Análisis del tamaño de partículas en la industria farmacéutica: principios,

métodos y aplicaciones

Abstracto
Las propiedades fisicoquímicas y biofarmacéuticas de las sustancias farmacológicas y las
formas de dosificación pueden verse muy afectadas por el tamaño de partícula, un
parámetro de proceso crítico en la producción farmacéutica. El problema fundamental con
el análisis de tamaño de partícula es la variedad de diámetros de partícula equivalentes
generados por diferentes métodos, que es en gran parte atribuible a la forma de la partícula
y al mecanismo de dispersión de partículas involucrado. Por lo tanto, para permitir la
selección de la técnica de dimensionamiento más apropiada u óptima, se puede requerir una
correlación cruzada entre diferentes técnicas. Esta revisión ofrece una discusión en
profundidad sobre el análisis de tamaño de partículas relacionado con aplicaciones
farmacéuticas específicas y aspectos regulatorios, principios y terminología fundamentales,
tipos de instrumentos, presentación e interpretación de datos, tecnología analítica en línea y
de procesos. A modo ilustrativo, se presta especial atención al análisis de aerosoles
utilizando mediciones del tiempo de vuelo y el impactador en cascada, que es respaldado
por un análisis computacional realizado para esta revisión.

PALABRAS CLAVE: diámetro aerodinámico; aerosoles; aglomeración; dispersión; micro

y nanosuspensiones; impactador; inhalador; PALMADITA; distribución de tamaño de
partícula; polvos; suministro de drogas respiratorias; forma; tabletas.

INTRODUCCIÓN

Partículas de ingredientes farmacéuticos activos y no activos existen en la mayoría de los

productos farmacéuticos como polvos secos, dispersiones líquidas y semisólidas que van
desde nanocoloides hasta gránulos de tamaño milimétrico, dependiendo de la forma de
dosificación y la vía de administración (Fig. 1). El tamaño de partícula y la forma puede
influir en una gran variedad de propiedades físicas importantes, procesabilidad de
fabricación y atributos de calidad, que incluyen:

& Velocidad de disolución y biodisponibilidad de ingredientes farmacéuticos activos.

& Tasa de liberación de medicamento para formulaciones de liberación sostenida y

controlada.

& Distribución y deposición in vivo de partículas, velocidad de absorción y tiempo de

eliminación, especialmente para aerosoles y diferentes sistemas coloidales diseñados para
la administración dirigida de fármacos.
& Contenido y uniformidad de dosis y otras propiedades relacionadas con la estabilidad
fisicoquímica.

& Comportamiento de aerosoles y rendimiento de formulaciones respiratorias.

& Propiedades de flujo y empaque, mezcla y segregación de polvos, características

reológicas de formulaciones líquidas y semisólidas.

& BGritidez ^ de partículas sólidas en tabletas masticables, ungüentos dérmicos, cremas e

irritabilidad de preparaciones oftálmicas.

Estas propiedades finalmente afectan la seguridad y eficacia de los medicamentos. El

surgimiento de una gama de nuevas tecnologías de ingeniería de partículas y la
disponibilidad de nuevos y sofisticados métodos de caracterización permiten considerar el
Bdesign con un primer intento de partículas con características y funciones fisicoquímicas
personalizadas. También se reconoce la importancia del control de calidad, la coherencia
del proceso y la economía, incluso en procesos de fabricación más tradicionales (2). El
objetivo del análisis del tamaño de partícula es obtener datos cuantitativos sobre el tamaño
medio, la distribución del tamaño de partícula (PSD) y la forma de los compuestos que se
utilizarán en la formulación farmacéutica. El análisis de tamaño de partícula también se
requiere para asegurar la calidad de las formas de dosis final y los sistemas de entrega de
drogas. Además, ha habido un mayor interés en incorporar instrumentación de tamaño de
partícula en el monitoreo y control del proceso, incluidas las unidades de producción
automatizadas. Sin embargo, la inconsistencia de datos entre diferentes métodos, o incluso
entre instrumentos similares de diferentes marcas de fabricantes, hace que validar el GLP y
cGMP sea muy difícil (2Y5). En el informe del taller AAPS sobre el análisis de tamaño de
partícula (2), se enfatiza que la diversidad de tratamientos de partículas, métodos de análisis
de tamaño de partícula, expresión e interpretación de datos y aplicaciones de proceso
resulta en criterios
complicados ya
veces

confusos para
selección, adopción,
o relevancia de las
técnicas disponibles.
Hay aspectos
metodológicos fundamentales relacionados con Bwhat que se está midiendo, pero también
desafíos específicos para el análisis farmacéutico, como se detalla a continuación:

& Requerimientos para un nuevo desarrollo de método basado en la forma física del
medicamento específico y la aplicación prevista de entrega del medicamento.

& Cantidades de muestra limitadas, especialmente en la etapa temprana de desarrollo de

medicamentos.

& Forma muy no esférica de muchos productos farmacéuticos que conducen a la

interpretación de datos complejos.

& Aglomeración, inestabilidad y otros cambios físicos que ocurren durante las mediciones.

& Necesidad de desarrollar métodos especializados para el control de calidad, por ejemplo,
en las áreas de productos inhalables y parenterales.

& Retos del análisis en línea como parte del sistema para diseñar, analizar y controlar los
procesos de fabricación (Process Analytical Technology, PAT).

& Los requisitos reglamentarios.

Los objetivos de la presente revisión son dobles. Primero, las metodologías del análisis del
tamaño de partícula se discuten en torno al concepto fundamental de diámetro de partícula
equivalente, teniendo en cuenta la influencia de la forma de la partícula y la dispersión de la
partícula. Las preguntas clave aquí son comunes a una gama de productos farmacéuticos
que incluyen polvos secos, suspensiones, aerosoles, emulsiones y nanopartículas.
Paralelamente, las metodologías se revisan para aplicaciones farmacéuticas específicas.
Ilustrado por ejemplos relevantes de otros campos, se hace hincapié en las formulaciones de
inhalación de polvo seco. Esta es una de las áreas más difíciles y controvertidas de
caracterización de partículas que tiene una implicación directa y obvia en el rendimiento de
la forma de dosificación. También sirve para ilustrar los problemas metodológicos
generales con el análisis del tamaño de partícula.

TAMAÑO DE PARTÍCULA Y RENDIMIENTO DEL PRODUCTO

Entrega de drogas respiratorias

El rendimiento de los dispositivos de inhalación depende principalmente de la PSD

geométrica y aerodinámica, la forma de la partícula y las características de dispersión del
polvo (4,6Y10). Existen tres mecanismos principales de deposición de aerosoles para la
administración pulmonar de fármacos: impactación inercial, sedimentación y difusión
browniana (11). En general, las partículas con diámetro aerodinámico masivo (MMAD) de
1 a 5 mm se depositan en las regiones bronquial y alveolar predominantemente por
sedimentación y tienen la mejor penetración pulmonar (4) y se encuentran dentro del rango
de tamaño óptimo para la mayoría de los productos de inhalación orales (12) Sin embargo,
una mejor comprensión de la fisiopatología subyacente en los estados de enfermedad puede
permitir un mayor ajuste del tamaño de las partículas para una administración más eficiente
de los fármacos pulmonares. A modo ilustrativo, consideremos el caso del asma, una
enfermedad común tratada con dos tipos de agentes farmacoterapéuticos inhalatorios, es
decir, broncodilatadores (agonistas b de acción corta) y agentes antiinflamatorios
(compuestos esteroideos). En la terapia de broncodilatación, se ha encontrado que la
orientación regional del agonista β2 inhalado a las vías respiratorias proximales es más
importante que la deposición alveolar distal (13). Se ha demostrado con partículas de
micras de diferentes tamaños (1,5, 3 y 6 mm) que, aunque las partículas más pequeñas
tienen mayor deposición pulmonar total, penetración distal más distante de las vías
respiratorias y más deposición periférica, las partículas más grandes son más eficaces y
permiten una mayor broncodilatación (13). ), lo que indica que las partículas dentro del
rango superior de 1Y5 mm son más deseables para los broncodilatadores. En contraste, las
enfermedades pulmonares distales parecen aumentar el riesgo de exacerbación recurrente
del asma, y la respuesta inflamatoria en el pulmón distal puede exceder la de las vías
respiratorias grandes (14). Los aerosoles extrafinos (MMAD: 1.1Y2.1 mm) tienen un mejor
acceso al pulmón distal, con una deposición orofaríngea menor y, lo que es más importante,
producen cambios beneficiosos en la función pulmonar distal (14). Los hallazgos antes
mencionados sugieren que los compuestos inhalantes de esteroides deben dirigirse a esta
región distal de la vía aérea, y las partículas dentro del rango inferior de 1Y5 mm son más
deseables para el control de la inflamación. También se debe tener en cuenta que, si bien
actualmente no existen formulaciones DPI con MMAD en el rango de submicras, casi todas
las formulaciones tienen una fracción de partículas de tamaño submicrónico. Es probable
que esas partículas (<0,5 mm) se exhalen y esto puede representar un problema de
dosificación.

La tendencia reciente del suministro sistémico de fármacos pulmonares hace que sea muy
importante comprender la correlación entre el diámetro aerodinámico, determinado por
mediciones in vitro o estudios in vivo de deposición pulmonar, y diferentes diámetros
geométricos medidos por una variedad de técnicas no aerodinámicas. Las formulaciones
respiratorias avanzadas pueden consistir en micropartículas o nanopartículas porosas o
altamente no esféricas. La deposición de partículas, expresada en términos de la fracción de
partículas finas (FPF), depende principalmente de la PSD aerodinámica y MMAD, mientras
que la PSD geométrica (volumen o superficie a volumen) determina las interacciones
interpartículas, la dosis emitida y la uniformidad de dosis, la disolución tasa y captación de
partículas. Por ejemplo, las partículas porosas grandes que contienen proteínas terapéuticas
tienen un MMAD típico dentro de un rango de tamaño de 1.5Y4.0 mm, con el
correspondiente diámetro medio volumétrico, VMD, entre 3Y12 mm (15,16). Estas
partículas pueden mostrar una FPF muy alta que alcanza un 65Y95% y una
biodisponibilidad aumentada debido a una mayor velocidad de disolución y retraso en la
fagocicladiacia natural (17). De forma similar, se prepararon partículas de PLGA porosas
cargadas con un nonapéptido deslorelina con VMD de aproximadamente 13,8 mm y una
densidad aparente <0,1 g / cm3 (18). Tales partículas grandes proporcionaron liberación
sostenida de péptido en pulmones de rata durante más de 7 días debido a su captación
reducida en las células epiteliales respiratorias en comparación con partículas de PLGA
sólidas con el mismo MMAD. La forma de partícula también es extremadamente
importante. Por ejemplo, los cristales alargados de ácido cromoglico y nedocromilo sódico
(19) o las placas muy delgadas de xinafoato de salmeterol (7) tenían dimensiones
geométricas entre 2 Y5 mm pero un MMAD significativamente más pequeño (0.7 Y2 mm).
La velocidad de eliminación de partículas también depende de la forma, siendo las
partículas alargadas tales como las fibras más difíciles de eliminar de los pulmones (20).

Las nanopartículas son prometedoras en la administración pulmonar debido a la

homogeneidad y la mayor eficacia de las nanosuspensiones. Por ejemplo, las
nanosuspensiones de budesonida (tamaño medio de 500 nm) mostraron un aumento
significativo de la FPF en un 53Y88% en comparación con las microsuspensiones (tamaño
medio de 4 mm) (21). Las nanopartículas de fármacos poco solubles en agua tienen una
velocidad de disolución general más alta y pueden tener una ruta de interacción muy
específica con el epitelio traqueobronquial y el alveolar. Las nanopartículas ultrafinas
(<150 nm) mostraron un aclaramiento pulmonar retardado, una mayor interacción / unión
con ciertas proteínas y una mayor translocación del epitelio a la circulación y los órganos
diana posteriores (22).

Se debe hacer una referencia específica a la mezcla de drogas y lactosa que actualmente es
el tipo más común de formulación de inhalación de polvo seco (DPI). A menudo se
incorpora una pequeña cantidad de partículas finas de lactosa (<5Y10 mm) para promover
la desagregación en la turbulencia creada por la inhalación. El aumento de la cantidad de
partículas finas de vehículo en mezclas interactivas ternarias, hasta una cierta proporción en
peso, puede mejorar el rendimiento en aerosol de las formulaciones de inhalación de polvo
seco (23Y26). La adición de partículas finas a la lactosa pulverizada o cristalina 63Y90 mm
también puede disminuir las cargas específicas (27), y la adhesión de partículas de lactosa
(4Y15 mm) a cápsulas de gelatina parece ser proporcional al tamaño de partícula para
superficies homogéneas (28). La eliminación de tales partículas finas por decantación
húmeda elimina la dependencia de la dispersión de partículas en el diámetro medio
volumétrico de los portadores (29). Por lo tanto, parece que el rendimiento del aerosol está
asociado con la presencia de partículas adheridas finas entre los portadores, pero no con el
tamaño de partícula inherente de los portadores (29). La presencia de partículas finas de
lactosa (VMD = 5.8 mm) también puede facilitar la disrupción física de la fuerte
interacción cohesiva entre partículas de fármaco, como nedocromil sódico trihidrato, al
disminuir el número de contactos fármaco-fármaco y aumentar la distancia de separación
entre las partículas vecinas ( 30). Dada la fuerte influencia de los finos de lactosa sobre el
rendimiento global de las formulaciones de inhalación de polvo seco, se sugiere que
durante el análisis del tamaño de partícula del transportador, el porcentaje en peso de
lactosa fina (<10 mm) y los parámetros estadísticos comunes (p. Ej., D10, d50, d90, y etc.)
deben ser monitoreados en todo el sistema.

Los requisitos de tamaño de partícula para aerosoles nasales son menos estrictos y menos
establecidos que aquellos para administración pulmonar (12). La literatura clásica sugiere
que el tamaño de partícula óptimo para la deposición en la cavidad nasal es 10 mm MMAD
(31). El rango de tamaño de partícula más aceptable es 4.8Y23 mm (32). Sin embargo, es
posible un amplio rango de distribución de tamaños de partículas para la administración
nasal de productos farmacéuticos documentados en la literatura contemporánea, que van
desde nanosize (33) a 45 mm (34), o incluso hasta 125 mm (35).

Formas de dosificación oral

Además de las formulaciones de pulverización nasal y pulmonar, otro ejemplo bien

documentado es la forma de dosificación del comprimido. El rango de tamaño de partícula
para tabletas de compresión directa tiende a estar dentro del rango de 100 a 200 mm,
principalmente debido a su comportamiento de compactación requerido y propiedades de
flujo de polvo. Sin embargo, es probable que los tamaños de partícula más pequeños de
aproximadamente 20Y50 mm sean óptimos para las tabletas masticables (con sabor
enmascarado) y de desintegración rápida, donde las características controladas de
disolución y trituración se vuelven más importantes. El tamaño de partícula tiene una
profunda influencia en casi todos los pasos en la fabricación de tabletas, incluida la mezcla
(36), la granulación (37), la compresión (38) y el recubrimiento (39). También se ha
informado que la forma de partícula afecta la mezcla (36) y los procesos de formación de
comprimidos (40). Además de la capacidad de fabricación de las tabletas, la velocidad de
disolución, que es proporcional al área superficial de los fármacos, depende en gran medida
de la distribución del tamaño de partícula de las partículas del fármaco (41). Esto es
particularmente importante para los medicamentos en el Sistema de Clasificación
Biofarmacéutica Clase II (baja solubilidad, alta permeabilidad) ya que la biodisponibilidad
se rige generalmente por la disolución del fármaco en esta categoría (42). Para tener en
cuenta el efecto de la forma de la partícula en la velocidad de disolución, se pueden
introducir factores correctores para considerar las influencias geométricas y materiales (43).
Manipulando el tamaño de partícula de ambos activos y / o excipientes, la velocidad de
disolución se puede mejorar mediante micronización y nano-dimensionamiento (44), o
reducirse mediante formulación en una preparación de liberación controlada por
compresión directa con polímeros, tales como hidroxipropil metilcelulosa (45). Sin
embargo, se debe tener cuidado para asegurar el aumento del área superficial efectiva en
muestras trituradas, ya que la formación de agregados puede anular los efectos beneficiosos
de los materiales micronizados o de tamaño nanométrico.
Además de las tabletas estándar, el rendimiento de disolución de las tabletas de liberación
controlada de tipo matriz está muy influenciado por el tamaño de partícula del fármaco y / o
del excipiente. El umbral de percolación del fármaco, la porosidad crítica donde la red de
poro apenas comienza a abarcar toda la matriz, se correlaciona linealmente con el tamaño
de partícula del fármaco en las tabletas de matriz (46). Los datos de disolución, como el
tiempo crítico de cambio cinético, están relacionados con el tamaño de partícula del
fármaco (47) y la relación de tamaño de partícula excipiente / fármaco (48). La extensión
de la liberación del estallido se puede modular controlando el tamaño de partícula del
alginato de sodio mediante la formación de una barrera de gel de ácido algínico inicial (49).
El tiempo de retardo en la tableta de matriz diseñada para la administración colónica puede
aumentar al disminuir el tamaño de partícula del agente de canalización (por ejemplo,
NaCl, Emdex \), como consecuencia de los poros más pequeños formados por su disolución
(50). Además de los perfiles de disolución, las resistencias a la compresión de las tabletas
matriciales también pueden verse afectadas por el tamaño de partícula (51).

La mejora de la biodisponibilidad para los fármacos insolubles en agua en formas de

dosificación oral se puede lograr para las nanopartículas de fármaco, a través de su
homogeneidad de suspensión mejorada y eficacia de administración, así como un mayor
tiempo de residencia (aclaramiento reducido). Para la biodisponibilidad oral, se observó un
aumento típico de AUC de un factor de 2,5 con una reducción del tamaño de partícula de
1.000 a 400 nm (52, 53). El mismo estudio también informó una reducción de los efectos
de alimentación / ayuno por un factor de 3Y4. Otras ventajas incluyen una mayor
proporcionalidad de la dosis y un inicio de acción más temprano. Las nanopartículas
también mostraron una mayor bioadhesión y / o una mayor captación en la mucosa colónica
intestinal e inflamada (52,53).

Suministro de fármacos oftálmicos, tópicos y transdérmicos

El tamaño de partícula de las formulaciones de liberación controlada oftálmica ha

demostrado ser muy importante para equilibrar la velocidad de liberación del fármaco, la
mejora de la biodisponibilidad, la comodidad del paciente y la facilidad de uso (54).
Cuando se formulan apropiadamente para la administración oftálmica, las partículas se
retienen en el fondo de saco ocular y el fármaco se libera a una velocidad que no es ni
demasiado rápida ni demasiado lenta para permitir la penetración adecuada del fármaco en
los tejidos oculares. Las nanopartículas (típicamente alrededor de 300 nm) sin bioadhesión
pueden eliminarse del sitio precorneal casi tan rápido como las soluciones acuosas. Las
micropartículas (diámetro medio de 1Y3 mm) pueden ser más adecuadas para la liberación
controlada, pero la presencia de una fracción de partículas gruesas por encima de 25 mm las
hace menos tolerables y puede causar irritación en el ojo. Uno de los principales desafíos en
el desarrollo de tales sistemas de partículas es la complejidad de fabricación y el control del
tamaño de partícula durante la fabricación a gran escala (54).
En la administración tópica y transdérmica de fármacos, el tamaño de partícula es un factor
crucial para algunas aplicaciones. Si la droga se suspende en un vehículo, el tamaño de
partícula puede convertirse en un regulador clave del flujo (55). Si el fármaco tiene una
baja solubilidad en el vehículo, la disminución del tamaño de partícula puede promover la
administración de fármaco aumentando la velocidad de disolución de las partículas (55). El
tamaño de partícula también ejerce una influencia significativa en las vías de penetración
cutánea: partículas de más de 10 mm permanecen en la superficie de la piel; partículas entre
3 y 10 mm de concentrado en los folículos capilares; las partículas de menos de 3 mm
pueden penetrar tanto en los folículos como en el estrato córneo (56). Para partículas
menores de 3 mm, incluidas las nanopartículas para la mayoría de los casos, la absorción
percutánea se realiza principalmente por vía folicular. La penetración de la piel de las
nanopartículas de poliestireno polimérico (20 y 200 nm) se logra mediante la localización
folicular, pero no hay vías alternativas de penetración no folicular (57). Resultados
similares se obtienen en minoxidil con nanopartículas de copolímero de bloque (40 nm y
130 nm) (58). La elección juiciosa del tamaño de partícula en formulaciones tópicas no solo
puede maximizar la eficacia local dentro del área de la piel, sino que también puede
minimizar posibles reacciones adversas sistémicas.

Formulaciones parenterales

Dado que actualmente la mayoría de las formulaciones parenterales son productos basados
en soluciones, el análisis del tamaño de partícula normalmente se centra en la detección de
contaminación particulada (Tabla I), donde las posibles fuentes son materias extrañas,
precipitación de fármacos o incompatibilidad de formulaciones. Dicha contaminación
particulada puede conducir a oclusión vascular y embolia pulmonar y debe controlarse
estrechamente. Por la misma preocupación de seguridad, las partículas con un tamaño
micrométrico (> 1 mm) deben excluirse de las formulaciones de nanosuspensión
intravenosa. Además, el aumento del tamaño de partícula puede disminuir tanto la
inyectabilidad como la capacidad de inyección. La obstrucción de la aguja puede ocurrir
debido al bloqueo por una sola partícula o por el efecto puente de partículas múltiples, y
por lo tanto, el tamaño de partícula individual debe ser menor que aproximadamente un
tercio del diámetro interno de la aguja.

Para suspensiones parenterales, dado que el área superficial específica está directamente
relacionada con la velocidad de disolución, el tamaño de partícula es importante para
determinar el patrón de liberación de fármaco in vivo. Las aplicaciones de
nanosuspensiones están creciendo rápidamente, en todas las áreas de IV, IM, ID, SC y
entrega cerebro-intratecal. Por ejemplo, para la inyección IV de agentes anticancerígenos,
muchos de los cuales son insolubles en agua, las nanosuspensiones (PSD acumulado del
99% <tamaño de 1 mm) se vuelven cada vez más importantes para el suministro de
fármacos. Para una farmacocinética rápida, la disolución rápida de plasma de
nanopartículas proporcionó una distribución tisular equivalente a la de la formulación en
solución, como se muestra para el flurbiprofeno (20, 53). Por otro lado, también se pudo
lograr una administración de depósito de ID mejorada mediante disolución lenta y se
observó una mejor administración de SC (47%) para las nanosuspensiones frente a las
microsuspensiones (20, 53). Otro ejemplo es la eficacia del modelo de tumor murino
xenoinjerto de pulmón humano paclitaxel enMV-522 nanoparticulado (es decir, Taxol 30
mg / kg frente a 90 mg / kg suspensiones nanoparticuladas) donde la nanoformulación
muestra una disminución múltiple en el peso tumoral frente al peso tumoral casi constante
observado para la administración de taxol (20,53).

En el área ampliamente investigada de la administración dirigida, los fagocitos

mononucleares, las células dendríticas, las células endoteliales y los cánceres (células
tumorales y neovasculatura tumoral) son objetivos importantes para las nanopartículas, con
tamaños medios de partículas

a menudo más pequeño que 100 nm. Aquí, tanto el potencial diagnóstico como el
terapéutico de la nanomedicina son claramente evidentes (59). El tamaño y la distribución
de tamaño de las nanopartículas tienen un papel clave en la determinación de su destino y
los efectos terapéuticos después de la administración, y su interacción con la membrana
celular y su penetración a través de las barreras farmacológicas fisiológicas (60). Las
nanopartículas por debajo de aproximadamente 150 nm de diámetro tienen una semivida
prolongada en la circulación sistémica debido a una captación más lenta por parte de los
micrófagos. Sin embargo, el tamaño no es el único factor que afecta esta captación. Por
ejemplo, las micelas de gusano de longitud de micra (con una sección transversal de 10 a
100 nm) mostraron tiempos de circulación de varios días (20, 61). En comparación con los
liposomas esféricos, estos polímerosomas (compuestos, por ejemplo, de PEG-PLA y PEG
PCL) son más robustos y capaces de una circulación sistémica prolongada. Diferentes
estudios in vivo muestran que estas estructuras similares a gusanos se comportan como
nanopartículas para la célula y el cuerpo. Esto indica que todas las propiedades particuladas
tales como el tamaño, la forma y las características de la superficie necesitan ser
investigadas en tales formulaciones.

Aunque la distribución de tamaño uniforme puede ser preferida en muchas aplicaciones, se

puede usar una mezcla de nanopartículas de diferentes tamaños de partículas para
incorporar la cinética de liberación deseada en el diseño de la quimioterapia para
individualizar la terapia para pacientes (60). A medida que la nanotecnología se exalta cada
vez más en las comunidades públicas y científicas, también se destacan las preocupaciones
sobre su toxicidad (62). Se ha informado sobre el cambio patológico dependiente del
tamaño de partícula en el pulmón en ratones expuestos con sílice coloidal de tamaño
nanométrico (63). Se ha recomendado que la distribución de tamaños y la forma se
caractericen por los nanomateriales en las pruebas rutinarias de detección de toxicidad (64).
Por lo tanto, el análisis del tamaño de partícula de las nanopartículas no se limita a la
evaluación de la calidad y la eficacia, sino que también sirve como una parte integral en el
control de la seguridad del producto.

ASUNTOS REGLAMENTARIOS

Está claro que hay un énfasis creciente en el análisis de tamaño de partículas en el control
reglamentario. Aunque las directrices generales de la Conferencia Internacional sobre
Armonización (ICH) son aplicables en la mayoría de los países, todavía existen diferencias
sutiles en estas directrices especificadas por varias farmacopeas nacionales. La Tabla I
contiene las fuentes de referencia del análisis de tamaño de partículas en diferentes
farmacopeas y las normas ISO para el tamaño de partículas que incluyen las definiciones,
así como las características técnicas y los principios de funcionamiento de los instrumentos
de determinación de tamaño de partículas más comunes. Como se muestra en la Tabla I,
solo se incluyen algunos instrumentos de determinación de tamaño de partículas en las
monografías de la Farmacopea. Esto, por supuesto, no excluye ninguna otra técnica
adecuada de caracterización de partículas, siempre que esto pueda justificarse mediante la
aplicación y el análisis de datos rigurosos. Factores como la velocidad, el costo y la
informatización del análisis del tamaño de partícula en la industria farmacéutica conducen a
la adaptación de varios tipos de instrumentos que pueden medir el PSD de muestras
pequeñas en períodos de tiempo muy cortos en comparación con técnicas de caracterización
de la Farmacopea clásica como tamices y sedimentación métodos basados en tasas (Tabla
I). Como regla general, la instrumentación de tamaño de partículas de laboratorio y proceso
utilizada en la industria farmacéutica cumple con las regulaciones de formato electrónico de
datos, como FDA 21 CFR Parte 1 (65), permitiendo a la FDA aceptar registros electrónicos
y firmas en lugar de registros en papel y manuscritos firmas. Esta regulación describe los
controles para garantizar que los registros electrónicos y las firmas sean confiables,
confiables y compatibles con el trabajo de la FDA.
Las Directrices ICH establecen explícitamente que el tamaño de partícula es una de las
propiedades fisicoquímicas que influyen en el rendimiento del producto farmacéutico y su
fabricación (http://www.ich.org). Se describen especificaciones adicionales en los criterios
de aceptación ICH Q6A en nuevas sustancias farmacéuticas para productos farmacéuticos
sólidos o en suspensión (figura 2). En suspensiones orales e inyectables para nuevos
productos farmacológicos, también se puede proponer la distribución del tamaño de
partícula en lugar de la prueba de disolución. En cuanto a las partículas, los productos
parenterales deben tener criterios apropiados, que incluyen el tamaño máximo de la
fracción de partículas gruesas, la claridad de la solución, las partículas extrañas y las
partículas visibles y subvisibles. La materia particulada extraños en los productos
farmacéuticos inhalados y pulverizadores nasales (OINDP) es uno de los temas de
discusión activos entre el Consorcio de aerosoles farmacéuticos sobre regulación y ciencia
(IPAC-RS) y la FDA. IPAC recomienda una caracterización completa que incluya el
número de partículas, el rango de tamaño y la identidad durante el desarrollo, y el conteo de
partículas durante la fabricación para el suministro en el mercado (66). La FDA ha emitido
varias guías para la industria relacionadas con distribuciones de tamaño de partículas en
una variedad de productos, como inhaladores de dosis medidas y productos de inhaladores
de polvo seco (67), y productos de pulverización nasal y solución por inhalación,
suspensión y pulverización (12) , incluida la evaluación de la bioequivalencia (68).
Además, la preparación de un documento técnico común para fines de registro
farmacéutico requiere las siguientes secciones de información para el análisis de tamaño de
partículas (69):

● Descripción del proceso de fabricación y controles de proceso.

● Identificación de la distribución del tamaño de partícula de la sustancia del fármaco.
● Especificación, y su justificación.
● Procedimientos analíticos, y su validación.
● Resultados de análisis por lotes.
● Identificación de la influencia del tamaño de partícula en el rendimiento del
producto.
En la administración pulmonar de productos farmacéuticos, es obvio que la distribución del
tamaño aerodinámico es el parámetro más importante que afecta el rendimiento del aerosol.
Sin embargo, debe señalarse que en el documento de orientación de la FDA, los criterios de
aceptación expresados en términos de MMAD y GSD solo (que representan las medidas de
la tendencia central y la diseminación respectivamente) así como en términos de fracción
respirable o dosis respirable no se consideran adecuados caracterizar la distribución del
tamaño de partícula de la dosis completa (12,67). La FDA recomienda que la masa total del
medicamento recolectado en todas las etapas y accesorios debe estar entre el 85 y el 115%
del reclamo de la etiqueta por acción (67). Dado que la Binhalabilidad de las formulaciones
también puede verse afectada negativamente por los cambios de tamaño y forma asociados
con la inestabilidad del estado sólido durante el almacenamiento (70), la FDA recomienda
que la humedad relativa y la temperatura se especifiquen y controlen en el procedimiento
de prueba para minimizar el crecimiento higroscópico. agregaciones de partículas y
variabilidad que surgen de estas fuentes (67). Las pruebas de uniformidad del contenido de
dosis tanto para pMDI como DPI especifican que la cantidad de ingrediente activo por
determinación debe estar dentro del T20% de la etiqueta solicitada para muestras> 90% y
T25% de la etiqueta solicitada para todas las muestras, y la media debe estar dentro de
T15% de la declaración de etiqueta (67). Si falla el primer nivel de 10 contenedores, el
segundo nivel de 30 contenedores debe coincidir con las especificaciones. La distribución
del tamaño de partícula emitida tanto para pMDI como para DPI debe determinarse por un
impactador de cascada de etapas múltiples. La masa total de fármaco recolectada en todas
las etapas y accesorios debe estar dentro del T15% de la declaración de etiqueta por
actuación, y en cada etapa y cada accesorio debe ser informado (67). Además, existen
controles más estrictos en los DPI. Por ejemplo, la distribución del tamaño de partícula de
la sustancia farmacológica en dispositivos inhalados dosificados por dispositivo debe
establecerse y controlarse a la dosis inicial y la última dosis del número de dosis marcado
(67). Los requisitos reglamentarios en la uniformidad del contenido de pulverización de los
aerosoles nasales son relativamente menos estrictos.

La distribución de la gotita y el tamaño de partícula en la formulación nasal se requieren en

la guía de la FDA (12), aunque las especificaciones de tamaño de partícula aquí están
menos bien establecidas que las de la administración pulmonar.
Las recomendaciones y directrices relacionadas con el análisis de tamaño de partículas se
encuentran actualmente en desarrollo y es probable que se expandan significativamente en
el futuro. Una de las áreas de expansión potencial es la inclusión de nuevas monografías
para instrumentación y metodología en las actuales farmacopeas, por ejemplo, el método de
difracción láser y el impactador en cascada de próxima generación, NGI (ver Tabla I). Otra
área importante es la coordinación entre los requisitos reglamentarios y la práctica
industrial. Por ejemplo, ha habido controversia con respecto al 85Y115% del balance de
masa de fármaco recolectado en todas las etapas y accesorios del impactador en cascada
(67,68). La industria respondió a esto formando varios grupos de trabajo y proponiendo
recomendaciones para cambios (71,72). Esto condujo a la relajación del requisito de
uniformidad del contenido de pulverización en aerosol nasal y solución de inhalación,
suspensión y productos de fumigación (12). El AAPS en conjunto con la FDA y el USP
organiza una serie de talleres de análisis de tamaño de partículas. Estos talleres planean
discutir los problemas actuales con respecto a estándares de partículas, muestreo de polvo,
preparación de muestras, aglomeración, forma de partículas, método de validación e
interpretación de datos (2).

MEDIDAS DE TAMAÑO DE PARTÍCULA

Metodología general

La Figura 3 ilustra el principio básico del análisis del tamaño de partícula. Los métodos de
dimensionamiento empleados se pueden subdividir en dos categorías principales: escaneo
de flujo y técnicas de escaneo en campo. En el primero, las partículas se examinan o se
cuentan una a la vez y luego se clasifican en cestas de tamaño correspondiente, mientras
que en el último, el conjunto de partículas completo se mide simultáneamente y el PSD se
deriva de esta respuesta Bfield ^ integral. Claramente, ambas categorías tienen sus ventajas
y desventajas. Debido al hecho de que el escaneo de flujo proporciona un parámetro
experimental adicional del número de partículas medidas, generalmente ofrece una mejor
resolución, límites de cuantificación más bajos e interpretación de datos más conveniente
(2,73). Por otro lado, los métodos de exploración de campo suelen ser más rápidos, más
robustos y más adecuados para aplicaciones en línea / en línea.

Diámetro equivalente a partículas

El tamaño de partícula, si se define como una dimensión lineal Característica, es una

cantidad ambigua para partículas no esféricas. Además, con la excepción de la microscopía,
el tamaño de partícula no se puede medir directamente. Los datos obtenidos no son una
propiedad única de las partículas, sino que dependen de la respuesta física del instrumento
analítico en relación con el tamaño y la forma de las partículas. Incluso para las partículas
esféricas, las diferencias físicas, manifestadas por diferentes diámetros equivalentes
medidos, pueden conducir a algunas discrepancias, típicamente dentro del 10% en términos
de diámetro medio por volumen (10,74Y76). Para las partículas no esféricas, esta
desviación se magnifica significativamente porque la mayoría de los métodos de
dimensionamiento están diseñados para partículas esféricas y no pueden discriminar entre
diferentes formas. La Figura 4 ilustra los datos obtenidos para esta revisión sobre partículas
de diversas formas utilizando tres instrumentos diferentes (véase la Tabla II). Solo en el
caso de las partículas esféricas de sílice, se encontraron los datos iguales al diámetro de
partícula verdadero. Se observaron desviaciones relativamente pequeñas en el caso de
partículas con forma prismática (tubular) de paracetamol (AP I). Se encuentran grandes
desviaciones para las partículas de xinafoato de salmeterol en forma de plaquetas y para los
cristales de acetaminofeno altamente aciculares, semejantes a agujas (AP II). Este efecto no
se relacionó con el desgaste de las partículas durante la dispersión, sino con la forma de la
partícula (ver a continuación). Además, la aglomeración en el caso de las nanopartículas de
óxido de zinc dio como resultado que los datos fueran inconsistentes con el tamaño de las
partículas primarias. El motivo de tales desviaciones es que todos estos instrumentos
operan en diferentes principios físicos y están calibrados para partículas esféricas, no
aglomeradas. Este no suele ser el caso de los materiales farmacéuticos. Se hicieron
observaciones similares en estudios previos sobre la correlación entre los métodos
(2,7,10,74,75). Las discrepancias del análisis del tamaño de partícula se han observado para
la lactosa de flujo rápido que dio un tamaño medio de partícula de 49 a 86 mm por
dispersión de luz láser y 40 mm por análisis microscópico (77). Pero incluso en el caso del
mismo tipo de mediciones, por ejemplo, utilizando principios de inercia aerodinámica, los
resultados pueden depender del diseño específico del instrumento. En un estudio
comparativo entre el impactador de cascada Andersen (ACI), el impactador de próxima
generación (NGI) y el medidor aerodinámico de partículas de tiempo de vuelo (APS) (78)
para tres formulaciones generadas con pMDI, el tamaño de partícula fue subestimado por
APS y los datos fueron inconsistentes para los dos diseños de impactador en cascada
operados en condiciones casi equivalentes. Aunque algunas de estas discrepancias podrían
atribuirse a problemas de formulación, no se puede descartar la dependencia del diámetro
aerodinámico medido en el flujo de aire y la geometría del instrumento, como se encontró
en algunos otros estudios (79Y81). Se recomendó (78) que tanto los datos de APS como de
NGI se evaluaran en base a formulación por formulación en relación con la gran base de
datos que ya existe para las mediciones basadas en ACI.

Debido a las limitaciones físicas antes mencionadas de las técnicas de medición, se ha

introducido el concepto de diámetros de partícula equivalentes. Estos son diámetros de
esferas calibradas que producen el mismo valor de una cierta propiedad física cuando se
analizan en las mismas condiciones que las partículas de forma irregular. Por ejemplo, el
diámetro volumétrico equivalente es el diámetro de la esfera que tiene el mismo volumen
que la partícula no esférica medida por el mismo instrumento de tamaño de partícula. El
diámetro equivalente de Stokes es el diámetro de la esfera que cae con la misma velocidad
en un líquido que una partícula no esférica, etc. Es posible subdividir todos los diámetros
equivalentes en dos grupos básicos: geométrico (es decir, relacionado con la superficie
esférica, sección transversal, volumen , etc.) y conductuales (por ejemplo, sedimentación,
deposición inercial, etc.) (2). El último grupo se puede asociar directamente con alguna
propiedad farmacéuticamente relevante durante la fabricación o la administración de
medicamentos. También debe observarse que el diámetro de partícula equivalente se define
no solo por el atributo de partícula física medido, geométrico o conductual, sino también
por la técnica de medición (p. Ej., Difracción láser, análisis de imagen, detección de zona
eléctrica, etc.) y a menudo por el algoritmo de procesamiento de datos. Por lo tanto, la
cantidad de diferentes diámetros equivalentes es casi tan alta como

la cantidad de diferentes métodos de dimensionamiento de partículas. A pesar de esta

variabilidad, se requiere una correlación cruzada entre las diferentes técnicas para
determinar qué diámetro equivalente es más relevante para una API o formulación dada.
Tal análisis de datos combinados permite establecer los efectos de la forma de partícula, la
aglomeración de partículas y la inestabilidad de la muestra en las mediciones de tamaño de
partícula.

Muestreo y dispersión

El objetivo principal del muestreo es retirar la menor cantidad de material a granel que
pueda proporcionar un PSD representativo. Los problemas de muestreo con polvos
farmacéuticos generalmente se deben a la segregación de partículas o al peso de muestreo
insuficiente. La segregación puede ocurrir como percolación entre fracciones de partículas
gruesas y finas o como aglomeración entre diferentes especies de mezclas
multicomponente. En el caso de las suspensiones, los gradientes de concentración y la
sedimentación de partículas pueden conducir a un muestreo selectivo. Mezclar y / o generar
una muestra a partir de una gran cantidad de incrementos puede minimizar estos problemas.
Las siguientes reglas de muestreo de Bgolden ^ se recomiendan para el muestreo de polvo
apropiado (82):

& Un polvo debe ser muestreado cuando está en movimiento.

& La totalidad de la corriente de polvo debe tomarse durante muchos pequeños

incrementos del tiempo, en lugar de tomar parte de la secuencia durante todo el período de
tiempo.

Los dispositivos de muestreo que confirman estas reglas están disponibles, como el riffler
giratorio (82). Desafortunadamente, la reducción de muestras de laboratorio farmacéutico a
cantidades de miligramos puede requerir muestreadores de polvo muy especializados o
muestras de suspensiones agitadas o lechos fluidizados.

Un problema de muestreo más fundamental es el número y el peso de las muestras

requeridas. El primero se puede evaluar usando la siguiente expresión (83):

donde n es el número de muestras requeridas para asumir el nivel de confianza t, s es la

desviación estándar de la muestra y Dd es la diferencia máxima permitida entre la
estimación y el valor real del diámetro de la partícula. Para aplicaciones farmacéuticas, se
usa un valor t = 2 (confianza 95%) para calidad de trabajo yt = 3 (nivel de confianza
99,9%) para calidad total (53). Por ejemplo: s = 0.5 mm, t = 2, Dd = 0.5 mm da n = 5. Con
respecto al peso de la muestra, es claro que el peso límite (mínimo) de la muestra requerido
está predeterminado por las partículas gruesas en el PSD, porque estas partículas siempre
están subrepresentadas durante el muestreo. La siguiente relación se puede usar (82):

donde ms (mg) es el peso límite, d (µm) es el diámetro medio de las partículas más gruesas
en la muestra, p (g / cm3) es la densidad del polvo, σ es el error de muestreo tolerado, wc es
la masa fraccionaria de la clase más grosera que se muestrea. Para valores típicos wc = 0.1;
s = 0.05 (5%); r = 0.5 g / cm3, se puede estimar que se requiere menos de 1 mg de muestra
para d <10 mm (aerosoles finos), mientras que varios gramos de cada muestra serán
necesarios para partículas con d = 100Y200 mm (formas de dosificación oral).

Las partículas de materiales orgánicos farmacéuticos pueden ser muy cohesivas y cargadas
electrostáticamente, formando aglomerados de diferentes tamaños y estructuras. Si las
fuerzas sostienen
Fig. 4. (a) Morfología de partículas de: sílice, óxido de zinc, xinafoato de salmeterol;
acetaminofeno, AP I (prismático) y paracetamol, AP II (acicular). (b) Correspondientes
diámetros medios medidos por tiempo de vuelo (TOF, AeroSizeri con AeroDisperser, TSI
Inc, EE. UU.), difracción láser (LD, Helos / Rodos, Sympatec GmbH, Alemania) y
contador Coulter (Coulter Multisizer II, Coulter) Instrumentos de Electronics GmbH,
Alemania).

las partículas primarias son débiles y más de naturaleza física, se dice que las partículas
están en forma de aglomerados blandos (84). Se dice que las partículas fuertemente unidas
forman parte de aglomerados duros, que típicamente se originan en el proceso de formación
de partículas, limpieza o secado inadecuados. La partícula primaria puede consistir en
monocristales, sólidos semicristalinos o amorfos. Las partículas primarias también pueden
ser aglomerados de núcleos submicrométricos y pueden tener una estructura hueca o
porosa. En lo que respecta al análisis de tamaño de partícula, los aglomerados duros se
consideran como partículas individuales y como parte del conjunto de partículas total. Sin
embargo, la dispersión ineficiente de aglomerados blandos, que se observa típicamente
tanto en polvos secos como en suspensiones, puede contribuir a la mayor parte del error
analítico. El objetivo es eliminar la mayor aglomeración de partículas posible de la muestra
a analizar y, al mismo tiempo, evitar el desgaste de partículas (fresado), debido al uso de
fuerzas de dispersión excesivas.

Dependiendo del tipo de medidas, la dispersión se puede lograr en una celda líquida, con la
adición de agentes tensioactivos apropiados. La dispersión también se puede lograr
mediante agitación controlada y / o mediante la aplicación de ultrasonidos. Los líquidos
polares se usan típicamente para dispersar sólidos polares y líquidos no polares para
dispersar los sólidos no polares (82). Los tensioactivos iónicos o no iónicos se seleccionan
para que coincida con la diferencia en la polaridad de la superficie (para aumentar la
eficiencia de humectación). Los sólidos idealmente deberían ser prácticamente insolubles
en el disolvente de dispersión. En casos extremos, el sólido se puede dispersar en su
solución saturada en un solvente adecuado. Aquí, siempre existe la posibilidad de cambiar
la distribución del tamaño de partícula debido a la termodinámica BOswald maduración ^ o
los efectos de recristalización (85). El uso de la dispersión líquida se requiere para
cualquier sistema submicrónico porque tales partículas son imposibles de dispersar en un
estado seco. También se encontró que una dispersión líquida ayudada por ultrasonido era el
método más eficiente para la medición de PSD primaria de algunos polvos secos de
inhalación fuertemente aglomerados (10).

Los dispersores de polvo seco, que suelen estar unidos a difracción láser estándar e
instrumentos de tiempo de vuelo, proporcionan un medio muy conveniente para controlar y
estudiar los efectos de dispersión con polvos de tamaño micrométrico (7, 10). Esto es
particularmente valioso para formulaciones respiratorias de polvo seco donde dicha
dispersión está directamente relacionada con el rendimiento de los inhaladores de polvo
seco. La dispersabilidad de los polvos en el flujo de aire se define como el equilibrio de
fuerzas generadas por las tensiones aerodinámicas que son necesarias para dispersar
partículas. El mecanismo de dispersión es muy complejo y puede involucrar la dispersión
por aceleración, flujo de cizallamiento así como por impacto u otras fuerzas mecánicas. Es
casi imposible anticipar todos los factores involucrados, sin embargo, es factible llevar a
cabo un estudio comparativo de diferentes polvos para el mismo dispositivo, considerando
la energía fluida suministrada por el flujo de aire, f, y tomando como medida adecuada tal
energía la magnitud del estrés turbulento viscoso, tS = Kf 3/2. El coeficiente, K, describe
qué tan eficiente es el dispositivo de dispersión a una tasa de flujo de aire constante.
Empíricamente, el perfil de dispersión para cada polvo se puede encontrar como una
función de la tasa de flujo o presión de dispersión (diferencial), que se relaciona
progresivamente entre sí (figura 5). El perfil de dispersión en la figura 5a muestra que el
diámetro de partícula medio en volumen (VMD) alcanza una meseta. Esto significa que la
mayoría de los aglomerados están dispersos y la velocidad de flujo correspondiente es
óptima para las mediciones. Polvos más cohesivos y fuertemente aglomerados se dispersan
a un caudal más alto. Además de proporcionar el régimen de dispersión óptimo, la
dependencia similar a la de la Fig. 5 es útil para comparar el rendimiento de diferentes
polvos en DPI. El proceso de dispersión en el DPI se produce típicamente en la región
inferior de flujos (<100 l / min) en la figura 5b que corresponde a la tensión turbulenta
viscosa, tS, entre 1Y30 N / m2 (6Y9). Este hecho explica por qué el rendimiento de muchos
DPI llenos con polvos micronizados o polvos de lactosa-fármaco es relativamente bajo.

Una técnica de formación de imágenes, como la microscopía óptica o electrónica, puede

proporcionar una descripción útil de aglomerados de partículas micrométricas y
submicrométricas escasamente dispersas sobre una superficie de sustrato de microscopio
(87). Este enfoque se basa en la teoría fractal, que está vinculada a la dimensión fractal del
límite de la imagen, d. El proceso de evaluación de la dimensión fractal del límite implica
la estimación de su perímetro P, mediante un polígono con varios lados, n:

El lado l se conoce como el parámetro de resolución. Las unidades funcionales de los

agregados se pueden describir utilizando sus dimensiones fraccionarias, lo que proporciona
una medida de la Bruggedness de las estructuras de partículas observadas bajo un
microscopio. La Figura 6 muestra un ejemplo de este algoritmo aplicado a agregados de
nanopartículas de griseofulvina producidas utilizando la extracción de emulsiones de
fluidos supercríticos (85). Se pueden ver dos regiones de estructura fractal con ᵟ = 1,12 en
una integración altamente resuelta que corresponde al empaquetamiento de partículas
individuales y d = 1,4 características de la aglomeración durante el secado.

Para ambos sistemas de polvo seco y líquido, se puede concluir en general que el desarrollo
de una técnica y procedimiento de dispersión adecuados es al menos tan importante como
el análisis del tamaño de partícula en sí mismo. Para los polvos de inhalación y los sistemas
submicrométricos, el control de la desaglomeración es el factor dominante que puede
requerir validación mediante el uso de una cartera de técnicas complementarias (7,10).

Precisión, precisión y principales fuentes de errores

Las siguientes definiciones de la Validación de Analytical Procedimientos (ICH Q2A y

Q2B) (http://www.ich.org) son aplicables al tamaño de partículas: La precisión es la
cercanía del acuerdo entre los valores que son aceptados como un valor verdadero
convencional o un valor de referencia aceptado y el valor encontrado (Btrueness ^). En
términos matemáticos, Faccuracy_ se puede definir como la media desviación porcentual,
A¯, de un tamaño de partícula experimental distribución (PSD) del PSD estándar (82):
𝑁
𝐴∆𝑃
𝐴= ∑
𝑁
𝑃=0

donde ∆P es el ancho de la clase de tamaño, N es el número de tamaño clases, A es la

desviación porcentual de la medida y tamaño estándar para una clase de tamaño dado. Una
gran desviación de estándar no significa que el instrumento está en error, pero que un
parámetro diferente está siendo medido por el estándar técnica. Este problema fundamental
está directamente relacionado con el definición del diámetro de partícula equivalente.
Muchos ejemplos se proporcionan en la literatura farmacéutica. Monografía de USP < 601>
(Tabla I) compara el microscopio y la aerodinámica mediciones para inhaladores de dosis
medida (IDMP). Es indicó que, mientras que las mediciones de tamaño de partícula por
microscopía se puede usar para evaluar el número de partículas grandes, aglomerados y
partículas extrañas en las emisiones de pMDIs, la prueba debe ser reemplazada, siempre
que sea posible, con un método para determinar la distribución aerodinámica del tamaño de
partícula del aerosol de la droga que sale del inhalador. La aerodinámica distribución de
tamaño de partícula define la manera en que depósitos de aerosoles durante la inhalación.
Sin embargo, está claro que análisis de tamaño de partículas por sedimentación
gravimétrica o centrífuga es el método más apropiado para la evaluación de estabilidad de
suspensión pMDI. Por lo tanto, para lograr la precisión requerido para una aplicación
farmacéutica particular, el principio general sería utilizar la técnica de medición eso se
parece al proceso.

Matemáticamente, la precisión puede definirse como un estándar promedio desviaciones

para una serie de mediciones (82):
𝑁
𝑆∆𝑃
𝑆= ∑
𝑁
𝑃=0
donde s es la desviación estándar para una clase de tamaño dada. La repetibilidad del
término relacionado se usa para denotar precisión bajo las mismas condiciones de
operación durante un corto intervalo de tiempo (precisión intra-ensayo). La
reproducibilidad es precisión entre laboratorios, como generalmente se aplica a la
estandarización de la metodología y pruebas entre laboratorios en estudios colaborativos.
Estas características son muy importantes para todos los productos farmacéuticos
investigación, GLP y cGMP porque reflejan directamente la calidad de la instrumentación,
así como la fiabilidad y consistencia del procedimiento operativo (2,88). Otras
características importantes para el análisis de partículas son la resolución y el alcance. La
resolución se define por el ancho y el número de clases de tamaño de partícula individuales
dentro del rango de tamaño de partícula medido. El rango Bdinámico ^ es utilizado para
describir el rango de tamaño donde los niveles requeridos de la precisión y la repetibilidad
se pueden lograr sin cambiar la configuración del instrumento.
La resolución y el rango dinámico a menudo están inversamente relacionados entre sí: la
mejor resolución se logra a menudo cuando el instrumento está configurado para medir un
específico y relativamente estrecho rango de tamaño de partícula. Por ejemplo, hay un
problema bien conocido que los diferentes tamaños de instrumentos (con excepción de la
microscopía electrónica) no cubren la totalidad rango de partículas utilizadas en la
liberación controlada (CR), que varía desde unos pocos nanómetros para sistemas micelares
hasta cientos de mm para microesferas grandes (88). Rango de tamaño de partícula entre
0.5Y1 mm se muestran como los más problemáticos con datos más inconsistentes
obtenidos por técnicas como la luz dispersión, conductividad eléctrica y oscurecimiento de
la luz. Claramente, este rango pertenece al límite de la mayoría métodos importantes de
dimensionamiento de partículas (Tabla II) donde la precisión es la más baja. Esto es de
particular importancia para sistemas con PSD relativamente anchas, bimodales y
multimodales. E n tales casos, una combinación de microscopía electrónica con un contar el
análisis de tamaño de partícula descrito a continuación puede permitirse la mejor precisión
y resolución.

Fig. 5. (a) Perfiles de dispersión experimentales para dos lotes diferentes de xinafoato de
salmeterol (7). (b) Relación entre la dispersión presión de aire, velocidad de flujo, f, y
boquilla tensión turbulenta viscosa, tS, determinado para RODOS (Sympatec GmbH),
polvo seco de 4 mm dispersador.
Fig. 6. Dependencia de lo normalizado (dividido por el promedio diámetro proyectado)
partículas del perímetro, P, en resolución normalizada parámetro, l, ambos en coordenadas
logarítmicas, para nanopartículas de griseofulvin se muestra en la fotografía SEM.

Las fuentes comunes de errores en el análisis de tamaño de partícula son tan sigue:

● Errores instrumentales (hardware) V que reflejan el limitaciones del método

analítico y en general asociado con la precisión de las mediciones como se describe
 encima. Y errores estadísticos V que dependen principalmente de procedimientos de
muestreo y dispersión.
● Errores de interpretación de datos (software) que pueden ocurrir debido a la
aplicación de algoritmos más o menos adecuados de computación y análisis.
● Errores de operadorV que normalmente se deben a errores calibración,
configuración, procedimientos operativos.

En general, cualquier instrumento de tamaño de partícula tiene un óptimo rango dinámico,

donde el error instrumental es mínimo. El error de muestreo siempre aumenta y la
dispersión el error disminuye al aumentar el tamaño de partícula como se explica en la
siguiente sección. Es posible separar el instrumental errores de los errores estadísticos
mediante el uso de diferentes secuencias de muestreo o dispersión (82). La variación total
(s2) es la suma de las variaciones individuales debidas a la medición procedimiento y los
otros factores. Para una descripción cuantitativa, Eqs. 4 y 5 se recomiendan para describir
el precisión y precisión, respectivamente. Las evaluaciones, que se basan en la comparación
de los diámetros medios de partícula más que en las estadísticas de todo el PSD, a menudo
conducen a una subestimación de estos errores. Por ejemplo, inhalación compuestos pueden
tener MMAD muy similar e incluso el mismo GSD, pero exhiben PSD completamente
diferentes tales como distribuciones monomodales y bimodales y se comportan de manera
diferente durante la aerosolización (89,90).

Validación, Calibración y Verificación

Durante la validación, un instrumento está sujeto a una serie de los procedimientos de
calificación. Estos procedimientos de calificación verifique las condiciones generales de
operación de un instrumento, instalación correcta de todos los componentes de hardware y
software y el funcionamiento apropiado de los componentes. La calibración es un proceso
en el que se usa un instrumento para medir un estándar conocido y su respuesta se ajusta
hasta la respuesta dada corresponde al estándar. El instrumento mantendrá este ajuste por
un período de tiempo limitado y gradualmente se apartará gradualmente del estado
calibrado. Estándar el material consiste en partículas esféricas que tienen valores
certificados que se trazan directamente al Bmetre ^ estándar (por ejemplo, a través de
microscopía). Microscopios y analizadores de imágenes, ambos ópticos y SEM,
generalmente se calibran usando retículas certificadas. En dispositivos como TOF y CI,
calibración interna fija los métodos son provistos por los fabricantes. Técnicas ópticas tales
como LD, dispersión de luz y DLS, implican el uso de una escala de medición fundamental
longitud de onda Vlaser, y por lo tanto no requiere calibración.

El procedimiento de calificación de verificación o desempeño es llevado a cabo para todos

los instrumentos para asegurar que todas las especificaciones (hardware y software) están
dentro de los límites establecidos. Esto generalmente se logra usando un material de
referencia que es un material Bstable de forma de partícula arbitraria, es los valores
certificados se referencian a un método de referencia ^ (82). El tamaño del material de
referencia se compara con sus valores certificados para determinar la precisión del
instrumento. Los materiales de referencia generalmente se entregan con el instrumento en
forma de polvos secos fácilmente dispersables (por ejemplo, sílice, vidrio, SiC) o
suspensiones estables de escasamente clasificadas (monodispersas) esferas de látex o
poliestireno disponibles en ambos nanoand rangos de micras Para la mayoría de las
mediciones, certificación se recomienda con al menos dos materiales de referencia
correspondiente a los extremos alto y bajo del tamaño dinámico distancia.

Todos los puntos discutidos anteriormente deben reflejarse en procedimientos de operación

estándar (SOP) que contienen todo lo necesario información para el control y la revisión de
control de calidad y Documentos de control de calidad que incluyen especificaciones
funcionales y de diseño, procedimientos de prueba, documentos de liberación de producto,
certificados y lineamientos de servicio. Por ejemplo, el desarrollo de métodos analíticos
confiables y validados para el dimensionamiento de partículas de parenterales de liberación
controlada (RC) para su uso en investigación y desarrollo, así como en la fabricación de
control de calidad ha sido uno de los temas de un taller organizado por EUFEPS y AAPS
(88) Se observó que la distribución de tamaños de microesferas para el producto final debe
ser el mismo que el utilizado para lotes clínicos. Además, control de calidad con validación
adecuada es necesario para determinar si la segregación ocurre durante procesamiento, y si
es así, qué procedimientos desarrollar para evitar este problema El mismo instrumento y el
mismo el procedimiento operativo estándar se debe utilizar para la prueba del control de
calidad de un producto dado Esta limitación puede crear problemas en scaleup y en los
cambios del sitio de fabricación.

INSTRUMENTACIÓN

Microscopía y análisis de imagen

Entre las técnicas más comúnmente utilizadas en el investigación y desarrollo farmacéutico

(Tabla II), microscopía a menudo se aplica como un tamaño de partícula absoluta método
porque este es el único método donde el individuo las partículas se pueden observar, medir
y determinar su forma (7,5,10,74). Aunque la resolución teórica de la luz la microscopía es
de aproximadamente 0.2 mm con la gran apertura numérica (NA) los objetivos de
inmersión, el halo de difracción da bruto Sobreestimación de partículas en la región de
tamaño de micra inferior. La resolución de un microscopio óptico es una función del
ampliación óptica, tipo, calidad del objetivo, numérico apertura, tipo de medio de inmersión
y también óptico características de las partículas mismas. Por lo tanto, el exacto límite
inferior, con la precisión dada debe evaluarse para cada microscopio individual. Se puede
aplicar microscopía confocal para aumentar el contraste de la imagen, pero la limitación
general de la longitud de onda óptica permanece (91). Determinación de partícula tamaño
mediante el método óptico también está limitado por estadísticas consideraciones durante el
análisis de imagen computarizado. Los algoritmo utilizado generalmente calcula el área de
proyecto equivalente diámetro o diámetro del perímetro proyectado. Desde el orientación
de la partícula en un sustrato por lo general da el máximo área, esto conduce a un tamaño
de partícula aparentemente más grande que el medido por otras técnicas (82). Sin embargo,
con mucho, el más error común es un muestreo subrepresentativo. El mínimo número,
Nmin, de partículas a medir puede ser estimado en términos del error de muestreo máximo
de la Distribución de PSD como Nmin> 1 / s2.
Esto da como resultado más de 10.000 partículas para una desviación estándar máxima del
1%. La precisión depende en gran medida de la clase de partículas más gruesa mesurado.
Siguiendo la ISO 14488 (Tabla I), el mínimo cantidad de partículas depende de la PSD y,
por lo general, más de 1,000,000 de partículas son necesarias para alcanzar un máximo
error por debajo del 1%. Aunque la microscopía, en particular, escanea el electrón
microscopía (SEM), es la técnica más esencial para el análisis de tamaño de partícula, no es
muy confiable para el tamaño por sí mismo y siempre debe usarse en combinación con
otros técnicas. Hay grandes errores estadísticos y también sesgos asociado con la partícula
de orientación y partículas preferenciales aglomeración que es difícil de controlar y
minimizar. Esta en efecto resultará en bajos números de partículas medidas por imagen y
altos tiempos de cálculo. Varias técnicas de imagen son capaces de abordar algunos de
estos problemas. Streamscanning el análisis óptico de imágenes permite una recopilación
de datos más rápida y orientación controlada para partículas micrométricas (ver
Interpretación y presentación de datos). Cryo-transmisión microscopía electrónica
(CryoTEM) se puede utilizar para proporcionar información sobre partículas en
suspensiones congeladas sin secado, evitando así posibles problemas con la agregación de
partículas. SEM ambiental (ESEM) permite la medición de dispersiones acuosas a presión
atmosférica, aunque a costo de la resolución de la imagen (92).

Hay un grupo en expansión de técnicas de imagen que puede discriminar entre

farmacéutico activo y no activo ingredientes en formulaciones: fluorescente confocal
microscopía, espectroscopia vibratoria (IR, Raman) y SEM con rayos X dispersivos en
energía (SEM / EDX). Por ejemplo, La imagen química de Raman fue desarrollada para
API específica Análisis PSD de varias suspensiones de corticosteroides acuosos
suspensiones de pulverización nasal (93). 1,600Y1,700 cmj1 rango espectral permitido
distinción entre el medicamento y los excipientes de la mezcla así como el fármaco se
adhirieron a las partículas de excipiente. Del mismo modo, la microscopía Raman se aplicó
a partículas extrañas pruebas en productos de medicamentos por inhalación (66). Fuerza
atómica microscopía (AFM), es otra técnica de imagen basada en escaneo (tapping) de
sondas a escala nanométrica sobre la muestra superficie. Aunque este método es
relativamente lento y usualmente requiere una elaborada preparación de muestra, las
imágenes son muy similar a los obtenidos por SEM con resolución abajo a varios nm.
Además del tamaño y la forma de las partículas, AFM también puede proporcionar
información sobre la superficie de la partícula propiedades, por ejemplo, interacciones entre
partículas en el DPI formulaciones (94).

Difracción láser y técnicas de dispersión estática

LD se está convirtiendo rápidamente en un método estándar preferido para el
dimensionamiento de partículas en la industria farmacéutica. Esto se debe a su breve
tiempo analítico, robustez, alta precisión, reproducibilidad, amplio rango de medición y
flexibilidad de operación utilizando aditamentos de líquido, pulverización y dispersión seca
(7,10,74Y76). La mayoría de los instrumentos de LD emplean una fuente de luz láser
HeYNe estándar (longitud de onda de 632,8 nm) y consisten en un sistema óptico para la
transformación de Fourier de la luz difractada en un detector sensible a la posición. El
patrón de dispersión de la luz de partículas no esféricas es muy complejo, variando en
función del ángulo de dispersión, tamaño y forma de la partícula, y el índice de refracción
complejo que depende de la refracción de la luz (real). componente) y absorción
(componente imaginario). Sin embargo, la difracción directa (Fraunhofer) depende solo del
tamaño de partícula, un diámetro tangencial promediado azimutalmente (Feret_s). Este
diámetro puede asociarse con el diámetro equivalente proyectado que se define por la
intensidad general de la luz difractada. El diámetro equivalente en volumen no se mide
mediante la técnica de difracción láser, aunque el volumen PSD se deriva del patrón de
difracción de Fraunhofer utilizando un sistema de ecuaciones lineales incorporado en el
algoritmo del instrumento (95,96). Los algoritmos basados en la teoría rigurosa de
Miescattering deberían aplicarse idealmente para partículas de menos de 25 mm (3), sin
embargo, estos requieren el conocimiento de índices de refracción complejos que no están
disponibles para la mayoría de los materiales orgánicos y no se pueden medir directamente
con los instrumentos disponibles. Beekman et al. (3) mostró que los errores en la
estimación del índice de refracción Beffective ^ pueden producir PSD radicalmente
diferentes, particularmente para partículas de menos de 10 mm. Por lo tanto, en la práctica,
los errores de dispersión con partículas pequeñas e incertidumbres introducidas por el
componente imaginario del índice de refracción pueden superar la inexactitud asociada con
la teoría simplificada de Fraunhofer (96). Para las partículas no esféricas, como las placas y
las agujas orientadas de forma aleatoria, el diámetro del volumen suele sobreestimarse
debido al mayor diámetro de proyección de estas formas (figura 4b). Otro error puede
originarse por la alta concentración de partículas analizadas. Alto oscurecimiento del rayo
láser, que conduce a una dispersión múltiple de la luz y a una sobreestimación de los finos
de partículas (subdimensionamiento del PSD). Esto se puede evitar fácilmente manteniendo
el oscurecimiento, generalmente monitoreado durante las mediciones, dentro del intervalo
0.1Y0.3. En algunos instrumentos, el método LD se combina con mediciones de dispersión
de luz multilongitud y longitud de onda múltiple, que permiten la expansión del rango de
medición dinámico y se convierten esencialmente en el método de dispersión de luz láser
estática (LLS) multiangular (5,92).
Como se mencionó anteriormente, el diámetro equivalente medido por LD no está
directamente relacionado con el volumen o superficie de la partícula y, por lo tanto, se debe
tener cuidado al interpretar estos datos para cualquier aplicación farmacéutica. Para los
fines del control de calidad, es suficiente establecer una correlación confiable entre los
datos de LD y, por ejemplo, la PSD medida mediante análisis de imágenes o mediciones
aerodinámicas (3,7,10,76). En los casos en que se mide el tamaño de partícula para la forma
de dosificación, los diferentes ingredientes de la formulación pueden afectar fuertemente
los datos. Los ejemplos incluyen la evaluación de la mezcla de polvo y la homogeneidad de
la tableta (2), las mediciones de nebulizadores (76,90), la separación de fases y la
agregación en suspensiones pMDI (97,98) y la desagregación en DPI (86).
Finalmente, se debe tener en cuenta que técnicas como la dispersión de rayos X (SAXS) y
la dispersión de neutrones de ángulo pequeño (SANS) (92) se basan esencialmente en el
mismo principio físico de difracción de la luz, pero con la aplicación de una longitud de
onda de radiación mucho más corta (típicamente varios A °). Esto permite un aumento de la
resolución en la región de nanoescala, posibilitando la observación de coloides, micelas,
laminillas y nanoestructuras similares. Sin embargo, estas técnicas no son para aplicaciones
comunes o de rutina y requieren una considerable especialización en la recopilación e
interpretación de datos. También se debe tener en cuenta que el análisis de difracción de
rayos X en polvo (XRPD), a veces denominado dispersión de rayos X de gran angular
(WAXS), estrictamente no es una técnica de tamaño de partícula. XRPD permite
determinar los parámetros de la red y el ensanchamiento físico de los picos de difracción
como una medida acumulativa de las imperfecciones de la red cristalina (100). Este último
está relacionado con los efectos de tamaño de los defectos cristalinos, como los granos, los
límites de ángulo pequeño y las fallas de apilamiento que, sin embargo, no se puede atribuir
directamente al tamaño de partícula geométrico.

Dispersión de luz dinámica (DLS)

Este método, también conocido como espectroscopia de correlación de fotones (PCS) o
dispersión de luz cuasi-elástica, se usa principalmente para medir sistemas de coloides
nanoparticulados tales como emulsiones, micelas, liposomas y nanosuspensiones
(5,85,90,92). Cuando un rayo láser pasa a través de suspensiones líquidas que contienen
partículas en movimiento browniano, experimenta fluctuaciones en su intensidad debido a
la dispersión de la luz. En el instrumento DLS, las mediciones de esta fluctuación de
intensidad en un ángulo de dispersión dado se usan para inferir el tamaño de partícula o el
diámetro hidrodinámico de las partículas en suspensión. Los instrumentos DLS miden las
fluctuaciones en la intensidad de la luz dispersada con el tiempo para generar una función
de autocorrelación en descomposición exponencial.
Esta función se analiza a continuación para conocer los tiempos de decaimiento
característicos, para determinar el coeficiente de difusión exclusivo de las suspensiones de
dispersión y, junto con la ecuación de StokesYEinstein, el radio hidrodinámico. La
principal ventaja del método DLS es que proporciona una medición absoluta sin más
información sobre la composición y las propiedades ópticas de las partículas en suspensión.
El límite inferior del instrumento depende de la potencia del láser y de la relación señal /
ruido, y puede ser tan bajo como 2 nm. Por lo tanto, se puede usar para medir los tamaños
no solo de micelas y coloides de surfactante sino también de macromoléculas. Los datos
obtenidos con el instrumento suelen estar en dos formatos según el tipo de algoritmo
utilizado para la inversión de la función de autocorrelación. Una distribución Gaussiana se
usa típicamente para representar dispersiones unimodales. Se requiere un análisis más
complejo para distribuciones de tamaños de partículas multimodales (por ejemplo,
bimodales). La introducción de la polidispersidad también puede conducir a una
complicación significativa porque las ecuaciones utilizadas para reducir el tamaño de
partícula se vuelven más ambiguas y menos estables (101). Los algoritmos utilizados
proporcionan información sobre el tamaño medio de partícula, los anchos y los modos de
pico de las distribuciones de tamaño de partícula. Los datos basados en la intensidad,
recopilados por el instrumento, se pueden reducir de forma fiable a una PSD ponderada en
volumen. Sin embargo, partículas grandes (> 3 mm) pueden distorsionar completamente las
mediciones y, por lo tanto, se recomienda un análisis complementario con LD o
instrumento de dispersión láser para corroborar los resultados obtenidos.
Una de las desventajas del método DLS es que las muestras en algunos casos pueden
requerir una dilución significativa para mediciones de tamaño precisas, lo que puede ser
problemático para la medición del tamaño de gota de las emulsiones. Se han desarrollado e
implementado nuevos enfoques que utilizan fibra óptica y dispersión retrógrada en algunos
instrumentos comerciales para permitir mediciones en suspensiones concentradas. Muchos
equipos diseñados para DLS también pueden tener un accesorio para la dispersión de luz
electroforética para medir el potencial zeta importante para la estabilidad de los coloides.
Una variación interesante de DLS es 216 Shekunov, Chattopadhyay, Tong y Chow, la
espectroscopía de correlación de fluorescencia (FCS) (102). La FCS es una técnica bien
establecida para determinar el coeficiente de difusión, el tamaño y la masa de las partículas,
así como para caracterizar la unión de ligandos de bajo peso molecular a moléculas
receptoras más grandes en solución. En FCS, la fluorescencia inducida por láser de las
partículas de un volumen de sonda muy pequeño se autocorrelaciona con el tiempo de
difusión. Una extensión instrumental de dos colores de la configuración FCS confocal
estándar permite el análisis de la correlación cruzada de dos especies fluorescentes
diferentes. Por lo tanto, mediante el etiquetado de diferentes partículas es posible localizar
diferentes componentes dentro de las partículas y obtener información sobre la
composición de los complejos. Una espectroscopia Raman de correlación menos
desarrollada (103) amplía el dominio de la espectroscopía de fluctuación óptica a la luz
dispersada Raman, combinando la identificación química obtenida por dispersión Raman
con el tamaño de partícula y la información dinámica obtenida por espectroscopía de
correlación.

Contador Coulter (detección de zona eléctrica)

Este instrumento fue desarrollado originalmente para el dimensionamiento de células
sanguíneas y cultivos celulares. Por lo tanto, su principio es muy adecuado para la medición
de suspensiones no aglomeradas y estables (10,75,82). Las partículas se suspenden en un
electrolito débil y se pasan a través de un pequeño orificio, separando dos electrodos. A
medida que cada partícula en el electrolito cruza el orificio desplaza su propio volumen de
electrolito provocando un aumento en la impedancia eléctrica. Este cambio en la
impedancia genera pulsos de voltaje, que son proporcionales al volumen de las partículas y
se utilizan para medir el diámetro de volumen equivalente de la partícula. El análisis con el
contador Coulter es rápido y muestra una buena reproducibilidad de la medición. Además,
el análisis del tamaño de partícula puede realizarse en un intervalo de tamaño global
relativamente amplio (Tabla II), usando diferentes electrosensores (tubos de apertura). El
rango dinámico para diferentes tubos varía de 2 a 60% del diámetro del orificio porque la
respuesta de partículas más pequeñas se pierde en el ruido electrónico, mientras que una
respuesta no lineal y el bloqueo pueden ocurrir para las partículas más grandes. La
calibración es esencial para esta técnica. Las dificultades están generalmente relacionadas
con la dispersión de partículas, en particular para materiales altamente hidrófobos o poco
humectados (10). También se encuentran dificultades para la medición de fármacos
solubles en agua para los cuales la solubilidad del fármaco en el electrolito debe ser
mínima; para partículas porosas, aglomerados sueltos (flóculos) y, por último, para
partículas con forma extrema (agujas, placas delgadas y varillas) donde se observan
grandes errores en el diámetro del volumen equivalente (82).

Tiempo de vuelo (TOF)

Dispositivos como API AeroSizeri y Aerodynamic Particle Sizer (APS) (TSI Inc, EE. UU.)
Se basan en el control del tiempo de vuelo de las partículas que se aceleran mediante
corrientes de aire y se expanden a velocidades sónicas, entre dos rayos láser. Las partículas
más pequeñas se aceleran a un ritmo más rápido que las partículas más grandes debido a las
diferencias en la masa. El diámetro aerodinámico de las partículas se calcula usando curvas
de calibración para partículas esféricas de densidad conocida incorporadas en el software de
análisis de datos. Las versiones más recientes de este instrumento tienen una electrónica
mejorada para minimizar la coincidencia y ampliar el rango dinámico midiendo pulsos
individuales de partículas grandes. TOF es una técnica de escaneo de flujo rápido, que tiene
el potencial para mediciones de alta resolución dentro de un rango dinámico relativamente
amplio. Requiere pequeñas cantidades de muestra para el análisis de tamaño. Mide un
diámetro aerodinámico equivalente y, por lo tanto, es una opción lógica para las mediciones
de aerosoles farmacéuticos. Sin embargo, como se muestra a continuación, este diámetro
equivalente es diferente del que se obtiene a velocidades de aire pequeñas y también es
muy sensible a la forma de la partícula (7,104). Cuando se aplica sin los factores de
corrección de forma, la medición de TOF típicamente subestimaría el diámetro de volumen
de la partícula. Una parte integral del instrumento es un dispersador aerodinámico, que
puede utilizar un generador de aerosol de lecho fluidizado, polvo de elevación desde un
plato giratorio (79) o usando un adaptador de inhalador. Aplicando la misma metodología
que se muestra en la Fig. 5, se debe asegurar que para los polvos cohesivos el dispositivo de
dispersión sea adecuado para la desaglomeración de partículas, a fin de evitar errores
altamente significativos con precisión y precisión. Las densidades de números de partículas
grandes, generalmente para partículas submicrométricas, pueden introducir algunos
artefactos, como el sobredimensionamiento debido a errores de coincidencia (105).

Cascade Impactor (CI)

Andersen Cascade Impactor (ACI) y Next Generation Impactor (NGI) (Tabla I) son las
principales técnicas utilizadas tanto para el desarrollo como para el control de calidad /
control de calidad de los productos inhaladores comerciales (2,78). La determinación del
tamaño se basa en la impactación inercial de partículas aerosolizadas que pasan a través de
aberturas de boquilla decrecientes hacia etapas de deposición posteriores. Cada etapa de
deposición proporciona un diámetro de corte aerodinámico definido (partículas recogidas
con una eficiencia del 50%). Las placas de recolección pueden recubrirse para evitar el
rebote de partículas. Se puede controlar la humedad, la temperatura, el diferencial de
presión sobre el inhalador bajo prueba y la tasa de flujo de aire. Los instrumentos también
se suministran con puerto de inducción USP, preseparador y filtro fino. Los impactadores
están calibrados a ciertas velocidades de flujo de aire como se muestra en la Tabla III, sin
embargo las mediciones pueden realizarse a cualquier tasa de flujo arbitraria, definida por
la diferencia de presión sobre el dispositivo inhalador. El USP especifica las mediciones
realizadas para DPI a una tasa de flujo de aire que produce una caída de presión de 4 kPa
sobre el inhalador que se probará y una duración consistente con la extracción de 4 litros de
aire de la boquilla del inhalador. Esto puede ser claramente justificado por las diversas
resistencias de flujo de diferentes DPI con implicaciones obvias para la energía de
dispersión dentro del inhalador. Las condiciones de prueba estándar para pMDI son 28Y30
l / min. Los diámetros de corte para diferentes tasas de flujo se pueden calcular con base en
la ecuación de Stokes como se analiza en las siguientes secciones. La estimación del
tamaño de partícula se basa típicamente en la distribución de masa determinada por análisis
químico (UV o HPLC), que es necesario desde perspectivas terapéuticas y regulatorias para
discriminar entre las sustancias activas (es decir, fármaco) e inactivas (es decir, vehículo).
El parámetro más importante medido es la fracción de partículas finas, FPF, que se define
como la masa de partículas (con referencia a la dosis emitida) por debajo de un cierto
diámetro de corte (por ejemplo, 4,7 mm, es decir, por debajo de la etapa 2 de ACI). El
diseño plano de NGI a menudo se considera más adecuado para mediciones automáticas.
NGI también tiene curvas de eficiencia de recolección más pronunciadas, ofreciendo la
ventaja de un fraccionamiento de tamaño más preciso (78,106). Hay varios otros
impactadores incluidos en las farmacopeas (Tabla I), como el Implante Líquido Multietapa
(MSLI). Cada etapa, excepto la Etapa 5, de MSLI debe dispensarse con 20 ml de líquido.
La determinación del tamaño se basa en la interacción aerosolYliquid, lo que proporciona
una simulación más realista de la impactación en los pulmones. Aunque el agua es la
elección preferida de disolvente, también se pueden usar disolventes orgánicos,
particularmente para fármacos poco solubles. Sin embargo, esto puede crear problemas en
la posible evaporación del disolvente ya que normalmente se usa 60 l / min de flujo de aire
en MSLI. Ambas mediciones CI y MSLI son, en general, muy lentas. Impactador eléctrico
de baja presión, ELPIi (107) se basa en la detección de carga de partículas, que permite el
análisis in situ de alta velocidad de fracciones de partículas depositadas en 13 etapas
diferentes. Sin embargo, este principio no permite una medición directa de las
distribuciones ponderadas de masa del fármaco y requiere un procedimiento de calibración
más complejo (108).

ANÁLISIS DE LOS DATOS

Interpretación de datos y presentación para productos farmacéuticos

El conocimiento de las necesidades específicas de formulación y las características físicas

de los sistemas de partículas es imprescindible para una presentación de datos efectiva. El
análisis del tamaño de partícula comprende tanto la medición como la descripción
cuantitativa de las propiedades físicas de la materia particulada. El análisis en la mayoría de
los casos requiere una metodología de medición de tamaño específica y una interpretación
cuidadosa de los datos. Como guía general, es apropiado determinar la distribución del
tamaño de partícula según el principio conductual de que la técnica de medición se asemeja
bastante a las condiciones en que se usarán las partículas: procesadas, formuladas o
entregadas. Los diámetros relacionados con la filtración y el tamizado pueden usarse para la
representación del tamaño de formulaciones inyectables y orales, respectivamente,
diámetro equivalente aerodinámico para aerosoles y el diámetro equivalente de
sedimentación hidrodinámica (Stokes) para micro y nanosuspensiones. Cuando la
aplicación del diámetro equivalente de partículas conductuales es problemática, debe
establecerse una correlación entre la propiedad física o biofarmacéutica de las partículas en
cuestión y una de diámetro geométrico equivalente bien definido. Por lo tanto, las
propiedades de las formulaciones farmacéuticas, tales como la dosis del fármaco y la
velocidad de disolución, generalmente vienen dadas por la distribución de masa / volumen
de partículas y el diámetro equivalente de volumen superficial (85). La información sobre
la sustancia química del fármaco y la estabilidad termodinámica también se puede
representar utilizando el diámetro equivalente de volumen y volumen de superficie (109).
Las distribuciones basadas en números son importantes para el control de calidad, por
ejemplo, analizando la presencia de partículas extrañas en las inyecciones (ver Tabla I) y
las formulaciones respiratorias (66). La presentación e interpretación de los datos correctos
son esenciales para la consistencia y comprensión de Bwhat. . Formato de datos variable, p.
la naturaleza del diámetro equivalente de partículas, el tipo de PSD o la definición de
diámetros medios apropiados, a menudo escapa a una definición clara en la investigación
farmacéutica. Esto es inconveniente, pero puede ser estandarizado. Un problema más serio
es que en muchos casos los datos brutos obtenidos por un instrumento de determinación de
tamaño de partículas se ajustan a un determinado modelo matemático, particularmente para
las técnicas de exploración de campos, tal como lo dictan los algoritmos de recopilación e
interpretación de datos. Este tratamiento puede predisponer los datos a una interpretación
particular o sesgo como la exageración o subestimación de finos, partículas gruesas o
agregados, cambio sistémico en los diámetros medios de las partículas, aparición de modos
artificiales en la PSD. Por ejemplo, los instrumentos de difracción láser pueden producir
artefactos que dependen del modelo y del fabricante del instrumento porque la óptica, los
sensores y el software empleados pueden ser muy diferentes (2,3). La siguiente sección
trata términos y definiciones matemáticos más generales, que se pueden aplicar a cualquier
presentación de datos y tipo de instrumentación.

Distribución del tamaño de partícula (PSD)

La PSD de un polvo puede describirse por la dimensión de partícula, r, asignada de la
siguiente manera: número (r = 0); longitud (r = 1); área proyectada, área de superficie (r =
2); volumen r = 3); masa o peso (r = 3, sin huecos), correspondiente a las PSDs ponderadas
numéricamente, ponderadas en función de la superficie y ponderadas (ponderadas en
masa), respectivamente. Para las partículas esféricas, estas distribuciones se pueden
convertir fácilmente de un tipo a otro. Para las partículas no esféricas, sin embargo, se
requiere información sobre la superficie y los factores de forma del volumen para la
conversión. Como regla general, el PSD ponderado por volumen (en masa) es la
descripción más adecuada para los materiales farmacéuticos. El PSD ponderado en número
es útil para determinar el tamaño de las partículas primarias en los sistemas aglomerados,
así como la estanqueidad de un PSD. Cuanto más cerca estén los PSDs ponderados y
ponderados en volumen, más estrecha será la distribución del tamaño de partícula.
La presentación gráfica de PSD se hace en términos de distribución acumulada, Qr, y
distribución de frecuencia (densidad), qr, calculada a partir de los datos acumulados. Estos
parámetros están relacionados por la siguiente ecuación normalizada:

donde dmin y dmax definen el rango de tamaño de partícula. En la práctica, Eq. 6 siempre
se calcula como una suma de las clases de tamaño de partícula, es decir, cubetas
individuales en las que la partícula se clasifica por el instrumento. En la Fig. 7 se muestra
un PSD típico con diámetros medios de partícula. El diámetro promedio de modo
corresponde al pico y la mediana representa el 50% (de masa, volumen o número, d50). El
diámetro medio de partícula de un sistema de partículas de un tamaño desigual está
representado por un sistema de esferas que tiene solo dos características de la distribución
original. La ecuación general para calcular los diferentes valores medios de diámetro de
partícula se da a continuación:
donde ∆N es el número de partículas en una clase de tamaño. Los diámetros de partícula
medios más comúnmente utilizados son: d [1,0] Diámetro medio varitmético que
corresponde al diámetro lineal medio; d [2,0] diámetro medio de la superficie V; d [3,0]
Diámetro medio de Vvolume; d [3,2] VSauter diámetro medio que corresponde a la
superficie específica área; d [4,3] Vvolume moment que corresponde al centro Bgravity ^
de volumen (o masa) - PSD ponderado (82). Cualquier PSD también se puede caracterizar
por su desviación estándar, s, del valor medio correspondiente, 𝑑:

Aproximadamente, el ancho del PSD puede estimarse usando un parámetro llamado

dispersión PSD. Se calcula a partir de las fracciones inferior y superior del PSD
acumulativo como: (d90 j d10) / d50. Los productos farmacéuticos exhiben una amplia
gama de PSDs. Se pueden observar distribuciones características que recuerdan formas
normales (gaussianas), lognormales y otras formas canónicas. Tales distribuciones se
prestan bien al tratamiento analítico matemático, por ejemplo, la conversión entre
diferentes diámetros medios, momentos y tipos de PSDs (82). Sin embargo, en la mayoría
de los casos, los PSDs están sesgados y tienen formas arbitrarias para las cuales las Ecs
generales. 6Y8 y se deben aplicar cálculos numéricos.

Forma de partículas
Todas las ecuaciones anteriores son aplicables a diámetros de partícula equivalentes, que
están influenciados por la forma de la partícula. Suponiendo que la forma de la partícula no
dependa del tamaño de la partícula, su descripción cuantitativa puede proporcionarse
mediante la esfericidad de la partícula, 8 o el factor de forma de superficie a volumen, αSV:

La esfericidad se define como la relación del área de superficie de una esfera con un
diámetro de volumen equivalente dV, con respecto al área de superficie real de la partícula,
definida por el diámetro de superficie equivalente, dS. El máximo de 8 = 1 corresponde a
una esfera. La esfericidad puede medirse mediante el análisis de imágenes calculando
directamente los diámetros en Eq. 9. La esfericidad también está relacionada con el área de
superficie específica, S, a través de la siguiente relación (7):

donde la PSD ponderada en volumen, q3 (x), se determina preferiblemente usando una

técnica basada en el diámetro de partícula equivalente en volumen y se mide S, por ejemplo
mediante adsorción de nitrógeno BET (7). Las partículas no esféricas se observan
típicamente en todas las orientaciones y esto provoca un ensanchamiento en la distribución
del tamaño medido. Por lo tanto, incluso un conjunto Bmonodispersado de partículas no
esféricas tendrá su propio PSD. Pueden aparecer algunos artefactos. Por ejemplo, la
medición por difracción láser de partículas aciculares puede presentar una distribución
bimodal, que corresponde a los diámetros de difracción mínimos y máximos característicos
de estas partículas (95). La función de ensanchamiento de forma se puede medir usando el
mismo instrumento, si se dispone de partículas no esféricas monodispersas, por ejemplo, de
cribado, filtración, sedimentación u otras técnicas de clasificación. Sin embargo, tal
enfoque ha sido severamente limitado por la falta de fuente de partículas con geometría y
densidad bien definidas (104). Otra posibilidad es medir la forma de la partícula bajo el
microscopio y luego calcular la función de ensanchamiento de la forma asumiendo la
orientación estadística de la partícula. La Figura 8 muestra un ejemplo de tal cálculo
realizado para polvo monodisperso de xinafoato de salmeterol, que consiste en plaquetas
muy delgadas (Fig. 4a). Es característico que dicho PSD esté sesgado hacia los diámetros
de partícula más pequeños, teniendo el
Fig. 7. Una distribución de tamaño de partícula ponderada en volumen (PSD) típica de los
diámetros medios correspondientes. Observe que tanto los PSD acumulativos como los de
densidad (frecuencia) se presentan en la escala logarítmica.

máximo desplazado hacia la proyección de partículas más grande. El diámetro de partícula

del área de proyección equivalente, que se muestra en la figura 8, es el diámetro
equivalente apropiado para microscopía, técnicas ópticas de barrido y también para
mediciones de difracción láser. El Bmeasured ^ PSD, qr (x), es una convolución del Breal ^
PSD, qr0 (x), y la función de ensanchamiento de forma, p (x), normalizada en
consecuencia:

Sabiendo, la función p (x) y la función determinada experimentalmente qr (x), Breal ^ PSD

puede deconvolucionarse numéricamente a partir de la ecuación. 11. Existen muy pocos
instrumentos analíticos que puedan determinar tanto la forma como el tamaño de las
partículas. Algunos instrumentos de análisis de imágenes automatizados de exploración de
flujo, por ejemplo, Sysmexi, Malvern, Reino Unido y QICPICi, Sympatec, Alemania (110),
pueden determinar la bcircularidad de partícula ^ que se define por la relación entre el
perímetro de partícula y la circunferencia del círculo equivalente de proyección. Otro
dispositivo (analizador de tamaño y forma de aerosol Aspecti, Biral, Reino Unido) se basa
en anisotropía de dispersión láser de partículas individuales y caracteriza la forma de la
partícula mediante un único parámetro llamado factor de asimetría, que se relaciona con la
relación de aspecto de la partícula, es decir, las dimensiones de partícula características
máximas a mínimas. El factor de asimetría toma valores entre 0 (partículas esféricamente
simétricas) y 100 (fibras largas).

Diámetro aerodinámico de partículas

El concepto de diámetro aerodinámico, dA, es fundamental para cualquier medición de
aerosoles y administración de fármacos respiratorios. Se define como el diámetro de las
esferas de densidad unitaria, que alcanzan la misma velocidad en la corriente de aire que las
partículas no esféricas de densidad arbitraria. El diámetro promedio más importante para
los aerosoles es el diámetro aerodinámico mediano de la masa Y, MMAD, que se puede
encontrar como d50 en PSD acumulada ponderada en masa (o ponderada en volumen para
partículas sólidas) con el diámetro aerodinámico equivalente. Los cálculos basados en la
ecuación dinámica general de Newton para partículas no esféricas con un diámetro
equivalente en volumen (dV) conducen a la siguiente ecuación para el diámetro
aerodinámico (7,104):
donde r0 es la densidad unitaria (de las esferas esféricas de calibración) yr es la densidad de
las partículas. Cd es el coeficiente de arrastre de partículas que generalmente es una función
de la esfericidad de las partículas y el número de partículas de Reynolds, Re ¼? RadV =?
donde ra y m son la densidad del aire y la viscosidad,? es la velocidad de la partícula
relativa a la corriente de aire. ReA y ReA denotan partículas con diámetros dA y dV,
respectivamente. Cc es el factor de corrección de deslizamiento de Cunningham que
depende del diámetro de la partícula (80,104) y que se vuelve significativo solo para las
partículas submicrométricas (7). Eq. 12 se resuelve numéricamente en casos generales. Esta
ecuación también es igualmente aplicable a partículas sólidas, partículas porosas y
agregados, siempre que se conozca la densidad de partículas (o fracción vacía para
agregados). Los regímenes de flujo se pueden definir como Stokesian (Re <0.1) y ultra
Stokesian (0.5 <Re <100) y Newtonianos (Re> 100) (62). Para las partículas esféricas en el
régimen de flujo de Stokesian, el coeficiente de resistencia asume la relación conocida: Cd
= 24 / Re. Por lo tanto, Eq. 12 conduce a la expresión simplificada para el diámetro
aerodinámico de Stokes ampliamente utilizado en la literatura de aerosoles:

donde c es el factor de forma dinámica, definido como la relación entre la fuerza de arrastre
en una partícula y la fuerza de arrastre en la esfera equivalente en volumen de partículas a
la misma velocidad. Por lo tanto, las partículas no esféricas tienden a tener un diámetro
aerodinámico más pequeño. Para aerosoles líquidos, como aerosoles de nebulizador y
pMDI, la forma de la partícula de gota no es completamente esférica debido a la
deformación por tensiones del aire. Por ejemplo, se muestra que las gotas de líquido con un
diámetro aerodinámico de más de unos pocos mm estaban sistemáticamente
subdimensionadas en las mediciones de TOF (81,104). Estas medidas también se ven
afectadas por el tipo de instrumento (41, 76, 78). La relación (12) también explica por qué
las partículas porosas proporcionan aerosoles mucho mejores que los materiales sólidos. Su
diámetro aerodinámico se reduce en comparación con el diámetro equivalente en volumen.
Las interacciones interparticulares disminuyen con un aumento del diámetro equivalente
del volumen y, por lo tanto, tales partículas pueden aerosolizarse más fácilmente y penetrar
más profundamente en el sistema respiratorio.

PREDICCIONES Y CORRELACIONES PARA MEDICIONES DE AEROSOL

Como se muestra por Eq. 12, el diámetro aerodinámico depende de las propiedades de las
partículas (tamaño geométrico, forma, morfología de la superficie, densidad) y de la
dinámica del flujo de aire (geometría de flujo, turbulencia, carácter del corte y arrastre

Fig. 8. Función de ensanchamiento de la forma para partículas de plaquetas del xinafoato de

salmeterol (7) con dimensiones características 4? 4? 0.2 mm y esfericidad 8 = 0.3 (ver Fig.
4a). Esta función se calculó para partículas orientadas estadísticamente utilizando sus
proyecciones en coordenadas cartesianas.

efectivo). Los polvos de inhalación generalmente no son esféricos y siempre se aglomeran

con un posible efecto de triboelectroficación a altos números de Reynolds característicos de
las boquillas CI y TOF (7,111). Los aerosoles líquidos frecuentemente presentan problemas
con la evaporación de las gotas, la separación de fases y la influencia de los aditivos tanto
en la atomización de las gotas como en la distribución del tamaño de las partículas
(76,78,98). Por lo tanto, siempre ha habido un problema con la selección de técnicas de
determinación de tamaño de partículas y métodos de validación para la administración de
fármacos respiratorios. Los estudios clínicos in vivo sobre la deposición de diferentes
formas de dosificación mediante evaluación cinética y ensayos farmacológicos o
monitorización directa de los pulmones mediante gammagrafía son muy laboriosos,
costosos y poco prácticos en los estudios de formulación. Claramente, la tarea final es
determinar el PSD de masa (o volumen) basado en el diámetro aerodinámico equivalente,
dA. El método de impactación en cascada es el más cercano a tales mediciones, pero
también muy laborioso y de baja resolución. Este método está destinado principalmente al
control de calidad, donde el foco está en las medidas relativas del rendimiento del producto.
Los resultados obtenidos en el impactador dependen de la tasa de flujo de aire y del diseño
del inhalador. Por lo tanto, un enfoque sistemático y dirigido científicamente para la
formulación de aerosoles requiere el uso de otras técnicas de determinación de tamaño de
partículas, tales como análisis de imágenes, difracción láser y TOF. El enfoque correcto
aquí es predecir los valores de dA usando diámetros equivalentes geométricos
correspondientes (por ejemplo, volumen o proyección) y encontrar un factor de corrección
para dA en diferentes flujos de aire.

Por lo tanto, se debe enfatizar que el diámetro aerodinámico es una función de la velocidad
del flujo de aire, expresada a través del número Re [Eq. 12], y en consecuencia es diferente
para todos los dispositivos de medición de partículas aerodinámicas y para el sistema
respiratorio humano. El flujo de Stokes [Eq. 13] no siempre se puede aplicar sin introducir
un error sistemático significativo. Los siguientes intervalos de Re se pueden calcular para
diferentes técnicas de dimensionamiento aerodinámico y partículas entre 0.5Y5 mm:

● 10 < Re < 100: TOF AeroSizeri

● 5<Re < 50: TOF APSi
● 0.1 < Re < 20: CI
● 0.01 < Re < 2 (sistema respiratorio humano entre el bronquiolo terminal y la tráquea)

En los cálculos anteriores, se tomaron diferentes boquillas y caudales tanto para ACI como
para NGI a partir de la referencia (112). Aparentemente, las partículas cambian su
velocidad relativa y trayectoria continuamente en todos estos instrumentos, y por lo tanto,
es difícil definir con precisión qué Re debería tomarse como el número de partículas de
Reynolds. Sin embargo, tanto las técnicas TOF como las impactadoras implican una alta
aceleración de partículas en las boquillas y su velocidad relativa puede alcanzar la de la
velocidad del aire de la boquilla (80). Se pueden usar dos enfoques para calcular dA usando
Eq. 12. En primer lugar, el factor de forma dinámica se puede determinar
experimentalmente a partir de mediciones de sedimentación o TOF (104,113) y luego se
calculan los coeficientes de arrastre aplicando correlaciones semiempíricas conocidas para
partículas esféricas. El segundo enfoque, más general, es describir el coeficiente de arrastre
de partículas, Cd, como una función del diámetro equivalente de volumen de la partícula
(dV) y la esfericidad de la partícula (8) (7,114,115). Tales correlaciones semiempíricas son
típicamente válidas para los regímenes de flujo de Stokesian y ultra Stokesian. La figura 9a
muestra cómo los diámetros aerodinámicos, calculados usando el modelo de Ganser (115) y
Eq. 12, cambian de forma no lineal con su diámetro de volumen equivalente. Estas son
también funciones de la esfericidad de partículas, 8; las partículas con 8 pequeños, como
placas delgadas, agujas y varillas tienen diámetros aerodinámicos reducidos y, por lo tanto,
se subestimarán sus diámetros equivalentes en volumen, si tales partículas se pueden
dispersar de manera eficiente y no se alinean en el flujo de aire. Además, la figura 9b
muestra que el diámetro aerodinámico de las partículas no esféricas es una función del
número de partículas de Reynolds (o velocidad de flujo) y disminuye a alta Re. La razón
subyacente de este efecto es que el factor de forma dinámica aumenta con el aumento de
Re. El efecto de subestimación del diámetro para partículas no esféricas se observó para las
técnicas TOF (7,80,104) (también Fig. 4) y el impactador de cascada (4,7). Además,
incluso para partículas esféricas con densidad reducida, tales como partículas porosas
diseñadas para la entrega pulmonar profunda, el diámetro aerodinámico depende de Re.
Como se muestra en la Fig. 10, se espera una desviación significativa hasta 45% de la
dependencia de la raíz cuadrada (Ec. 13) para partículas ligeras en el flujo ultraesqueno.
Otra suposición bien conocida del flujo de Stokes se realiza para volver a calcular los
diámetros aerodinámicos de corte, dC (Stokes) a partir de los diámetros de calibración,
dC0, en los impactadores de cascada:

donde Q es un caudal arbitrario y Q0, es el flujo de aire calibrado (Tabla III). Para el flujo
de aire aumentar de 30 a 100 l / min en el NGI, Eq. 12 predice un error de
aproximadamente 15% de subestimación del diámetro aerodinámico para partículas con dV
= 1.5 mm y 8 = 0.5 debido a la aproximación de Stokes. De manera similar, un error
sistemático 5Y10% puede introducirse en la ecuación. 14 para diámetros de corte de
partículas porosas (ver Fig. 10).
Finalmente, debe notarse que toda la discusión anterior se refiere al efecto de la
impactación inercial, que es válida para Re> 0.1 relativamente grande y que representa el
mecanismo de deposición principal en las vías respiratorias superiores. Los otros dos
fenómenos principales que afectan la deposición de partículas en los pulmones, la
sedimentación y la difusión, también se definen por diámetros aerodinámicos equivalentes
que están relacionados respectivamente con la velocidad de sedimentación y la difusión
browniana en el régimen de flujo de Stokes.

ANÁLISIS DE TAMAÑO EN LÍNEA / EN LÍNEA Y TECNOLOGÍA ANALÍTICA

DE PROCESO

Existe un grupo especializado de sensores y sensores de tamaño de partículas desarrollados

para aplicaciones en línea o en línea. Generalmente, en línea significa que la muestra, el
dispersor y / o el sensor están montados en la línea de producción. Un flujo parcial de
partículas necesario para el análisis se guía a través del sistema de dispersión y siempre se
recicla en el flujo de producción principal. La configuración en línea es cuando el dispersor
y el sensor están fuera de la línea de producción, pero están estrechamente acoplados. Se
alimenta un flujo parcial a través del dispersor y se recicla o desecha. Como regla general,
la velocidad, la fiabilidad y la robustez tienen prioridad en estos instrumentos sobre la
resolución y la precisión. Las técnicas ópticas no son invasivas y se prestan bien al análisis
cuantitativo y son particularmente ventajosas para mediciones dinámicas. El advenimiento
de la electrónica de alta velocidad y los sistemas informáticos rápidos automatizados ha
facilitado en gran medida tales aplicaciones. Por ejemplo, existen sistemas comerciales en
línea / en línea para la difracción láser equipados con muestreadores / dispersores
apropiados (por ejemplo, Insiteci de Malvern, RU; Mytosi y Safiri de Sympatec,
Alemania). Por lo general, se toman muestras de partículas de un chorro de aire de corriente
controlada o suspensiones diluidas. El anemómetro Fase Doppler (76,116), basado en la
medición del patrón de interferencia producido por partículas que se mueven a través de la
intersección de dos rayos láser, es un excelente instrumento para caracterizar los aerosoles
líquidos y partículas en chorros, dando el número de partículas y la velocidad además de la
partícula diámetro. Mediciones de reflectancia del haz enfocado (FBRMi), basadas en la
medición del tiempo requerido para que un rayo láser se mueva a una velocidad fija para
cruzar una partícula (Lasenteci, Mettler Toledo, EE. UU.), representa uno de

Fig. 9. (a) Diámetro de partícula aerodinámico en función del diámetro de volumen, dV y

esfericidad, 8, dentro del intervalo 10 <Re <200 (TOF AeroSizer). (b) El mismo diámetro
calculado como una función del número de Reynolds, Re, para partículas con esfericidad, 8
= 0.5. Se supuso que la densidad de las partículas era la unidad.
Fig. 10. Diámetro aerodinámico de partículas esféricas en función de la densidad de
partícula y el número de partículas de Reynolds calculado para el diámetro de volumen dV
= 5 mm.

las pocas técnicas desarrolladas para los procesos de reactores discontinuos. Para tales
aplicaciones, los sensores deben operar en un entorno agresivo, a menudo agresivo,
resistente a la contaminación de las superficies ópticas y al alto nivel de ruido de fondo.
Para los métodos no ópticos, la espectrometría de atenuación acústica (97, 117) es capaz de
dimensionar las partículas de suspensiones y suspensiones líquidas concentradas (1Y70% p
/ p) dentro de un rango dinámico muy amplio de entre 0.01 y 3.000 mm. La desventaja de
este método, sin embargo, es el requisito de un conocimiento preciso de varias constantes
físicas para medios dispersos y continuos.
En general, la calidad dinámica de los datos in situ es muy superior a los resultados ex situ
obtenidos mediante el análisis de tamaño de partícula estándar. Se pueden distinguir las
siguientes áreas de aplicaciones:

● Investigaciones sobre el comportamiento de partículas en diferentes inhaladores y

sprays.
● Estudios mecanísticos in situ y optimización de procesos de formación de partículas
(por ejemplo, secado por pulverización, cristalización, etc.).
● Supervisión de procesos industriales y tecnología analítica de procesos de control
(PAT).

Por ejemplo, Shekunov et al. han estudiado el comportamiento dinámico de las partículas
durante y después del proceso de aerosolización en DPI utilizando un método LD (6). Las
mediciones se realizaron en paralelo al impactador en cascada de Anderson, lo que permite
una comparación directa entre el diámetro aerodinámico promediado en el tiempo o
MMAD dado por el impactador y la distribución del tamaño de partícula del volumen
informado por difracción láser en línea. Los datos se compararon en relación con la dosis
emitida y FPF. Este análisis resuelto en el tiempo diferenciaba los patrones de difracción
producidos por las diferentes secciones de la nube de aerosol, tales como partículas de
fármaco primario, agregados y partículas de vehículo. La distribución de tamaños
acumulada obtenida para diferentes polvos de fármaco de xinafoato de salmeterol,
combinado con el cálculo del diámetro aerodinámico, mostró los valores correctos de FPF.
La dosis total emitida fue buena

Fig. 11. Diagrama de flujo que muestra un ejemplo de control en línea de un proceso de
mezcla de fármaco / excipiente basado en el análisis de tamaño de partícula.

acuerdo con las medidas del impactador en cascada realizadas en las mismas muestras. En
un estudio similar con IDMp, se probó una teoría simplificada de la aglomeración de
partículas dentro de gotas de propelente usando una combinación de LD (Malvern
Spraytec) y mediciones de tiempo de vuelo TSI APS (98). Este estudio tuvo como objetivo
determinar si este mecanismo fue responsable de la observación de que el límite superior
entregado por una suspensión de pMDI era inferior al 1% p / p. Sin embargo, los datos
obtenidos no se ajustaban a este modelo; se propusieron algunas explicaciones alternativas
tales como la influencia de la evaporación de gotitas en las mediciones de LD y los cambios
en el comportamiento aerodinámico de las pulverizaciones de pMDI con el aumento de las
concentraciones de partículas. Rogueda et al. (97) también utilizaron la espectrometría de
atenuación acústica para estudiar fenómenos de separación en propulsores de HFA basados
en una selección de suspensiones de pMDI comerciales (Ventolin, Flixotide y Salbuhexal).
Se obtuvieron datos cuantitativos sobre la dinámica de la floculación de las partículas
primarias antes de la aglomeración en los conglomerados. Después de la agregación, los
cúmulos se sedimentan dejando atrás la partícula más pequeña, y por lo tanto da lugar a
disminuciones aparentes tanto en la concentración de partículas como en el tamaño. Las
diferencias observadas entre las diferentes formulaciones se atribuyeron a las propiedades
de las partículas primarias y a las características de la superficie.
En el área de las nuevas tecnologías farmacéuticas, el desafío de la investigación está
íntimamente relacionado con el diseño de mediciones fiables en línea, con el fin de
proporcionar medios para el desarrollo y la optimización de procesos impulsados
científicamente. El énfasis está en la comprensión del mecanismo de los procesos de
formación de partículas que conducen a la optimización del proceso. Este principio se ha
aplicado, por ejemplo, a la investigación de procesos de secado por pulverización
(118,119), cristalización (117,120) y precipitación de fluido supercrítico (116). Por
ejemplo, la difracción láser y la anemometría Doppler en combinación con interferometría
láser y velocimetría de imágenes de partículas (PIV) se usaron para estudiar el proceso de
formación de partículas mediante la mezcla o pulverización de soluciones orgánicas con
dióxido de carbono supercrítico (116). Se construyeron celdas ópticas de alta presión de
flujo directo a través de un principio modular por el cual el área de vista podría moverse
con respecto a la boquilla usando diferentes longitudes de secciones de tubo de conexión,
permitiendo así la observación de diferentes áreas de flujo. Tal configuración también
podría aplicarse para controlar la relación entre los flujos de alimentación, uno de los
parámetros críticos para este proceso. En un estudio reciente, Dem et al. Estudiaron un
problema muy importante de la cinética de evaporación durante el deshumidificación.
usando una sola técnica de gota (119). Se investigó la cristalización de D-manitol, un
excipiente para las formulaciones DPI. La información sobre el proceso de evaporación se
obtuvo a través de mediciones de dispersión de luz estática (elástica), mientras que la
cristalinidad del material resultante se determinó mediante espectroscopía micro-Raman
(dispersión no elástica). Identificando las formas polimórficas generadas en diferentes
condiciones de temperatura y humedad relativa, se construyó un diagrama de fases de D-
manitol y se asignó la formación de tres formas polimórficas diferentes así como una fase
de solución a alta humedad relativa a distintas regiones de las condiciones del proceso.
La aplicación más importante del análisis en línea / en línea se encuentra en el área de
fabricación farmacéutica, que se manifiesta a través de la iniciativa de tecnología analítica
de procesos (PAT). PAT es un esfuerzo de colaboración entre la FDA y la industria para
facilitar la introducción de tecnologías nuevas y eficientes en la industria. La fabricación
farmacéutica se ha basado históricamente en procesos por lotes seguidos de pruebas de
laboratorio y análisis para verificar la calidad del producto (121). La mayoría de estos
procesos se han desarrollado empíricamente. Los controles de procesos automatizados, los
ajustes del proceso o las mejoras se consideraron difíciles para cualquier proceso validado y
aprobado. Sin embargo, es bastante claro que se puede obtener mucha ventaja aplicando la
ciencia de la ingeniería de procesos. PAT se define como un sistema para el análisis y
control de procesos de fabricación basado en mediciones oportunas de parámetros de
calidad críticos y atributos de rendimiento de materias primas y materiales en proceso. El
objetivo principal de PAT es adquirir un conocimiento profundo del proceso, basado en
datos electrónicos en proceso en lugar de en pruebas de laboratorio del producto final. La
definición de los parámetros críticos, el método de su análisis y control están directamente
relacionados con la aplicación de técnicas en línea / en línea. Incluye estrategias de control
de procesos de retroalimentación, estrategias de optimización de procesos de productos y
herramientas de administración de información.
La distribución del tamaño de partícula y la forma de la partícula, junto con algunas
propiedades químicas y de estado sólido seleccionadas, generalmente constituyen las
variables críticas de un proceso de fabricación farmacéutico. Típicamente, algunos
diámetros medios de partículas relevantes forman parte del circuito de control de
retroalimentación. En un ejemplo de proceso de mezcla esquemático tomado de la
referencia (122), los tamaños de partícula de los materiales se controlan y controlan en dos
etapas de proceso consecutivas antes de la compresión de la tableta: primero, funcionalidad
/ dispensación de materia prima para el ingrediente activo y los excipientes y, segundo ,
distribución del tamaño de partícula frente al tiempo de mezcla con disgregante y otros
excipientes (Fig. 11). Una causa principal de la baja uniformidad de contenido de las
formas de dosificación sólidas es una falta de coincidencia del tamaño de partícula del
fármaco y del excipiente que conduce a la segregación, especialmente para las mezclas de
baja relación de fármaco a excipiente (2). La baja uniformidad del contenido puede resultar
incluso con la mezcla ideal si el tamaño de partícula del fármaco es demasiado grande y / o
la distribución del tamaño de partícula es demasiado amplia. Sin embargo, la reducción del
tamaño de partícula del fármaco también puede afectar negativamente a la aglomeración
del fármaco y a las propiedades de flujo del polvo. Por lo tanto, hay un rango óptimo de
tamaños de partículas de fármaco aceptables como el parámetro de calidad crítico. Este
parámetro también puede depender de otras propiedades relacionadas (por ejemplo,
superficie, forma, cohesión) de las partículas del fármaco así como también de los
materiales del excipiente. Por lo tanto, el PAT aquí debería ser capaz de proporcionar un
resultado de información que conduzca a modelos predictivos y al proceso de fusión más
eficiente.

CONCLUSIÓN Y PERSPECTIVAS FUTURAS

Los datos de tamaño de partícula aparentemente inconsistentes, en términos de precisión y

precisión de varios instrumentos, generalmente se remontan a las diferencias en los
diámetros de partícula equivalentes medidos, que se pueden magnificar por la influencia de
la forma de partícula y la variabilidad de la dispersión de partículas. . En esta revisión se
enfatizan los factores metodológicos fundamentales asociados con la forma de las
partículas y las propiedades aerodinámicas de las partículas. Estos factores se pueden tener
en cuenta mediante una interpretación cuidadosa de los datos y una descripción matemática
apropiada de la distribución del tamaño de partícula, en la que la conversión entre
diámetros equivalentes físicamente diferentes, por ejemplo, geométrica y aerodinámica, es
posible y sirve como herramienta analítica útil. El mismo instrumento y el mismo método
finalmente se deben usar para las pruebas de control de calidad de un producto
determinado. Sin embargo, es necesaria una correlación cruzada entre diferentes métodos
para seleccionar una técnica relevante y proporcionar un análisis de datos en profundidad.
El desarrollo de la instrumentación de dimensionamiento de partículas se puede prever en
las áreas de medidas automáticas de tamaño / forma. La aplicación de sistemas de alta
velocidad puede desarrollarse para monitorear procesos dinámicos que incluyen sistemas
analíticos más sofisticados basados en redes neuronales. Esto es particularmente importante
para la integración de PAT en la fabricación farmacéutica. Se requiere una medición
cuantitativa y consistente de los fenómenos de aglomeración y la mejora de las técnicas de
dispersión para todas las clases de instrumentos de tamaño de partícula. Para una
interpretación de datos más completa, se necesitan nuevos algoritmos computacionales
probados por modelos empíricos para la conversión consistente entre diferentes diámetros
de partículas equivalentes, es decir, entre los diámetros de proyección estadística
proporcionados por diversos instrumentos de imagen y difracción láser, diámetros de
volumen equivalentes y diámetros de partículas aerodinámicas. Está claro que la dinámica
de fluidos computacional (CFD) se puede aplicar para predecir, con alta precisión, los
factores de forma dinámica y los diámetros aerodinámicos (o hidrodinámicos) equivalentes
en diferentes regímenes de flujo. Esto es particularmente importante en el caso de las
mediciones de aerosoles. Un problema adicional, con pocos datos actualmente disponibles,
es la orientación preferencial de las partículas y el tiempo característico de la rotación de
las partículas. El control adecuado de este problema proporcionará una comprensión de la
dinámica de la partícula y permitirá la determinación de la forma de la partícula. La forma
de la partícula en algunos casos puede variar con el tamaño de partícula debido a los
diferentes mecanismos de precipitación para fracciones de partículas finas y gruesas. Este
problema solo se puede abordar utilizando técnicas de medición de exploración de flujo de
alta resolución. Finalmente, está claro que a medida que la industria farmacéutica valida y
acepta más métodos de tamaño de partículas, se incluirán en las directrices de las
farmacopeas y las agencias reguladoras, lo que permite una aplicación más consistente de
estas técnicas en productos farmacéuticos.