CICLO DE KREBS

1. Respiración Celular
a. CONCEPTO - ETAPAS
b. RENDIMIENTO ENERGÉTICO
2. Mitocondria
a. ESTRUCTURA
b. DISTRIBUCIÓN ENZIMÁTICA
c. PERMEABILIDAD
d. TRANSPORTADORES DE NADH + H+
3. Descarboxilación oxidativa del piruvato
a. COMPLEJO PIRUVATO DH
4. Ciclo de Krebs
a. FUNCIONES - INTERMEDIARIOS Y REACCIONES ANAPLERÓTICAS
5. Cadena Respiratoria
a. DISTRIBUCIÓN Y COMPOSICIÓN
b. MECANISMO DE ACCIÓN
c. INHIBIDORES
6. Oxidaciones Biológicas
a. REACCIONES REDOX
b. POTENCIAL REDOX
c. RADICALES LIBRES Y ANTIOXIDANTES
7. Fosforilación Oxidativa
a. TEORÍA QUIMIOSTÁTICA DE MITCHELL
b. INHIBIDORES Y DESACOPLANTES

1. Respiración Celular: Es un conjunto de procesos metabólicos que consiste en la

oxidación de compuestos para la obtención de energía en forma de ATP. El combustible
favorito de las células es la glucosa por ende la respiración celular comienza con el
proceso de glucolisis principalmente, aunque también se pueden oxidar otros
componentes y también pueden entrar a ciclo de Krebs
a. Etapas
1. Glucólisis.
2. Descarboxilación del Piruvato (se transforma ese
piruvato que se obtuvo en la glucolisis en Acetil Coa)
3. Ciclo de Krebs (El Acetil Coa ingresa a Ciclo de
Krebs)
4. Cadena transportadora de e- y Fosforilación
Oxidativa (Ingresan todos y cada uno de los NADH Y
FADH que se han obtenidos en los procesos previos a la
cadena transportadora de e-. Y finalmente ingresa a
Fosforilación Oxidativa que es el último complejo para
sintetizar ATP)
En la Respiración Aeróbica el aceptor final de electrones es el O2 que se reduce a H2O.
2. Mitocondria
a. Estructura
i. Membrana Externa Mitocondrial (Permeable)
1. Acil Coa Sintasa
2. Glicerolfosfato Aciltranferasa
ii. Espacio Intermembrana (No participan en la respiración)
1. Adenilil Cinasa
2. Creatina Cinasa
iii. Membrana Interna Mitocondrial (Selectivamente Permeable, algunos
atraviesan por Difusion Simple y otros necesitan de Transportadores o
lanzaderas)
1. Atp Sintasa
2. Complejos Enzimáticos De La Cadena Transportadora De
Electrones
iv. Matriz Mitocondrial
1. Enzimas Del Ciclo De Krebs
2. Enzimas De La Β – Oxidación
3. Complejo Piruvato Deshidrogenasa (Se encarga de la
Descarboxilación del Piruvato para obtener Acetil Coa)

b. Fuentes de Acetil Coa

2. β – OXIDACIÓN DE A.G

ÁCIDO GRASO
1. GLUCÓLISIS
PIRUVATO
COMPLEJO ACETIL COA
PIRUVATO
DESHIDROGEN
ACETIL COA 4. TRANSAMINACIÓN

3. CETÓLISIS AMINOÁCIDOS

CUERPO CETÓNICO
PIRUVATO

ACETIL COA
ACETIL COA
 1. De la glucolisis obtenemos Piruvato y por acción del complejo
piruvato deshidrogenasa se obtiene acetil coa
2. Proceso Oxidativo de los lípidos a partir de un A.G se puede
obtener Acetil Coa
3. Metabolismo de lípidos pero que no se da todo el tiempo, se
refiere a la degradación de cuerpo cetónico y se obtiene Acetil
coa
4. Metabolismo de Proteínas o AA. Muchos AA pueden ser
transformados en Piruvato y el Piruvato en Acetil Coa

3. Descarboxilación Oxidativa del Piruvato

 El Piruvato difunde hasta la matriz mitocondrial a través de un simportador de
protones.
 Se considera una ruta irreversible de la glucólisis. (Una vez que entre en la
mitocondria el no va a retornar al citosol)

Entonces tenemos el piruvato, la piruvato deshidrogenasa, las coenzimas, los cofactores, la

Coenzima A, Tenemos NAD+, Tpp (Tirofosfato de tiamina), lipoato, FAD. Con liberación de
NADH y finalmente se forma Acetil CoA con liberación de una molécula de CO2.
PIRUVATO + NAD+ + COA ACETIL COA + NADH + H+ + CO2
a. Piruvato DH
Esta compuesto por 3 enzimas (E1, E2 ,E3)
E1: Piruvato Deshidrogenasa
E2 Dihidrolipoil Transacetilasa
E3 Dihidrolipoil Deshidrogenasa
 b. Esas 3 enzimas están compuestas por 5 Coenzimas
COENZIMA COMPOSICIÓN FUNCIÓN UNIÓN

Pirofosfato Derivado de la Vit. B1 Transporta restos de E1

de Tiamina C
(PPT)

Ácido A.G de 8C Transporta y acepta E2

H
Lipóico

Coenzima A Contiene Vit. B5 Transporta y acepta -

(CoA) Acilos

FAD Contiene Vit. B2 Aceptor de H+ E3

NAD Contiene Vit. B3 Aceptor de H+ -

c. ¿Como ocurre la transformación?

 Tenemos el Piruvato en presencia de la PPT (Pirofosfato de Tiamina), la Piruvato
Deshidrogenasa elimina 1C y se obtiene Hidroxietilo + CO2
 Luego, La Dihidroxilipoil Transacetilasa hara transferencias de grupos acetilos y
una oxidación, utilizando acido lipoico y la CoA. Cuando ingresa acido lipoico
obtenemos Acetil Litoamida y al ingresar la CoA obtenemos Acetil CoA+
Dihidrolipoamida.
 El Acetil CoA ingresa a Ciclo de Krebs y la Dihidrolipoamida continua la reacción
con la enzima 3 que es la Dihidrolipoil Deshidrogenasa. En presencia de FAD
obtenemos FADH2 y NAD Obtenemos NADH+ + H+ Por procesos de Oxidacion y
Reducción. De aquí el FAD Y NAD pueden entrar a Ciclo de Krebs o Cadena
Transportadora de e-.
 d. Regulación del Complejo Piruvato DH
La regulación es a nivel de la enzima 1 Piruvato DH

Glucagón porque inhibe la Glucolisis

Insulina estimula la Glucolisis

4. Ciclo de Krebs
Se caracteriza por ser una Vía Metabólica de tipo Anfibólica. Tiene un proceso Catabólico
y al mismo tiempo un proceso Anabólico.
  Catabólica
o Se obtienen moléculas de energía, en forma de GTP y con poder reductor
 Anabólica: Sus intermediarios sirven como precursores para otras vías metabólicas
Ocurre a nivel de cualquier tejido y célula, excepto en los GR (No poseen mitocondrias,
la obtienen a través de la vía pentosa fosfato)
a. Catabolismo

Productos Enzima Reacciones Productos

Intermediarios

1. Acetil CoA (2C) Citrato sintasa En presencia de H20 Citrato (6C)

y liberación de CoA

2ª.Citrato (6C) Aconitasa Deshidratación CIS-Aconitato

2b. CIS-Aconitato Aconitasa Hidratación Isocitrato (6C)

Isocitrato (6C) Isocitrato DH Descarboxilación Αlfa-

oxidativa. Liberación Cetoglutarato
de NADH (5C)

3. Αlfa- Complejo Αlfa- Descarboxilación Succinil CoA

Cetoglutarato Cetoglutarato DH oxidativa. Liberación (4C)
de NADH

4. Succinil CoA Succinil CoA Fosforilación a nivel Succinato (4C)

(4C) sintetasa de sustrato. Se
obtiene GTP. Se
remueve la CoA

5. Succinato Succinato DH Deshidrogenación. Fumarato (4C)

(4C) Se libera FADH2

6. Fumarato (4C) Fumarasa Hidratación Malato (4C)

7. Malato (4C) Malato DH Deshidrogenación. Oxalacetato

Se libera NADH (4C)

8. Oxalacetato (4C) Condensación Acetil CoA (2C)

 b. Fosforilación a nivel de sustrato
La energía para producir ATP/GTP proviene de la reacción enzimática sobre el sustrato.
Basándonos en el Ciclo de Krebs tenemos que el Succinil CoA que por acción de la
Succinil CoA Sintetasa en presencia de H20 Y ATP, va a liberar GTP, Remueve la CoA y
se obtiene Succinato.
La energía va a provenir de la ruptura del enlace Tioester del Succinil CoA. (Su
hidrólisis es una reacción muy exergónica)

c. Produccion de Energia del Ciclo de Krebs

Por cada vuelta (1 Acetil CoA) del Ciclo de Krebs se producen 10 ATP
 3 NADH + H+ X 2,5 = 7,5 ATP
 1 FADH2 X 1,5 = 1,5 ATP
 1 GTP X 1,0 = 1 ATP
 De la glucolisis de una molécula de glucosa se obtienen 2 Piruvato y de cada piruvato
se obtiene 1 de acetil CoA, entonces que por cada glucolisis se obtienen 20 ATP

d. Catabolismo (enzimas)

 Reacciones Reversibles (5)

o Aconitasa
o Succinil Coa Sintetasa
o Succinato Dh
o Fumarasa
o Malato Dh
 Reacciones Irreversibles (3)
o Citrato Sintasa
o Isocitrato Dh
o Α- Cetoglutarato Dh
 Producción De Fadh2
o Succinato Dh
 Producción De Nadh+ + H+
o Isocitrato Dh
o Α- Cetoglutarato Dh
o Malato Dh
 Producción De Co2
o Isocitrato Dh
o Α- Cetoglutarato Dh
 Producción De Gtp
o Succinil Coa Sintetasa
Características de las enzimas del ciclo de Krebs
• Todas se encuentran en citosol, a excepción de la Succinato DH y α- Cetoglutarato
DH.
• Todas están en la matriz mitocondrial a excepción de la Succinato DH (membrana
interna mitocondrial).
COMPLEJO α- CETOGLUTARATO DESHIDROGENASA
Trabaja con 5 Coenzimas y 3 Enzimas
e. Reacciones Anapleroticas
Son aquellas que reponen los intermediarios del Ciclo de Krebs que a su vez se usan como
sustratos para otras vías metabólicas. (se ven con doble flecha)

 En primer lugar, tenemos la que es llevado por la Piruvato Carboxilasa ella el

piruvato lo va a convertir en oxalacetato
 Por medio de la PEP carboxiquinasa, se puede obtener Oxalacetato a partir de la
Fosfoenolpiruvato
 También se puede reponer oxalacetato a partir de un AA por transaminación
(Aspartato)
Se repone oxalacetato porque puede ser utilizado en vía gluconeogenica o para obtener AA
 A partir de Piruvato se puede obtener Malato por acción de la enzima málica
 A partir de Tirosina, Fenilanina se puede obtener Fumarato
 A partir de Isoleucina, Metionina, Valina se puede obtener Succinil CoA
 El Succinil CoA como se puede utilizar para obtener Porfirina se puede obtener por
Propionato de la B-Oxidacion de A.G.
 A partir de Glutamato se obtiene a-cetoglutarato, a partir de el también se pueden
producir AA
 El citrato se puede utilizar para producir Ácidos grasos
Reacción Anaplerótica (1), la llevada a cabo por la piruvato carboxilasa más importante a
nivel de hígado y riñón en mamíferos.
f. Anabolismo del ciclo de Krebs

 El citrato que se convierte en Acetil Coa por acción de la Citrato Liasa e ingresa en
Lipogénesis y Colesterolgénesis
 A-Cetoglutarato se utiliza para Sintetizar AA
 Succinil CoA se pueden sintetizar Porfirinas para obtener las Hemoproteinas y
Citocromos
 El oxalacetato, puede ser utilizar para síntesis de AA o entrar en vía
Gluconeogenica
e. Regulación del Ciclo de Krebs
1. Primer nivel: Disponibilidad de sustrato. Regula [Acetil COA] y de [Oxalacetato]

Regulación
2. Segundo Nivel: Regulación de enzimas de reacciones irreversibles dentro del propio ciclo
de Krebs.
 Citrato sintasa
o (-) NADH Y Succinil CoA
 Isocitrato DH
o (-) NADH Y ATP
o (+) ADP
 α- Cetoglutarato DH
o (+) Calcio
o (-) NADH, ATP, Succinil CoA y Arsénico (Sustancia externa al ciclo)
 Succinato DH
o (-) Malonato y Oxalacetato
 Malato DH
o (-) NADH
 Aconitasa
o (-) Fluoracetato de Sodio (externo)

g. Obtenemos 2 moléculas energéticas, dos con poder reductor y GTP

El destino del NADH Y FAHD2 es ingresar a cadena transportadora de e-
El destino del GTP puede ser utilizada como molecula energética o utilizada para
Sintetizar ATP
 Cadena Transportadora de Electrones
Vimos que en el ciclo de Krebs, nosotros
producimos NAD reducido (NADH) y FAD
reducido (FADH2) y que también otras
reacciones químicas que hemos estado viendo
de carbohidratos producen NADH y FADH2,
todas esas moléculas con poder reductor van
a ingresar a esta cadena, toda no solamente lo
que uno produce en ciclo de Krebs. Entonces
que es esta cadena transportadora nos marca
un sistema de complejos o conjunto de
complejos donde convergen los electrones
provenientes de los procesos catabólicos, en
forma de NADH + H+ y FADH2, dirigiéndolos a su aceptor final (O2). Este está constituido por 4 complejos se habrá de 5
pero básicamente son 4 complejos, Los electrones del NADH + H+ se transfieren a través de los Complejos I, III y IV, y los
electrones del FADH2 se transfieren a través de los Complejos II, III y IV.
En cuando a la cadena transportadora de electrones los componentes
principales de la cadena respiratoria están dispuestos en orden creciente de su
Potencial Redox (desde el más reducido al más oxidado).
Los electrones fluyen desde los
componentes más electronegativos
hacia el Oxígeno (más
electropositivo).

En esta cadena transportadora también van a tener complejos transportadores que son proteínas que poseen diversos
grupos prostéticos que aceptan y donan e-.
Moléculas capaces de transferir e-:
1. Ubiquinona o Coenzima Q: es una Benzoquinona hidrofóbica (polar).
2. Citocromos (B Y C): proteínas que tienen como Grupos prostéticos grupos Hemo (al igual que la Hb y la Mb).
3. Proteínas Sulfo-Férricas: que van a poseer centros (FE –S) hierro sulfurado.
NOTA: La Ubiquinona se considera una proteína transportadora pero (móvil) ella no es estática en el complejo y el
Citocromo C no forma parte de la membrana.

Complejo Subunidades Proteicas Cofactores

I. NADH-ubiquinona reductosa 1FMN
16-25
22-24 Fe-S en 5-8 centros
II. Succinato-ubiquinona reductasa 1 FAD
4 8 Fe-S en 3 centros
Citocromo b550
III. Ubiquinona-citocromo c reductasa 2 centros Fe-S Proteínas transpor-
Citocromo b552 tadoras de electro-
8
Citocromo b556 nes
Citocromo C1
IV. Citocromo c oxidasa Citocromo a
7 Citocromo a3
2 iones cobre
COMPLEJO I: NADH-UBIQUINONA OXIDORREDUCTASA
Complejo Enzimático NADH DH: cataliza oxidación del NADH y reducción de Coenzima Q.
Que ocurre, tenemos el NAD
reducido el ingresa al primer
complejo y libera 2 e-, estos
electrones pasan al FMN y luego al
Fe-S y finalmente a la coenzima Q,
mientras se hace este proceso de
óxido reducción por cada 2 NAD
reducido que ingresa al complejo I se
van a bombear espacio intermem-
brana 4 H+. La Coenzima Q reducida
difunde libremente a través de la
membrana y transfiere los e- al
Complejo III.
COMPLEJO II: SUCCINATO - UBIQUINONA REDUCTASA
Complejo Enzimático Succinato DH (Ciclo de Krebs): cataliza la
reducción de la coenzima FAD en estado oxidado.
Tenemos que la reaccion que se lleva acabo Succinato DH que
convierte el succinato en fumarato me va a liberar 2 e-, FAD en este
caso pasa a través del FAD, el FAD pasa de estado oxidado a estado
reducido luego pasa a través del complejo Fe-S y finalmente transfiere
los electrones a la Coenzima Q. Recibe los electrones de la oxidación
del FADH2 y los pasa a la Coenzima Q. No transfiere protones al
espacio intermembrana.
NOTA: este es el único complejo de la cadena respiratoria que por la
reducción de una molécula no va a bombear protones.
COENZIMA Q
Recepción de Electrones: Complejo I y II - Lanzadera Glicerol 3-P, Acil CoA DH
Transferencia de Electrones: Complejo III

Los electrones que ingresaron al complejo I y II se transfieren a la coenzima Q

que sabemos que es móvil. Entonces la coenzima Q va a recibir electrones del
complejo I y II en cuanto a la cadena respiratoria pero la coenzima Q también
puede recibir electrones ya sea de la lanzadera Glicerol 3-P, Acil CoA DH de la
reacción, aquí tenemos el complejo I y II, el glicerol 3-P citosólica que puede
ingresar una molécula de FAD, todas ellas transfieren electrones a la
coenzima Q y también de los ácidos grasos una vez que esa coenzima Q
recibió electrones de cualquiera de esas vías ella va a transferir al complejo III
Ubiquinona – Citocromo C Oxidorreductasa.

COMPLEJO III: UBIQUINONA - CITOCROMO C OXIDORREDUCTASA

Complejo Enzimático Citocromo C Reductasa: oxida la Coenzima Q
reducida y a su vez reduce el Citocromo C.

El paso de 2 e- desde la CO Q hasta el Citocromo C permite el

tránsito de 4 protones (H+) al espacio intermembrana. La coenzima
Q cede 1 e- a cada Citocromo C, los cuales transfieren los e- al
Complejo IV.
COMPLEJO IV: CITOCROMO C OXIDASA
Cataliza la reducción de la molécula de O2 hasta una molécula H2O.

CITOCROMO C (4E-)
El paso de 2 e- desde el Citocromo C hasta el O2
CITOCROMO A permite el tránsito de 2 protones (H+) al espacio
(Complejo IV) intermembrana.

O2 y finalmente 2 H+ + ½ O2 H2O
reacciona con los
protones y forma
una molécula de
H2O

Gradiente Electroquímico de la Cadena Respiratoria:

En el complejo I se va a bombear 4 H+.
El complejo II no bombea protones.
En el complejo III se va a bombear 4 H+ por cada 2 e-.
En el complejo IV por cada 2 e- bombea 2 H+.
En un total de 10 H+ (si es la molécula de Nano)
En un total de 6 H+ (si es la molécula de FAD)
Nota: Por eso es que la molécula de NAD produce más
ATP en comparación de las moléculas de FADH2.

Las fuentes de NADH + H+ reacciones del ciclo de Krebs, pero

sabemos que otras reacciones químicas pueden liberar estas
moléculas con poder reductor.
Por cada molécula de NADH + H+ que entra a la cadena respiratoria se generan 10 H+ al espacio intermembrana.
Por cada molécula de FADH2 que entra a la cadena respiratoria se generan 6 H+ al espacio intermembrana.

Fosforilación Oxidativa: Es la síntesis de ATP a partir de

ADP y Pi (Fosfato inorgánico) por acción de la ATP
Sintasa (Complejo V) pero la energía va a provenir de un
gradiente electroquímico, son los protones en el espacio
intermembrano (es con respecto a la energía necesaria).

Teoría Quimiostática de Mitchell: establece que los H+

liberados al espacio intermembrana por los complejos
de la cadena respiratoria generan un gradiente
electroquímico denominado fuerza protón-motriz, la
cual es aprovechada por la ATP Sintasa.
Ejemplo: ATP sintasa tiene una especie de motor y él va
arrancar gracias a la entrada de protones por eso se le
denomina fuerza protón- motriz, si ellas no están presentas
la ATP sintasa no se activa se puede decir o complejo V,
entonces aquí vemos como la despolarización, de la
membrana, vemos las cargas positivas y negativas lo que es
la matriz hay menor concentración de H+ por lo tanto tiende
a hacer un pH ácido y el potencial eléctrico negativo, y lo
que es en el espacio intermembrana hay mayor concen-
tración de H+ por eso que fueron bombeados por lo tanto
el pH se hace más básico y el potencial eléctrico positivo.
Complejo V o ATP Sintasa: está constituido por 9 cadenas polipeptídicas y 2 subunidades F0 y F1. Va a tener una especie
de transportador que es el fosfato translocasa que permite la
entrada de fosforo inorgánico a la matriz en conjunto de 1
protón, y tiene otro transportador también que es Adenosina
nucleótido translocasa que permite la entrada de ADP a la
matriz con salida de ATP. La entrada de 3H+ impulsa un giro
(rotar) en F0 para que F1 pueda sintetizar ATP.
Tiene una unidad catalítica que es ATP sintasa y una unidad
bombeadora de H+.

NOTA: lo importante es que tiene 5 subunidades,

un acoplamiento y que son de la familia NTPasas.
Fosforilación Oxidativa:
Producción de ATP por acción de la ATP sintasa, utilizando la energía proveniente de la fuerza protón-motriz.

En esta se ve la diferencia de la fosforilación

a nivel de sustrato, el paso de electrones, el
gradiente y finalmente ingresan esos
protones generados por la transferencia de
electrones y gira ese motor de la ATP sintasa
y se produce ATP que es lo que se necesita.

Inhibidores de la cadena respiratoria y de la Fosforilación Oxidativa: pueden tener algunas moléculas que inhiban estas
reacciones, como por ejemplo.
Zona Inhibida Inhibidor Mecanismo de Acción
Rotenona (insecticida)
Bloquean la transferencia de electrones desde el Fe-S
Complejo I Amobarbital (fármaco)
hacia la coenzima Q
Piericidina A (antibiótico)
Complejo II Malonato Inhibido competitivo de la succinato deshidrogenasa
Antimicina A (antibiótico)
Bloquean la transferencia de electrones desde el
Complejo III Dimercaprol (quelante)
citocromo B al citocromo C
Mixotiazol (fungicida)
Cianuro (cn)
Complejo IV Inhiben a la citocromo oxidasa
Azida de Na-CO-H2S
Oligomicina (antibiótico)
Complejo V o Bloquea el flujo de H+ a través de F0
Atractilosido (glucósido en
ATP Sintasa Inhibe al transportador fosfato translocasa
plantas)
Muchos fármacos pueden inhibir lo que es cadena respiratoria por eso es que los tratamientos a largo plazo de antibióticos
y ciertos barbitúricos son monitoreados y ocasionan problemas a nivel de piel, por lo general ellos no bloquean en su
totalidad porque el organismo siempre busca manera de que la respiración celular se dé, por eso es que las
concentraciones de esos fármacos se monitorean, como lo monitorean más que todo empiezan a monitorear la parte
hepática, se mandan hacer marcadores hepáticos (cuando uno ve que esas enzimas empiezan a aumentar mucho), se
supone que las reacciones enzimáticas están aumentadas, entonces los radicales van aumentarse y ocasionan esos
efectos.

Desacoplantes de la Fosforilación Oxidativa: los desacoplantes no son más que sustancias de carácter anfipático (parte
polar y no polar) que van a desacoplar la cadena respiratoria de la fosforilación oxidativa (no va a permitir que esa cadena
respiratoria se conecte con la fosforilación oxidativa). Los desacoplantes son: 2, 4 Dinitrofenol y la Termogenina (tejido
adiposo pardo en recién nacidos).

¿Cómo van a desacoplar?: el 2, 4 Dinitrofenol y la Termogenina cuando están presentes o aumentan su concentración, lo
que van a hacer es disminuir el gradiente electroquímico en el espacio intermembrana y lo desvía de la ATP sintasa (se
desvían esos protones, se hace aumentando la permeabilidad de la membrana interna de la mitocondria a los protones).
Estas 2 sustancias el 2, 4 Dinitrofenol y la Termogenina aumentan la permeabilidad de esa membrana interna a los
protones y se liberan, y si se liberan del espacio intermembrana no se va a generar la fuerza protón-matriz y sin esa fuerza
protón-matriz la ATP sintasa no puede sintetizar ATP, entonces se corta esa comunicación de la cadena respiratoria en la
fosforilacion oxidativa.