Fundamentos

de Asociaciones
Simbio1cas Planta-Microorganismos
La Filósfera
Alia Rodriguez Villate
alrodriguezvi@unal.edu.co
Berg et al., 2017
 Microorganismos en la Filósfera
•  Hábitat aéreo, de la planta, colonizado por
microorganismos denominados epífitos
•  La mayoría son bacterias 106 – 107 células/cm2
•  Las hojas son un hábitat enorme: el área
superficial de las hojas es 6.4 x 108 km2
•  Población mundial bacteriana en la filósfera 1026
células
•  Influyen muchos procesos de importancia global
y a nivel de plantas individuales
•  Comensalistas?
 Comunidades microbianas sobre las hojas
•  Son altamente diversas: diferentes géneros de bacterias,
hongos filamentosos (transitorios) , levaduras, algas y
algunas veces protozoas y nemátodos
•  Poblaciones de bacterias epífitas: difieren en tamaño entre
y dentro de las mismas especies de plantas, plantas
creciendo cerca, a lo largo de cortos periodos de 1empo y
entre etapas fenológicas de la planta
•  Debido a fluctuaciones en las condiciones `sicas y
nutricionales en la filósfera
•  Especie vegetal también influye la capacidad de carga
microbiana de la hoja: ej hojas de pepino y fríjol vs. hojas
de pastos y cereales
–  Por ejemplo hojas con cerosidad
 Diferencias con la rizósfera
•  Filósfera es muy diferente como ambiente en
sus caracterís1cas fisicoquímicas en
comparación con la rizósfera
•  Las bacterias pigmentadas dominan la
filósfera y son muy raras en la rizósfera. Por
qué?
•  Especies muy comunes en la rizósfera como
Rhizobium y Azospirillum no logran
establecerse
Filósfera de una planta de fríjol
•  Agregado de bacterias en verde
•  Hifa fúngica en naranja
•  Tricoma en blanco
•  Bacterias en las venas y uniones celulares en azul
•  Fondo rojo por autofluorescencia de cloroplastos
•  Microscopio confocal
•  Tinción BacLight

Lindow & Brandl, 2003

 Inventario: cul1vables Pseudomonas
syringae - y Erwinia (Pantoea)
•  Bacterias aeróbicas cul1vables: se cree que
poblaciones son dominadas por pocos géneros
•  Bacterias aeróbicas cul1vables: estudios en escala en
1empo y espacio
–  Arboles de olivas: diferentes estructuras de comunidad en
hojas de la misma edad en una misma etapa de creci/
–  Remolacha: hojas inmaduras (> diversidad), maduras y
senescentes (1,236 cepas bacterianas: 78 especies, 37
géneros iden1ficados, 12 géneros no iden1ficados)
–  Diversidad más baja: más cálido y seco
–  Diversidad más alta: más fresco y lluvioso
–  Más diversidad en hojas jóvenes que en hojas viejas
•  Independiente de cul1vo: 16S rRNA, 18S rRNA
Bringel & Couée, 2015
Superficie de la hoja: microhábitat
•  Fluctuaciones de temperatura y humedad rela1va, y
agua libre (lluvia y rocío)
•  Nutrientes: limitados
•  Como pocos este ambiente cambia rápida y
extremadamente en varias propiedades `sicas ej.
agua:
–  Humedad: capa laminar húmeda
–  Micro-hábitats en la hoja. En fitopatógenas se conoce que
viven en cámaras sub-estomá1cas. No se conocen
(tortuosos a pequeña escala) y son muy diferentes a gran
escala (humedad, radiación, etc.)
•  Ceras en la cukcula, estructuras cristalinas, formas,
etc. dependiendo de la especie vegetal, edad ..
Superficie de la hoja: microhábitat
•  Lixiviados de nutrientes (C y N): azúcares
(glucosa, fructosa y sacarosa)
•  Heterogéneamente distribuidos y un ambiente
oligótrofo /con limitaciones para el crecimiento y
ac1vidad metabólica y oasis con abundantes
nutrientes: se ha estudiado con bio-reporteros
•  Competencia y otras interacciones
•  Flujos de radiación UV: bacterias epifitas
pigmentadas (protección contra UV) ej.
Pseudomonas syringae (plásmidos inducibles –
transitorios- reparación de DNA mutagénico)
Verde: flujos de químicos de la planta
Gris: flujos de químicos microbianos
Ej: excreción, exudación, gutación, heridas, lavados o infliltraciones
Bacterias epífitas y
endófitas

Bringel & Couée, 2015

Modificación microbiana del hábitat de la hoja:
selección para superar las limitaciones
•  Alteración de las propiedades superficiales de la planta:
–  Solubilización y difusión de sustratos. Bacterias epífitas pueden
incrementar la permeabilidad de las hojas (cukcula es
hidrofóbica) produciendo surfactantes ej. En el 50% de
Pseudomonas
–  Biosurfactantes (tolaasin) incrementan la movilidad sobre la
superficie. P. tolaasi una toxina con propiedades surfactantes
–  Transporte de iones a través de la membrana celular de la
planta. Siringomicina P. syringae pv. syringae (solo en
pseudomonas):
•  Patógenas, formación de canales iónicos y lisis celular
•  No patogénicas, dispara liberación a bajo nivel de metabolitos de la
planta. Producción a nivel menor que el requerido para lisis celular
–  Producción de IAA (auxina vegetal): induce hiperplasia.
Ampliamente presente

 Modificación microbiana del hábitat
de la hoja
•  Modificaciones dependiendo de la densidad
celular:
–  Muchas bacterias epífitas viven en agregados grandes
de mezclas de especies e incluyen hongos
–  Pueden llegar a ser del 30-80% del total de la
población bacteriana en ciertas plantas
–  Ensamblajes más permanentes (como bio-películas)
se encuentran en hojas en el trópico o regiones
húmedas
–  Crucial para su sobrevivencia: EPS (polisacáridos
extracelulares) ej. disponibilidad de agua, ROS,
aumento de nutrientes, quorum-sensing (n-acyl
homoserin lactona)
A. Liberación de nutrientes a par1r de células de la
planta y dispersión de células bacterianas por la
producción de siringomicina (fito-toxina) ó
(surfactante)
B. Liberación de azúcares a par1r de la pared celular de la planta,
causada por secreción de auxinas (IAA-regulador del crecimiento
vegetal indol-3-ácido acé1co que es idén1ca a la producida por
la planta) por parte de las bacterias: es muy común en bacterias
de la filósfera

Aplicaciones foliares de Methylobacterium spp. Aumentó el rendimiento de soya

 C. Protección a estreses ambientales y ROS vía
producción de polisacáridos extracelulares (EPS) en
agregados bacterianos: es el mayor elemento en la
formación de agregados bacterianos (bio-películas)
Vorholt, 2012
Se puede u1lizar este conocimiento en
el control de fitopatógenos foliares?

•  Control biológico de enfermedades: el añublo de las flores en peros y

manzanos causado por la bacteria Erwinia amylovora
 Añublo de los peros y manzanos

Costo por control y

pérdidas: 100 millones de
dólares al año solo en Uso de an1bió1cos con cobre
E.E.U.U.
Problema también en Italia,
Alemania y Francia: grandes
productores de peras y
manzanas. Manejo con aplicaciones de estreptomicina o
Costo socio-económico inyectando a la planta con oxitetraciclina para
prevenir nuevas infecciones. Sin embargo, en
California y Washington se ha desarrollado
resistencia a estos an1bió1cos (por HGT).
Único manejo efec1vo la poda y remoción de
ramas afectadas
 Añublo de los peros y manzanos
•  Uso de bacterias no
fitopatógenas:
Pseudomonas fluorescens
A506 y Patoea
agglomerans
•  Inhibición de colonización
de Erwinia amylovora
•  Movilidad a flores no
inoculadas
•  Transferencia de
plásmidos de
Pseudomonas pu?da a P.
fluorescens