UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
Escuela Académico Profesional de Microbiología y
Parasitología

LABORATORIO DE FISIOLOGÍA MICROBIANA

PRACTICA 1: DETERMINACIÓN DE LOS
REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES PARA EL
CRECIMIENTO DE DIFERENTES GRUPOS
BACTERIANOS

Profesora : Dra. Susana Gutiérrez Moreno

Alumno : Herrera Vivas, Adriana

15100050

Ciudad Universitaria, Setiembre del 2018

INTRODUCCIÓN
Todo organismo debe encontrar en su entorno todas las sustancias necesarias para la
generación de energía y la biosíntesis celular. Los químicos y elementos de este
ambiente que se utilizan para el crecimiento bacteriano se conocen
como nutrientes o requerimientos nutricionales. Muchas bacterias se pueden cultivar en
el laboratorio en los medios de cultivo que están diseñados para proporcionar todos los
nutrientes esenciales en solución para el crecimiento bacteriano. Las bacterias que son
simbiontes o parásitos intracelulares obligados de otras células, generalmente células
eucariotas, son (no inesperadamente) difíciles de cultivar fuera de sus células
hospedadoras naturales. Si el microbio es un mutualista o un parásito, la célula huésped
en última instancia debe proporcionar los requisitos nutricionales de su residente.

Muchas bacterias pueden identificarse en el medio ambiente mediante inspección o

utilizando técnicas genéticas, pero los intentos de aislarlas y cultivarlas en cultivos
artificiales no han tenido éxito. Esto, en parte, es la base de la estimación de que
podemos conocer menos del uno por ciento de todos los procariotas que existen.

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RESULTADOS
1. Evaluación del crecimiento en medio con fuente de carbono
orgánico y en medio con fuente de carbono inorgánico.

Fig. 1.1 Cepa de E.coli (izquierda) Fig. 1.2 Cepa de A.ferrooxidans

y A.ferrooxidans (derecha) en (izquierda) y E.coli (derecha) en
medio TSB medio 9k

E.coli A.ferrooxidans
TSB
 
Caldo 9k
 
Tabla 1.1 Resultados del crecimiento en TSB y caldo 9k

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2. Evaluación del crecimiento en un medio mínimo y en un medio
completo

Fig. 2.1 Cepa de E.coli Fig. 2.2 Cepa de E.coli

prototrófica en medio TSB y autotrófica en medio TSB y MMD
MMD

E.coli prototrófica E.coli auxotrófica

Medio mínimo de
Davies
 
TSB  
Tabla 2.1 Resultados del crecimiento en MMD y TSB

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 3. Determinación de los requerimientos mínimos para el
crecimiento.

Fig 3.1 Siembra de E.coli, Saccharomyces cerevisiae y A.Ferrooxidans por cuadrantes

en agar + agua (01), agar + agua + sales (02), agar + agua + sales + fuente de
nitrógeno (03) y agar + agua + sales + fuente de nitrógeno + fuente de carbono (04)

E.coli S. cerevisiae A.Ferrooxidans Control

Agar    
Agar + agua    
Agar + sales + N    
Agar + sales + N + C    

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 Tabla3.1 Resultados del crecimiento en placa

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1. Evaluación del crecimiento en medio con fuente de carbono
orgánico y en medio con fuente de carbono inorgánico.
El objetivo de esta prueba fue el de demostrar la diferencia metabólica entre 2
cepas: E. coli (heterótrofa) y una cepa de Acidiothiobacillus ferrooxidans
(Autotrofa)

Como se observa en las imágenes ( Fig 1.1 y 1.2) Escherichia coli creció en el
tubo con caldo TSB y no en el tubo con caldo 9k.

Esto se debe a que Escherichia coli es una bacteria heterótrofa, lo que significa
que para su nutrición necesita de una fuente de carbono orgánico, la cual es
satisfecha en el caldo TSB gracias a la dextrosa y la caseína que están presentes en
su composición, en el caso del medio 9k, no se observa crecimiento debido a que
este medio básicamente está constituido por sales minerales, las cuales a su vez,
inhiben su crecimiento.

En oposición, Acidithiobacillus ferroxidans es una bacteria que para su

crecimiento necesita de sales minerales, y por ende no necesita el carbono
orgánico del caldo TSB, el Acidithiobacillus ferrooxidans tuvo un ligero
crecimiento en el tubo con caldo 9k y no en el caldo TSB (fig 1.2); esta cepa es
autótrofa y solo necesita el CO2 del ambiente como fuente carbonada, sin
embargo cabe mencionar que esta cepa además requiere de Fe para la elaboración
de ATP, esta bacteria tiene las rutas de ATP y compuestos carbonados orgánicos
completamente separadas, el crecimiento de Acidithiobacillus ferrooxidans
hubiese sido mayor si hubiese tenido mayor cantidad de oxígeno

2. Evaluación del crecimiento en un medio mínimo y en un medio

completo
El objetivo aquí fue el de demostrar las diferencias entre 2 cepas de la misma
especia (E. coli), siendo la diferencia en que una era prototrófica y la otra
auxotrófica.La prueba consiste en sembrar ambas cepas en el medio mínimo de
Davis, este medio contenia una sola fuente de carbono.

La cepa prototrófica de Escherichia coli mostró un ligero crecimiento en el medio

mínimo y en el caldo TSB (fig 2.1); esto se debe a que la cepa es prototrófica, es
decir tiene todo su material genético en condiciones para la síntesis de todos los

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 compuestos necesarios en su metabolismo, para esta cepa no es indispensable la
presencia de dichos compuestos en el medio de cultivo.

La cepa auxotrófica de Escherichia coli únicamente crece en el TSB y no en el

medio mínimo (fig 2.2), esto debido a que esta cepa es mutada, y por ende tiene
su ADN dañado, lo cual hace que estas cepas sean incapaces de sintetizar ciertos
compuestos indispensables para su metabolismo, por ese motivo, solo crecen en el
TSB ya que este tiene en su composición dichos compuestos.

3. Determinación de los requerimientos mínimos para el

crecimiento.

Finalmente en la prueba de los requerimientos mínimos tenemos que

Saccharomyces cerevisiae solo creció en una de las cuatro placas, esto se debe a
que, al ser este una levadura, necesita de un medio ligeramente ácido para su
desarrollo. Por otro lado tenemos que Escherichia coli logró crecer solo en la
última placa (Fig. 3.1) esto se debe a que en dichas placas se cuenta con una
fuente de carbono, sales y agua los cuales los componentes mínimos que esta
bacteria necesita para su desarrollo; A.Ferrooxidans no creció en ninguna placa,
esto se debe a que es una bacteria muy exigente que no puede crecer en un
medio que no cuente con una fuente de carbono, nitrógeno, sales y agua.

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CUESTIONARIO
1. Establezca semejanzas y diferencias ente los organismos autótrofos y
heterótrofos

Los requisitos bacterianos para el crecimiento incluyen fuentes de energía,

carbono "orgánico" (por ejemplo, azúcares y ácidos grasos) e iones metálicos
(por ejemplo, hierro). La temperatura óptima, el pH y la necesidad (o la falta de
necesidad de oxígeno) son importantes. Las bacterias se pueden clasificar en el
siguiente tipo de acuerdo con su capacidad para sintetizar el metabolismo
esencial.

Autótrofos: - Estas son bacterias que pueden sintetizar sus propios alimentos
orgánicos a partir de sustancias inorgánicas. Ellos usan dióxido de carbono para
la obtención de carbono y utilizan sulfuro de hidrógeno (H2S) o amoníaco
(NH3) o hidrógeno (H2) como la fuente de hidrógeno para reducir de carbono

Heterótrofos: - Los microbios obtienen su carbono de compuesto orgánico, tal

como azúcar, proteínas y lípidos. El hidrógeno se obtiene generalmente del agua,
y el oxígeno se obtiene de la atmósfera o del agua, donde se encuentra en estado
disuelto.

2. De dos ejemplos de microorganismos auxotróficos y prototróficos.

Podríamos nombrar muchas especies bacterianas, puesto que por definición una
cepa auxotrofa tiene la secuencia de DNA afectada y no puede metabolizar un
compuesto. Ej E. coli auxotrofica para el triptófano, o Pseudomona auxotrofica
para valina.

3. ¿Cuáles son los componentes mínimos que sostienen el crecimiento

bacteriano?

De acuerdo a la práctica realizada, en especial a la tercera prueba, podemos

asegurar que toda cepa bacteriana requiere al menos una fuente carbonada como
un azúcar y además una fuente nitrogenada para su metabolización y
transformación a diferentes compuestos como proteínas y otros. De no ser así la
bacteria no podría conseguir un ATP suficiente o nutrientes necesarios para su
desarrollo y proliferación.

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BIBLIOGRAFÍA

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http://www.uobabylon.edu.iq/eprints/publication_10_1062_180.pdf

 BASAURE, P.; Microorganismos/ Nutrición y Crecimiento. Febrero 2006

Santiago – Chile:
http://www.manualdelombricultura.com/foro/mensajes/24224.html

 Producto: TRYPTONE SOY BROTH Y TRYPTONE SOY AGAR TUBO.

(2009). Retrieved from http://f-
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Tsuzuki, M. G., Hernández, L., Camacho, A. y Urzúa, M. C. (2011). Manual de
Prácticas de Microbiología General. México: UNAM, Facultad de Química.

 ZUÑIGA, L.; Necesidades Nutricionales de los microorganismos , Noviembre

2012: https://prezi.com/5pachiuqptnk/necesidades-nutricionales-de-los-
microorganismos/