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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONÓMA DE CHOTA

“Un sueño hecho realidad”

CARRERA:
Ingeniería Forestal Y Ambiental

CURSO:
Bioquímica Ambiental

DOCENTE:
Delgado Tapia, Doris Elena

ALUMNOS:
Mejía Espinoza, Cleyser Elí

CICLO:
IV
AÑO:
2018

CHOTA-CAJAMARCA-PERÚ
PRÁCTICA N° 04
DETERMINACIÓN DE CARBOHIDRATOS: MEDIANTE REACCIONES DE
IDENTIFICACIÓN DE MONOSACÁRIDOS, DISACÁRIDOS Y
POLISACÁRIDOS.
I. INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son compuestos universales en la materia viva (vegetal y
animal primordialmente), definidos como aldehídos y cetonas polihidroxílicos
(monosacáridos), sus polímeros (oligosacáridos y disacáridos), sus productos
resultantes de las reacciones de óxido reducción y de sustitución incluyendo los
ésteres.
Los carbohidratos en el organismo animal constituyen el combustible desdoblado
en anhídrido carbónico y agua, de donde se obtiene la energía. Asimismo el
producto del metabolismo ayuda al desdoblamiento de muchas sustancias
alimenticias, actuando como catalizadores o facilitadores de oxidaciones. Sirven
para sintetizar otras sustancias en el organismo como por ejemplo ácidos grasos
y aminoácidos. También están presentes en glucolípidos, glucoproteínas,
heparina, etc.
Los monosacáridos y oligosacáridos son sustancias cristalizables, solubles en
agua y etanol diluido, insolubles en casi todos los solventes orgánicos. La
sacarosa es un oligosacárido de gran importancia así como la lactosa y maltosa,
convirtiéndose todos en monosacáridos como la glucosa, para facilitar su
absorción y su metabolismo.
En cuanto a los polisacáridos, el más importante cuantitativamente en la dieta
humana es el almidón. Este y la celulosa son polisacáridos de almacenamiento
y de sostén respectivamente en los vegetales. En los animales en cambio, el
glucógeno corresponde a la forma de almacenamiento de carbohidratos.
II. OBJETIVOS
 Identificar monosacáridos, disacáridos y polisacáridos mediante
reacciones químicas.
 Describir y analizar la acción reductora de los azúcares sobre el Licor de
Felhing.
 Elaborar y titular el Licor de Fehling.
 Valorar monosacáridos, disacáridos y polisacáridos.
III. MATERIALES Y REACTIVOS
A.-Materiales
 10 tubos de ensayo
 3 buretas de 25 mL
 2 vasos de precipitación de 50 mL y 250 mL
 4 matraces Erlenmeyer de 100 mL
 4 refrigerantes de reflujo
 3 pipetas de 10 mL, 5 de 5 mL y 2 de 1mL
 2 probetas de 100 mL
 Papel de tornasol
 Cocina eléctrica
 Agitadores de vidrio
 Papel filtro Whatman Nº2.
 Fiola
 Crisoles de porcelana (11).
 Marcador.
 Pinzas
 Reloj.

B.-Reactivos
 S.R., de Bial.
 S.R., de Bertrand.
 S.R., de Berg.
 S.R., de Selivanoff.
 S.R., de Fenilhidrazina acética.
 Sol., de Fehling A y B.
 Sol., Ácido nítrico (1x3).
 Sol., glucosa al 5 por mil.
 Sol., de galactosa.
 Sol., de goma arábiga.
 Sol., de almidón.
 S.R., de nitrato de cobalto 15%.
 S.R., de hidróxido de sodio 50% S.R., de sulfato de cobre (III) 12,5%.
 Ácido clorhídrico.
 Sol, de azul de metileno.
 S.R., de yodo 2,5%.
 S.R., de cloruro férrico 9%.
 Sol., de hidróxido de sodio 10% y 40%.
 Sol., diluida de subacetato de plomo 2%.
 Agua destilada.
 Acetato de plomo 30% 4ml.
 Sulfato de sodio solución saturada 3ml.
 Ferrocianuro de potasio en solución acuosa al 5%.
C.- Material que debe traer el alumno
 Sol., isotónica de dextrosa 100 ml.
 100 g de azúcar blanca.
 100 g de maicena o chuño.
 10 mL de leche de vaca.
IV. PROCEDIMIENTO
4.1. IDENTIFICACIÓN DE MONOSACÁRIDOS
A. Reacción de Bial. Calentar en un tubo de ensayo hasta ebullición 2 mL
de reactivo, agregar I a II gotas de solución de pentosa, seguir calentando.
La presencia de pentosas nos da coloración verde. Las hexosas no dan
coloración.
B. Reacción de Bertrand. Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de reactivo y
agregar gotas de solución de pentosa. Calentar con cuidado para evitar la
disociación molecular. En presencia de pentosas da coloración violeta.
Las hexosas en iguales condiciones da coloración roja o no reaccionan.
C. Reacción de Berg. Colocar en un tubo de ensayo 2mL de solución de
aldosa y 1 mL de agua de bromo. Calentar a baño maría hasta eliminación
total de bromo (líquido incoloro e inodoro). Añadir gotas de Reactivo de
Berg. En presencia de aldosas da coloración amarilla.

4.2. IDENTIFICACIÓN DE DISACÁRIDOS


a. Reacción de Herail. En un tubo de ensayo colocar 2 mL de solución
de sacarosa y 1 mL de S.R., de nitrato de cobalto 15%. Agitar y añadir
2 mL de hidróxido de sodio 50%. En presencia de sacarosa da
coloración violeta amatista.
b. Reacción de Selivanoff. Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de
solución de sacarosa y 1 mL de S.R., de Selivanoff. Llevar a ebullición
debiendo dar coloración roja.

c. Identificación de lactosa. Añadir 5 mL de S.R., de hidróxido de


sodio 50% a 5 mL de una solución de lactosa caliente. Calentar
moderadamente la mezcla, el líquido se vuelve amarillo y finalmente
rojo parduzco. Por adición de una gota de S.R., sulfato de cobre (III)
se formará un copioso precipitado color rojo.
4.3. IDENTIFICACIÓN DE POLISACÁRIDOS
a) Identificación de almidón. El almidón se colorea de azul intenso con S.R., de
yodo.
b) Identificación de goma arábiga. A 10 mL de una solución fría de goma arábiga (1
en 50), añadir 0,2 mL de solución diluida de subacetato de plomo; se produce un
precipitado coposo o caseoso de color blanco.

4.4. TÍTULO DEL LICOR DE FEHLING


Medir exactamente 10 mL de Sol. A y 10 mL de Sol. B, colocar en un vaso de
precipitación y añadir agua destilada en cantidad suficiente (50mL). Llevar a ebullición
y dejar caer de una bureta solución de glucosa al 5% (unas gotas), hasta que se
produzca un cambio de color ligero (verde). Añadir II a III gotas de sol., de azul de
metileno. Seguir añadiendo solución de glucosa, permaneciendo el contenido del vaso
a ebullición prolongada hasta que den un precipitado color rojo ladrillo y desaparezca
el color azul del indicador, lo que indica el final de la reacción. Anotar el gasto de
solución de glucosa. Finalmente realizar los cálculos. (El título de L.F. Nos indica que
20 mL de éste han sido reducidos por cantidad X de azúcares).

Título Fehling = G x 5,5/100


20 mL Licor de Fehling = X g A.R.
4.5. DOSAJE DE AZÚCARES CON LICOR DE FEHLING
Dosaje de sacarosa.
Tomar en un matraz Erlenmeyer 100 mL de solución de sacarosa. Añadir 5 mL de ácido
clorhídrico qm. Y llevar a ebullición con refrigerante a reflujo durante 1 hora. Enfriar y
neutralizar con c. s. de hidróxido de sodio (utilizar papel tornasol para verificar). Aforar
a un volumen determinado. Esta solución colocarla en una bureta, determinar la
cantidad de azúcares reductoras totales (ART) mediante el L.F. Determinar el
porcentaje de sacarosa en la solución teniendo en cuenta que:
100 g. de azúcar reductor equivalen a 95 g. de sacarosa.
Dosaje de solución de almidón:
Medir exactamente 0,5 g de una muestra que contiene almidón y añadir c. s. p 100 mL
en un matraz aforado. Añadir 3 mL de ácido clorhídrico q. p. y llevar a ebullición con
refrigerante a reflujo por 1 hora, comprobando su hidrólisis completa con solución de
yodo. Dejar enfriar y neutralizar con hidróxido de sodio al 10%, verificar el cambio de
pH con ayuda de papel tornasol. Aforar a 100 mL, colocar en una bureta solución de
azúcar reductor (glucosa 5%). Dosar con LF. Determinar el porcentaje de almidón en
la muestra.

100 g. de azúcar reductor equivalen a 90 g. de


almidón

4.6. Método: AOAC - 1990.


FUNDAMENTO: Los carbohidratos se determina eliminando los lípidos al
agregar HCl cc y al ser hidrolizados con agua y mediante álcalis débiles
(hidróxido de sodio) en baño maría se neutraliza y luego retenemos los
carbohidratos con el Fehling el cual luego lo llevamos a calentamiento, se
va a originar un gasto de filtrado que luego se compara con 100 ml de
filtrado luego esto se compara con la glucosa y se eleva a 100 gramos de
muestra.
PROCEDIMIENTO:
a. Pesar 5gr. de muestra previamente desecada.
b. En una fiola agregar los 5gr de muestra y agregar 5ml de HCl
cc y 80ml de Agua destilada.
c. Homogenizar y llevar a baño maría por 2 horas
d. Luego dejamos enfriar y neutralizamos con NaOH 40% (5ml), y
verificamos la neutralización con papel de tornasol rojo.
e. Agregamos 4ml de acetato de plomo 30% y 3 ml de solución
saturada de
Na2SO4.
f. Filtrar y colocar el volumen obtenido en la bureta.
g. En un vaso de 50ml medir el fehling (5ml de A y 5ml de B) y 40
ml de H2O y 5 ml de solución acuosa de ferrocianuro de potasio
al 5%.y lo llevamos a calentamiento.
h. Finalmente titulamos y anotamos el gasto del filtrado.
.CALCULOS:
Gasto del filtrado -------------------------0.05 g de glucosa
100 ml filtrado --------------------------- X
X gr de glucosa en 100 ml de filtrado
5g de muestra --------------------------- Xgr de glucosa
100 g de muestra ------------------------ Y gr de glucosa en 100 gr de muestra

% Carb. = gr gl7ucosa x 0.90

V. PROPIEDADES DE REACTIVOS UTILIZADOS


VI. DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS
 Reacción de bertand:
Datos:
 Leche
 Almidón
 Sacarosa
 Destroza
Resultados:
 Leche: positivo coloración blanca.
 Almidón: positivo color rojizo.
 Sacarosa: positivo color amarillento.
 Destroza: positivo color amarillento.

 Como observamos los resultados en todas las muestras hay presencia de


hexosas.

 Identificación de almidón:
Datos:
 Solución de chuño
Resultados:
 Salió positivo con una gota por lo tanto ay presencia de almidón en nuestra
muestra

 Reacción de fehling A y B:
Datos:
 Leche.
 Dextrosa
 Azúcar
 Chuño
Resultados:
 Leche: positivo color anaranjado presencia de glucosa o hexosa
 Dextrosa: positivo color anaranjado presencia de glucosa o hexosa
 Azúcar: negativo x lo tanto no ay presencia ya sea de glucosa o
hexosa
 Chuño: negativo x lo tanto no ay presencia ya sea de glucosa o
hexosa.
 Reacción de Herail.
Datos:
 Sacarosa
 Hidróxido de sodio.
 Nitrato de cobalto.

Resultados:

 Salió positivo coloración violeta por lo tanto en la muestra hay presencia


de sacarosa.
 Identificación de Lactosa:
Datos:
 Leche.
Resultados:
 Leche: positivo por lo tanto en la muestra encontramos presencia de
sacarosa.
VII. DISCUSIONES

VIII. CONCLUSIONES:

 En esta práctica llegamos a conocer la importancia de cada una de las


pruebas que realizamos, y así poder conocer carbohidratos, pentosas,
aldosas, cetosas, acción reductora de azucares.

 Es de mucha importancia conocer sobre el tema de carbohidratos, son


bases fundamental para la estabilidad del organismo y así diferenciar que
sustancias pueden ingerir ciertos organismo cual las pueden rechazar y
como pueden reaccionar algunas con un cierto organismo
metabolizándolas.
IX. BIBLIOGRAFÍA
 2014, 03. Alimentos en los carbohidratos. Revista ARQHYS.com.
Obtenido 10, 2016, de http://www.arqhys.com/color.html.)

X. ESQUEMA DE LA PRÁCTICA
 Reacción de fehling A y B
Leche Dextrosa Azúcar Chuño

1ml de
fehling A y
2ml 2ml B
2ml 2ml

 Identificación de almidón
Chuño

1ml 1 gota de Lugol

 Identificación de lactosa
Leche

5ml de NaoH
5ml

 Reacción de berland
Leche almidón sacarosa dextrosa 2ml de

Permanganat
o d potasio

2ml 2ml 2ml 2ml


 Reacción de Herail
Sacarosa

2ml
1ml de nitrato de cobalto más 2ml de hidróxido de sodio