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Reacción de la Ninhidrina:

MUESTRA RESULTADO OBSERVACION


ALBUMINA NEGATIVO COLOR AMARILLO
CLARO
METIONINA POSITIVO COLOR VIOLETA CLARO
SACAROSA NEGATIVO TRANSPARENTE
MUESTRA POSITIVO COLOR VIOLETA
PROBLEMA OSCURO

Reacción de Adamkiewicz:

MUESTRA RESULTADO OBSERVACION


ALBUMINA POSITIVO COLORACION VIOLETA
TENUE EN LA INTERFASE
TRIPTÓFANO POSITIVO COLORACION VIOLETA
OSCURO EN LA
INTERFASE
MUESTRA NEGATIVO TRANSPARENTE
PROBLEMA
Reacción Xantoproteíca:

MUESTRA RESULTADO OBSERVACION


ALBUMINA POSITIVO AMARILLO CON
PRECIPITADO NARANJA
TRIPTÓFANO POSITIVO NARANJA
FENILALANINA NEGATIVO TRANSPARENTE
MUESTRA POSITIVO NARANJA
PROBLEMA

Reacción de los Tiogrupos

MUESTRA RESULTADO OBSERVACION


ALBUMINA POSITIVO CAFÉ OSCURO
METIONINA NEGATIVO TRANSPARENTE
CISTEINA POSITIVO CAFÉ CLARO
MUESTRA NEGATIVO TRANSPARENTE
PROBLEMA
Análisis de resultados

Reacción de Adamkiewicz:

La reacción Adamkiewick, o también conocida como reacción de Hopkins-Cole en la


cual los derivados del indol dan productos de condensación cuando se tratan con
aldehídos aromáticos en presencia de acido sulfúrico o clorhídrico, esta es una prueba
específica para el triptófano , al ser el único aminoácido con el grupo indol presente, la
reacción con dicho aminoácido presenta un anillo violeta en la interface. La estructura
exacta del compuesto violeta no se conoce, pero parece estar relacionado con el
producto de condensación del aldehído del ácido Glioxálico con los nitrógenos de dos
anillos indólicos, como se muestra en la reacción, ya que también se pueden formar
complejos con otros aldehídos. La reacción general está dada de la siguiente manera:

Imagen. Reacción de Adamkiewicz. (Velasquez, Ordorica)


Triptófano
El triptófano es un aminoácido aromático, el grupo R contiene una estructura
heterocíclica denominada indol, el indol es un anillo bencénico fusionado con los
enlaces C2-C3 del pirrol. Es un aminoácido no polar y según su conformación es
de esperar que también reaccione a la prueba xantroproteica.

El Reactivo de Adamkiewick es una disolución de Acido Glioxilico en agua que al


mezclarse con el triptófano el grupo carbonilo del acido glioxilico se condensa
con el grupo indol generando un color purpura en presencia de acido sulfúrico
(H2SO4)como agente deshidratante. Se observo claramente una coloración
violeta en la interface del acido sulfúrico y la solución debido a una reacción
especifica con el grupo -R (indol) del triptófano, como reacción especifica para
este aminoácido.

El triptófano puro no da la reacciona menos que contenga indicios de iones


férricos o cúpricos. Los cloratos, nitratos, nitritos y cloruros en exceso impiden la
reacción.(Vejar.2005)

El triptófano es un aminoácido fundamental cuando le ocurre una


descarboxilación y produce triptamina, fundamental para el sistema nervioso y el
cerebro, al reaccionar con un grupo OH u obtener la serotonina, un
neurotransmisor y vaso conductor del sistema nervioso central.
Albumina
Los resultados para la albumina para la reacción de reacción Adamkiewicz,
proporcionaron información acerca de su composición química, observamos la
formación de un halo violeta tenue en la interface con precipitación, lo que indica que la
prueba es positiva y que como tal la albumina contiene el triptófano dentro de su
estructura molecular.
La albumina es una proteína compuesta de 610 aminoácidos organizados en una
cadena peptida simple, doblada sobre sí misma en varias capas y con un peso
molecular de 66.248.(Mora,2002). La albumina provee presión osmótica, sirve de
transporte a los nutrientes y protege al medio interno de sustancias toxica.
Comúnmente esta unida levemente al triptófano en el plasma.

La reacción Adamkiewick es positiva sólo para las proteínas que contienen Triptófano.
Se supone que el ácido concentrado hidroliza las proteínas en la interface liberando el
Triptófano para formar el halo violeta en la interface. Hay que tener en cuenta que como
se menciono anteriormente el Triptófano puro en solución no da positiva la reacción, a
menos que se agreguen agentes oxidantes como iones cúpricos, así que hay que tener
en cuenta que en la reacción efectuada con la albumina el Triptófano no se libero, y la
reacción obtenida es parcialmente correcta.

Solución Problema
Dado que para esta sustancia el resultado fue negativo, está claramente establecido
que la muestra problema no es triptófano, el único que podría reaccionar positivo.

Reacción de los Tiogrupos

Esta reacción también depende de las propiedades del grupo -R del aminoácido.
El grupo tiol se compone del grupo funcional sulfihidrilo -SH, ya que con
frecuencia el azufre tiende a ocupar el lugar del oxigeno en estructuras
orgánicas.
En esta reacción se detecta la Cisterna y proteínas que la contengan en medio
fuertemente alcalino el radical mercapto de la Cisterna se desprenden como ácido
sulfhídrico que se pone en evidencia añadiendo sales de plomo para que se forme de
un precipitado negro de sulfuro de plomo. Los cuales podemos observar en la siguiente
reacción.

Imagen. Reacción de tiogrupos. (Velasquez, Ordorica)


Cistina

La configuración relativa L del carbono alfa de los aminoácidos de las proteínas


equivale a la configuración absoluta S, excepto en la Cisterna, en la que el Azufre de la
cadena lateral tiene mayor importancia que los Oxígenos del Carbono carboxílico, por
lo que el carbono alfa de este aminoácido tiene la configuración absoluta (lo podemos
observar claramente en su estructura molecular).

AL aminoacido cisteina se le agrega una base que desprende ácido sulfhídrico al ser
remplazado el azufre en el aminoacido por un -OH, posteriormente el azufre separado
de los aminoacidos reacciona con una solución de acetato de plomo formando el
sulfuro de plomo, el cual nos indica un resultado positivo para la reaccion de tiogrupos
por medio de un precipitado oscuro, como lo pudimos observar en la prueba efectuada
a la cistina.

De los aminoácidos proteínicos no codificables la Cistina es el que está más


ampliamente distribuido en las proteínas. Se forma por la condensación de dos
moléculas de Cisteína a través de los grupos tiol. La oxidación de los grupos tiol forma
la estructura conocida como el Puente Di sulfuro. Los puentes di sulfuro participan en
forma importante en la estabilización de la estructura tridimensional de las proteínas,
cuando se forman entre dos regiones de una misma proteína, y en la asociación
cuando se forman entre dos cadenas distintas. En general, las proteínas son más
estables cuando tienen más puentes di sulfuro, las proteínas de las bacterias
termófilas, que viven en los manantiales de aguas termales tiene muchos puentes di
sulfuro. (Deblin,1999)

La albúmina

E l r e s u l t a d o d e e s t a p r u e b a e n a l b u m i n a f u e p o s i t i v o y a q u e presentó
un oscurecimiento intenso sin la presencia de un precipitado oscuro. El resultado es
coherente con el estudio y analisi de la composicion molecular de la albumina, en el
caso de la albúmina en suero es normal quie se encuentren 17 residuos de cisteína y 6
bipéptidos de glutamilcistina (Glu-Cis); en la lactoferrina, 17 residuos de cistina y 4
bipéptidos Glu-Cis y en residuos de cistina, 4 de lacto-albúmina alfa.

Aunque todas las proteínas están compuestas de aminoácidos unidos entre sí por
enlaces peptídicos, es claro que la albumina está compuesta por diferentes
aminoácidos y por esta razón las diferentes pruebas de color producen reacciones que
varían en la intensidad del
color de acuerdo a la naturaleza y cantidad de los grupos contenidos en la proteína
particular. (Eleazar, Ortiz).

Hay métodos más eficientes para la clasificación y detección de aminoácidos en las


proteínas, por ahora estos métodos colorimétricos solo me permiten saber si hay algún
aminoácido presente en la proteína pero hay que tener en cuenta las condiciones de
falso positivo para cada reacción las técnicas de separación de aminoácidos en las
moléculas están determinadas por el rompimiento de enlaces peptídicos. Con la
hidrolisis enzimática y técnicas como la electroforesis y la cromatografía puede
investigarse la secuencia de aminoácidos en las proteínas.

Metionina

AL aminoacido metionina tambien arrojo un resultado positivo, de igual manera este


aminoacido esta compuesto por un grupo -S, al cual se le agrega una base separando
el asufre y conviertiendolo en ácido sulfhídrico, este asufre reacciona con una solución
de acetato de plomo formando el sulfuro de plomo, el cual nos indica un resultado
positivo para la reaccion de tiogrupos por medio de un precipitado oscuro.

La metionina también es un aminoácido esencial. En el caso de las plantas este es


usado para la síntesis del etileno. Este proceso es conocido como el ciclo de Yang o el
ciclo de la metionina.

Solución Problema
Dado que para esta sustancia el resultado fue negativo, está claramente establecido
que la muestra problema no es cistina. El aminoacido problema no detecto la presencia
del grupo -S.

CONCLUSIONES

 Para la reaccion de ninhidrina, observamos que dio positivo para la muestra


problema, la metionina. En el caso de la albumina solo se noto una leve
coloracion opaca tipo blancusca, y teniendo en cuanta las demas
coloraciones en tonos de violeta diferentes podemos concluir que podrian
haber deficiencia en la preparacion del reactivo, el cual nos permite la
identificacion de los aminoacidos.
 La reaccion xantroproteica obserbamos resultados positivos para el
tiptofano, albumina y muestra problema, debido a sus anillos
f e n ó l i c o s , l o s c u a l e s p o r l a n i t r a c i ó n d e l a n i l l o bencénico
presente en los residuos de aminoácidos y la albumina se obtubieron nitrocompuestos
de color amarillo. Los anillos Benceno del Triptofano están activados y reaccionan
fácilmente, mientras que el benceno de la Fenilalanina no tiene sustituyentes que lo
activan y no reacciona o reacciona con más dificultad.

 La reacción de dio positiva para triptofano, como reaccion especifica para este
aminoacido, al ser el unico que posee un grupo indol en su estructura molecular. Esta
prueba tambien permite determinar la presencia de tiptofano en proteinas como la
albumina, sin embargo hay que tener en cuanta que la reaccion no sera totalmente
positiva o puede arrojar resultados errados si el triptofano se encuantra en estado puro
y no hay la presencia de oxidantes. La reaccion d e l g r u p o i n d o l d e l triptofano
con el ácido glioxílico en presencia deácido sulfúrico concentrado, dan positivo al
observarse el anillo violeta.

 La reaccion de tiogrupos para la deteccion de aminoacidos


azufrados dio positivo para cistina, metionina y a l b u m i n a ,
confirmando la existencia del grupo -S en la estructura
m o l e c u l a r. S i n e m b a r g o h a y q u e m e n c i o n a r q u e n o s e o b s e r v o
como tal un precipitado oscuro sino una coloracion.

 Para la determinacion d ela muestra problema y según los resultados obtenidos,


deducimos que se trata de un aminoácido, el cual dio negativo para reaccion de
tiogrupos y reaccion de Adamkiewick, lo que principalmente hace que descartemos al
triptano como el aminoacido de la muestra problema, aunque la prueba xantroproteica
dio positivo, segun los resultados y por descarte sabemos que no se trata de
Fenilalanina ni Triptofano, dejando la tirosina como opción, ya que cuenta anillos
aromáticos derivados de benceno.

Bibilografia

 Deblin. Thomas M. (1999).Bioquímica. Libro de texto con aplicaciones


clinicas. Tercera edicion. Editoria Revert
 Mora. Rfael. (2002) Soporte Nutricional especial. Tercera Edición. Editorial
Medica Panamericana
 Vejar, Eva Irma.(2005) Practicas de Bioquímica descriptiva. Editorial
Unison.
 Barboza, Eleazar .Ortiz, Guadalupe. Manual de Prácticas de Bioquímica.
UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO. Campus Irapuato-Salamanca.
División Ciencias de la Vida
 vELASQUEZ, mARIA. oRDORICA, mIGUEL. Estructura. Las proteínas -
Bioquímica Médica I.