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TRABAJO PRÁCTICO Nº 4

TEJIDO CONECTIVO

Tejido conectivo propiamente tal

Objetivos

a) Analizar los componentes del tejido conectivo: sustancia fundamental, fibras y células.

b) Reconocer algunos tipos de tejidos conectivos, relacionando los componentes del tejido
con la función del mismo.

PREPARACIÓN Nº 1

a) Material biológicos: Glándula mamaria en reposo (no lactante)

b) Objetivo: Observar la distribución de los distintos tipos de


tejido conectivo observados en esta glándula.
Reconocer el tejido conectivo laxo, tejido conectivo
denso desordenado y tejido adiposo, estudiando sus
distintos componentes: células, fibras y sustancia
fundamental.

c) Tipo de Corte: Indeterminado

d) Tinción: Hematoxilina y Eosina (H- E)

1.- Con aumento topográfico, identifique grupos más o menos redondeados constituidos
por acúmulos de estructuras canaliculares (ductos y alvéolos glandulares que forman
lobulillos). Los mismos se encuentran delimitados por gruesas porciones de tejido
conectivo denso desordenado que posee numerosas bandas de colágeno (interlobulillar) y
también por tejido adiposo.

Identifique las células adiposas de gran tamaño, redondas, de citoplasma blanco (ya que
posee una gran gota de lípidos que es evacuado con la técnica utilizada y aparecen
ópticamente vacías) y núcleo celular hacia la periferia citoplasmática, de forma aplanada.

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Tejido conectivo
laxo

Epitelio
glandular Tejido conectivo
Denso
desordenado

Lobulillo

2.- Observe con atención el tejido conectivo denso desordenado o irregular que limita
estas unidades glandulares. Las bandas de colágeno son eosinófilas y si usted cierra el
condensador al máximo observará que las mismas muestran cierta refringencia. Observe
la presencia de escasas células entre las bandas de colágeno.

3.- Con aumento mediano analice alguna de estas unidades glandulares. Allí encontrará
una mezcla de conductos (los mayores) y alvéolos (más pequeños) pero generalmente de
difícil diferenciación en la glándula en reposo o no lactante. Ambos presentan un epitelio
simple cilíndrico o cúbico, rodeado por células mioepiteliales (que en esta preparación
aparecen muy prominentes y de citoplasma claro, dando la sensación de tener epitelio
estratificado). Observe el tejido conectivo laxo que se encuentra entre los conductos y
alvéolos (intralobulillar). Compare las fibras de colágeno y la cantidad de células de este
tejido con las del tejido conectivo denso desordenado interlobulillar.

Actividad: Realice un dibujo esquemático que represente las características de los


tejidos que conforman un lobulillo y los tejidos ubicados fuera de él. Destaque las
diferencias histológicas que observa entre todos los tejidos con sustancia fundamental
estudiados en esta preparación: tejido conectivo laxo (intralobulillar) y tejido conectivo
denso desordenado y tejido adiposo (interlobulillar) a 40X. Rotule todo lo dibujado.

PREPARACIÓN Nº 2

a) Material biológico: Piel delgada

b) Objetivo: Observar la localización y características del tejido


conectivo en la piel. Reconocer diferentes tipos de
tejidos conectivos y su localización.

c) Tipo de corte: Indeterminado

d) Tinción: Hematoxilina y Eosina (H - E)

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Ésta corresponde a la misma preparación observada en prácticos anteriores.
Identifique el tejido de revestimiento (epidermis) y diríjase a las capas subyacentes al
mismo (dermis).
La unión dermo-epidérmica generalmente posee un contorno irregular. El sector de
tejido conectivo que se ubica inmediatamente por debajo de la epidermis, se denomina
dermis papilar, debido a que el tejido conectivo protruye formando unas zonas elevadas
con aspecto de papilas. Este tejido conectivo es de tipo laxo, con una delicada red de
fibras colágenas, reticulares y elásticas.
Por debajo de la dermis papilar (más profundamente) se encuentra la dermis reticular,
que, generalmente es más gruesa que la anterior, pero puede tener un espesor variable.
Consta de un tejido conectivo denso desordenado, con gruesos haces (colágeno tipo I,
principalmente) y fibras elásticas.
Por debajo de la dermis reticular se ubica la hipodermis (escasamente observable en
esta preparación), donde se encuentra tejido adiposo blanco o unilocular (y, según la
zona corporal, también es posible observar nervios, músculo liso o músculo
esquelético).
Actividad: realice un esquema a 10X que muestre la epidermis y dermis de la piel. Con
respecto al epitelio de revestimiento no es necesario que esté dibujado en detalle. En la
dermis debe reconocer sus dos capas y esquematizar los tejidos que la conforman,
haciendo hincapié en sus principales diferencias (en éstos si deben aparecer detalles).
Rotule todo lo representado.

PREPARACIÓN Nº 3

a) Material biológico: Piel delgada


b) Objetivo: Comparar la información entregada al emplear una
tinción de rutina versus una tinción especial.
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tinción: Tricrómico de Mallory

Al colocar la muestra, verifique que se encuentre en la misma posición que la observada


anteriormente.
Intente localizar los distintos tipos de tejidos que hemos analizado con la tinción
habitual. Notará que los perfiles celulares no son notorios con esta técnica; y debido a
su composición, algunos tejidos se pueden estudiar con mayor facilidad. Intente
determinar qué tejidos son éstos y qué componente de ellos es el que destaca este
método de tinción.
Actividad: Haga un cuadro comparativo entre las características del tejido conectivo
laxo y el tejido conectivo denso desordenado. Considere, por ejemplo, su componente
fibrilar (tipos de fibras, cantidad de fibras y disposición de las fibras). Refiérase a todos
sus componentes y también a la (as) función (nes) de ambos tejidos.

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TRABAJO PRÁCTICO Nº 5

TEJIDO CONECTIVO ESPECIALIZADO

Cartílago y hueso

Objetivos

a) Analizar los componentes de algunos ejemplos de tejidos conectivos especializados y


sus principales componentes.

b) Identificar cartílago de tipo hialino y fibroso, además del hueso compacto, estudiar sus
componentes relacionando sus particularidades con su función

PREPARACIÓN N° 1

a) Material biológico: Tráquea


b) Objetivo: Estudiar el cartílago hialino
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tinción: HyE

1.- Con aumento menor aumento ubique a la estructura canalicular que constituye la
tráquea. Recorra el preparado y localice las distintas capas que componen a este
órgano. Revistiendo al lumen, la capa mucosa: constituida por un epitelio y una lámina
propia subyacente de tejido conectivo laxo. Por debajo se localiza la submucosa,
compuesta por tejido conectivo apenas más denso que el de la lámina propia, que
además consta de glándulas. Luego se observa la capa de cartílago y finalmente lo
más externo es la adventicia, compuesto por tejido conectivo laxo.
La zona de cartílago (resalta por su coloración basófila) está compuesta por anillos
incompletos de cartílago hialino cuyos extremos de localización posterior se
encuentran unidos por músculo liso.
2.- Con aumento medio y mayor estudie el cartílago hialino. Observe la forma y
disposición de las células de las zonas más periféricas y de la porción central. Analice
las diferencias de coloración de la matriz en sus distintas zonas con la tinción utilizada.
3.-Observe el pericondrio que rodea al cartílago. Reconozca las capas que lo constituyen.

Actividad: Realice un dibujo esquemático del cartílago hialino con aumento 40X, que
incluya una zona de pericondrio. Rotule todos los elementos observados.

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Matriz
territorial

Matriz
pericondrio interterritorial

PREPARACIÓN N° 2

a) Material biológico: Menisco


b) Objetivo: Estudiar un tipo de cartílago que constituye los meniscos:
fibrocartílago
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tinción: HyE

Coloque la preparación y observe a 4X. Observe como destaca la coloración eosinófila


bastante homogénea con este aumento.
Al mirar con más aumento, reconocerá hileras de condrocitos y formando grupos
isógenos. La matriz posee abundantes fibras de colágeno dispuestas más o menos en
forma paralela entre los condrocitos. Este tipo de cartílago además no presenta
pericondrio.

PREPARACIÓN N° 3

a) Material biológico: Menisco


b) Objetivo: Estudiar el menisco comparando la coloración que adquieren
sus distintos componentes con una técnica especial
c) Tipo de corte: Indeterminado
d) Tinción: H – E y Azul de Alcian

Recorra la preparación mientras la observa con 4x. Observe, como a diferencia de la


preparación anterior, se pueden identificar, debido a sus características tincionales, los
componentes del fibrocartílago: cartílago hialino y tejido conectivo denso ordenado. La
intensa acidofilia observada en el fibrocartílago corresponde principalmente a las fibras
colágenas del tejido conectivo denso ordenado. Las zonas de intensa tinción celeste-

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turqueza corresponden al cartílago hialino; los condrocitos son muy pequeños y
dispuestos principalmente en hileras.
Con 40X observe el detalle de los componentes que constituyen al fibrocartílago.

Actividad: Realice un dibujo esquemático, con 40X, en el cual queden representados


todos los componentes del fibrocartílago y puedan compararse las características que
observa en las preparaciones 2 y 3.

Actividad: Investigue qué componentes de la matriz cartilagínea se tiñen de color


celeste- turquesa.

PREPARACIÓN N° 4

a) Material biológico: Diáfisis de hueso largo descalcificado


b) Objetivo: Estudiar el tejido óseo de tipo compacto
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tinción: HyE

1- Identifique una estructura con forma de anillo eosinófila con un contenido pálido.
Con menor aumento recorra la preparación y diríjase a la zona del anillo periférico
eosinófilo. Observe la presencia de pequeñas cavidades rodeadas por células
dispuestas en distintas capas, de disposición concéntrica a cada pequeño orificio.
Estas estructuras compuestas por una cavidad central rodeada de osteocitos de
disposición concéntrica se denominan osteonas o sistemas de Havers. La cavidad
central se denomina conducto de Havers y contiene vasos sanguíneos y nervios.

Conducto de
Volkman

Conducto de
Havers
Disposición de
los
osteocitos en
forma
concéntrica al
conducto
de Havers
Osteocito

2.- Observe la zona central más pálida del preparado. Allí encontrará tejido mieloide y
tejido adiposo.

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3.- Con mayor aumento observe las células que forman parte del tejido óseo (¿qué
características histológicas y funcionales presenta cada una? y las características
tincionales de la matriz extracelular (¿cuál es su principal componente). Identifique
canales de Havers y de Volkman
4.-Identifique el periostio y el endostio, analice su composición.

Actividad: Realice un dibujo esquemático de las estructuras observadas a 40X.


(Osteonas, periostio y cavidad medular). Rotule todo lo dibujado.

TRABAJO PRÁCTICO Nº 6

TEJIDO MUSCULAR

Músculo liso, estriado esquelético y estriado cardíaco

Objetivos

a) Analizar como están constituidos los tres tipos de músculos y relacionar su estructura
con la función que cumple.

b) Identificar las características de cada uno de los tejidos analizados, sus células, y
componentes extracelulares.

PREPARACIÓN Nº 1

a) Material biológico: Raíz lingual


b) Objetivo: Estudiar músculo estriado esquelético.
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tinción: HyE

Observe este órgano con menor aumento. Recorra la superficie y observe nuevamente el
tejido de revestimiento superficial y el tejido conectivo subyacente. Diríjase a zonas más
profundas y reconozca distintos tipos de tejidos.
Con mediano aumento enfoque los sectores más profundos e identifique las fibras
musculares que disponen en distintas direcciones, entre las cuales es posible reconocer
glándulas (clasifíquelas) y tejido adiposo, además de estructuras vasculares y nerviosas.
Enfoque con mayor aumento las fibras musculares estriadas esqueléticas. Observe un
sector donde éstas aparezcan cortadas a lo largo, con los núcleos ovalados y en hilera

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paralelas. Generalmente a simple vista (pero aún mejor si desciende el condensador o
cierra el diafragma, de forma de disminuir la luz) identificará la presencia de estriaciones
transversales (porque atraviesan en forma perpendicular el eje mayor de la fibra) que se
repiten en forma ordenada y regular. También es posible identificar estriaciones
longitudinales, menos evidentes por lo general, que se observan paralela el eje mayor de
las fibras (¿a que corresponde esta estriación?)
Ahora enfoque un sector donde las fibras aparezcan cortadas transversalmente.
Identifique los perfiles celulares redondeados que se amoldan unos a otros. Reconozca
los núcleos celulares localizados en la periferia. El citoplasma celular eosinófilo en el que
se observan un puntillado correspondiente a las miofibrillas cortadas transversalmente.
(Campos de Conheim)
Actividad: Realice un dibujo esquemático de las fibras musculares estriadas esqueléticas
en corte longitudinal y transversal con aumento 40X. Rotule todo lo dibujado

PREPARACIÓN N° 2

a) Material biológico: Estómago


b) Objetivo: Estudiar el músculo liso que forma parte de la pared del
estómago
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tinción: HyE

Observe a simple vista la preparación identificando un fragmento más o menos


rectangular que presenta una de las dos superficies de mayor longitud, de aspecto
ondulado. Esta superficie ondulada corresponde a la zona de la mucosa. Cuando
coloque la preparación en el microscopio deberá asegurarse de que esta superficie
quede mirando hacia usted, de forma que al observar esta aparezca hacia arriba.
Con aumento topográfico recorra toda la pared del órgano prestando atención a los
distintos sectores con distintas tonalidades con hematoxilina y eosina.
Desde la superficie superior (que corresponde a la superficie que linda con el lumen del
estómago) hacia el sector inferior se reconoce:
Capa mucosa, que ocupa gran parte del espesor de la pared y cuyo límite inferior lo
comprende una capa delgada y eosinófila que se llama “muscular de la mucosa”. Por
debajo de ésta se extiende otra capa de tonalidad más pálida y gran cantidad de vasos
sanguíneos y, que por estar debajo de la mucosa, se denomina capa submucosa. Por
debajo de esta se encuentra la capa muscular o muscular propia (o externa). La
última capa hacia abajo, o contraria a la mucosa (recubriendo la superficie externa del
órgano) es la capa serosa, extremadamente delgada.
Luego de ubicar la capa muscular del órgano, enfoque con mayor aumento y observe
las fibras musculares, cortadas en sentido longitudinal (en el sector más interno de esta
capa o más hacia el lumen del órgano, o hacia la capa mucosa) y en sentido
transversal (en el sector más externo de esta capa y de menor espesor). Determine la
forma de las células musculares lisas, cantidad de núcleos celulares, forma y
localización de los mismos.

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Analice a qué se debe el hecho de que no observa núcleo en todos los perfiles
celulares, en el corte transversal.
Entre las dos capas de músculo liso (disposición longitudinal y transversal) podrá
reconocer tejido nervioso formando parte del plexo nervioso mientérico o de Auerbach.
Ahora está en condiciones de buscar este tipo de músculo liso en otras regiones de la
pared gástrica que no sea en la capa muscular propia del órgano ¿dónde más
encuentra este tipo de fibras musculares?
Actividad: Realice un esquema de la capa muscular propia, en disposición longitudinal
y transversal de las fibras a 40X (ambos en un mismo círculo dividido a la mitad).
Rotule
Consigne las características principales que le permiten identificar a este tipo de
músculo como liso.

PREPARACIÓN Nº 3

a) Material biológico: Corazón


b) Objetivo: Estudiar músculo estriado cardíaco.
c) Tipo de corte: Transversal
d) Tinción: HyE

Analice la preparación a simple vista y reconozca un fragmento de tejido de aspecto


macizo. Corresponde a un trozo de la pared del corazón.
Observe con menor aumento, la zona periférica del corazón, de coloración pálida
constituido por tejido conectivo laxo, tejido adiposo blanco con numerosos vasos
sanguíneos.
Diríjase a la profundidad del mismo y observe la presencia de músculo estriado cardíaco,
de coloración eosinófila. Las fibras musculares cardíacas se disponen en grupos más
irregulares que en el músculo estriado esquelético y generalmente rodeadas por
abundante tejido adiposo. Las fibras musculares en corte longitudinal presentan diámetro
irregular con ramificaciones y anastomosis.
Con aumento mediano y mayor, identifique una zona donde las fibras estén cortadas a lo
largo de su eje mayor y reconozca las estriaciones longitudinales y transversales de las
fibras. Ubique los núcleos celulares. Busque una zona donde las fibras se observen
cortadas lo más transversalmente posible y examine la localización de los núcleos.
También observe los cortes oblicuos de las fibras que aparecen en gran cantidad.
El músculo cardíaco se caracteriza por presentar “disco intercalares” o “trazos
escaleriformes” que son zonas de unión especializadas entre las fibras musculares.
Dichas uniones son escasamente visibles mediante las técnicas habituales (H y E), para
poder distinguirlas adecuadamente se necesitan tinciones especiales. Sin embargo en
nuestras preparaciones puede llegar a distinguirlas bajando el condensador o cerrando el
diafragma.
Actividad: Realice un dibujo esquemático de un área de músculo cardíaco donde
observe corte longitudinal y transversal de la fibras a 40X. Destaque las características

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que permita reconocerlo como tal y además diferenciarlo de los otros tipos de músculo.
Rotule.

TRABAJO PRÁCTICO Nº 7
TEJIDO NERVIOSO

Objetivos

a) Analizar como está constituido el tejido nervioso en el sistema nervioso central (SNC) y
periférico (SNP) estableciendo las diferencias más importantes entre ellos.

b) Identificar neuronas (constituyen la unidad funcional del tejido nervioso) y células


gliales y analizando su relación con las neuronas

PREPARACIÓN Nº 1

a) Material biológico: Cerebelo


b) Objetivo: Estudiar la organización celular de un sector del sistema
nervioso central, analizando las características y
composición celular del tejido nervioso
c) Tipo de corte: Sagital
d) Tinción: H-E

Antes de la observación microscópica, al examinar la muestra a simple vista,


comprobamos que se trata de un órgano macizo.
Recorra la muestra y observe la presencia de abundantes folias o laminillas cerebelosas
(corresponden a pliegues del tejido nervioso). Cada una de ellas está constituida por
sustancia gris y blanca, y recubierta por meninges; en este caso la piamadre. Como un
efecto artefactual, algunas folias aparecen planas en sus bordes.
Al recorrer la muestra notará que en el centro de ésta se aprecia una zona altamente
acidófila, que también se observa en cada folia. Esta zona corresponde a la sustancia
blanca, y se encuentra rodeada por la sustancia gris o corteza cerebelosa.
La sustancia gris está constituida por tres capas; la más externa, ubicada bajo la
piamadre, corresponde a la capa molecular (levemente acidófila); la más profunda, y que
se relaciona con la sustancia blanca, es la capa granulosa (muy basófila y de aspecto
granular); y entre ambas capas se puede observar una hilera continua de células de gran
tamaño y forma de pera, las neuronas de Purkinje, que conforman la capa de Purkinje o
capa ganglionar
En cada una de las zonas y capas mencionadas, reconozca todos sus componentes
celulares. Establezca las diferencias principales entre las células gliales y las neuronas.
Observe la gran vascularización de todas las zonas y capas ¿De qué tipo de vasos
sanguíneos se trata?

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Tanto en la sustancia blanca, como en la sustancia gris intente reconocer los diferentes
tipos de prolongaciones celulares ¿Es posible determinarlo con claridad en la sustancia
gris? ¿Al conjunto de ellas con qué nombre se le conoce?

Actividad: Realice un esquema con 10X de una folia (laminilla) cerebelosa. Con 40X
dibuje una zona en donde se aprecien todas las características de tres las capas de la
corteza cerebelosa. Rotule

PREPARACIÓN Nº 2

a) Material biológico: Cerebelo


b) Objetivo: Estudiar la organización celular de un sector del sistema
nervioso central, analizando las características y
composición celular del tejido nervioso
c) Tipo de corte: Sagital
d) Tinción: Cajal

Antes de la observación microscópica, al examinar la muestra a simple vista,


comprobamos que se trata de un órgano macizo.
Al recorrer la preparación con aumento topográfico se observa que las superficies
laterales de la muestra están cortadas con bisturí. Debemos colocar la porción que posee
un reborde delgado de color café oscuro, casi negro, hacia nosotros, para que al mirarlo al
microscopio se observe hacia arriba. Esta corresponde a las meninges (en particular la
capa llamada piamadre).
La capa superficial o molecular (de color amarillo) y otra capa profunda o granulosa
(de color café debido a la presencia de numerosas células redondeadas y café oscuras).
Entre medio de ambas capas y dispuesta en forma paralela se encuentra una hilera
discontinua de células grandes y de color café, denominada capa de Purkinje, debido a
las células ( neuronas de Purkinje)que la constituyen tienen ese nombre.

Capa granulosa Capa molecular

Folia o laminilla
Capa de células de Purkinje

Sustancia blanca
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La sustancia blanca posee una coloración café clara y menor número de células,
adoptando un aspecto más fibrilar.

Identifique cortes de vasos sanguíneos que con esta técnica aparecen como imágenes
de ramas de árboles secos.

Coloque mayor aumento y observe con atención cada una de los sectores y capas
analizados.
¿Es posible observar toda la extensión de cada célula con esta técnica histológica?

Actividad: Realice un esquema 40X de la corteza cerebelosa (incluya las tres capas de la
corteza o sustancia gris)

PREPARACIÓN Nº 3

a) Material biológico: Nervio


b) Objetivo: Estudiar las características histológicas de un nervio como
ejemplo de una estructura que pertenece al sistema nervioso
periférico (SNP).
c) Tipo de corte: Transversal y longitudinal
d) Tinción: HyE

La observación de la lámina a simple vista permite reconocer la presencia de varios


fragmentos de pequeña magnitud. Algunos redondeados y generalmente uno solo
alargado.

El fragmento alargado constituye un corte de tipo longitudinal del nervio, es decir


constituye un corte que es paralelo al eje mayor de las fibras nerviosas.
Observe con aumento mediano (10X) y reconozca fibras nerviosas dispuestas a lo largo,
de color eosinófilo y aspecto espumoso. Entremedio de las fibras se reconocen núcleos
celulares basófilos y alargados que corresponden a núcleos de células de Schwan.

(También se observan espacios blancos, entremedio del tejido que corresponden a


artefactos, roturas del material biológico).

Con mayor aumento, intente identificar líneas eosinófilas muy delgadas (axón), rodeado
de un material de aspecto espumoso (vaina de mielina). También reconocerá la presencia
de vasos sanguíneos de pequeño calibre (capilares).

Ahora diríjase a los fragmentos redondeados u ovalados. Los mismos corresponden a


cortes de nervio, transversales y oblicuos.
En los cortes oblicuos observará algo similar a lo descrito anteriormente. En aquellos
sectores que aparecen las fibras nerviosas cortadas en sentido bien transversal es posible
identificar varias secciones pequeñitas y redondas que poseen un punto central eosinófilo

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fuerte (que corresponde al axón cortado transversalmente, tenga en cuenta que en
algunos casos puede haberse eliminado con la preparación de la muestra). El axón se
encuentra rodeado de una estructura de aspecto espumoso, blanquecino con pequeñas
líneas.
Identifique núcleos de células de Schwan también en este corte.

Corte transversal de nervio (4X) Detalle de parte de un fascículo


(40X)

Fascículo

Ahora diríjase hacia la periferia del nervio en ambos tipos de corte.


Identifique la presencia de tejido conectivo laxo y un poco más denso en algunos
sectores. Las zonas compuestas por tejido conectivo denso irregular, corresponden al
llamados epineuro. Rodeando a cada fascículo nervioso se reconocen una o dos capas
concéntricas de tejido conectivo que se encuentra formando una barrera especializada,
que se denomina perineuro.
Rodeando a cada fibra nerviosa (axón y su vaina de mielina) se reconoce un tejido
conectivo laxo, escaso constituido principalmente por fibras reticulares y una matriz de
proteoglicanos, conocido como endoneuro.

Reconozca además vasos sanguíneos (vasa nervorum) de mayor calibre a nivel del
epineuro y más pequeños en el perineuro y el endoneuro.

Actividad: Realice un dibujo esquemático a 10 o 40 x que represente un corte transversal


y otro longitudinal de un nervio, destacando los principales elementos estudiados en clase
y que permiten reconocer las estructuras analizadas. Rotule.

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