INFORME DE LABORATORIO

1.- ENZIMAS

2.- OBJETIVOS

2.1.- OBJETIVO GENERAL

Analizar la acción enzimática en las diferentes soluciones.

2.2.- OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Observar los cambios producidos en la acción enzimática.

Comprobar si los factores tales como temperatura, concentración de sustrato afecta en la acción
enzimática.

Identificar en las soluciones las características producidas por los reactivos.

3.- RESUMEN

Una enzima es una proteína que actúa como catalizador biológico, llevando a cabo reacciones
bioquímicas a muy altas velocidades, no se consume durante la reacción y en general presenta
un elevado grado de especificidad. (Badui ,2006)

Están compuestas por pequeños bloques conocidos como aminoácidos, cuyo peso molecular
abarca desde 75 hasta 200.Por lo tanto, la mayoría de enzimas simples están constituidas por
100 a 400 residuos de aminoácidos. (Bernal, 1993)

En la siguiente práctica del laboratorio tiene como fin Analizar la acción enzimática en las
diferentes soluciones. Así como también Observar los cambios producidos en la acción
enzimática, Comprobar si los factores tales como temperatura, concentración de sustrato afecta
en la acción enzimática e Identificar en las soluciones las características producidas por los
reactivos de ahí su importancia de la acción enzimática se demostró que la glucosa es un azúcar
capaz de reducir al cobre de reactivo de Benedict, esto se detecta por un cambio de coloración.

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En fundamento con lo anterior se obtiene un resultado positivo ya que el aspecto final del tubo
de ensayo, con la ayuda de calor a tal punto de ebullición, presentaba un color precipitado rojo
ladrillo (oxido cuproso) lo que indica que la glucosa redujo al cobre de Reactivo de Fehling.

(Nelson & Cox, 2008).

En el proceso de la práctica no se observó ningún cambio pues el color siguió el mismo a pesar
de la adición del lugol. Con fundamento a lo anterior se puede analizar que la reacción no se
desarrolló por el calentamiento que tuvo el tubo de ensayo caso contrario ocurrió con el reactivo
de Fehling se dio de mejor manera ya que el aspecto final fue de un amarillo anaranjado lo que
significa que la reacción se dio de manera positiva con una concentración media.

Concluyendo que en el tubo número 2 se observó color precipitado rojo ladrillo (oxido
cuproso). En el tubo número 7 el color inicial crema se mantuvo y en el tubo número 8 en los
primeros 10 minutos su color blanco inicial se conservó, con las 10 gotas del reactivo y el punto
de ebullición este se tornó de un color blanco amarillento con un aspecto más denso.

Se observó como la temperatura y la concentración de sustrato afecta en la acción enzimática, y

los cambios de color y espesor en las soluciones utilizadas.

Las características que se observó en las soluciones causadas por los reactivos fueron en el tubo
2 se tornó un rojo ladrillo; en el tubo 7 no se notó cambios luego de la adición de Lugol, ni al
someter al calor el tubo de ensayo; en el tubo 8 en los 10 primeros minutos luego de enfriar el
tubo, la solución se separó dejando la parte más densa en la parte inferior y la más liquida en la
parte superior, al añadir el reactivo este reaccionó con la solución del tubo y eso si visualizo que
se tornó un color amarillo dando como resultado una práctica con resultados deseados.

4.- RESULTADOS

Tabla N°1: Resultados de Identificación de Enzimas

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Reacción Aspecto Tiempo Aspecto Final Observaciones
Inicial
Tubo número 2 Presentaba un Hasta llegar al Presentaba un Ese rojo ladrillo (oxido
2 ml de solución de color azul punto de color cuproso) no indica que la
glucosa claro muy ebullición precipitado rojo reducción tuvo lugar.
20 gotas de Bénedict (o transparente ladrillo (oxido Glucosa = Positivo
Fehling a y b) cuproso)

Tubo número 7 Presentaba un Se calentó a El color inicial No se notó cambio luego

2 ml sol. Almidón color blanco y 40°C por 10 crema se de la adición de lugol, ni
5 ml solución levadura un poco minutos mantuvo. al someter al calor el tubo
2 gotas de Lugol espeso de ensayo.

Tubo número 8 Se presentaba Se calentó a 40 En los primeros En los 10 primeros

2 ml sol. Almidón un color ° C por 10 10 minutos su minutos luego de enfriar
5 ml solución levadura y blanco minutos color blanco el tubo la solución se
mezcle aguado Se dejó enfriar inicial se separó dejando la parte
10 gotas de Bénedict y luego conservó. más densa en la parte
añadidas 10 Con las 10 gotas inferior y la más liquida
gotas de del reactivo y el en la parte superior.
Fehling B punto de Al añadir el reactivo este
Se llevó a ebullición este reaccionó con la solución
punto de se tornó de un de tubo y notamos que la
ebullición color blanco temperatura influyo en su
amarillento con aspecto haciendo que en
un aspecto más espiras del almidón se
denso produjera una
modificación y eso si
visualizo en el color
amarillo que se tornó.

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5.- ANÁLISIS DE RESULTADOS

La glucosa es un azúcar capaz de reducir al cobre de reactivo de Benedict, esto se detecta por
un cambio de coloración. Es también posible cuantificar la cantidad de glucosa de una
disolución; en función de estas, la disolución presentara color verde, amarillo o rojo/ naranja
dependiendo de si la concentración es pequeña, media o alta respectivamente (Nelson & Cox,
2008).

En el caso del Fehling, esta es una solución que se caracteriza fundamentalmente por su
utilización como reactivo para la determinación de azúcares reductores es decir demostrar la
presencia de glucosa o sus derivados. Su acción se fundamenta en el poder reductor del grupo
carbonilo de los aldehídos el cual se oxida a ácido y se reduce la sal de cobre en medio alcalino
a óxido de cobre, formando un precipitado de color rojo.

Cuando se calienta una solución alcalina de ión cúprico (Cu2+) presencia de azúcares reductores
(como glucosa o fructosa, pero no sacarosa o almidón), el ión cúprico se reduce a cuproso (Cu+),
y se forma un precipitado rojizo de óxido cuproso (Cu2O) (Coralia, 2014).

 En fundamento con lo anterior se obtiene un resultado positivo ya que el aspecto final del
tubo de ensayo, con la ayuda de calor a tal punto de ebullición, presentaba un color
precipitado rojo ladrillo (oxido cuproso) lo que indica que la glucosa redujo al cobre de
Reactivo de Fehling.

Las enzimas amilasas son empleadas en la fabricación de pan para romper azúcares complejos
como el almidón (presente en la harina) en azúcares simples. La levadura puede entonces
alimentarse de esos azúcares simples y convertirlos en productos de fermentación alcohólica.
Las células de la levadura contienen amilasas pero necesitan tiempo para fabricar la suficiente
cantidad para romper el almidón.

El yodo adquiere un color diferente cuando se encuentra en presencia de almidón, debido a la

formación de un complejo (las moléculas de yodo quedan atrapadas dentro de una red de
moléculas de almidón) almidón-yodo de color azul-violáceo: I2 (marrón) + almidón (incoloro)
—> complejo almidón I2 (azul-violáceo). Esta última reacción será utilizada para seguir la
reacción de hidrólisis del polisacárido debida a la acción de la enzima.

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Con condiciones suaves (sin calentar y sin añadir ácido), el extracto de cebada y la levadura
hidrolizan sus sustratos. En estos casos, tanto el calentamiento como la adición de ácido
clorhídrico impiden la hidrólisis: los materiales biológicos son termolábiles y sensibles al pH
(Peña, 2004).

 En el proceso de la práctica no se observó ningún cambio pues el color siguió el mismo a

pesar de la adición del lugol. Con fundamento a lo anterior se puede analizar que la
reacción no se desarrolló por el calentamiento que tuvo el tubo de ensayo.
 Con el reactivo de Fehling se dio de mejor manera ya que el aspecto final fue de un amarillo
anaranjado lo que significa que la reacción se dio de manera positiva con una concentración
media.

6.- CONCLUSIONES

 Se Analizó la acción enzimática en las diferentes soluciones dando como resultado que
en el tubo número 2 se observó color precipitado rojo ladrillo (oxido cuproso). En el
tubo número 7 el color inicial crema se mantuvo y en el tubo número 8 en los primeros
10 minutos su color blanco inicial se conservó, con las 10 gotas del reactivo y el punto
de ebullición este se tornó de un color blanco amarillento con un aspecto más denso.

 Se observaron los cambios producidos en la acción enzimática. tales que en cada uno
de los tubos analizados se observó como la temperatura y la concentración de sustrato
afecta en la acción enzimática, y los cambios de color y espesor en las soluciones
utilizadas.

 Las características que se observó en las soluciones causadas por los reactivos fueron en
el tubo 2 se tornó un rojo ladrillo; en el tubo 7 no se notó cambios luego de la adición de
Lugol, ni al someter al calor el tubo de ensayo; en el tubo 8 en los 10 primeros minutos
luego de enfriar el tubo, la solución se separó dejando la parte más densa en la parte
inferior y la más liquida en la parte superior, al añadir el reactivo este reaccionó con la
solución del tubo y eso si visualizo que se tornó un color amarillo.

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7.- RECOMENDACIONES Y SUGERENCIAS

 Utilizar el equipo de protección necesario para cada una de las prácticas a realizar.
 Realizar correctamente la preparación de las diferentes soluciones.
 Anotar cada uno de los cambios producidos en cada uno de las diferentes soluciones de
la acción enzimática.
 Lavar todos los materiales utilizados en la práctica.
 Entregar limpio y ordenado el aula de laboratorio utilizado en la práctica.

8.- BIBLIOGRAFIA

Nelson, D & Cox. M. (2008). Principios de bioquímica. Omega. España.

Coralia, T. (2014). Azucares reductores. Recuperado de

https://sites.google.com/site/trabajosbioquimicos/home/informe-identificacion-de-azucares-
laboratorio-de-bioquimica.

Peña, Arroyo, Gómez, Tapia & Gómez. (2004).Bioquímica. Edit.: Limusa, México.

Badui Dergal, S. (2006). Química de los alimentos. México: Alhambra Mexicana.

Bernal de Ramírez, I. (1993). Análisis de alimentos. Bogota, Colombia: Academia Colmbiana

de Ciencias Exactas, Fisicas y Naturales 313p. ISBN, 999270411.

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 9.- ANEXOS

Figura 1.- Pesamos 10 g de glucosa Figura 2.- Solución de glucosa al 10%

Fuente: Fotografía de Jhosselin Paladines. Fuente: Fotografía de Jhosselin Paladines.

Figura 3.- 20 gotas de fehling b en tubo 2 Figura 4.- Reacción positiva de la glucosa

Fuente: Fotografía de Viviana Parra. Fuente: Fotografía de Julissa Cacuango.

Figura 5.- Activación de la levadura. Figura 6.- Solución de 2ml de almidón y 5

ml de levadura.
Fuente: Fotografía de Julissa Cacuango. Fuente: Fotografía de Enny Vaca.
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Figura 7.- Solución de 2ml de almidón y
5 ml de levadura (Tubo 7) a 40°C.
Fuente: Fotografía de Enny Vaca.
Figura 9.- Precipitado en el fondo del
tubo 7.
Fuente: Fotografía de Nataly Pinchao.
Figura 11.- Solución final de 2ml de
almidón y 5 ml de levadura (tubo 8).
Fuente: Fotografía de Enny Vaca.
Figura 8.- Añadimos 2 gotas de lugol en el
tubo 7.
Fuente: Fotografía de Nataly Pinchao.
Figura 10.- Añadimos 10 gotas de fehling b
en el tubo 8.
Fuente: Fotografía de Viviana Parra.
Figura 12.- Soluciones finales (tubo 7, 8 y
2).
Fuente: Fotografía de Julissa Cacuango.
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10.- CUESTIONARIO

1. ¿Que son las enzimas?

Una enzima es una proteína que actúa como catalizador biológico, llevando a cabo reacciones
bioquímicas a muy altas velocidades, no se consume durante la reacción y en general presenta
un elevado grado de especificidad.

2. ¿Qué composición tienen las enzimas?

Las enzimas están compuestas por pequeños bloques conocidos como aminoácidos, cuyo peso
molecular abarca desde 75 hasta 200.Por lo tanto, la mayoría de enzimas simples están
constituidas por 100 a 400 residuos de aminoácidos.

3. ¿A que se denomina centro activo?

El sitio activo de una enzima es aquella porción de la proteína que participa directamente en la
unión y la transformación del sustrato; y está constituido por ciertos aminoácidos que integran
un microambiente característico dentro de la proteína y que llevan a cabo la catálisis

4. Nombre tres características de las enzimas

Influyen sólo en la velocidad de reacción sin alterar el estado de equilibrio.
Actúan en pequeñas cantidades.
Forman un complejo reversible con el sustrato.

5. ¿Qué enzima se identificó en la práctica?

Se identificó la enzima amilasa

6. ¿A qué temperatura (optima) actuaron mejor las enzimas?

La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. Por

encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es
contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica, y la
actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.

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En la práctica realizada la temperatura en la que mejor actuaron las enzimas fue a 40°C.

7. ¿En qué consiste el complejo enzima-sustrato?

Es la estructura que se forma de la unión de una enzima con su sustrato (la molécula sobre la
que actúa la enzima).

8. Como explica lo ocurrido en el tubo 3

Se observó color precipitado rojo ladrillo (oxido cuproso)

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