Sistemas de Inyección

3.- Sistemas de inyección

3.1. Inyecciones convencionales

- On-column
- Inyección mediante split-splitless
- Inyección con temperatura y presión
programables (PTV)

3.2. Válvulas de inyección para muestras gaseosas

 Inyección en columnas empaquetadas y capilares

Sistemas de inyección On-Column

E t inyectores
Estos ny ct r son n muy similares
m ar para columnas
c umna empaquetadas
mpaqu ta a como
c m para
capilares, las diferencia es que para emplear columnas capilares se necesita
de alguna instrumentación adicional.

La columna capilar se protege con una precolumna previa de sílice.

Purga de septum
Regulación de presión/flujo.
 Inyección en columnas capilares

Inyección de la muestra
manual
émbolo automática

Cuerpo
p
(pirex)

aguja (inox)

Mi
Microjeringa
j i d
de 10 µll
 Inyección en columnas capilares

Toma de muestra tipo “sandwich”

‰ Es el tipo de inyección recomendada en
la mayoría inyectores.
‰ Limpiar
mp la jjeringa
g con disolvente limpio.
mp
‰ Eliminar el disolvente y tomar 1.0 µl de
aire.
‰ Tomar varios microlitros de muestra
en el cuerpo de la jeringa, quitar la
jeringa del vial de muestra y eliminar disolvente
muestra hasta que el émbolo se burbujas
encuentre en 2 µl. muestra de
‰ Retraer el émbolo, de esta manera aire
veremos la l muestra
t tomada
t d dentro
d t del d l
cuerpo de la jeringa.
‰ Introducir la aguja dentro del inyector
e inyectar la muestra.
 Inyección en columnas capilares

Inyección On-Column
‰ La muestra líquida se inyecta
Gas Septum
directamente en cabeza de columna.
‰ Evita pérdida de muestra durante la portador
transferencia desde el inyector a la Purga de
P d
columna. Septum
‰ No existe pérdida de muestra (sólo capilares)
durante la vaporización.
vaporización
‰ El inyector debe estar a la misma Tª Inicio
Bloque
o ligeramente superior a la del horno. columna metálico
‰ Permite
P it ell empleo
l ded muestras
t con un
caliente
amplio rango de volatilidad.
‰ Precisión para compuestos termo-
lábiles.
‰ Excelente precisión cuantitativa.
‰ Funciona mejor j con muestras limpias
p
y diluídas.
 Inyectores de columnas capilares

Purga de septum

‰ Es un flujo de gas portador (1-5 ml/min) que pasa

directamente a través de la parte inferior del septum.
‰ Elimina
m la muestra
m residual y el disolvente,, así como
m
las impurezas del septum.
‰ Se controla mediante un restrictor o una válvula de
aguja.
‰ Se
S emplea
l en ttodos
d llos ti
tipos de
d iinyectores
t capilares.
il
 Inyección en columnas capilares

1 1 – La punta de la aguja de la
2 microjeringa se introduce en el inicio de la
columna
l (
(precolumna).
l )
2 – La muestra inyectada se vaporiza
instantáneamente.
3 – El gass portador
p t d arrastra
st ell vapor
p de d la
l
muestra.

3
 Inyección en columnas capilares

Inyección con Temperatura Programable

SPI
‰ Inyección directa, on-column libre de
pérdidas en la inyección. La preconcentración
de los analitos se realiza mediante frío
(cryofocusing), empleando gases como CO2
líquido, N2 líquido o aire.
‰ Diseñado para muestras lábiles o de elevado Gas de
peso molecular y para análisis de trazas. enfriamiento
‰ Elimina la discriminación de compuestos de
alto peso molecular,
molecular descomposición térmica,
térmica Gas
adsorción de la muestra en superficies portador
calientes.
‰ La velocidad
oc a de ca calentamiento
ntam nto va a desde
s
20°C/min a 180°C/min. Siendo la Tinicial 10-20°C
por debajo de Peb del disolvente.
‰ La Tinicial del horno ha de ser la del p
punto de
ebullición del disolvente.
 Inyección en columna capilar split-splitless

Inyección Split-Splitless

“Split” “Splitless”

inserto
Permite que entre sólo una Funciona como si fuera una inyección
partición
ti ió dde lla muestra
t en lal directa.
columna. Deposita la mayoría de la muestra
Se emplea cuando los compuestos inyectada
y en la columna.
están en concentraciones elevadas. Es la técnica de inyección capilar más
conocida.
 Inyección en columnas capilares modo split-splitless

Insertos de inyector
Inserto Técnica Función

Abierto Splitless Poro estrecho permite un

mayor contacto entre la
muestra en forma de vapor y
la entrada de columna,
asegurando así una
preconcentración de la muestra
Fritado Split Fritado de vidrio sinterizado
para divisiones lineales, mezcla
de sustancias, vaporización
instantánea
Empaquetado Split Empaquetado con ChromasorbTM
W-HP para muestra no
volátiles o sucias abierto Con relleno frit

Mayor área superficial reduce la discriminación másica

E i
Existen distintos
di i di
diseños
ñ para modod split
li
 Inyección en columnas capilares modo split-splitless

Splitter
‰ Muestrea una fracción representativa
que no puede medirse con la jeringa. septum
gas portador
‰ Relaciones de split reproducibles.
‰ La muestra se vapor
vaporiza
za en un inserto
nserto 100 ml/min
de vidrio.
‰ La muestra homogénea vaporizada volumen restrictor
llega
g a la zona del split
p (división
( de flujo
j amortiguador purga
en la punta de la columna). columna 99 ml/min
‰ El volumen amortiguador provee de un 1 ml/min

espacio de expansión para disminuir los

cambios de viscosidad. (purga + columna)
‰ La discriminación másica puede ser un S.R. = flujo
columna
problema en la reproducibilidad.
La relación de split se determina
Discriminación másica: menor respuesta
a los compuestos de elevado peso según sea la complejidad y la
molecular-vaporización
ó no uniforme. concentración
ó de la muestra.
 Inyección en columnas capilares modo split-splitless

Guía de inyección en modo split

‰ La temperatura del inyector debe estar,
estar al menos,
menos 20 20°C C por
encima del componente con mayor punto de ebullición para
obtener una vapor
vaporización
zac ón ef
eficiente
c ente y reproduc
reproducible.
ble.
‰ Emplear una velocidad de inyección alta, evitando que la
aguja se precaliente. Sacar la aguja inmediatamente se haya
inyectado.
d Para obtener inyecciones reproducibles d l se
aconsejan los inyectores automáticos.
‰ El volumen de inyección debe de ser 1 µl o menor.
menor
‰ Con temperatura programada, la temperatura del horno de
m debe de estar p
columna por encima
m del p punto de ebullición del
disolvente. La rampa debe de comenzar inmediatamente
después de la inyección.
‰ Asegurarse ded que hay
h purga de d septum y es ded 1-5
1 5 ml/min.
l/
 Inyección en columnas capilares modo split-splitless

Guía de inyección en modo splitless

‰ Cambiar a modo splitless, cambiar el inserto.
‰ Poner la temperatura del inyector al componente con mayor punto
de ebullición.
‰ Inyectar la muestra lentamente usando la técnica sandwich.
sandwich
‰ Precalentar la aguja en el inyector 2-3 s. Emplear una velocidad de
inyección de 1.0 µl/s. Dejar la jeringa en el puerto de inyección varios
segundos para asegurarse de una completa vaporización.
vaporización
‰ Empezar con una temperatura de horno de columna 20°C por debajo
del punto de ebullición del disolvente, mantener durante 1 min,
comenzar lla rampa a 30°C/min
30°C/ i hasta
h t 40-60°C
40 60°C por encima
i del
d l punto
t de
d
ebullición del disolvente, continuando el programa según requiera la
muestra.
‰ Dejar 0.5-1.0 minuto de tiempo de muestreo (split cerrado). Luego
el inyector pasa a modo split para limpiarse. El flujo de venteo debe de
ser al menos de 50ml/min.
‰ Asegurarse de que existe purga de septum y que es de 1-5 ml/min.
 Inyección en columnas capilares modo split-splitless

Tiempo
p de muestreo splitless
p

Para optimizar el tiempo con la válvula de split cerrada:

ƒ Primero realizar un cromatograma sin abrir el split.

ƒ Fijarse en el perfil de la cola del disolvente y el perfil
del primer pico.
ƒ Programar la apertura del split a un tiempo entre el
disolvente y el primer pico.
ƒ Si el área de pico decrece, incrementar el tiempo de
espera.
ƒ Si el área no cambia o incrementa, disminuir el tiempo de
espera hasta que el pico decrezca.
decrezca
 Inyección en columna capilar con PTV

jeringa

i
inserto purga septum

gas portador
sistema aire
calefactor refrigerante
f g

empaquetamiento

columna

Se puede emplear en modo split o splitless. Tiene la posibilidad de trabajar de

forma isobárica e isotérmica, o bien, emplear rampas de presión y de temperatura.

Se puede enriquecer la muestra dentro del inyector, introduciendo grandes

volúmenes
lú d
de muestra.
 Sistemas de inyección para muestras gaseosas

Válvulas de muestras gaseosas

‰ Son
S válvulas
ál l ded seis
i vías,
í semejantes
j a llas empleadas
l d en
HPLC.
‰ Operación manual o automática.

loop loop
p
gas muestra
gas muestra portador
portador

muestra muestra
columna columna

Posición de carga: la muestra Posición de inyección: la muestra se

llena el loop con una cantidad introduce desde el loop a la
conocida. columna por el gas portador.