FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y

MATEMÁTICA
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGÍA

PRÁCTICA N°2
“Coloraciones de células y preparación de láminas en el
laboratorio”
2. INTRODUCCIÓN

Como futuros biólogos, es ideal tener una clara comprensión sobre todo lo que abarca
el tema de la coloración de microorganismos. Es fundamental en nuestra preparación ya
que sin estos conocimientos poco o nada se sabría sobre la verdadera diferenciación de
las partes de alguna sustancia u organismo. Para ello, además de adquirir la teoría, se
debe adquirir la experiencia a través de la experimentación, permitiendo llegar a
conclusiones y alcanzar objetivos.

3. OBJETIVOS

3.1. OBJETIVO GENERAL

❖ Aprender a preparar una muestra, colorear e identificar las partes de las células de
la muestra.

3.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS

❖ Observar diversas células usando diferentes colorantes en detalle al microscopio.

❖ Cumplir con los procedimientos para cada experimento.

4. MARCO TEÓRICO

4.2. DEFINICIONES CONCEPTUALES

4.2.1. Colorante

Es una sustancia química empleada en la coloración y resolución de las

imágenes. Al usarse diversos colorantes se hace posible la visualización de los
comportamientos celulares diferenciados.

Estos cambios de color se deben a una reacción física, la de cohesión molecular del
colorante en los cuerpos debido a la absorción de las materias porosas., y a una reacción
química; tal es la de la combinación entre la célula microbiana, que portan cargas
negativas, y los colorantes básicos cargados positivamente.

4.2.2. Coloración Simple

Llamada también tinción simple, consta en aplicar un solo colorante a la

preparación. Permite determinar la morfología y tamaño del microorganismo. Los más
usados son: azul de metileno, fucsina fenicada, cristal violeta, entre otros.

4.2.3. Coloración Compuesta

Llamada también tinción completa, consta en aplicar más de un

colorante a la preparación. Permite diferenciar algún componente del resto o entre ellos.
Los más usados son: la coloración de Gram y la coloración de Ziehl Neelsen.
 4.2.4. Coloración Gram

Es un tipo de coloración compuesta, creada por Christian Gram. Muy

utilizada en la bacteriología, puesto que, consiste en colorear las bacterias con violeta
genciana o cristal violeta, seguido del colorante mordiente, lugol, formándose un
compuesto yodado que logra fijarse a las bacterias y así determinar si son bacterias Gram
Positivas (+) o Gram Negativas (-); para ello, se clasifican como las primeras, si se pintan
de violeta; y de las segundas, si se pintan de rosado1.

5. MATERIAL Y METODOLOGÍA

5.1. MATERIAL BIOLÓGICO

❖ Catafilo de cebolla
❖ Raíces
❖ Hojas
❖ Tallos herbáceos
❖ Mucosa bucal
❖ Sarro dentario
❖ Alcohol acetona
❖ Fucsina básica o safrina

5.2. OTROS MATERIALES

❖ Microscopio
❖ Equipo de disección
❖ Láminas portaobjetos
❖ Láminas cubreobjetos
❖ Palitos mondadientes
❖ Papel toalla
❖ Goteros

5.3. EQUIPOS

❖ Microscopio

1
Ver anexo N° 1
5.4. REACTIVOS

5.5. METODOLOGÍA

5.5.1. COLORACIÓN SIMPLE

5.5.1.1. OBSERVACIÓN DE CORTE DE CATÁFILA DE CEBOLLA

5.5.1.2. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS DE MUCOSA BUCAL

5.5.2. COLORACIÓN COMPUESTA (COLORACIÓN GRAM)

5.5.2.1. OBSERVACIÓN DE BACTERIAS

5.5.2. SIN COLORACIÓN

5.5.2.1. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EN CORTES DE PLANTAS

6. RESULTADOS

7. CONCLUSIONES

8. DISCUSIONES

Comparando nuestros resultados con trabajos ya realizados y publicados vemos que

coincidimos en los resultados: ubicando la pared celular, núcleo, etc además de lograr la
identificación de estructuras celulares
También utilizando este método comparativo pudimos observar la realización de diversas
tinciones como el uso del colorante eosina-hematoxilina y la tinción de Ziehl Neelsen que
en comparación con la técnica usada en el laboratorio no hay grandes diferencias por lo
solo sería cuestión de facilidad realizar una u otro técnica (los resultados son los mismos)

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● Clínica Universidad de Gamarra. (2015). Obtenido de

https://www.cun.es/diccionario-medico/terminos/eosina el 15/09/18 a las 2:30 pm
● Hematoxilina-Eosina. (2011). Obtenido de http://hematoxilina-eosina-
uc.blogspot.com/ el 15/09/18 a las 5:26 pm
● Mundo Descargas. (2009). Obtenido de http://www.mundodescargas.com/apuntes-
trabajos/quimica_t/decargar_colorantes-y-conservantes.pdf el 21/09/18 a las 4:45
pm

ANEXOS

Imagen 1

Gram positivo y Gram negativo en el caso de cocos y bacilos.

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué se utilizan los colorantes para realizar las observaciones de las
células?
Porque permite una mejor observación de los diferentes compartimentos de la
célula, esto también depende del colorante que se use pues nos puede ayudar
 coloreando determinadas partes o alterando su estructura (ejemplo: engrosando los
flagelos)

2. ¿Al observar y hacer la comparación que usted realiza entre una célula no
coloreada y coloreada, qué diferencias encontró?
Se logra verificar que la célula coloreada posee zonas más resaltadas, además
genera una mejor observación con el microscopio debido a su fácil reconocimiento,
algo que no sucede con una célula sin colorear, en esta si bien se puede observar
también sus estructuras no lo hace de manera tan nítida como en el primer caso

3. ¿Diga qué es el colorante eosina?

Es un colorante de naturaleza química ácida, se asocia y colorea sustancias de
composición básica. Es un colorante con carga negativa por lo que no logra
penetrar la célula, solo lo hace en caso la membrana sea permeable y para esto la
célula tiene que estar muerta

4. ¿Qué es el colorante hematoxilina?

Es un colorante natural pues es extraído de la corteza del árbol Hematoxylon, su
naturaleza química es básica por lo que tiñe a las estructuras ácidas en color azul y
púrpura,una de estas estructuras es el núcleo

5. Qué diferencias encuentra entre una coloración simple y una coloración

compuesta?
La coloración simple es el uso de una sola tinción en una muestra, sea de células o
tejidos.
La coloración compuesta es el uso de más de una tinción de colorantes.
La diferencia radica en las diferentes zonas que los colorantes pueden resaltar de
la célula o del tejido, dependiendo de ser varios los colorantes los que actúen en la
muestra.

6. ¿Por qué se dice coloración gram positiva y gram negativa diferencias?

La diferencia más notable radica en el color resultante de las bacterias. Las
bacterias Gram positivas retienen la coloración azul mientras que las Gram
negativas no. Esto es debido a la composición de su pared celular y membrana.. en
el caso de las gram negativas cuentan con una pared celular gruesa por lo que
absorben una mayor cantidad de colorante mientras que las gram negativas tienen
una membrana externa y pared celular delgada

7. ¿Qué diferencias encuentra entre la observación de células de catafilo y

células de la mucosa bucal?
En las células de catafilo de cebolla se puede observó la pared celular, citoplasma
y núcleo (este último se observa mejor con ayuda del azul de metileno). su forma
es hexagonal y las células se encontraban juntas
En las células de la mucosa bucal se observó la membrana plasmática, citoplasma
y núcleo además de tener forma irregular y de estar aisladas
Diferencias:
● Presencia de pared celular (catafilo de cebolla)
 ● La forma (hexagonal e irregular)
● Disposición (juntas y aisladas)

8. ¿Por qué no utilizamos colorantes celulares para observar cortes en raíz,

tallos y hojas de plantas?
Porque en esta práctica solo se quería realizar un reconocimiento e identificación
de las estructuras celulares de manera básica, sin ayuda de algún colorante

9. ¿Qué diferencias resaltantes observa en los cortes de raíz, tallo y hojas en

vegetales?
Se observan diferentes tejidos con diferentes células, estas dependen de la parte
que estamos observando, difieren en tamaño, color y texturas.