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Informe de Laboratorio 5 Bioquímica

Nombre de la práctica: Características de los Ácidos Grasos

Estudiante: Amanda Isabel Avila Ibañez. Código: 40384150Grupo: 201103_8


Correo: catalana999@hotmail.com

Correo Tutor Campus: Gmail: alberto.garcia@unad.edu.co albertogarciajerez@gmail.com

Tutor de Laboratorio: Fredy Alexander Sánchez

Universidad Nacional Abierta y a Distancia Unad, Cead Yopal


Escuela de Ciencias Básicas, Tecnología e Ingeniería
Tecnología en Regencia de Farmacia
Yopal, Casanare- mayo 9-2018
1. PRACTICA 5: CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS
3,1 Materiales y Procedimientos
3,2 Solubilidad en Lípidos
3,3 Reacción con el Sudan III
3,4 Preguntas
Practica 5. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS
Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más bajas que
los dos primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo de sustancias
muy heterogéneas con características químicas diversas, pero con algunas propiedades físicas
comunes, que podrían resumirse en estas dos:
_ Son mayoritariamente insolubles en agua.
_ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej: hexano),
benceno, acetona y alcoholes.

De acuerdo a la estructura química los lípidos se clasifican en dos grupos, de acuerdo al


contenido en su composición ácidos grasos (Lípidos saponificables) o no lo posean
(Lípidos insaponificables).

La saponificación consiste en una hidrólisis alcalina de la preparación lipídica (con KOH o


NaOH). Los lípidos derivados de ácidos grasos (ácidos monocarboxílicos de cadena larga)
dan lugar a sales alcalinas (jabones) y alcohol, que son fácilmente extraíbles en medio
acuoso.
Tabla 1 Clasificación de lípidos.

Lípidos saponificables Simples Acilglicéridos

Céridos

Complejos Fosfolípidos

Glucolípidos

Lípidos insaponificables Terpenos

Esteroides

Prostaglandinas
MATERIALES Y PROCEDIMIENTO.
Tabla 2Materiales y Materiales y reactivos.
Reactivos Materiales Cantida
d

Aceite de girasol Tubos de ensayo (140 mm*14mm) 15

Agua destilada Gradilla 2

Hexano Pinza para tubos 2

Acetato de etilo Pipetas Pauster con bulbo 4

Etanol Beaker o vasos de precipitados de 500 mL 5

NaOH Estufa 1

KOH Cámara de flujo laminas 1

Reactivo Sudán III Pipetas de vidrio: 0.5 ml, 1 ml, 5 ml y 10 4


ml.

Pera de goma para pipetas 4

Vidrios reloj grandes

Probeta 100 ml

Balón aforado de 25 ml

Agitador de vidrio

Balanza analítica

SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS

Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequeñísimas gotitas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, puede
sepárese en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor
densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas con solubles en los llamados
disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo, etc.
Tabla 3 Determinación de solubilidad en lípidos.

Tub Cada tubo


Cantidad Reactivo Procedimiento
os

con 3 ml de 4 mL de Preparar los tubos de 4 mL de hexano


1 Aceite agua ensayo.
vegetal destilada

con 3 ml de
4 mL de 4 mL de hexano
2 Aceite
hexano
vegetal 

Agite los tubos.

 3 ml de Aceite vegetal
deje reposar unos +
minutos
Agite los tubos

+
Observar y tomar
apuntes de los Dejar en reposo.
cambios. +

Observar y tomar
apuntes de los
cambios.

SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con bases fuertes, NaOH o
KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben el nombre de jabones. Esta reacción se
denomina de saponificación. Son saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen
ácidos grasos en su estructura.
Tabla 4 Ensayo de Saponificación.
Tub Cada tubo
Cantidad Reactivo Procedimiento
os

3 mL de 3 mL de Agregar manteca en
1 aceite NaOH un tubo de ensayo.
Preparar los tubos de
vegetal (1 N) ensayo.

3 mL de Agregar 3 mL solución de
3 mL de
2 aceite NaOH
KOH
vegetal
(1 N).

Agitar. 3 ml de la solución de
 NaOH (1 N).

Baño de agua hirviente por +

10 minutos. Baño de agua


hirviente por

10 minutos.
Dejar enfriar.
Observar y tomar
 apuntes de los
Observar y tomar apuntes cambios.
de los cambios.
Si posible repetir el mismo
procedimiento con KOH
REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas, porque
es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se
disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.

Tabla 5 Tinción: Reacción con el Sudán III.


Tub Cada tubo
Cantidad Reactivo Procedimiento
os

con 3 3 ml de Aceite
ml de vegetal
1 Sudan III Preparar los tubos de
Aceite
ensayo.
vegetal

con 3
mL de Agregar 3mL de aceite
2 Tinta roja
Aceite vegetal.
vegetal

Agregar 8 gotas de Sudan


III 8 gotas de Sudan III

Observar y tomar
Observar y tomar apuntes apuntes de los
de los cambios. cambios.

1.1 PREGUNTAS:
¿Qué son los jabones?
R/ Son sustancias solidas, en polvo o liquida elaborado con la finalidad de limpiar la
superficie de algún material sucio, y que se fabrica haciendo cocer hasta fundirse una mescla
de grasas vegetales o animales y aceites.
Los jabones son lípidos saponificables por lo cual pueden realizar el proceso de
saponificación. Son la sal de un ácido graso.
¿Cómo se pueden obtener los jabones?
Se puede obtener jabon basada en la reacción de saponificación, que consiste en hacer
reaccionar una grasa, ya sea sebo o aceite, con una base fuerte, ordinariamente hidróxido de
sodio (NaOH), también llamada sosa caustica.
Mediante el proceso de saponificación, siendo una hidrólisis de un ácido graso que tiene lugar
en medio alcalino y se realiza con NaOH o con KOH
¿Por qué en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?
Porque la glicerina no es liposoluble
Porque en la saponificación, se utilizan grasas y estas están compuestas por ácidos grasos y
glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de sodio de los ácidos
grasos (el jabón ), por lo tanto, en la fase acuosa quedara el alcohol (glicerina) como
subproducto de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua, por lo
que no hay razón para que no esté presente en esta forma.

¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrólisis de las grasas?


La enzima lipasa gástrica, en el estomago
La enzima lipasa bucal, en la boca
La enzima lipasa pancreática, en el intestino delgado

Indica lo que ocurre con las mezcla aceite – sudan III y aceite-tinta y explica a qué se debe
la diferencia entre ambos resultados.
Cuando se mescla el aceite con el sudan III, todo el aceite se tiñe de rojo puesto que es un
colorante lipofilico ósea que es soluble en grasas y debido a esa afinidad se utiliza para revelar
la presencia de grasa. Pero la tinta roja no es soluble en grasas, por esa razón, el aceite no se
tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no se mesclan, y la tinta se deposita en el fondo
¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de
reposo? ¿Y con la de los otros compuestos empleados? ¿A qué se deben las
diferencias observadas entre ambas emulsiones?

Al pasar unos minutos de reposo, esa emulsión desaparece por la reagrupación de las gotitas
de grasas en una capa, que por ser menos densa, se sitúa sobre el agua, de mayor densidad.
Aparece una disolución homogénea, puesto que el aceite se disuelve en el benceno, sustancia
orgánica y apolar al igual que el aceite. Por la solubilidad de las grasas, insoluble en agua y
por lo tanto no se mescla con ella, y soluble en disolventes apolares como él.

¿Qué ocurre con la emulsión cuando se le añade detergente?


Se habrá conseguido mezclar dos sustancias inmiscibles en una emulsión
Al añadir el detergente y agitar se forman esferitas de aceite. Las esferitas no se unen unas a
otras, sino que permanecen separadas gracias al emulgente que las rodea, quedando
repartidas en el agua de manera prácticamente homogénea. La forma esférica se debe a que
el extremo hidrófilo de la molécula de detergente está cargado negativamente. Las cargas del
mismo signo se repelen y para estar lo más lejos posible unas de otras se colocan dando lugar
a una esfera.
Materiales y Métodos
Los principales materiales que se utilizaran en las realizaciones de las prácticas son Tubos
de ensayo de 140mm*14mm, Gradilla, Pinza para tubos, Pipetas Pauster con bulbo, Beaker
o vasos de precipitados de 500ml, Estufa, Cámara de Flujo Laminas, Pipetas de vidrio de
0,5ml, 1ml,5ml y 10ml, pera de gomas para pipetas
Algunos reactivos son Reactivo de Ninhidrina, Hopkins-Cole, Millon, Biuret, Xantoproteica,
Sakaguchi, Bradford, Seliwanof, Lugol, Fehling, Benedict, Barfoed, entre otros
Algunas precauciones que se deben tener con estos reactivos son: Almacenamiento, Guarde
en un envase cerrado herméticamente, almacene en un área fresca, seca y bien ventilada.
Proteja contra los danos físicos. Aísle de las sustancias incompatibles. Los recipientes de este
material pueden ser peligrosos al vaciarse puesto que retienen residuos del producto (polvo,
sólidos); observe todas las advertencias y precauciones listada para el producto.
Desecho, Lo que no pueda salvarse para recuperar o reciclar debe manejarse en una
instalación de eliminación de residuos, aprobada y apropiada. El procesamiento, utilización
o contaminación de estos productos puede cambiar las opciones de administración de
residuos. Las regulaciones de eliminación local o estatal pueden diferir de las regulaciones
de eliminaciones federales.
Deseche el envase y el contenido no usado con los requerimientos federales, estables y
locales.
Plan de trabajo

El Tutor encargado de la práctica de laboratorio de bioquímica es el Profesor


Fredy Alexander Sánchez. La práctica se realizara el domingo 12 de mayo en Acacías (Meta),
en el Laboratorio de la UNAD.
Se debe tener en cuenta en concepto de bioseguridad, que es el conjunto de medidas
preventivas, destinadas a mantener el control de factores de riesgo laborales procedentes de
agentes biológicos, físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos,
asegurando que el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atenten contra la
salud y seguridad de trabajadores, estudiantes y docentes que se encuentren en los
laboratorios.
“Todos los residuos y sus fluidos corporales independientemente de su procedencia o motivo
por el cual haya ingresado deberán ser considerados como potencialmente infectantes, por lo
tanto se debe tener las precauciones evitar accidentes”.

Estas son algunas normas principales

1. Maneje todo material como potencialmente infectante.


2. Cualquier accidente por pequeño que sea, debe comunicarse al docente responsable de la
práctica o al laboratorista.
3. Todo el personal que desarrolle su labor en ambientes que tengan contacto, tanto directo
como indirecto, con la sangre u otros fluidos biológicos de otras personas infectadas o en los
cuáles se desconoce si están enfermas o portadoras de algún microorganismos que puede ser
prevenible por vacunación, deberá vacunarse.
4. El equipo de protección personal será usado en los laboratorios donde se lleven a cabo
trabajos de experimentación, será para estudiantes, docentes y laboratoristas.
5. Ninguna persona podrá permanecer en el laboratorio si le falta alguno de los implementos
antes descritos y no se admitirá a nadie que llegue extraoficialmente de visita, sin previa
autorización del docente o laboratorista.
6. Antes de iniciar la tarea diaria asegúrese que la piel de sus manos no presente cortes o
lesiones, si es así, cubra la herida de manera conveniente antes de colocarse los guantes.
7. Usar guantes de látex de buena calidad para todo manejo de material biológico o donde
exista el riesgo de exposición de fluidos corporales.
8. Usar guantes de nitrilo de buena calidad para el manejo de sustancias químicas.
9. Cambiar los guantes cada vez que hayan sido contaminados, lavarse las manos y ponerse
guantes limpios.
10. No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas por riesgo de contaminación.
11. No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los
guantes puestos.
12. Todos los procedimientos deberán ser realizados de manera tal que sea
nula la creación de gotas, salpicaduras, etc.
13. Bajo ninguna circunstancia se pipeteará sustancia alguna con la boca, para
ello se usarán pipeteadores o dispositivos de pipeteado.
14. Las superficies del área de trabajo deberán ser descontaminadas al iniciar y al terminar
las actividades. Usando para tal efecto una solución de hipoclorito de sodio en concentración
adecuada.
15. Lavar las manos con jabón (líquido o sólido suspendido) y agua inmediatamente después
que el trabajo haya sido terminado.
16. No guarde alimentos, en las neveras ni en los equipos de refrigeración de sustancias
contaminantes o químicos.
17. Una vez usados los guantes deberán ser colocados dentro del recipiente adecuado (Bolsa
color rojo, debidamente rotulado).
18. El desecho de los fluidos orgánicos puede efectuarse por los lavados habituales una vez
que estos hayan sido convenientemente descontaminados.
19. En caso de ruptura de material de vidrio contaminado con cultivos microbianos, sangre
u otro líquido corporal, los vidrios deben recogerse con escoba, recogedor y guantes de goma,
nunca con las manos.
20. El uso de agujas, jeringas y cualquier otro instrumento similar deberá ser restringido a su
uso indispensable. Las agujas y otros elementos punzantes deberán ser descartados en un
recipiente resistente (guardián). Se deberán evitar los intentos de reintroducir las agujas
descartadas en capuchones o de romperlas o doblarlas ya que esta conducta produce aumento
de la posibilidad de accidentes por pinchazos o salpicaduras. No usar tijeras con puntas muy
agudas. Por ningún concepto las agujas volverán a taparse. El conjunto aguja-jeringa deberá
ser descartado en el recipiente destinado a tal fin.
21. Todas las sustancias, equipos, materiales, etc., deberán ser manejados con el máximo
cuidado, atendiendo a las indicaciones de los manuales de uso o de seguridad, según sea el
caso.
22. Queda prohibido arrojar desechos de sustancias al drenaje o por cualquier otro medio, sin
autorización del responsable.
23. En cada laboratorio deberá existir, de manera clara, visible y legible, la información
acerca de los teléfonos de emergencia a los cuales llamar en caso de requerido.
24. Por seguridad no se bebe colocar ningún tipo de objeto sobre los equipos.
25. Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso, en particular en los
pasillos del laboratorio.
26. Todos los aparatos con toma eléctrica deberán cumplir con las normativas
correspondientes. Nunca deberán utilizarse en zonas mal aisladas y expuestas a la humedad.
27. Las fuentes de calor (calentadores, termo bloques, etc.), sobre todo si alcanzan
temperaturas elevadas, deberán de estar señalizadas para evitar quemaduras accidentales.
28. Al conectar o desconectar cualquier equipo eléctrico las manos deben estar
completamente secas, los cables de los equipos deben estar en óptimas condiciones de no ser
así o lo utilice e infórmelo inmediatamente al laboratorista.
29. Deberá limpiarse cualquier aparato o instrumento de cualquier laboratorio que vaya a ser
sometido a reparación.
30. Usar solo el equipo asignado por el docente a cargo de la práctica en el laboratorio.
31. El uso de lentes de contacto y zapatos abiertos. (tipo sandalia) está prohibido en los
laboratorios.

Es indispensable presentarse al desarrollo del componente práctico, con la vestimenta


apropiada y cómoda, que facilite la movilidad para la actividad que se desarrolla en los
laboratorios. Debe cubrir áreas considerables de la piel con pantalones (jeans), blusas con
mangas, la bata y guantes.

Use calzado cerrado que cubra completamente el pie. El alumno debe portar en todo
momento Bata blanca de Laboratorio.
Nunca ingerir alimentos, beber o masticar chicle dentro del laboratorio, igualmente evitar
tocar partes del rostro y llevar las manos a la boca o introducir lapiceros u otros en boca nariz
y oídos.
Asistir puntualmente en la fecha y hora programada, igualmente al entrar a las instalaciones
del laboratorio se recomienda que se haga cuando esté presente el docente encargado de la
práctica, así como no ausentarse antes de terminar la práctica.
El área del laboratorio es exclusivamente para realizar el trabajo de la práctica; cualquier tipo
de acción social como cortejar, charlas ajenas a la práctica e igual que las bromas pueden
causar pérdida de tiempo y posibles incidentes de alta gravedad.
Describir los principales equipos, instrumentos y reactivos indicando las precauciones a
tener, así como describiendo la información relávate que permita el buen desarrollo de la
práctica.
Debe tener en cuenta para el desarrollo de la práctica

1. Es indispensable presentar el acta de matrícula y/o Carnet vigente para el ingreso al


laboratorio.

2. Usar siempre blusa blanca, limpia y en buen estado.


El uso de la bata es obligatorio al ingresar a cualquier laboratorio.

2. Queda prohibido a los estudiantes, profesores y personal administrativo fumar, consumir


alimentos o ingerir bebidas de todo tipo en los laboratorios en donde se realicen
experimentos.
3. El estudiante que se presente en estado de embriaguez o bajo la influencia de sustancias
psicoactivas en algún laboratorio, será sancionado conforme a los estatutos y reglamentos de
la Universidad.

4. Se prohíbe portar armas de cualquier clase en los laboratorios.


5. Está prohibido practicar cualquier tipo de juegos de azar en los laboratorios.
6. Está prohibido correr al interior del laboratorio con el fin de evitar posibles accidentes.

7. No se permite el ingreso de estudiantes a cualquiera de los laboratorios sin el uniforme


correspondiente al programa exceptuando los estudiantes de otras escuelas.

8. Habrá un horario estricto de entrada a las prácticas, un horario de descanso y un horario


de salida o terminación de prácticas.
9. Ningún estudiante podrá permanecer en los laboratorios fuera del tiempo establecido por
su horario de clases, salvo en los casos en que el profesor responsable o el laboratorista lo
autorice.

10. Se harán responsables de la pérdida de elementos y equipos de los laboratorios a los


estudiantes que se encuentren al momento de la práctica.

11. Las personas a quienes se sorprenda haciendo mal uso de equipos, materiales,
instalaciones o de las señalizaciones ubicadas para protección civil, propias en los
laboratorios serán sancionadas conforme al reglamento de la Universidad, según la gravedad
de la falta cometida.
12. Los docentes, estudiantes, empleados y demás miembros del personal de los laboratorios,
velarán por la protección del patrimonio de este.

13. Por respeto a sí mismos y a sus compañeros, así como a la comunidad Universitaria, las
parejas deben conservar una compostura decorosa y digna en los laboratorios.

14. Los estudiantes están obligados a guardar el mayor respeto, basado en la mutua tolerancia,
la cortesía y el espíritu de colaboración en los Laboratorios. Se considera como falta cualquier
actitud des obligante de un estudiante hacia sus compañeros y como sumamente grave
cualquier forma de agresión verbal o física hacia sus compañeros, docentes o trabajadores.

15. Está prohibido para estudiantes, docentes y personal administrativo el mal uso de los
extintores. En caso de ser sorprendido, la persona será sancionada según los reglamentos de
la Universidad.

16. La presencia de personas extrañas que atenten contra el normal funcionamiento de la


Universidad serán considerados infractores, por esta razón, se pondrán en disposición de las
autoridades judiciales.
NOMENCLATURA
Tabla 6Aminoácidos proteicos con nomenclatura clásica sistema de tres letras y sistema
de una sola letra, impuesto en genética molecular.

Nomenclatura

Una Tres Nombre


Clasificación
letra letras

A Ala Alanina

G Gly Glicina

I Ile Isoleucina Ae
Apolares alifáticos

L Leu Leucina Ae

V Val Valina

F Phe Fenilalanina Ae

Apolares aromáticos
W Trp Triptófano Ae

C Cys Cisteina
Apolares con azufre
M Met Metionina Ae

N Asn Asparagina

Q Gln Glutamina Polares alifáticos y sin


S Ser Serina carga

T Thr Treonina Ae

Y Tyr Tirosina Polar aromático y sin


carga

R Arg Arginina Polar con carga positiva


H His Histidina Ae

Lys Lisina

D Asp Ac. Aspártico o Aspartato


Polar con carga negativa
E Glu Ac. Glutamico o Glutamato

P Pro Prolina Iminoacido

Ae = Aminoácido esencial

REFERENCIAS
Tomado de: Manual de Prácticas de Laboratorio de bioquímica, Universidad Nacional
Autónoma de México

Reactivosmeyer.com.mx
http://reactivosmeyer.com.mx/pdf/reactivos/hds_1790.pdf

Quimicaweb.net
FDS Ficha de Datos de Seguridad
Quantyka.com.mx
http://www.quantyka.com.mx/catalogo/HDSM/R/251820.htm
ANEXO
REACTIVO DE BIURET
Uso de la sustancia o preparado:

Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina. Nocivo para los
organismos acuáticos

Indicaciones generales:

En caso de pérdida del conocimiento nunca dar a beber ni provocar el vómito.


Inhalación:
Trasladar a la persona al aire libre. En caso de que persista el malestar, pedir atención
médica.

Contacto con la piel:


Lavar abundantemente con agua. Quitarse las ropas contaminadas.

Ojos:
Lavar con agua abundante manteniendo los párpados abiertos. En caso de irritación, pedir
atención médica.

Ingestión:
Beber agua abundante. Provocar el vómito. Pedir atención médica.
No inhalar los vapores.

Precauciones para la protección del medio ambiente:


Prevenir la contaminación del suelo, aguas y desagües.

Métodos de recogida/limpieza:
Recoger con materiales absorbentes (Absorbente General Quantyka, Kieselguhr, etc.) o en
su defecto arena o tierra secas y depositar en contenedores para residuos para su posterior
eliminación de acuerdo con las normativas vigentes. Limpiar los restos con agua
abundante.

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