero
el comportamiento indica que entre mayor es la
concentración de Chlorella sp. en el medio, mayor es el
porcentaje de remoción.
Los tratamientos biológicos son reconocidos para el
tratamiento de efluentes por su capacidad de reducir
DBO y DQO [20, 21], muestra de esto son los buenos
resultados obtenidos en este estudio, alcanzado valores
del 95,4% y 94,6% para la DBO5 y DQO respectivamente
para los experimentos con absorbancia 0,3. En el agua
residual se encuentran presentes nutrientes que bien
pueden estar en forma sencilla como CO2, nitratos, etc.,
o como estructuras más complejas como los colorantes,
que al ser degradados forman compuestos simples que
suministran carbono y nitrógeno fundamentales para
el crecimiento de la microalga, esto indica que la misma
carga orgánica y mineral presente en el agua residual
se convierte en fuente de alimento para las microalgas.
Los porcentajes de remoción de nitrógeno y fosfatos por
la microalga en el agua residual fueron significativos,
alcanzando valores superiores al 98% para el nitrógeno
y del 65% para los fosfatos, teniendo en cuenta que
normalmente para la remoción de estos nutrientes es
preciso aplicar tratamientos terciarios.. Esto se debe
a que son nutrientes esenciales en la formación de
biomasa [22], por lo que incorporan el amonio, nitrato
y fósforo por absorción directa [23].
4. CONCLUSIONES
Esta investigación permitió evaluar el uso de la
microalga Chlorella sp. en la eliminación del color del
agua residual de una industria textil. Del análisis de los
resultados se formulan las siguientes conclusiones:
• Debido a las limitaciones del medio, el crecimiento
de la microalga Chlorella sp. en el agua residual
sufrió una inhibición en comparación con los
controles.
• El tratamiento del agua residual con distintas
concentraciones equivalentes de microalga: 0,1,
0,2 y 0,3 de absorbancia, logró eliminar el 90,0, 93,1
y 97,2% del colorante presente respectivamente.
• La evaluación de los parámetros fisicoquímicos
como el DBO, DQO5, NKT y fosfatos, realizados
antes y después del tratamiento biológico,
mostraron una reducción significativa.
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