Ralstonia

Clasificación
Es una bacteria de suelo Gram-negativa patógena de las plantas. Coloniza el
floema, causando una marchitez bacteriana en una amplia gama de plantas
huésped

Distribución geográfica
Está distribuida en África, Asia, Australia, Europa y América. En Cuba se ha
reportado en la Provincias de Pinar del
Río, Habana, Matanzas (hidropónicos), Villa Clara, Isla de la
Juventud y Granma. En cultivos como papa, tomate, pimiento, girasol, dalia, así
como en malezas silvestres (Milleria quinqueflora, Eclipta alba y Parthenium
hyterosphorus).

Sintomatología General
Los síntomas característicos de la marchitez bacteriana en la mayoría de los
hospedantes son el marchitamiento, achaparramiento y amarillamiento del
follaje. La expresión específica de los síntomas varía con el cultivo y la tasa de
desarrollo de la enfermedad, la que es influida por las condiciones ambientales,
puede ocurrir enanismo y achaparramiento.

Sintomatología en tomate
Las hojas inferiores pueden caerse antes de que aparezca la marchitez. El
marchitamiento aparece por focos y por partes de la planta. El síntoma vascular
toma color pardo y aumenta la aparición y desarrollo de raíces adventicias a lo
largo del tallo. Cuando el síntoma avanza este tiende a deprimirse totalmente,
mostrando el tejido afectado, coloración pardusca y las exudaciones blanco
cremosas de la bacteria. Al seccionar transversalmente el tallo, los haces pueden
exudar una materia mucosa bacteriana. En la médula se puede formar una
podredumbre parda, pero en los foliolos y frutos no se presentan moteados. No
se observan afectaciones en el fruto.

Marchitez bacteriana de la papa

La marchitez bacteriana o pudrición parda es una de las enfermedades que
puede causar Ralstonia solanacearum y, de hecho, es la enfermedad bacteriana
más grave de la papa en las regiones cálidas del mundo. Con frecuencia
restringe la producción de este cultivo. Los síntomas iniciales de amarillamiento
leve se observan primero en un solo lado de la hoja o en una rama y no en la
siguiente. Los síntomas avanzados son la marchitez severa y la sequedad, qua
preceden a la muerte de la planta. Los haces vasculares se oscurecen y, si se
hace un corte transversal al tallo, se nota la exudación de un mucílago gris-
castaño, excepto en los casos leves. Esto se puede verificar mediante la
observación de un fluido filamentoso de color blanco lechoso que emana de los
haces vasculares al cortar y sumergir un pedazo del tallo en agua limpia. Un
mucílago bacteriano grisáceo puede ser exudado por los ojos o por el extremo
del estolón en los tubérculos, donde se adhieren partículas de suelo. Rebrotes
de color blanco-grisáceo exudan del anillo vascular oscurecido de los tubérculos
cortados. Pueden darse, en forma aislada, síntomas aéreos o en los tubérculos.
La infección latente del tubérculo ocurre cuando se siembran semillas infectadas
en lugares fríos, o cuando los tubérculos son infectados al final de la temporada.
La marchitez bacteriana evoluciona rápidamente bajo altas temperaturas.

Control
La rotación de cultivos es el método más eficaz. La bacteria se transmite por
medio del agua que fluye entre los surcos y de un campo a otro y también por
contacto entre raíces. Su supervivencia en los rectos de cosecha o en el suelo
varía de modo considerable.Los tubérculos por siembra natural pueden
incrementar sus posibilidades de supervivencia, lo mismo que su desarrollo en
la rizosfera de algunos cultivos y malezas.

INTRODUCCIÓN

Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al. (anteriormente

llamado Pseudomonas solanacearum ), es un patógeno bacteriano transmitido por
el suelo que es un importante factor limitante en la producción de muchas plantas
de cultivo en todo el mundo. Este organismo es el agente causal de la
podredumbre parda de la papa, la marchitez bacteriana o la marchitez del sur del
tomate, el tabaco, la berenjena y algunas plantas ornamentales, y la enfermedad
de Moko del banano (1, 8).

ANFITRIÓN DISTANCIA Y DISTRIBUCIÓN

Ralstonia solanacearum es un patógeno ampliamente distribuido que se

encuentra en regiones tropicales, subtropicales y algunas regiones templadas del
mundo (3). La especie en su conjunto tiene un amplio rango de hospederos e
infecta a cientos de especies en muchas familias de plantas. La mayoría de los
anfitriones son dicotiledóneas, con la principal excepción son plátanos y
plátanos. La mayoría de las plantas hospedantes económicamente importantes se
encuentran en la familia Solanaceae o solanáceas (8).

El rango específico de hospedadores y la distribución de R.

solanacearum dependen de la raza y, hasta cierto punto, del biovar del patógeno
(2). Estos rangos de host y distribuciones han cambiado en los últimos años. La
raza 1 es endémica del surEstados Unidos. Race 3 Biovar 2 es un "agente selecto"
del USDA incluido en la Ley de Bioterrorismo Agrícola de 2002 y está sujeto a
medidas reglamentarias que incluyen estrictas cuarentenas ya que la papa es
extremadamente sensible a esta raza (5). La Tabla 1 ilustra la relación de raza,
biovar, rango de host y distribución geográfica.
AISLAMIENTO
El agar de cloruro de tetrazolio (TZC) de Kelman o el agar de peptona de
sacarosa al 2% (SPA) se debe utilizar para el aislamiento cuando se sospecha R.
solanacearum . Después de dos días en medio TZC, las colonias virulentas de tipo
salvaje son grandes, elevadas, fluidas y completamente blancas o con un centro
rojo pálido; Las colonias mutantes avirulentas son butíricas, de color rojo oscuro a
menudo con un borde azulado. En SPA, las colonias de R. solanacearum son
blancas y fluidas con espirales características (4).

Cultivo de Ralstonia
solanacearum
virulenta en agar TZC.

(Foto cortesía de
T. Momol y SM Olson, Universidad de
Florida)

El aislamiento directo de Ralstonia solanacearum puede obtenerse del

exudado y el exudado de la planta. Los tallos y / o pecíolos infectados se cortan
usando un cuchillo afilado estéril o cuchilla de afeitar. Si el exudado bacteriano no
aparece activamente, el material de la planta se apretuja entre dos dedos. Se
prepara una suspensión del exudado en agua destilada estéril y luego se estría en
placas TZC o SPA. Los cultivos puros generalmente se aíslan fácilmente (4). R.
solanacearum también se puede aislar del agua y el suelo utilizando un medio TZC
modificado de Kelman (4).

Los aislados de R. solanacearum pierden rápidamente virulencia cuando se

mantienen en medios de laboratorio; sin embargo, el organismo puede mantenerse
fácilmente durante años en agua destilada estéril o en agar inclinado cubiertos con
aceite mineral estéril y almacenarse a temperatura ambiente (7).

IDENTIFICACIÓN
Clasificación (de NCBI):

Reino: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Betaproteobacteria
Orden: Burkholderiales
Familia: Burkholderiaceae

Características del organismo :

Ralstonia solanacearum es una varilla móvil gramnegativa. El organismo

crece aeróbicamente y no forma endosporas. Las células son de 0.5-0.7 X 1.5-2.0
μm y no están encapsuladas. R. solanacearum es catalasa positiva, oxidasa positiva
y reduce los nitratos. El patógeno no hidroliza el almidón y no degrada fácilmente la
gelatina. En el cultivo en caldo, el organismo se inhibe por concentraciones de NaCl
superiores al 2% (8).

Identificación de campo:

Para una identificación de campo rápida de R. solanacearum y para

distinguir la marchitez bacteriana de las marchiteces vasculares causadas por
hongos patógenos, se puede utilizar la transmisión bacteriana del material vegetal
infectado. Una sección del tallo se corta de una planta con decoloración vascular
usando un cuchillo afilado o una cuchilla de afeitar. La sección del vástago se
coloca contra la pared interna de un vaso de precipitados transparente o tubo de
ensayo lleno de agua, de modo que el extremo de la sección apenas toque la
superficie del agua. Los filamentos blancos lechosos que contienen bacterias y
polisacáridos extracelulares fluirán desde los extremos cortados del xilema
(7). Las pruebas serológicas rápidas también están disponibles ahora para la
detección del patógeno.

Transmisión bacteriana
de un
tallo de tomate infectado . (Foto cortesía de T. Momol y SM Olson, Universidad
de Florida)

Razas y Biovars:

La especie patógena se subdivide en razas según el rango de

hospedadores. Actualmente, la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es el
medio principal de identificación definitiva de la raza del patógeno. Antes de la
PCR, se usó una prueba de hipersensibilidad al tabaco, desarrollada por Lozano y
Sequeira, para distinguir entre las Razas 1, 2 y 3, las razas más importantes desde
el punto de vista económico. La especie también se subdivide en biovares basados
en la utilización de los disacáridos celobiosa, lactosa y maltosa y la oxidación de los
alcoholes de hexosa dulcitol, manitol y sorbitol (4). La Tabla 2 ilustra la clasificación
en biovares basada en este método.

Recientemente, se ha sugerido que Ralstonia solanacearum debe

considerarse un "complejo de especies". Además, algunos consideran que la raza
actual y el sistema de biovar son inadecuados ya que se basan en medidas
fenotípicas y proponen cambiar a un sistema jerárquico basado en la
filogenia. Este esquema se basa en el análisis filogenético de la información de la
secuencia mediante el tipado de RFLP, la filogenia de rDNA 16S y los datos de hrpB
PCR-RFLP. El sistema divide el complejo de especies en filotipos (agrupamiento
filogenético de cepas), secuencias (grupo de cepas con endoglucanasa o secuencias
del gen mutS que divergen en <1%) y clones (grupo de cepas que exhiben la
misma huella genética) (3).

SÍNTOMAS

Tomate Tabaco Geranio

ECOLOGÍA Y CICLO DE VIDA

Las altas temperaturas y la alta humedad del suelo generalmente favorecen
a Ralstonia solanacearum , con la excepción de ciertas cepas de la raza 3 que son
patógenas para la papa y pueden crecer bien a temperaturas más bajas (8). El
patógeno se encuentra en muchos tipos de suelos diferentes y en un amplio rango
de pH del suelo. El organismo sobrevive en material vegetal infectado, órganos de
propagación vegetativa, plantas silvestres hospedadoras y suelo. Se cree que los
huéspedes alternos, especialmente las especies de malas hierbas infectadas de
forma latente, desempeñan un papel importante en la capacidad de hibernación del
organismo en las regiones templadas (5, 8). La dulcamara agridulce ( Solanum
dulcamara ), una hierba acuática común, ha sido implicada como la fuente de
varios brotes de pudrición café (8).

Las fuentes de inóculo para los campos agrícolas y los métodos de

propagación incluyen riego y aguas superficiales, malezas acuáticas, suelo infestado
y malas hierbas de campo, material de siembra contaminado, material de
propagación vegetativa infectado de forma latente y herramientas y equipos
agrícolas contaminados. Una vez establecido en un campo, la propagación planta
a planta puede ocurrir cuando las bacterias se mueven de las raíces de las plantas
infectadas a las raíces de las plantas sanas (5, 8).

Posibles fuentes d
(Fotos cortesía de T. Momo
Universidad de Flo
 Estanque de riego contaminado y equipo

Malezas latentemente infectadas en y alrededor de los campos

R. solanacearum ingresa a la planta a través de heridas en las raíces por el

cultivo de equipos, nematodos, insectos y por las grietas donde emergen las raíces
secundarias (1). Las bacterias alcanzan los elementos de xilema grandes y se
diseminan en la planta, donde se multiplican. Una vez establecidos en los vasos
del xilema, las bacterias pueden ingresar a los espacios intercelulares de las células
del parénquima en la corteza y médula en varias áreas de la planta. Aquí, R.
solanacearum es capaz de disolver las paredes celulares y crear bolsas viscosas de
bacterias y desechos celulares. La producción de polisacáridos altamente
polimerizados aumenta la viscosidad del xilema, lo que resulta en taponamiento
(7).