27/08/2015
Tema IV: Espectrometría de masas
Sumario
Introducción. Fundamento. Espectros de
masas. Tipo de iones. Ion molecular.
Características generales
Provee información cuantitativa de analitos a niveles de
especificidad y sensibilidad difíciles de imaginar. Ej: En el rango de
attomole y zeptomole.
Permite estudiar la dinámica de las reacciones y la química de los
iones, provee datos sobre propiedades físicas (energía de
ionización, entalpía de reacción, etc).
Probablemente es la técnica analítica más versátil de las que
disponen los químicos. Varias áreas de la física, química, farmacia,
geología, cosmoquímica, ciencia forense, ciencia medioambiental
se benefician de la alta precisión y sensibilidad de esta técnica
instrumental.
Representación esquemática simple de un espectrómetro de masas.
Espectrometría de masas
Es una técnica analítica que mide las masas moleculares de
compuestos individuales y átomos, de forma precisa, al
convertirlos en iones cargados. A menudo permite deducir la
estructura de una molécula.
Principios básicos de la espectrometría de masas.
1. La ionización de la muestra que convierte al analito
(moléculas o átomos) en especies iónicas en fase gaseosa.
Requiere adicionar o remover un electrón o protón.
2. Separación y análisis de la masa de los iones moleculares y
sus fragmentos cargados sobre la base de su relación m/z
(masa carga).
3. La corriente de iones separados se mide, amplifica y se
registra en forma de espectro
Partes fundamentales
• Sistema de introducción de la muestra. Transfiere una
muestra dentro de la fuente iónica y debe mantener la
integridad de la muestra durante la transferencia.
• Fuente iónica. Convierte la muestra de moléculas neutras en
iones en fase gaseosa. Existen varias técnicas de ionización.
• Analizador de masas. Separa y analiza las masas de las
especies iónicas. Ej: Sector magnético, cuadrupolo, tiempo de
vuelo, etc.
• Detector. Mide y amplifica la corriente de iones de los iones
separados.
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Continuación Modos de ionización

• Sistema de datos. Registra, procesa, almacena y muestra • Ionización electrónica

los datos de una forma fácilmente reconocible.

• Sistema de vacío. Mantiene una muy baja presión en el

espectrómetro. La región de la fuente de iones es usualmente
mantenida entre 10-4 a 10-8 torr y de 10-8 torr en el analizador
de masas.

• Parte electrónica. Controla la operación de varias

unidades.

Modos de ionización Modos de ionización

Ionización química. Ej: Metano
•Ionización electrónica (15 y 70 eV)
• Formación del ion-radical

CH4 + e CH4 + 2e

• Fragmentación del ion-radical

CH4 CH3 + H

• Reacciones con otras moléculas de metano

CH4 + CH4 CH5 + CH3

CH3 + CH4 C2H5 + H2

Modos de ionización Modos de ionización

Ionización química. Ej: Metano Bombardeo de átomos rápidos

• Las moléculas de la muestra M reaccionarán en su mayor parte

adquiriendo un protón en una reacción del tipo ácido-base si la afinidad
protónica de M es mayor que la del metano:

M + CH5 MH + CH4

• En moléculas que contienen heteroátomos, la reacción de ionización

principal ocurre a través de una reacción ácido-base como la antes
mostrada.
• Para el caso de hidrocarburos
RH + CH5 R + CH4 + H2
Ar .+(rápido) + Ar (lento) ------------> Ar .+( (lento) + Ar ( rápido)
• En el caso de las moléculas polares también de forman iones aductos
Matrices: Glicerina, tioglicerol, polietilenglicol, etc.
M + CH3 (M +CH3)

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Modos de ionización Resumen de algunas fuentes de ionización

Ionización por electronebulización (ESI)

Ventajas de la espectrometría de masas

• Provee una sensibilidad de detección ultra alta. En teoría la
EM tiene la habilidad de detectar una molécula; la detección
de moléculas en cantidades de attomole y zeptomole ha sido
demostrada.
• Versatilidad sin paralelo para determinar estructuras de
muchas clases de compuestos.
• Aplicable a todos los elementos.
• Provee una especificidad molecular única debido a su
habilidad para medir masas moleculares de forma precisa.
• Aplicable a todos los tipos de muestras: volátiles o no
volátiles, polares o no polares y materiales sólidos, líquidos y
gaseosos.
• En combinación con servicios de separación de alta
resolución es la más calificada para analizar mezclas
complejas. Ej: CG/EM, CLAR/EM

Masas exactas de los isótopos de algunos elementos comunes

• Tipos de iones

+
m1
I o n iz a c ió n
+
M u e s tr a I o n m o le c u la r m2

+
m3

Ion molecular : Se genera por la pérdida de un electrón. Permite inferir la masa

molecular.
Iones fragmentos: Se originan por fragmentación del ion molecular y se
corresponden con la estructura del compuesto.
Iones isotópicos: Asociados a la presencia de isótopos. [M+1]+, [M+2]+, etc.
Otros tipos (iones aductos)

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Características del ion molecular

•Debe ser el ion más abundante en el grupo de masas altas.
Identificación del ion molecular.
Muchas veces es cierto pero hay excepciones. Ej: compuestos con
• Es el paso más crítico para identificar un compuesto dos átomos de Br.
orgánico.
• Provee la masa molecular y la composición elemental del
compuesto.
• Este proceso se puede acomplejar con la presencia de
interferencias y por la no aparición del mismo. Ej. Moléculas
muy lábiles.

Abundancia de los iones en compuestos con cloro y bromo

• Debe ser un valor de m/z par excepto que el compuesto

Abundancia de los picos isotópicos (%) para contenga un número impar de nitrógenos. (Se cumple en
combinaciones con cloro y bromo compuestos donde tanto la masa como el número atómico son
pares o impares) Ej: H, C, O, S, Si, P, F, Cl, Br, I.

Pérdidas neutras más comunes

••Debe proveer explicaciones lógicas para pérdidas neutras. Ej:

(M-1)+, (M-2)+ e inclusive (M-3)+ debido a pérdida de H, H2 y
H+H2, son razonables.

• Igualmente la pérdida de 15 (CH3), 16 (CH4), 17 (OH, NH3),

18 (H2O), etc. ( ver tabla )
Pérdidas de 4 a 14 y de 21 a 25 Da son inesperadas

• Debe ser el último pico en desaparecer al disminuir la energía

de ionización.

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Pérdidas neutras (Continuación)
El pico M+1 no debe ser muy grande y debe acomodar un número razonable
de átomos de carbono, de otra forma lo que se sospecha como M+1 es el ion
molecular. Ej. m/z 147 es el pico base en el espectro IE del ácido cinámico,
mientras el ion molecular es m/z 148 con un 70 % de abundancia relativa.
•

El espectro de masas
• Un gráfico donde se plotean los valores de m/z (sobre el eje de
las x) de todos los iones que alcanzan el detector contra su
abundancia (sobre el eje y).
• Usualmente se caracteriza por la región del ion molecular (ion
molecular más los iones satélites de isótopos pesados asociados).
• El ion más abundante se define como pico base y al que se le
asigna el 100% de abundancia de forma arbitraria.
• El espectro también puede ser presentado en formato de lista ,
donde se tabulan todos los valores de m/z de los iones contra la
abundancia.
• La información más importante que aporta es la masa molecular
del analito.

Masas atómicas y moleculares

La unidad de masa base del SI es el Kg pero es muy incómoda
para referirse a la masa de átomos y moléculas. Ej: La masa de
un átomo de carbono es 1,99266 X 10-26 Kg
La masa de átomos y moléculas se expresa en términos de la
unidad de masa atómica unificada (u). Por convenio
internacional la masa del 12C es definida como 12 y una u se
Ejemplo: Calcular la masa nominal y la masa exacta de la
acetofenona (C8H8O)
Masa nominal = (8 x 12) + (8 x 1) + (1 x 16)=120 u
Masa exacta = (8 x 12,000000) + (8 x 1,007825) + (1 x
15,994915) = 120,0575

define como la 1/12 parte de la masa de un átomo de 12C.

1 u = 1 Da = 1,6605402 X 10 -27 Kg

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Determinación de la masa molecular
Se realiza a través de la determinación de la masa del ion molecular
• Puede ser realizado a baja o alta resolución
• Baja resolución provee información de la masa nominal del analito
y su composición elemental puede ser determinada para compuestos
de baja peso molecular desde el patrón isotópico.
•Alta resolución provee la masa molecular exacta y desde esta la
composición elemental
Un valor aceptable de la masa medida debe estar dentro de 5 ppm de
la masa exacta.
p p m = m a s a e x a c ta - m a s a m e d id a 6
X 10
m a s a e x a c ta
• Valorar la abundancia del ion molecular. Se incrementa con
insaturaciones y número de anillos y decrece con la longitud de
la cadena y la ramificación. Aromáticos producen M+
abundantes
• Prestar atención a la apariencia general del espectro Ej.
Compuestos con cadenas largas alifáticas muestran patrones
típicos de hidrocarburos mientras los aromáticos producen
pocos iones pero abundantes.
• Reconocer pérdidas características de especies neutras desde
el ion molecular
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Pasos generales en la interpretación de un espectro de masas.
• Reconocer el ion molecular.
• Aplicar la regla del nitrógeno.
• Valorar el patrón de isótopos y determinar la composición
elemental. Si el ion molecular es de baja abundancia y falla el
análisis, se calcula la composición del ion fragmento próximo
abundante y se añade la composición de una pérdida neutra para
arribar a la composición de la molécula.
• Determinar el valor de IDH.
• Buscar series de iones de baja masa.
1. Una serie m/z 29, 43, 57, 71.. es indicativo de alcanos y cetonas
alifáticas.
2. Alquenos y cicloalcanos producirán una serie de iones de m/z 27, 41,
55, 69.
3. De forma similar, iones de m/z 30, 44, 58, 72 son producidos por aminas
de cadenas largas.
4. Iones de m/z 31, 45, 59, 73 sugieren alcoholes y éteres.
5. Una serie que contiene m/z 39, 51, 63 and 77 es la firma de un
compuesto que contiene el grupo fenilo.
6. Los iones de m/z 39, 51, 65 y 91 indican la presencia del grupo
bencílico.
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• Buscar iones abundantes en el espectro (ej. m/z 60, 74, 92;

estos iones se forman por perdidas de especies moleculares
neutras estables via reacciones de reordenamiento especificas • Buscar también iones específicos de algunas estructuras (ej: m/z
( Ej. McLafferty) o reacciones no especificas (Ej. pérdida de
agua) que pueden sugerir la presencia de un agrupamiento 77, 91, 93, 105, 127)
funcional.
• Deducir la estructura mediante las reglas de fragmentación.
• Buscar iones de masa par en el extremo de las masas bajas
del espectro (ej: m/z 30 , CH2-NH2+), la ausencia de los Debe ser capaz de justificar muchos de los picos del espectro
cuales indica que la molécula es de masa par. mediante procesos razonables.

Espectro de masas de la ciclohexanona por Ionización electrónica

IMPORTANTE
La apariencia de un espectro de masas puede cambiar
drásticamente con las condiciones experimentales.
En particular, con el modo de ionización
Ejemplo. Espectros de masas de la ciclohexanona. 98 Da

Espectro de masas por ionización química con metano