TÍTULO

ESTUDIO QUÍMICO Y BIOPROSPECCIÓN DE HONGOS DEL GÉNERO

GANODERMA DEL DEPARTAMENTO DE CÓRDOBA

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:

Algunas enfermedades infecciosas como la leishmaniasis, transmitidas por medio de

mosquitos como el mosquito flebótomo, son causa de muchas muertes, así como de pérdidas de
extremidades y daños complejos al organismo humano. Desde la antigüedad el ser humano ha
utilizado extractos de hongos y plantas con fines medicinales, el género Ganoderma se caracteriza
por tener una gran cantidad de cualidades curativas referentes a las infecciones, pero en realidad
no se han hecho los estudios necesarios para saber cómo están formados y cuáles son las ventajas
y eficiencia que dan sus extractos para el tratamiento de infecciones graves como la
leishmaniasis.

PREGUNTA PROBLEMA:

¿Cómo y qué permite a los hongos del género Ganoderma tener la capacidad
antiparasitaria y antitumoral a través de sus extractos, y qué compuestos tienen presentes
en su estructura?

OBJETIVOS:

OBJETIVO GENERAL

 Realizar un estudio químico y de bioprospección de especies silvestres de hongos

del género Ganoderma, como aporte al conocimiento de los productos naturales
en el departamento de Córdoba.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Aislar los metabolitos secundarios mayoritarios de los extractos etanólicos de los

especímenes estudiados, a través de técnicas cromatográficas como,
Cromatografía en Columna (CC), Cromatografía en Capa Delgada (CCD) y
Cromatografía en Capa Delgada Preparativa (CCDP).
 Determinar la estructura química de algunos de los metabolitos secundarios
aislados, mediante el uso de técnicas instrumentales, como Cromatografía de
 Gases de Alta Resolución Acoplada a Espectrometría de Masas (CGAR-EM) y
Resonancia Magnética Nuclear (RMN 1H y 13C).
 Evaluar las actividades Antioxidante, Antibacteriana, Leishmanicida y
Citotóxica de los extractos etanólicos obtenidos a partir de los diferentes
especímenes estudiados.

MARCO TEORICO

2.1 ESTUDIOS. QUÍMICOS DE ESPECIES DEL GÉNERO Ganoderma

Desde la antigüedad en la medicina tradicional de Oriente, hasta los tiempos modernos,

los hongos pertenecientes al género Ganoderma se han utilizado para el tratamiento y la
prevención de diversas enfermedades como cáncer, hipertensión y diabetes, entre muchas
otras afecciones (Kao, 2013; Paterson, 2006). Así, a partir de los cuerpos fructíferos,
micelio y esporas de diferentes especies de Ganoderma se han aislado más de 140
triterpenoides biológicamente activos y 200 polisacáridos, al igual que proteínas y otros
metabolitos diversos (Trigos, 2011).

Esta amplia gama de metabolitos secundarios es debida principalmente a que los hongos
son incapaces de sintetizar macromoléculas a partir del dióxido de carbono y la energía
procedente de la luz por el hecho de no poseer clorofila, por lo tanto, su biogénesis está
condicionada principalmente por el tipo de nutrientes que estén en el substrato donde se
desarrollan además de las condiciones climáticas que los rodean, haciendo que hongos
presentes en regiones diferentes o que crezcan en substratos que varíen en composición,
puedan alterar y cambiar su metabolismo generando una amplia variedad de compuestos
químicos con diversas estructuras (Erkel, 2009; Zhen, 2013).

METODOLOGÍA

Cuatro especímenes del género Ganoderma; Ganoderma sp. 1, Ganoderma sp. 2,

Ganoderma sp. 3 y Ganoderma sp. 4 creciendo sobre diferentes sustratos: Inga edulix
Delonix regia, Tamarindus indica y Samanea saman fueron recolectados en diferentes
lugares del departamento de Córdoba. Una muestra micológica de cada organismo está
depositada en la colección de hongos de la Universidad Tecnológica del Chocó “Diego
Luis Córdoba”. Se utilizó Cromatografía en Columna, Cromatografía en Capa Delgada,
Lámpara Ultravioleta, Rotavaporador, Espectrofotómetro UV/VIS y Cromatografía de Gases
de Alta Resolución Acoplada a Espectrometría de masas.

HALLAZGOS
Se reportan compuestos lipídicos de cuatro especímenes de hongos pertenecientes al
género Ganoderma, de los cuales fue posible identificar 91 compuestos, a través de
Cromatografía de Gases de Alta Resolución Acoplada a Espectrometría de Masas
(CGAR-EM). Dentro de estos metabolitos se encuentran 85 ácidos grasos y 6 compuestos
esteroidales. En el caso de los ácidos grasos se observó una gran diversidad estructural,
caracterizada por ácidos grasos saturados e insaturados de cadena lineal o ramificada.
Para los esteroles el ergosterol resultó como el compuesto mayoritario, dado que se
encuentra formando parte las paredes celulares en los hongos macromicetos. Además, en
este estudio se reporta el aislamiento de un compuesto triterpenoidal conocido como
Ganoderona A (5α-Lanosta-8,24-dien-26-hidroxi-3,7-diona), a partir del basidioma de
Ganoderma sp. 2 que creció en Delonix regia y fue elucidado utilizando técnicas
espectroscópicas como Resonancia Magnética Nuclear (RMN 1H y 13C) y CGAR-EM.
Además, en la evaluación de la actividad Leishmanicida y Citotóxica sobresale el extracto
etanólico de Ganoderma sp. 1 Inga edulix, ya que presenta valores de CL50 (μg/ml)
(citotóxidad) y de porcentaje de inhibición (Leishmanicida) de 39.1 μg/ml ± 0.5 y 33.8% ±
0.4 respectivamente, resultados aceptables si se les compara con las del control 2 positivo
anfotericina B que presenta valores de 38.6 μg/ml ± 0.2 y 62.7% ± 1.4. Por lo que dicho
extracto se constituye con potencialidad antiparasitaria y antitumoral.
RESULTADOS

MASAS DE LOS EXTRACTOS Y FRACCIONES LIPÍDICAS OBTENIDAS

A partir de 200 g de material fúngico fueron obtenidos los extractos etanólicos y las
fracciones lipídicas (ácidos grasos y esteroles) de los diferentes especímenes estudiados. Las
masas de estos aparecen reportadas en la tabla 2 y se tomaron una muestra de cada uno de
los extractos totales para la realización de las actividades antioxidante, antibacteriana,
leishmanicida y citotóxica.

Elucidación estructural de los compuestos aislados de Ganoderma sp. 1 (Sustrato: Inga

edulix)
Veinticinco compuestos se pudieron identificar a través del análisis por CGAR-EM de la
fracción de ésteres metílicos de ácidos grasos de Ganoderma sp. 1 (Sustrato: Inga edulix).
Los tiempos de retención están comprendidos entre 7.6 y 40.9 min, valores entre los que se
presentan diversas estructuras para estos metabolitos.

Elucidación estructural de los compuestos aislados de Ganoderma sp. 2 (Sustrato: Delonix

regia)
Diecinueve compuestos se pudieron identificar a través del análisis por CGAR-EM de la
fracción de ésteres metílicos de ácidos grasos de Ganoderma sp. 2 (Sustrato: Delonix regia).

Elucidación estructural de los compuestos aislados de Ganoderma sp. 3 (Sustrato:

Tamarindus indica)

Veintiún compuestos se pudieron identificar a través del análisis por CGAR-EM de la fracción
de ésteres metílicos de ácidos grasos de Ganoderma sp. 3 (Sustrato: Tamarindus indica).

Elucidación estructural de los compuestos aislados de Ganoderma sp. 4 (Sustrato:

Samanea saman)
Dieciocho compuestos se pudieron identificar a través del análisis por CGAR-EM de la
fracción de ésteres metílicos de ácidos grasos de Ganoderma sp. 4 (Sustrato: Samanea
saman).

CONCLUSIONES

El análisis por Cromatografía de Gases de Alta Resolución Acoplado a Espectrometría

de Masas (CGAR-EM) de las fracciones lipídicas de los diferentes organismos
estudiados, permitió la identificación de 85 ácidos grasos y 6 esteroles.

Las estructuras de los ácidos grasos elucidados corresponde a compuestos saturados de

cadena ramificada, saturados de cadena lineal y a compuestos con una, dos y hasta tres
insaturaciones. Para las fracciones de esteroles se observaron núcleos Δ7 y Δ5, 7, en
donde el ergosterol fue el compuesto mayoritario.

El espécimen del cual se identificaron la mayor cantidad de compuestos lipídicos fue

Ganoderma sp. 1 (Inga edulix) (25 ácidos grasos y 3 esteroles) y en el respectivo orden
descendente Ganoderma sp. 3 (Tamarindus indica) (22 ácidos grasos y 1 esterol),
Ganoderma sp. 2 (Delonix regia) (19 ácidos grasos y 1 esterol) y Ganoderma sp. 4
(Samanea saman) (19 ácidos grasos y 1 esterol).

En este estudio se realiza el segundo reporte de la Ganoderona A (5α-Lanosta-8,24dien-

26-hidroxi-3,7-diona, compuesto triterpenodial que de acuerdo con l bibliografía
consultada presenta actividad antiviral), siendo aislada de Ganoderma sp. 2 (Delonix
regia) e identificada a través de RMN de 1H y 13C principalmente. En todos los
organismos estudiados se evidenció la presencia de ácidos grasos de cadena
hidrocarbonada larga, a los cuales se les ha comprobado actividades antitumorales contra
varias líneas de células humanas cancerosas. Los valores fueron para Ganoderma sp. 1
(Inga edulix) 76 %, Ganoderma sp. 2 (Delonix regia) 78%, Ganoderma sp. 3 (Tamarindus
indica) 86.4 %y Ganoderma sp. 4 (Samanea saman) 73.7%. Además, también en este
estudio se muestra la presencia de ácidos grasos esenciales como el ácido linoleico (ácido
9,12-octadecadienoico). En este estudió se propone la identificación por espectrometría
de masas en todos los especímenes estudiados, de compuestos como el éster metílico del
ácido nonanodioco y el éster metílico del ácido 7-metil-6-hexadecenoico, metabolitos
secundarios que no se han reportado hasta el momento para especies de hongos del género
Ganoderma. La determinación del contenido de fenoles totales para los diferentes
organismos estudiados arrojó valores moderados, en especial para el extracto etanólico
de Ganoderma sp. 2 (Delonix regia) (37,989 ± 0,47 EAG/g) al ser evaluado a una
concentración de 100 ppm.

Al comparar los datos obtenidos para la capacidad antioxidante total, se observó que
los valores en ppm correspondientes a la metodología del radical catiónico ABTS+·
(39.660, 62.282, 43.137 y 30.367 mg/L) fueron mejores que los del radical DPPH·
(52.049, 85.625, 91.920 y 73,871 mg/L), en el respectivo orden para los extractos
etanólicos de Ganoderma sp. 1 (Inga edulix), Ganoderma sp. 2 (Delonix regia),
Ganoderma sp. 3 (Tamarindus indica) y Ganoderma sp. 4 (Samanea saman). Estos
resultados pueden originarse en que el primer radical responde a antioxidantes tanto de
naturaleza hidrofilica como lipofilica. Los resultados del método del radical DPPH·, el
radical catiónico ABTS+· y la determinación de los fenoles totales para los extractos
etanólicos, nos indican que estos hongos son una fuente promisoria de metabolitos
secundarios con una significativa actividad antioxidante, por lo cual se recomienda
continuar con el estudio de este tipo de organismos.

Los valores de la evaluación de la actividad citotóxica (39.1 µg/ml ± 0.5) y

leishmanicida (33.8% ± 0.4) para el extracto etanólico de Ganoderma sp. 1 (Inga edulix)
son de gran relevancia, dado que sugieren que este organismo tiene potencialidad
farmacológica de tipo antitumoral y leishmanicida, por lo tanto, se constituye como una
fuente promisoria en la búsqueda de nuevos compuestos con propiedades bioactivas.