FACULDADE ASSIS GURGACZ

POTENCIAL CICATRIZANTE DO MEL DE ABELHA (Apis mellifera L.) EM

LESÕES DO TECIDO CUTÂNEO DE RATOS WISTAR

Cascavel
2012
 INGRIDY MAYARA DE CAMARGO

POTENCIAL CICATRIZANTE DO MEL DE ABELHA (Apis mellifera L.) EM

LESÕES DO TECIDO CUTÂNEO DE RATOS WISTAR

Trabalho de conclusão de curso

apresentado a Faculdade Assis Gurgacz,
FAG, Curso de Farmácia.
Professor Orientador: Patrícia Stadler
Rosa Lucca
Co-orientador: Francine Martins Pereira

Cascavel
2012
 INGRIDY MAYARA DE CAMARGO

POTENCIAL CICATRIZANTE DO MEL DE ABELHA (Apis mellifera L.) EM LESÕES

DO TECIDO CUTÂNEO DE RATOS WISTAR

Trabalho apresentado no Curso de Farmácia da FAG, como requisito parcial para

obtenção do título de Bacharel em Farmácia, sob a orientação da Professora Patrícia

Stadler Rosa Lucca

BANCA EXAMINADORA

_______________________________
Prof. Patrícia Stadler Rosa Lucca
Mestre

_______________________________
Nome do Professor Avaliador
Titulação do Professor Avaliador

_______________________________
Nome do 2º Professor Avaliador
Titulação do Professor Avaliador

Cascavel, 24 de Novembro de 2012.

“Não é digno de saborear o mel aquele que se
afasta da colmeia com medo das picadas das
abelhas."

William Shakespeare
 DEDICATÓRIA
Dedico este Trabalho de Conclusão de Curso aos
meus pais, Valdomiro e Solange Beatriz Follmann de
Camargo, os quais fizeram tornar este sonho uma
realidade, unindo todos os seus esforços para que
isso fosse possível.

“Acredito sim em amor à primeira vista, pois amo

meus pais desde a primeira vez em que abri meus
olhos.”
 AGRADECIMENTOS
À Professora e Coordenadora Patrícia Stadler Rosa Lucca, pela brilhante e
competente orientação deste trabalho,
À co-orientadora Jacqueline Godinho, pela motivação e incentivo durante o
desenvolvimento prático,
À co-orientadora Doutora Francine Martins Pereira, pela atenção e esclarecimento
de dúvidas sempre que necessário,
Ao Professor e Coordenador Giovane Douglas Zanin, pela sua grandiosa
contribuição no crescimento pessoal e profissional de todos os acadêmicos,
A todos os Docentes da Faculdade Assis Gurgacz que de alguma forma
contribuíram para a grandiosa obtenção de conhecimento ao longo do curso,
À Bruna, do Hospital Veterinário da Faculdade Assis Gurgacz, pelo atendimento e
disposição para a realização deste projeto,
À Ana Caroline, da Coordenação Geral dos Laboratórios da Faculdade Assis
Gurgacz, pela competência e agilidade para requerimento dos materiais utilizados no
desenvolvimento deste trabalho,
Aos meus pais, por absolutamente tudo. Pelo exemplo de força e perseverança
fundamentais em minha vida e em minhas escolhas, permitindo ser quem sou com
orgulho e dignidade. Por sempre acreditarem e confiarem em mim, pelo amor
incondicional, pela vida, por existirem,
À minha Avó materna, Irene Follmann, que através de sua ampla experiência de
vida e conhecimento popular, fez despertar a ideia tema deste trabalho,
À toda a minha família que sempre compreendeu as minhas ausências durante
estes quatro anos, conferindo sempre apoio e afeto,
Às minhas amigas Luciane Fracaro e Nathany Agnolin que disponibilizaram grande
parte do seu tempo e paciência para contribuir com este trabalho, a vocês a minha eterna
gratidão,
Às minhas amigas e colegas Ana Paula Burato, Andressa Tecchio, Camila Pereira,
Eduarda Bordini, Janaina Pantano, Luiza Manfroi, Luciane Fracaro, Nathany Agnolin, Taís
Pawelak por toda amizade, apoio, companheirismo e compreensão durante estes quatro
anos, que fizeram tudo valer a pena. Diz o ditado: “Vão-se os anéis, ficam os dedos...”
Neste caso eu diria: O tempo passa, a amizade permanece, como um diamante, cada vez
mais lapidado, sem preço! Não existem palavras para demonstrar o tamanho da minha
satisfação em conhecê-las e tê-las sempre ao meu lado,
 À todos os meus colegas de turma, que, de uma forma ou de outra, serão
lembrados e guardados para sempre,
E, finalmente, a Deus por sempre me guiar e me iluminar.
ÀS COBAIAS

Apenas um “agradecimento” aos animais vítimas deste estudo não é o suficiente

para redimir ou desculpar a pretensão de usufruir sem o seu consentimento de suas
vidas, que falsamente atribuímos valor menor. Fica aqui, com muito respeito, a honrosa
menção.
 SUMÁRIO

REVISÃO DA LITERATURA.................................................................................. 10

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ...................................................................... 25

ARTIGO .................................................................................................................. 30

ANEXO 1: NORMAS DA REVISTA CIENTÍFICA .................................................. 45

REVISÃO DE LITERATURA

HISTÓRIA DO MEL
O Mel é conhecido pelo homem desde a pré-história, e desde então tem sido
amplamente utilizado principalmente na alimentação, sendo muito apreciado pelo seu
sabor característico. Dessa forma, foi provavelmente uma das primeiras fontes de açúcar
conhecidas pelo homem. Durante séculos foi considerado sagrado em virtude da sua
raridade e do seu paladar açucarado, sendo utilizado em cerimônias religiosas para
prestar homenagem aos Deuses e também para embalsamar defuntos (OSTERKAMP,
2009).
Na Idade Média, o Mel era considerado um alimento tão essencial para a existência
humana, que se encontraram alguns testamentos destinando as colmeias de propriedade
como herança para pessoas da família ou Igreja. O roubo de colmeias poderia até mesmo
ser punido com a morte (VARGAS, 2006).
Inicialmente era extraído de forma predatória, mas com o decorrer do tempo, os
Egípcios, considerados pioneiros na apicultura, aprenderam a manejá-lo de forma
sustentável, sem causar prejuízos às abelhas. Nesta época, cerca de 2.400 anos a.C. as
abelhas eram consideradas sagradas para algumas civilizações, e atualmente o Mel
representa uma importante fonte econômica para vários países. (EMBRAPA, 2003).
Pode ser definido como Mel, de acordo com a Resolução 12 de 1978, da ANVISA,
como um produto natural elaborado por abelhas, podendo ser produzido a partir do néctar
de flores ou exsudatos de plantas.
Para o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), na Instrução
Normativa Nº 11 de 20 de Outubro de 2000, o Mel é designado como um produto
alimentício produzido por abelhas melíferas, podendo ser elaborado por diferentes
substâncias, como pelo néctar das flores, excreções de insetos ou secreções de plantas,
as quais são recolhidas pelas abelhas que as transformam em mel, através de
substâncias específicas próprias, armazenam nos favos até sua maturação.
Dos produtos elaborados pelas abelhas, o Mel é com certeza o mais conhecido e
utilizado em todo o mundo, não só como alimento, mas também pelas suas propriedades
terapêuticas. Foi um dos primeiros alimentos conhecidos pelo homem em quase todas as
civilizações já conhecidas, sendo considerado como uma solução supersaturada de
açúcares, principalmente D-glicose e D-frutose, além de ser um composto rico em
vitaminas, sais minerais, fenóis e enzimas (MAIA et al., 2006).

10
O MEL

O mel é um alimento de extraordinário valor energético e medicinal (WOLFF,

2007), apreciado pelo homem como alimento por ser uma substância natural, com alto
valor nutritivo, possuir sabor característico, ser uma fonte de energia para o organismo e
também por contribuir pra o equilíbrio dos processos biológicos do corpo humano. Vários
autores evidenciam a importância da ingestão regular deste produto, já que possui
proporções adequadas de vitaminas, aminoácidos, fermentos e substâncias aromáticas
(OSTERKAMP, 2009).
Aparentemente simples, o mel é um dos produtos biológicos mais complexos já
estudados, pois tem sido reportado por conter em torno de 200 substâncias como
proteínas, vitaminas, minerais, ácidos orgânicos, flavonoides, ácidos fenólicos, enzimas e
outros fitoquímicos. Seu valor comercial está diretamente relacionado com a sua origem
floral, que é um dos principais parâmetros de qualidade, sendo os mais apreciados os
méis monoflorais, aqueles produzidos a partir de uma única espécie de planta (PEREIRA,
2010).
A composição do mel depende de vários fatores, como por exemplo, das fontes
vegetais de onde é derivado, solo, espécie da abelha que o produz, estado fisiológico da
colônia, estado de maturação do mel, condições meteorológicas, entre outros (ALVES et
al., 2005).
A Legislação Brasileira estabelece os requisitos mínimos para a qualidade do mel
destinado ao consumo humano. Para isso, as análises do mel floral devem seguir aos
seguintes padrões: açúcares invertidos com quantidade mínima de 65%; umidade máxima
de 20%; sacarose máxima de 6%; cinzas máximo 0,6%; devendo apresentar
necessariamente grãos de pólen e não ter indícios de fermentação (MAPA, 2000).

AS ABELHAS
As abelhas são consideradas insetos sociais, tendo em vista suas características
de ordem e especialização do trabalho (LIMA, 1997). São extremamente importantes na
natureza, pois através das etapas para a elaboração do mel, trabalham como agentes
polinizadores de diversas espécies de plantas, contribuindo assim para o equilíbrio do
ecossistema natural, bem como das populações nele presentes (OSTERKAMP, 2009)
Além da polinização, a qual garante melhor produção de pomares e lavouras, as
abelhas exercem outras atividades de extrema importância para o homem, como a
produção do mel, cera, própolis, geléia-real, pólen e apitoxina. (WOLFF, 2007) Esta
11
última, é uma substância química muito complexa presente no ferrão das abelhas,
conhecida como “veneno”, a qual possui grande importância comercial, principalmente na
manipulação de medicamentos. (SEBRAE, 2006)
Estes insetos são pertencentes à ordem dos himenópteros, ou seja, possuem
quatro asas membranosas nuas, incluídos na família Apidae. As espécies mais
conhecidas são do gênero Apis, a qual se caracteriza pela presença do ferrão. Neste
gênero, está presente a abelha doméstica, mais conhecida e utilizada na produção do
mel, a Apis mellifera (LIMA, 1997).
Apesar da grande variedade de espécies de abelhas produtoras de mel, o gênero
Apis mellifera tem se destacado e é considerado o mais importante na comercialização
devido à sua facilidade de domesticação e por estar presente em diversos países
apreciadores do mel (ALVES et al., 2005).
O gênero Apis mellifera é dividido em diversas subespécies. A primeira delas, a
Apis mellifera mellifera, popularmente conhecida como Nigra ou Alemã; Apis mellifera
carnica também chamada de Carniola; Apis mellifera ligustica, conhecida como abelha
Italiana; e por fim Apis mellifera adansoni, a abelha Africana. Existem ainda várias
subespécies do gênero Apis, porém não são tão conhecidas e difundidas comercialmente
(LIMA, 1997).

APICULTURA
De acordo com APACAME – Associação Paulista de Apicultores Criadores de
Abelhas Melificas Européias, a apicultura consiste na criação de abelhas em
confinamento, alojadas em colmeias artificiais, sob os cuidados do homem, utilizando-se
equipamentos e métodos para melhor explorar as capacidades naturais desde inseto.
Dessa forma, a apicultura é definida como uma atividade que envolve a
manipulação de abelhas, para que estas produzam mel e seus derivados a partir do
néctar das flores ou outras fontes. É considerada uma importante atividade comercial a
nível nacional, que cada vez mais vem despertando o interesse de criadores em diversas
partes do Brasil, conseguindo-se obter bons resultados econômicos (WELKE et al., 2008).
A criação de abelhas é vista como uma fonte de renda sustentável, já que do ponto
de vista econômico e social é uma alternativa de geração de renda para o homem,
propiciando a produção durante todo o ano, melhorando a qualidade de vida dos
apicultores. Por outro lado, contribui para a preservação do meio ambiente devido à
atuação das abelhas como agentes polinizadores naturais, favorecendo o equilíbrio e
manutenção da biodiversidade (KHAN et al., 2009).
12
 De acordo com Sabbag e Nicodemo, (2011), a vasta biodiversidade da flora
brasileira proporciona a obtenção de diversos tipos de Mel provenientes de inúmeras
floradas durante todos os meses do ano, com cores, aromas e sabores únicos. A
apicultura tem se mostrado uma importante atividade econômica e encontra-se difundida
em diversas regiões do Brasil, como Amazônia, Pantanal, Caatinga, Cerrado e Pampas
Gaúchos. Além da facilidade de adaptação, a apicultura gera pequeno ou nenhum
impacto ambiental e favorece a manutenção dos ecossistemas através da polinização.
Além da apicultura ser considerada uma atividade bastante rentável, o apicultor
não necessita ter suas atividades totalmente voltadas para o apiário, já que este não
necessita de cuidados diários, dessa forma, o criador pode ter outras atividades
secundárias geradoras de renda. Além disso, a produção do mel não gera gastos com a
alimentação das abelhas, já que as próprias fazem a coleta do seu alimento na flora
disponível (INSTITUTO CAMPINEIRO DE ENSINO AGRICOLA, 1982).
Em virtude da sua flora amplamente diversificada e uma grande biodiversidade,
sua vasta extensão territorial e a variabilidade climática, o Brasil possui um grande
potencial apícola, o que possibilita a produção do Mel durante todo o ano, diferente dos
demais países, que geralmente colhem mel apenas uma vez ao ano (PEREIRA, 2010).

DERIVADOS DO MEL
Além da produção do Mel, as abelhas também são responsáveis pela elaboração
de outros produtos, como: própolis, geléia-real, pólen, cera, apitoxina, entre outros. Todos
com características únicas e importante utilização no dia-a-dia do homem.

PRÓPOLIS
De acordo com a Resolução 24 de 2010, a própolis é definida como um produto de
características físicas resinosas, tendo uma composição variável, sendo elaborada por
abelhas, através da coleta em diversas espécies vegetais, as quais sofrem adição de
secreções. Dessa forma, é considerada pela ANVISA na Resolução 10/78, um
Medicamento Opoterápico, ou seja, substâncias obtidas a partir de glândulas, tecidos,
outros órgãos ou secreções animais.
A própolis é uma palavra de origem grega, pró (defesa) polis (cidade), ou seja,
“defesa da cidade” (SILVA et al. 2008), é assim definida devido ao seu emprego na
colmeia, já que é utilizada para a proteção do mel contra micro-organismos, mantendo-o
saudável e de boa qualidade (PONTE, 2003).

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 A resina coletada pelas abelhas para elaboração da própolis é proveniente
geralmente da casca das árvores, gemas apicais, brotos, flores, exsudatos de plantas e
até mesmo nas folhas. Dependendo do material coletado, a qualidade da própolis é
definida, além disso, pode interferir na atividade biológica e no seu uso medicinal (SILVA
et al. 2008).
É um produto amplamente utilizado na terapêutica tradicional, alguns estudos
apontam que já é empregado a mais de 5000 anos. Os primeiros indícios demonstram
que os egípcios deram início à utilização da própolis para embalsamar os mortos.
Posteriormente passou a ser utilizada na forma de unguento pelos gregos. (SILVA et al.
2008).
A própolis possui em sua composição 50 a 55% de resina bálsamo; 5 a 10% de
pólen; minerais; vitaminas; enzimas; 30 a 40% de cera e 10% de óleos voláteis. Além
disso, podem ser encontrados flavonoides; terpenos; ácidos aromáticos; ácidos orgânicos;
cumarinas e vitaminas (BERNARDO, 1990, apud PONTE, 2003). Em alguns estudos, já
foram identificadas várias propriedades da própolis, como antimicrobiana, cicatrizante,
antiviral, fungicida, antiulcerogênica, anti-inflamatória, imunoestimulante e antioxidante
(PONTE, 2003).

GELEIA REAL
A geleia real é uma substância produzida e secretada pelas abelhas operárias
entre o 5º (quinto) e 14º (decimo quarto) dia de vida, através das glândulas mandibulares
hipofaríngeas. Apresenta cor branco-acinzentada, com aparência viscosa, de odor
característico e não desagradável. É um dos produtos mais importantes da colmeia
(AMOEDO, 2001), pois serve como alimentação para as larvas de abelhas operárias nas
primeiras 90 horas de vida, alimentação de toda a fase larvária dos zangões, e
alimentação da abelha rainha durante toda a sua vida (TOLEDO, 2005).
Por ser um produto com muitos benefícios atribuídos e de difícil obtenção, já que é
encontrado nas colmeias em pouquíssima quantidade, possui um alto valor comercial,
assim, para aumentar o volume de geleia real, esta se torna alvo de adulteração e
falsificação, principalmente com adição de água. Os benefícios atribuídos à geleia real
são: aumento da fertilidade, atividade antileucêmica, atividade antibiótica e
hipocolesterolemiante (AMOEDO, 2001).
A maioria dos seus benefícios estão atribuídos à complexa composição da geleia
real, a qual possui proteínas, aminoácidos, ácidos orgânicos, hormônios esteroides,

14
fenóis, minerais e açúcares, sendo um dos mais valorizados produtos apícolas
(PAMPLONA et al., 2004 apud MORAIS et al., 2009).
O uso da geleia real teve despertado interesse devido aos efeitos na abelha rainha,
que possui sua alimentação rica em geleia real, por isso acredita-se que sua ação seja
similar em seres humanos. Muitos estudos avaliam o aumento do processo reprodutivo de
animais, o que geralmente resultou na melhora da fertilidade e do desenvolvimento do
embrião (HUSEI E HADDAD, 2006 apud MORAIS, 2009).

PÓLEN
O pólen é outro elemento apícola que vem sendo utilizado há muitos anos como
suplemento da dieta humana em virtude a sua alta concentração de proteínas, lipídeos,
vitaminas e sais minerais (SOUZA et al., 2003). É coletado pelas abelhas nas anteras das
flores, o qual representa o gametófito masculino, e é essencial para nutrição desses
insetos, tanto na fase de larva como na abelha adulta, pois se sabe que as abelhas só
elaboram a geleia real a partir da digestão do pólen (MODRO et al., 2007).
Ainda de acordo com Modro (et al., 2007), são atribuídos diversos benefícios ao
consumo de pólen, como por exemplo, atividade fortificante e estimulante, além de
proporcionar bem estar e vigor físico.

APITOXINA
A Apitoxina é o “veneno” produzido pelas abelhas, a palavra tem origem no latim
“apis”, que significa apelha, e “toxikon”, veneno. É considerada uma neurotoxina, sendo
uma substância complexa produzida por glândulas presentes no abdômen da abelha
operária. Diversos estudos apontam que a Apitoxina em pequenas doses pode ter ações
terapêuticas, como por exempl,o a sua propriedade antiartrítica, que já é conhecida há
muitos anos (CALLEGARI et al., 2006).
Atualmente, já existem no mercado medicamentos preparados à base de apitoxina,
sendo comercializados em diversos países. Este princípio ativo tem se mostrado eficaz na
redução de inflamações reumáticas e sinusites. Acredita-se que seu mecanismo de ação
baseia-se na estimulação da glândula suprarrenal, levando a uma aumentada produção
de cortisol, considerado um poderoso anti-inflamatório fisiológico (CALLEGARI et al.,
2006).
Uma das vantagens do uso da Apitoxina é a sua capacidade de substituir os
corticoides em alguns casos, pois se sabe que o uso destes medicamentos pode produzir
sérios efeitos adversos devido à demasiada produção de cortisol, ao contrario da
15
Apitoxina, que induz a produção apenas da quantidade necessária ao organismo. Devido
ao seu importante emprego na terapêutica, a Apitoxina tem agregado um alto valor
comercial e tem sido amplamente procurada por diversos países, assim sendo, se
explorado da maneira correta e em potencial, pode trazer grande lucratividade para o
Brasil (CALLEGARI et al., 2006).

CERA
A cera de abelha é produzida a partir de glândulas cerígenas, localizadas no
abdômen do inseto. É um importante produto na colmeia, já que é utilizada na construção
de favos, os quais serão utilizados para o depósito do mel. Além disso, a cera é
amplamente utilizada industrialmente, seja como componente na produção de
medicamentos e cosméticos e também na medicina (SILVA et al., 2000).

A PELE
A pele, também chamada de cútis, é um órgão vital para o organismo humano, a
qual possui uma complexa estrutura de tecidos das mais variadas naturezas, que são
inter-relacionados harmonicamente. (SAMPAIO, 2008, p.1) É um órgão extenso, que
corresponde a cerca de 15% do peso corporal do homem, tendo como função principal
revestir e delimitar o corpo, protegendo-o do meio externo. Além disso, é um tecido
amplamente dinâmico, com ampla e constante capacidade de renovação e reparação
(AZULAY, 2008, p.1). É considerada a primeira linha de defesa contra as agressões do
meio externo, (PEYREFFITE et al.,1998, p.326) e um dos melhores indicadores da saúde
geral ao exame físico (SWARTZ, 1994, apud MOORE, 2001, p.10)
Além de ser envoltória, funcionando como uma barreira a organismos patogênicos,
também desempenha outras funções, como a detecção de estímulos sensoriais devido à
presença de componentes do Sistema Nervoso na derme; conservação da homeostasia
através da termorregulação, controle hemodinâmico; produção e excreção de alguns
metabólitos; impermeabilidade seletiva; preservação dos fluidos corporais; absorção da
radiação ultravioleta e produção de vitamina D (VIVIER, 2004, p.21).
De acordo com Azulay, (2008, p.12) a pele tem origem nos folhetos ectodérmicos,
do qual originam as estruturas epiteliais e neurais, como epiderme, glândulas, unhas,
pelos, melanócitos e nervos; e dos folhetos mesodérmicos, onde ocorre a formação da
derme e hipoderme.

16
 A pele é composta basicamente por três grandes camadas, uma mais externa, a
epiderme; uma camada intermediária chamada de derme; e por fim, a mais profunda,
conhecida como hipoderme ou tecido celular subcutâneo (SAMPAIO, 2008, p.1)
A epiderme é constituída basicamente por um tecido epitelial queratinizado
(AZULAY, 2008, p.1), tendo em sua composição alguns tipos celulares, como os
queratinócitos, células de Merkel e células de Langerhans (VIVIER, 2004, p. 22).
A epiderme é subdivida em quatro camadas bem definidas, chamadas basal,
espinhosa, granulosa e córnea. Na palma das mãos e na planta dos pés pode haver uma
quinta camada, localizada entre as camadas granulosa e córnea. A camada basal é
conhecida como a camada germinativa da epiderme (VIVIER, 2004, p.22), é composta
por uma fileira de queratinócitos, que em sua maioria possuem características de células
germinativas com capacidade de multiplicação. É a mais profunda camada da epiderme,
sendo responsável pela manutenção e formação da junção dermoepidérmica. Algumas
células resultantes da germinação permanecem na camada basal, outras, chamadas de
pós-mitóticas, perdem sua capacidade de mitose e iniciam um processo de diferenciação,
migrando para a superfície. (AZULAY, 2008, p.3).
Ainda de acordo com Azulay (2008, p.3), as células que migram para a superfície
deixando a camada basal, passam a sofrer uma série de transformações até adquirirem
características das células de malpighi, as quais compõe a camada espinhosa, sendo
dispostas em várias fileiras, que variam de acordo com a posição e localização
anatômica; hormônios; vascularização local; e também alguns fatores externos, como
possíveis traumas.
Migrando em direção à superfície, as células provenientes da camada espinhosa
amadurecem, adquirindo grânulos compostos por cerato-hialina, o que caracteriza a
camada granulosa. Por fim, essas células sofrem achatamento e perda do núcleo
formando a camada córnea, composta por células achatadas de queratina. (VIVIER,
2004, p.22).
A derme, camada intermediária da pele, é composta principalmente por colágeno e
elastina, e é nesta divisão que se encontram os anexos cutâneos; inervações; vasos
sanguíneos; e componentes celulares, como os fibroblastos e células de inflamação. É
dividida em derme papilar e a derme reticular (VIVIER, 2004, p.30).
Para Azulay (2008, p.10) a derme, além de ser divida em papilar e reticular, possui
uma terceira divisão, chamada derme adventicial. A derme papilar, também chamada de
superficial é o local onde predominam feixes finos de colágeno dispostos de forma
vertical. Na derme reticular ou profunda, estão localizados os feixes mais grossos de
17
colágeno, dispostos horizontalmente. Por fim, a camada adventicial encontra-se disposta
em torno dos anexos e vasos sanguíneos, e é caracterizada por possuir finos feixes de
colágeno, semelhante à derme papilar.
A hipoderme, também chamada de tecido adiposo subcutâneo é a camada mais
profunda da pele, caracterizada pela presença de grande quantidade de lipídeos, os quais
comprimem o núcleo das células contra a membrana citoplasmática. A hipoderme é a
camada responsável pelo isolamento térmico do organismo, reserva nutricional (VIVIER,
2004, p.32), proteção contra traumas externos, além de proporcionar modelação para o
corpo e mobilidade da pele, ao relacionar com as estruturas subjacentes (AZULAY, 2008,
p. 12).

TIPOS DE FERIMENTOS
Durante toda a vida, os seres humanos estão expostos a vários fatores que podem
interferir na homeostasia do corpo. Um fato comum que pode proporcionar esse
desequilíbrio encontra-se na ocorrência de lesões e ferimentos da pele, podendo estes
ser de natureza física ou química, ocasionados por fatores externos, ou até mesmo de
natureza biológica, proveniente de uma patologia do próprio organismo (BALBINO et al.
2005).
A pele, por ser um órgão de revestimento de superfície, é responsável por proteger
o conteúdo interno das agressões químicas, físicas, mecânicas e bacterianas, é a
primeira barreira de proteção e a principal atingida em casos de lesão (BORGES, 2006,
p.276).
As lesões de pele, geralmente resultam em perda tecidual, podendo atingir
diversas camadas da pele, como por exemplo, atingir alguns pontos ou lesar
completamente a derme, ou ainda, em casos de lesões mais profundas, chegar ao tecido
subcutâneo. Dessa forma, as lesões são classificadas de acordo com as suas
características, a fim de facilitar sua detecção e forma de tratamento (MANDELBAUM et
al., 2003).
A primeira classificação é definida como Ferida de Espessura Parcial, esse tipo de
ferida, atravessa a primeira camada da pele, a Epiderme, atingindo sua segunda camada,
a Derme, porém sem atravessá-la (HESS, 2002, p.172). É ocasionada geralmente por
traumatismos mecânicos ou pela realização de muitos procedimentos dermatológicos,
como peeling, dermoabrasão e alguns tratamentos por laser. A cicatrização desse tipo de
ferimento ocorre geralmente por reepitelização e deixa uma cicatriz praticamente
imperceptível (MANDELBAUM et al., 2003).
18
 Outra classificação sugerida por Mandelbaum (et al.,2003), são as Feridas de
Espessura Total, as quais atingem a derme de forma completa ou ainda podem se
estender até o tecido subcutâneo. Para Hess (2002, p.172), esse tipo de lesão pode
comprometer tanto o tecido subcutâneo, músculo e até mesmo os ossos. Podem ocorrer
por lacerações de pele, feridas cirúrgicas e úlceras vasculares. Como são lesões mais
profundas, necessitam da formação de um novo tecido de granulação, e a reepitelização
ocorre apenas nas margens da ferida. Nesses casos, a cicatriz deixada é marcante,
geralmente com queloides.
As lesões cutâneas também podem ser classificadas de acordo com a cor que
apresentam, a avaliação da cor pode ser extremamente útil para definir a gravidade da
lesão e direcionar o tratamento de forma correta, para que este tenha o efeito desejado
(HESS, 2002, p.174).
De acordo com o Conceito de Três Cores, se o ferimento apresentar cor
avermelhada, indica que o tecido de granulação está sendo formado de forma limpa e
saudável. Uma cor na escala de amarelo à amarelo esverdeado, indica a presença de
exsudato ou descamação, demonstrando que a ferida necessita de maiores cuidados com
a higiene. Por fim, a cor preta sugere a presença de escara, podendo até mesmo ocorrer
a necrose do tecido. Essa característica torna a cicatrização muito lenta, além de ser um
local propício para a disseminação de micro-organismos. Pode ocorrer a presença de
uma ou mais cores, assim sendo, a intervenção deve ser feita naquela em que apresenta
características mais graves, como a preta (HESS, 2002, p.174).

A EVOLUÇÃO HISTÓRICA DA CICATRIZAÇÃO

Desde a Antiguidade evidencia-se a preocupação do homem em proteger e tratar
as lesões cutâneas, de forma que se evite a sua progressão e repercussão, evitando
maiores problemas ao indivíduo. Manuscritos da Farmacopeia Egipcia 3000 a.C, revelam
que já eram utilizados curativos à base de mel e graxa, e Hipócrates, nas bases da
medicina científica recomendava a limpeza com água morna, vinho e vinagre, além de
definir os primeiros conceitos de cicatrização. (SANTIS et al., 2005).
Ainda de acordo com SANTIS, (et al., 2005), com o passar do tempo as técnicas
para curativos e cuidados com os ferimentos foram aprimoradas, surgindo em 1860 o
chumaço de algodão envolto em gaze, amplamente utilizado na atualidade. Ao final da
Segunda Guerra Mundial, surgiram os antissépticos, como o iodo, e os primeiros agentes
tópicos antimicrobianos. A partir daí, houve uma avalanche de novos estudos envolvendo
a cicatrização.
19
 Atualmente, existe uma gama de tratamentos e medicamentos para a cicatrização,
feitos por diversas vias de administração e uma diversidade de marcas. Com o
crescimento da Indústria Farmacêutica e a retenção das patentes pelas Multinacionais,
vários tratamentos para a cicatrização tornaram-se caros e inacessíveis para uma parcela
da população. Dessa forma, é importante que se realizem novos estudos para o
desenvolvimento de tecnologias mais simples e com menor custo, utilizando matérias
primas disponíveis em cada região (SANTIS et al., 2005).

ACOMPANHAMENTO DA PROGRESSÃO DA CICATRIZAÇÃO

A avaliação é um processo fundamental para o tratamento das lesões da pele, pois
só assim pode-se definir o tipo e o estágio das feridas através do acompanhamento das
suas características, como comprimento, largura e profundidade. Através desses dados,
pode-se analisar a contração, área da lesão e os progressos do tratamento
(MANDELBAUM et al., 2003).
O comprimento e largura da ferida são medidos pela distância linear entre os
bordos da lesão. O comprimento refere-se à direção da ferida que vai da cabeça aos pés
do indivíduo lesado, enquanto a largura é medida de lado a lado. Esses dados devem ser
registrados pela anotação das medidas ou até mesmo na forma de desenhos, dia após
dia, para que se verifique o quanto está cicatrizando e em qual velocidade. (HESS, 2002,
p.176).
Ainda de acordo com Hess (2002, p.180), a profundidade da ferida deve ser
mensurada de acordo com a distância entre a superfície visível até o ponto mais profundo
da base da ferida. Desse modo, se a profundidade variar na extensão da ferida, deve-se
medir o ponto mais profundo, com o auxílio de um aplicador flexível e estéril.

O PROCESSO DE CICATRIZAÇÃO
A cicatrização pode ser entendida como a capacidade do organismo de reconstituir
o tecido lesado, através de boas condições de higiene e desbridamento da ferida, que
nada mais é do que a retirada de materiais estranhos que possam retardar o processo de
reepitelização. (SALGADO et al., 2007).
O processo o qual envolve a cicatrização pode ser dividido em cinco fases
principais, porém que ocorrem de maneira simultânea, as quais envolvem a coagulação,
inflamação, proliferação, contração da ferida e remodelação (MANDELBAUM et al., 2003).
De acordo com Mandelbaum (et al., 2003) a coagulação tem inicio imediatamente
após a integridade da pele ser alterada, a qual depende diretamente da atividade
20
plaquetária e cascata de coagulação. Nessa fase, são liberadas várias substâncias, como
proteínas adesivas, substâncias vasoativas, fatores de crescimento e proteases. Segundo
Mendonça (2009), a coagulação sanguínea e a agregação plaquetária formam um tampão
rico em fibrina, que devolve a homeostasia do tecido e forma uma barreira contra a
invasão de agentes externos, organizando a matriz provisória para favorecer a migração
celular, auxiliando para as próximas fases do processo de cicatrização. A matriz provisória
é um componente rico em citocinas e fatores de crescimento, importantes para a
continuidade do processo.
A fase inflamatória tem início em torno de 3 a 5 dias após a lesão. Nesta etapa, a
agregação das plaquetas da fase de coagulação juntamente com a fibrina, forma uma
rede para que outras células possam infiltrar neste processo. É a preparação para a
cicatrização. Em seguida, os linfócitos, neutrófilos e macrófagos migram para o local
lesionado a fim de remover os tecidos desvitalizados (ANDRADE et al., 2010).
No momento da lesão, os leucócitos polimorfonucleados (PMN) são os primeiros a
chegar, e ficam por até cinco dias, sendo responsáveis pela fagocitose das bactérias. Os
macrófagos são considerados as células mais importantes da fase de inflamação, pois
permanecem no locam por até dez dias, sendo responsáveis pela fagocitose de bactérias,
desbridação de material estranho e formação de tecido granuloso. Por fim, a fibronectina,
sintetizada pelos fibroblastos, queratinócitos e células endoteliais, se adere à fibrina e ao
colágeno, proporcionando a consolidação do coágulo e os demais componentes da matriz
(MANDELBAUM et al., 2003).
São características da fase inflamatória a hiperemia, definida como o aumento do
fluxo sanguíneo na área da lesão; edema, pela concentração de agentes inflamatórios no
local; e dor, causada pela liberação de substancias como histamina, prostaglandina e
bradicinina (PEREIRA et al., 2010).
A fase de proliferação compreende três etapas: reepitelização, fibroplasia e
angiogênese. É nesta fase que ocorre o fechamento da ferida (MENDONÇA; NETTO,
2009). Na reepitelização ocorre a migração de queratinócitos provenientes das bordas e
anexos remanescentes. Na fibroplasia os fibroblastos se proliferam e inicia-se a produção
de colágeno, elastina e outras proteínas. Por fim, na angiogênese são formados novos
vasos sanguíneos, os quais aumentam a permeabilidade vascular, dando origem a uma
nova matriz (MANDELBAUM et al., 2007).
Ainda de acordo com Mandelbaum (et al., 2007) a próxima etapa da cicatrização é
a contração da ferida, porém esta fase só está presente em lesões de espessura total,
onde as bordas da ferida realizam um movimento centrípeto.
21
 Por volta da terceira semana ocorre a fase de maturação, também chamada de
fase reparadora. Esta etapa pode se estender por até dois anos, dependendo do local e
extensão da lesão (PEREIRA et al., 2010). Durante a maturação o ferimento encontra-se
recoberto por um tecido de granulação, que vai sendo enriquecido com fibras de colágeno
até adquirir aparência fibrótica, o que dá a aparência de cicatriz. Assim surgem as
primeiras fibras de colágeno tipo I e a maioria das células desaparecem, podendo-se
observar apoptose de fibroblastos e células endoteliais. Após o fechamento da ferida, os
leucócitos, responsáveis pela produção de fatores de crescimento são atraídos para o
local juntamente com os monócitos (BALBINO et al., 2005). A vascularização é
praticamente inexistente na cicatriz, dessa forma é considerada avascular
(MANDELBAUM et al., 2007). Considera-se uma cicatrização completa quando a
maturação e remodelagem da matriz extracelular é concluída. Assim sendo, uma cicatriz
completamente madura possui em torno de 70% da resistência quando comparada a uma
pele normal (BALBINO et al., 2005).

PROPRIEDADES TERAPÊUTICAS DO MEL E A SUA RELAÇÃO COM A

CICATRIZAÇÃO
A utilização indiscriminada de antibióticos para tratamento de feridas infectadas
tem favorecido ao aparecimento de linhagens de micro-organismos resistentes trouxe a
necessidade do desenvolvimento de novas classes destes medicamentos. Por outro lado,
diversas pesquisas têm contribuído para a utilização de produtos naturais que possam
atuar como terapias alternativas, visando diminuir o uso de antibióticos. O mel é um
suplemento alimentar, que atualmente vem recebendo cada vez mais importância no
consumo comercial devido às comprovações científicas das suas diversas propriedades
terapêuticas. (GONÇALVES et al.,2005).
Para Venturini et al. (2007) o Mel é um fluido viscoso, de coloração que varia do
quase incolor ao marrom escuro, aromático, doce e elaborado a partir do néctar das flores
e de secreções de partes vivas de determinadas plantas ou ainda de excreções de
insetos sugadores de plantas, no qual abelhas melíferas coletam, transformam, combinam
e deixam maturar nos favos das colmeias.
A utilização do mel como forma de tratamento já é conhecida desde a Antiguidade.
Seu uso tópico como cicatrizante e antibacteriano para tratamento de feridas,
queimaduras e lesões ulceradas da pele já foi diversas vezes evidenciado. Além disso,
atua impedindo a entrada de substâncias exógenas e perda de fluidos devido à formação

22
de uma barreira viscosa durante a sua aplicação. Acredita-se que a atividade
antibacteriana e bacteriostática ocorre devido ao alto valor do gradiente osmolar, além
disso, apresenta alguns compostos que auxiliam no mecanismo de cicatrização, como por
exemplo, o peróxido de hidrogênio (MALAVAZZI et al., 2005).
O Mel é considerado um produto natural de saúde, devido às suas qualidades
terapêuticas atribuídas, como atividade antimicrobiana, proteção de doenças
gastrointestinais, propriedades antioxidantes e prebióticas, além de uma valiosa fonte de
energia, sendo constituído essencialmente por açúcares, principalmente a D-frutose e D-
glicose, além de outros componentes como ácidos orgânicos, enzimas e partículas
sólidas (Maia et al., 2006).
Apresenta em sua constituição compostos como Polifenóis e Flavonóides, que lhe
conferem propriedades antioxidantes (Venturini et al., 2007). De acordo com Maia et al.
(2006) durante a maturação, o Mel é um produto estéril, devido a presença de uma
enzima chamada glicose-oxidase secretada pelas abelhas, a qual converte a glicose em
ácido glucônico e peróxido de hidrogênio, fortes antioxidantes capazes de atacar o
envoltório dos micro-organismos, mantendo a esterilidade do produto nos favos.
Para Maia et al. (2006), as propriedades antimicrobianas do Mel são atribuídas a
sua elevada pressão osmótica, baixa atividade de água, baixo pH, poucas proteínas,
baixo potencial redox pelo alto teor de açúcares redutores, intensa viscosidade que limita
a solubilidade do oxigênio, entre outros.
Pesquisas relacionadas por Miraglio apud Maia et al. (2006), demonstram que
diversas bactérias patogênicas e alguns fungos são sensíveis à atividade antimicrobiana
do mel, como Escherichia coli (diarreia); Klebsiella pneumoniae (pneumonia); Listeria
monocytogenes (Meningite); Mycobacterium tuberculosis (Tuberculose); Salmonella sp.
(Diarréia, septicemia, febre tifoide) Staphylococcus aureus (Infecções de ferimentos);
Streptococcus sp (Febre reumática, infecção na garganta, meningites, sinusites,
pneumonia); Vibrio cholerae (cólera), entre outros.
As propriedades antimicrobianas do mel foram também evidenciadas em um
estudo realizado por Gonçalves (et al., 2005), Para isso foi realizada semeadura de micro-
organismos em meio ágar e discos de mel foram distribuídos. As amostras foram
incubadas à 35º C e após 24 horas os resultados foram avaliados e comparados com
discos contendo antibióticos comerciais submetidos ao mesmo procedimento. O mel da
abelha sem ferrão Nannotrigona Testaceicornis apresentou significativa atividade sobre
cepas de Escherichia coli, Proteus spp., Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus
pyogenes, e Staphylococcus spp.
23
 Ao contrário do que dizem alguns conhecimentos populares, o Mel quando utilizado
para o tratamento de feridas, além de ser uma solução acidificada, inibindo o crescimento
de vários patógenos, é uma solução supersaturada de açúcares que possui uma baixa
atividade de água, sendo assim não oferece condições para o crescimento bacteriano
(MOLAN, 1999).
Ainda de acordo com Molan (1999), a atividade cicatrizante do mel refere-se a
estimulação do crescimento de tecido de granulação saudável e limpo, pelo processo de
epitelização, como já foi demonstrado em estudos histológicos com animais. Este fato
pode ser explicado devido à formação de peróxido de hidrogênio, capaz de estimular a
angiogênese a fim de fornecer mais oxigênio no local da lesão, característica importante
para a regeneração do tecido. Além disso, o pH ácido do mel, em torno de 3 e 4, acidifica
a ferida, fazendo com que mais oxigênio seja liberado. Por outro lado, a alta osmolaridade
do mel é capaz de extrair o líquido da ferida para o meio externo, fazendo com que ocorra
um novo fornecimento de linfa e nutrientes para regeneração de tecidos.

24
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CAMARGO, I.M.1; LUCCA, P.S.R.2

1
Faculdade Assis Gurgacz, Curso de Farmácia. Endereço: Av. da FAG, 750, 85806-095
Loteamento Fag, Cascavel/PR . Email: ingridycamargo@hotmail.com.
2
Faculdade Assis Gurgacz, Curso de Farmácia. Endereço: Av. das Torres, 500, 85806-
095 Loteamento Fag, Cascavel/PR. Email: patricialucca@fag.edu.br.

RESUMO: Dos produtos elaborados pelas abelhas, o Mel é com certeza o mais
conhecido e utilizado em todo o mundo, não só como alimento, mas também pelas suas
propriedades terapêuticas. Diversos estudos já evidenciaram grande capacidade do Mel
em contribuir para a cicatrização rápida e efetiva de lesões de pele. Seu potencial
terapêutico está relacionado com sua concentração supersaturada de açúcares, baixa
atividade de água e pressão osmótica, alta viscosidade e pH ácido, não fornecendo
condições favoráveis para o crescimento microbiano, além da presença de diversas
substâncias como polifenóis e flavonoides, que lhe conferem propriedades antioxidantes.
Diante disto, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar o potencial de
cicatrização do Mel de Abelhas Apis mellifera L. em lesões induzidas no tecido cutâneo na
região dorsolombar de cobaias. Para isso, foram utilizados 20 ratos machos da linhagem
Wistar, submetidos à anestesia e procedimento cirúrgico para obtenção de uma lesão
circular de 1x1cm do tipo espessura parcial. Os animais foram divididos em dois grupos
contendo 10 animais cada, o Grupo Controle, tratado com aplicação tópica diária de água
destilada, e o Grupo Teste, tratado com aplicação tópica diária de Mel de Abelhas Apis
mellifera L. As avaliações clínicas e morfométricas foram realizadas até o 24º dia, onde
ambos os grupos apresentavam total cicatrização. No grupo tratado, houve aceleração na
evolução do processo cicatricial, assim, a utilização tópica do Mel de Abelhas Apis
mellifera L. apresentou eficiência significativa no auxílio da reparação cicatricial de feridas
cutâneas de ratos.

Palavras-chave: Feridas, Cicatrização, Cobaias, Propriedades terapêuticas.

ABSTRACT: Healing potential of honey bee (Apis mellifera L.) cutaneous tissue
injury in wistar rats
Of the products produced by bees, the honey is certainly the most known and used
throughout the world, not only as food but also for its therapeutic properties. Several
studies have shown great ability of the honey to contribute to the rapid and effective
cicatrization of skin lesions. Their therapeutic potential is related to its concentration of
supersaturated sugars, low water activity and osmotic pressure, high viscosity and acidic
pH, not providing favorable conditions for microbial growth besides the presence of various
substances such as polyphenols and flavonoids, which confer properties antioxidants.
Given this, this work was developed with the aim of evaluating the potential of cicatrization
of the honey of bees Apis mellifera L. in induced lesions in the cutaneous tissue in
lumbodorsal region of guinea pigs. For this, were used 20 male Wistar rats subjected to
anesthesia and surgical procedure for obtaining a circular lesion 1x1cm type of partial
thickness. The animals were divided into two groups of 10 animals each, the control group,
treated with daily topical application of distilled water, and the test group treated with daily
30
topical application of honey of bee Apis mellifera L. The clinical evaluations and
morphometric were performed until the 24th day, where both groups had complete
cicatrization. In the treated group, there was acceleration in the evolution of the cicatricial
process, so the topical use of honey bee Apis mellifera L. showed significant effectiveness
in helping to repair scarring of skin wounds in rats.

Keywords: Wounds, Cicatrization, Guinea pigs, Therapeutic properties.

INTRODUÇÃO

Ao longo da vida, os seres humanos estão expostos a diversos fatores que podem

interferir na homeostasia do corpo. Um fator comum e que proporciona esse desequilíbrio,

são as lesões da pele, que, embora na maioria das vezes simples, podem causar

desconfortos, dor, e até mesmo inflamação (Balbino et al., 2005).

A pele, sendo considerada a primeira barreira de proteção, está amplamente

susceptível às agressões físicas, químicas, mecânicas e bacterianas do meio externo

(Borges, 2006). Estas lesões podem se caracterizar por serem de espessura parcial,

sendo as mais simples e superficiais, ou ainda, em casos de lesões mais graves, as de

espessura total, que podem chegar a comprometer o tecido cutâneo (Mandelbaum et al.,

2003).

Dessa forma, imediatamente após o processo invasivo da lesão, inicia-se uma

perfeita e coordenada cascata de eventos celulares e moleculares, que interagem

proporcionando reparação tecidual, demonstrando a capacidade do organismo de reverter

os eventos danosos (Santis et al.,2003). Estes processos envolvem desde a coagulação

até a remodelação, onde ocorre o fechamento total da ferida (Mandelbaum et al., 2003).

Desde a Antiguidade, o homem já vem demonstrando reconhecimento sobre a

importância e o cuidado de proteger as lesões e evitar que estas se compliquem e

causem danos ao paciente, fato este que manuscritos de Egípcios 3.000 anos a.C. já

mencionavam curativos à base de mel, graxa e outros excrementos, os quais faziam parte

dos princípios da farmacopeia egípcia (Santis et al., 2003).

31
 O Mel, por definição, é um produto natural produzido por abelhas e obtido a partir

do néctar das flores, secreções de partes vivas de plantas ou excreção de insetos

sugadores. Foi um dos primeiros alimentos descobertos e utilizados pela humanidade e

desde então passou a ser utilizado como recurso medicinal (Maia et al., 2006).

Diversos estudos demonstram a importante atividade do Mel nos processos de

cicatrização, enfatizando suas propriedades curativa, antimicrobiana, calmante,

regenerativa de tecidos, entre outras. Estudos experimentais já utilizaram o mel em

aplicações tópicas na pele para o tratamento de queimaduras, tratamento de feridas

cirúrgicas, úlceras de pele, abcessos e ainda para prevenção histológica de enxertos de

pele, tendo sucesso na maioria dos casos (Maia et al., 2006).

Ao contrário do que dizem alguns conhecimentos populares, o mel quando utilizado

para o tratamento de feridas, além de ser uma solução acidificada, capaz de inibir o

crescimento de patógenos, é uma solução supersaturada de açúcares que possui uma

baixa atividade de água, não oferecendo condições para o crescimento bacteriano

(Molan, 1998, apud Maia, 2006).

Além disso, a apicultura, atividade que envolve a criação de abelhas, tem se

mostrado uma importante atividade comercial a nível nacional, a qual traz bons resultados

econômicos (Welke et al., 2008). Dessa forma, é vista como uma fonte de renda

sustentável, sendo uma alternativa de geração de renda para o homem, e contribuindo

para a preservação do meio ambiente devido à atuação das abelhas como agentes

polinizadores naturais, favorecendo o equilíbrio e manutenção da biodiversidade (Khan et

al., 2009).

Embora se acredite que já exista excesso de pesquisas no campo da cicatrização,

ainda há muito que se aperfeiçoar, não só para o melhoramento de recursos, mas

também para torna-los mais acessíveis mediante produção de tecnologias simples e

baratas que aproveitem as matérias-primas presentes em cada região de acordo com a

32
sua diversidade, pois sabe-se que muitos recursos utilizados atualmente são importados e

patenteados por multinacionais, tornando muitos tratamentos caros e inacessíveis (Santis

et al., 2003)

Diante disto, sugere-se que o Mel apresenta-se como um importante produto a ser

desvendado, pois além de ser um produto rentável, de fácil obtenção e acesso à

população, possui diversas características que podem evidenciar funcionalidade

terapêutica. Assim, este trabalho tem por objetivo avaliar a eficácia do Mel de abelha Apis

mellifera no processo cicatricial das feridas cirúrgicas quando utilizando topicamente em

lesões cutâneas de cobaias.

MATERIAL E MÉTODOS

Coleta da amostra

O Mel de Abelha Apis mellifera, utilizado no presente estudo foi adquirido de um

produtor da cidade de Marmeleiro, Paraná, o qual foi produzido pelas abelhas diretamente

em um vidro de conserva previamente higienizado, onde se encontravam os favos.

A amostra analisada macroscopicamente possuía coloração marrom translúcido,

sabor característico, sem vestígios de cristalização e livre de materiais estranhos.

Animais

O experimento teve início após aprovação pelo Comitê de Ética no Uso de Animais

da Faculdade Assis Gurgacz, sob o número 012/2012, realizado como o preconizado no

manual Fiocruz, (2005).

Foram utilizados 20 ratos machos, da linhagem Wistar, com 90 dias de idade,

pesando aproximadamente 500 gramas, submetidos a técnicas de manejo idênticas,

alimentados com ração comercial do tipo Nuvilab CR-1 e água ad libitum, em sala com

temperatura (20 ± 2ºC), umidade (65 % a 70%) e ciclo claro/escuro de 12 horas. Para que
33
evitasse o contato entre os animais e consequentemente interferência nas lesões, estes

foram mantidos em gaiolas individuais.

Indução das lesões

Para a indução das feridas cutâneas nas cobaias, estas foram anestesiadas de

acordo com o Manual Fiocruz (2005), com Cloridrato de Xilazina (10mg/kg) e Cloridrato

de Quetamina (75mg/kg) misturadas e administradas na mesma seringa via

intramuscular.

Em seguida, os animais foram colocados em decúbito ventral sobre uma prancha

de madeira e fez-se a tricotomia e antissepsia com álcool 70% no local cirúrgico, na

região dorsolombar, e após demarcação da área a ser lesionada, foi realizada com auxílio

de bisturi, lâmina número 15 e tesoura romba, uma lesão circular de aproximadamente

1x1cm de diâmetro do tipo Ferida de Espessura Parcial, definida por Hess, 2002.

Delineamento experimental

Para o delineamento experimental, os animais foram divididos aleatoriamente em

dois grupos experimentais, contendo 10 (dez) animais cada. Dessa forma, foram obtidos

os seguintes grupos: GC (Grupo Controle), tratados somente com água destilada e GT

(Grupo Teste), tratados com Mel. Ambos os grupos foram induzidos à lesão cutânea na

região dorsolombar.

Foi aplicada uma (1) grama de Mel no Grupo Teste (GT) imediatamente após a

cirurgia, e, posteriormente uma vez ao dia, sempre no mesmo horário, com auxílio de

espátulas de madeiras limpas e individuais. O Grupo Controle foi tratado seguindo-se o

mesmo padrão, porém usando água destilada. Ambos os grupos foram mantidos em

tratamento com Paracetamol 36mg/ml via oral, na proporção de 15mg/kg com o objetivo

de reduzir os efeitos dolorosos da lesão.

34
 A avaliação do processo de cicatrização foi realizada de acordo com a técnica

descrita por Hess, (2002), onde foi medido, com auxílio de paquímetro, o comprimento e a

largura da ferida. A medição foi feita em todas as cobaias, tendo início no dia 0 (W0), ou

seja, no dia da lesão, e posteriormente foi realizada a medição a cada dois dias,

anotando-se os resultados em tabela e fazendo-se fotografias, até o término do

experimento.

No dia 0, e posteriormente a cada 5 dias, até que as feridas estivessem totalmente

cicatrizadas, foi realizado o cálculo de Grau de Contração, definido por Batista (2010),

onde se utilizou a equação A = π. R. r, onde A representa a área (cm²); “R”, o raio maior e

“r”, o raio menor, e por fim, Grau de Contração, expresso em percentual através da

equação GC% = 100x (W0 – Wi)/ w0, onde W0 = área inicial da ferida e Wi = área da

ferida no dia da medida.

Análise Estatística

Os resultados foram analisados estatisticamente por regressão linear (tamanho da

lesão versus tempo), comparação das médias dos tamanhos das lesões e grau de

contração entre os Grupos GC (Grupo Controle) e GT (Grupo Teste) através de Tukey, a

95% de confiança, utilizando o programa Prisma 5.0.

Foram considerados estaticamente diferentes os resultados que apresentaram

probabilidade de ocorrência de nulidade menor que 5% (p<0,05).

RESULTADO E DISCUSSÃO

O desenvolvimento de novas classes de antibióticos, juntamente com a sua

utilização indiscriminada, também no tratamento de feridas infectadas, favoreceu o

aparecimento de linhagens de micro-organismos resistentes, trazendo a necessidade do

desenvolvimento de novos medicamentos. Por outro lado, diversos estudos contribuíram

para a utilização de produtos naturais que atuem como terapias alternativas, que possam
35
favorecer de forma significativa a cura de lesões infectadas. Neste âmbito, o mel tem se

mostrado cada vez mais importante, pois, além de um valioso suplemento alimentar tem

se evidenciado suas propriedades terapêuticas, entre elas a inibição do crescimento de

micro-organismos indesejáveis favorecendo o processo de cicatrização (Gonçalves et

al.,2005).

Alguns estudos experimentais já utilizaram o mel em aplicações tópicas na pele

para o tratamento de queimaduras, tratamento de feridas cirúrgicas, úlceras de pele,

abcessos e ainda para prevenção histológica de enxertos de pele, tendo sucesso na

maioria dos casos (Maia et al., 2006). Assim sendo, neste estudo foi avaliado o potencial

cicatrizante do Mel quando aplicado topicamente em lesões cutâneas de cobaias.

Para isso, foram escolhidos animais da linhagem Wistar devido à facilidade de

aquisição, manipulação devido ao pequeno porte, acomodação, e por apresentarem-se

resistentes a agressões cirúrgicas e processos infecciosos com baixa mortalidade, como

determinou Faleiro et al.(2009). O procedimento operatório e o tratamento pós-operatório

transcorreram de forma natural, não houve óbitos e maiores complicações. Todos os

animais recuperaram-se bem da anestesia, demonstrando bom estado físico e

comportamental normais para a espécie já no segundo dia.

Durante todo o experimento, os animais foram mantidos em tratamento com

Paracetamol gotas, 36mg/ml via oral, na proporção de 15mg/kg com o objetivo de reduzir

os efeitos dolorosos da lesão. Como descrito por Araujo (2008), o Paracetamol é

classificado quimicamente como um AINE, Anti-inflamatório não esteroide, do grupo dos

derivados do p-aminofenol, possuindo efeitos analgésicos e antipiréticos, porém pouca

ação anti-inflamatória devido a sua fraca ação sobre a COX-1 e COX-2.

Desta forma o Paracetamol demonstrou ser o analgésico mais indicado, devido a

sua ação anti-inflamatória diminuída quando comparado aos demais medicamentos do

grupo, procurando interferir da menor forma possível na fase inflamatória da cicatrização.

36
Porém, talvez pela ação deste medicamento, não foram observados exsudatos purulentos

ou serosos nas feridas cutâneas de nenhum dos grupos em experimento, ao contrário do

que constatou Parente et al. (2009) em um estudo semelhante onde utilizou Calendula

officinalis como cicatrizante, observou exsudação serosa nos animais do grupo teste até o

4º dia e no grupo controle até o 7º dia pós operatório.

Na análise visual, observou-se grande diferença entre os Grupos Teste (GT) e

Grupo Controle (GC). No GT, já no segundo dia de tratamento as feridas apresentavam-

se recobertas por uma crosta fina e amarelada, nivelada com a pele e sem evidências de

inflamação. Em um estudo semelhante realizado por Batista, et al. (2010), no sétimo dia

pós operatório, o Grupo Tratado com óleo de pequi apresentou lesões recobertas por uma

crosta fina, nivelada com a pele e sem evidências de inflamação.

Parente et al., (2009), observaram a formação de crostas a partir do terceiro dia

pós operatório, onde as crostas do grupo tratado com Calendula officinalis apresentaram-

se mais delgadas e umedecidas em relação ao grupo controle, que se apresentaram

espessas e ressecadas.

A alta viscosidade do Mel é capaz de formar uma barreira sob a lesão impedindo a

entrada do oxigênio e de outros componentes externos, favorecendo no processo de

cicatrização (Maia et al. 2006).

No mesmo dia, no GC, também houve formação de crosta, porém esta encontrava-

se avermelhada e em desnível com a pele, com presença de coágulos de sangue em

70% dos animais. Em seu estudo, Parente et al., (2009), observaram a formação de

crostas a partir do terceiro dia pós operatório, onde as crostas do grupo tratado com

Calendula officinalis apresentaram-se mais delgadas e umedecidas em relação ao grupo

controle, que se apresentaram espessas e ressecadas.

A crosta começou a se desprender no Grupo Teste a partir do quarto dia em 50%

dos animais, e estavam totalmente livres em 100% até o oitavo dia. Por outro lado, no

37
Grupo Controle, as crostas começaram a se desprender em 20% dos animais no sexto

dia, caindo por completo em sua totalidade no décimo terceiro dia. A evolução das lesões

pode ser observada nas Figuras 1 e 2. Parente et al., 2009 observou que as crostas

começaram a se destacar no 7º dia pós operatório em ambos os grupos, com sinais de

epitelização da ferida, onde no 14º dia foi verificada a cicatrização completa em todos os

animais.

FIGURA 1 - Evolução das feridas do Grupo Controle (GC) A- Visualização da ferida ao 2° dia de evolução
pós-cirúrgica, observando-se crosta rugosa e aderida recobrindo toda a área cruenta, com presença de
coágulos de sangue. B- Visualização da ferida ao 6° dia de evolução pós-cirúrgica, observando-se crosta
rugosa recobrindo a área cruenta, com presença de coágulos de sangue. C - Visualização da ferida ao 12°
dia de evolução pós-cirúrgica, observando-se crosta desprendendo-se do tecido.

FIGURA 2 – Evolução das feridas do Grupo Teste (GT). A- Visualização da ferida ao 2° dia de evolução
pós-cirúrgica, observa-se uma película formada pelo Mel e crosta rugosa recobrindo toda área cruenta B -
Visualização da ferida ao 6° dia de evolução pós-cirúrgica, observando-se a película formada pelo Mel com
coloração amarelada e aparentemente mais aceitável. Nota-se início do desprendimento da crosta. C-
Visualização da ferida ao 12° dia de evolução pós-cirúrgica, observando-se cicatrização completa.

Com o desprendimento da crosta, já se pôde verificar grande parte de

reepitelização local. Batista et al., (2006), relata que a crosta passa a se desprender dos

tecidos somente quando inicia-se o seu processo de recuperação.

Observou-se que as feridas dos animais do Grupo Controle, nas condições deste

experimento levaram o dobro do tempo até a completa cicatrização quando comparadas

38
ao Grupo Teste, pois enquanto o GT levou apenas 12 dias de tratamento, o GC precisou

de 24 dias.

No décimo segundo dia pós-operatório, enquanto os animais do Grupo Teste já

apresentavam completa cicatrização, a área da lesão para o Grupo controle apresentava

uma média de 0,16cm² apresentando diferença estatisticamente significativa (p<0,001), o

que também ocorreu nos dias 8 e 10 (p < 0,05) como pode ser observado na Figura 3.

FIGURA 3 - Valor médio (cm²) da área das feridas ao dia 0, 5, 10, 12, 15 e 24, de evolução pós-cirúrgica
das feridas cutâneas dos Grupos Controle e Teste. (* p < 0,05; ** p < 0,001).

A atividade cicatrizante do mel, de acordo com Molan, (2005), é explicada pela sua

capacidade de promover a regeneração dos tecidos através da estimulação da

angiogênese e, por consequência, o crescimento de fibroblastos, proporcionando a

reepitelização celular rápida.

Já o grupo controle, no décimo segundo dia, apresentou percentual de contração

de 77,27%, enquanto que o do Grupo Teste foi de 100% (Fig. 4). O percentual de

contração é um parâmetro morfométrico amplamente utilizado como indicador de

resolução do processo de cicatrização (Batista et al., 2010). Esse fenômeno ocorre devido

à diferenciação dos fibroblastos em miofibroblastos que apresentam capacidade contrátil

e promovem força de tensão e união dos bordos da ferida (Oliveira et al., 2010).

39
FIGURA 4 - Valor médio do percentual de contração ao dia 0, 5, 10, 12, 15 e 24, de evolução pós-cirúrgica
das feridas cutâneas dos Grupos Controle e Teste. (* p < 0,05; ** p < 0,001).

Batista, et al., (2010), em seu estudo envolvendo o tratamento de lesões de ratos

machos Wistar com Óleo de Pequi, realizou mensurações até o décimo quarto dia, onde o

Grupo Tratado apresentava área média da lesão de 0,031cm², e grau de contração de

96,0%, enquanto no grupo controle obteve média de 0,376cm² e grau de contração de

52,0% demonstrando diferença significativa (p<0,05) entre os grupos, evidenciando

influencia positiva do Óleo de Pequi no processo de cicatrização. O Óleo de Pequi

demonstrou aparentemente ter atividade inferior ao Mel onde, em lesões semelhantes,

este apresentou maior efetividade na cicatrização total em um menor espaço de tempo.

De acordo com Molan, (2005) as infecções do pé são uma complicação grave da

diabetes, sendo uma das principais causas das hospitalizações relacionadas com a

doença. Diversos estudos já apontaram que o Mel, quando utilizado neste tipo de lesão

pode apresentar resultados benéficos. Sabe-se que lesões não cicatrizam enquanto

infectadas, já que as toxinas produzidas pelas bactérias impedem o crescimento das

células de reepitelização através da digestão da matriz celular necessária para a

substituição do tecido.

40
 Além disso, os componentes do revestimento das bactérias estimulam uma forte

resposta inflamatória, a qual impede a cura, e quando se agrava pode provocar ulceração,

onde a amputação pode se fazer necessária quando as infecções não respondem à

terapia (Molan, 2005).

As úlceras diabéticas, ao invés de passar pelas quatro fases normais de cura

(homeostasia, inflamação, proliferação e remodelação), encontram-se presas na fase

inflamatória, impedindo o processo de cura. O Mel apresenta potente ação anti-

inflamatória, desempenhando um papel importante na superação desta fase. Esta ação é

explicada pela capacidade do mel em diminuir a atividade excessiva das enzimas

colagenase e elastase, as quais degradam constituintes extracelulares como colágeno,

elastina e fibrina, proporcionando destruição tissular, provocando a degradação prematura

dos fatores de crescimento (Molan, 2005).

Além destes fatores, a lenta taxa de cura observada em feridas diabéticas pode

ocorrer devido a falta ou a incapacidade de resposta à insulina. De acordo com um estudo

realizado por Al-Waili, (2003), o Mel pode possuir a capacidade de regular a absorção de

glicose pelas células e as funções da insulina, através de um efeito insulino mimético.

Neste ensaio clínico foram utilizados 16 pacientes com Diabetes mellitus tipo II e 12

indivíduos saudáveis, submetidos à administração de uma solução de Mel 60% (p/v) por

inalação durante 10 minutos. Foram realizados testes de glicemia após 30 minutos, onde

se constatou que o mel reduziu significativamente (p< 0,0303) os nívels de glicose no

sangue, de 199 +/- 40,9 mg/dL para 156 +/- 52,3 mg/dL.

As características descritas do Mel de Abelhas Apis mellifera L. sugerem boa

perspectiva na utilização deste produto como alternativa terapêutica para cicatrização,

inclusive em processos de difícil cura, como em pacientes diabéticos, já descrito em

outros estudos, além de possuir outras vantagens como poder anti-inflamatório e

antibacteriano.

41
CONCLUSÃO

O acompanhamento do processo de cicatrização sob os pontos de vista clínico e

macroscópico demonstrou que o uso tópico do Mel de Abelhas Apis mellifera L., nas

condições deste estudo possui influência positiva na cicatrização de feridas cutâneas

experimentais em ratos Wistar por promover melhores características visuais e o

fechamento mais rápido das feridas em relação ao grupo controle.

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Mart. ex Tul. var. ferrea) em lesões cutâneas de caprinos. Revista Brasileira de
Plantas Medicinais, v.12, n.3, p.302-310, 2010. Disponível em:
<http://www.ibb.unesp.br/servicos/publicacoes/rbpm/pdf_v12_n3_2010/07_08_14.pdf>Ace
sso em: 10 out. 2012.

PARENTE, L.M.L.; SILVA, M.S.B.; BRITO, L.A.B.; LINO-JÚNIOR, R.S.; PAULA, J.R.;
TREVENZOL, L.M.F.; ZATTA, D.T.; PAULO, N.M.; Efeito cicatrizante e atividade
antibacteriana da Calendula officinalis L. cultivada no Brasil. Rev. bras. plantas
med. vol.11 no.4; São Paulo 2009. Disponível em:
<http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S15165722009000400005&lang=
pt> Acesso em: 27 out. 2012

SABBAG, J.A.; NICODEMO, D.; Viabilidade Econômica Para Produção do Mel em

Propriedade Familiar. Rev. Pesq. Agropec. Trop., Goiânia, v. 41, n. 1, p. 94-101, mar.
2011.

SANTIS, D.P.E.; MANDELBAUM, H.S.; MANDELBAUM, S.H.M.; Cicatrização:

Conceitos Atuais e Recursos Auxiliares. Parte 2, Educação Médica Continuada: Anais
Brasileiros de Dermatologia, versão online: Rio de Janeiro, 2003. Disponível em:
<http://www.scielo.br/pdf/abd/v78n4/16896.pdf>. Acesso em: 14 mar. 2012.
43
VENTURINI, S.K.; SARCINELLI, F.M.; SILVA, C.L.; Características do Mel. Boletim
Técnico - PIE-UFES: 01107 – Universidade Federal do Espírito Santo, 2007. Disponível
em <http://www.agais.com/telomc/b01107_caracteristicas_mel.pdf> Acesso em: 18 out
2012.

WELKE, E.J.; REGINATTO, S.; FERREIRA, D.; VICENZI, R.; SOARES, M.J.;
Caracterização físico-química de méis de Apis mellifera L. da região noroeste do
Estado do Rio Grande do Sul. Rev. Ciencia Rural, vol. 38, Rio Grande do Sul, 2008.
Disponível em <http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-
84782008000600038&lang=pt> Acesso em 30 de março de 2012.

44
ANEXO 1 - NORMAS DA REVISTA BRASILEIRA DE PLANTAS MEDICINAIS

A Revista Brasileira de Plantas Medicinais - RBPM é publicação trimestral e destina-se à

divulgação de trabalhos científicos originais, revisões bibliográficas e notas prévias, que
deverão ser inéditos e contemplar as grandes áreas relativas ao estudo de plantas
medicinais.

Manuscritos que envolvam ensaios clínicos deverão vir acompanhados de autorização de

Comissão de Ética constituída, para realização dos experimentos. Os artigos podem ser
redigidos em português, inglês ou espanhol, sendo sempre obrigatória a apresentação do
resumo em português e em inglês, independente do idioma utilizado. Os artigos devem
ser enviados por email: rbpm@ibb.unesp.br, com letra Arial 12, espaço duplo, margens de
2 cm, em Word for Windows. Artigos muito extensos, fotografias e gráficos coloridos
podem ser publicados, a critério do Corpo Editorial, se o autor se comprometer, mediante
entendimentos prévios, a cobrir parte das despesas de publicação. No e-mail, enviar
telefone para contatos mais urgentes.

REVISÕES BIBLIOGRÁFICAS E NOTAS PRÉVIAS

Revisões e Notas prévias deverão ser organizadas basicamente em: Título, Autores,
Resumo, Palavras chave, Abstract, Key words, Texto, Agradecimento (se houver) e
Referência.

ARTIGO CIENTÍFICO

Os artigos deverão ser organizados em:

TÍTULO: Deverá ser claro e conciso, escrito apenas com a inicial maiúscula, negrito,
centralizado, na parte superior da página. Se houver subtítulo, deverá ser em seguida ao
título, em minúscula, podendo ser precedido de um número de ordem em algarismo
romano. Os nomes comuns das plantas medicinais devem ser seguidos pelo nom e
científico entre parênteses, verificado em www.tropicos.org e www.ipni.org.

AUTORES: Começar pelo último sobrenome dos autores por extenso (nomes
intermediários somente iniciais, sem espaço entre elas) em letras maiúsculas, 2 linhas
abaixo do título. Após o nome de cada autor deverá ser colocado um número sobrescrito
que deverá corresponder instituição e endereço (cidade, sigla do estado, CEP). Indicar o
autor que deverá receber a correspondência, com e-mail. Os autores devem ser
separados com ponto e vírgula.

RESUMO: Deverá constar da mesma página onde estão o título e os autores, duas linhas
abaixo dos autores. O resumo deverá ser escrito em um único parágrafo, contendo
objetivo, resumo do material e método, principais resultados e conclusão. Não deverá
apresentar citação bibliográfica.

Palavras-chave: Deverão ser colocadas uma linha abaixo do resumo, na margem

esquerda, podendo constar até cinco palavras, separadas com vírgula.

ABSTRACT: Apresentar o título e resumo em inglês, no mesmo formato do redigido em

português, com exceção do título, em negrito, apenas com a inicial em maiúscula, que
virá após a palavra ABSTRACT.

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Keywords: Abaixo do abstract deverão ser colocadas as palavras-chave em inglês,
podendo constar até cinco palavras, separadas com vírgula.

INTRODUÇÃO: Na introdução deverá constar breve revisão de literatura e os objetivos do

trabalho. As citações de autores no texto deverão ser feitas de acordo com os seguintes
exemplos: Silva (1996); Pereira & Antunes (1985); (Souza & Silva, 1986) ou quando
houver mais de dois autores Santos et al. (1996).

MATERIAL E MÉTODO: Deverá ser feita apresentação completa das técnicas originais
empregadas ou com referências de trabalhos anteriores que as descrevam. As análises
estatísticas deverão ser igualmente referenciadas. Na metodologia deverão constar os
seguintes dados da espécie estudada: nome científico com autor; nome do herbário onde
a excicata está depositada e o respectivo número (Voucher Number).

RESULTADO E DISCUSSÃO: Poderão ser apresentados separados ou com o um só

capítulo, podendo conter no final conclusão sumarizada.

AGRADECIMENTO: deverá ser colocado neste capítulo (quando houver).

REFERÊNCIA: As referências devem seguir os exemplos:

Periódicos:
AUTOR(ES) separados por ponto e vírgula, sem espaço entre as iniciais. Título do artigo.
Nome da Revista, por extenso, volume, número, página inicial-página final, ano.
KAWAGISHI, H. et al. Fractionation and antitumor activity of the water-insoluble residue of
Agaricus blazei fruiting bodies. Carbohydrate Research, v.186, n.2, p.267- 73, 1989.

Livros :
AUTOR. Título do livro. Edição. Local de publicação: Editora, Ano. Total de páginas.
MURRIA, R.D.H.; MÉNDEZ, J.; BROWN, S.A. The natural coumarins: occurrence, chem
istry and biochemistry. 3.ed. Chinchester: John Wiley & Sons, 1982. 702p.

Capítulos de livros:
AUTOR(ES) DO CAPÍTULO. Título do Capítulo. In: AUTOR (ES) do LIVRO. Título do
livro: subtítulo. Edição. Local de Publicação: Editora, ano, página inicial-página final.
HUFFAKER, R.C. Protein metabolism. In: STEWARD, F.C. (Ed.). Plant physiology: a
treatise. Orlando: Academic Press, 1983. p.267-33.

Tese ou Dissertação:
AUTOR. Título em destaque: subtítulo. Ano. Total de páginas. Categoria (grau e área de
concentração) - Instituição, Universidade, Local.
OLIVEIRA, A.F.M. Caracterização de Acanthaceae medicinais conhecidas como
anador no nordeste do Brasil. 1995. 125p. Dissertação (Mestrado - Área de
Concentração em Botânica) - Departamento de Botânica, Universidade Federal de
Pernambuco, Recife.

Trabalho de Evento:
AUTOR(ES). Título do trabalho. In: Nome do evento em caixa alta, número, ano, local.
Tipo de publicação em destaque... Local: Editora, ano. página inicial-página final.
VIEIRA, R.F.; MARTINS, M.V.M. Estudos etnobotânicos de espécies medicinais de uso
popular no Cerrado. In: INTERNATIONAL SAVANNA SYMPOSIUM, 3., 1996, Brasília.
Proceedings… Brasília: Embrapa, 1996. p.169-71.
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Publicação Eletrônica:
AUTOR(ES). Título do artigo. Título do periódico em destaque, volume, número, página
inicial-página final, ano. Local: editora, ano. Páginas. Disponível em: <http://www........>.
Acesso em: dia mês (abreviado) ano.
PEREIRA, R.S. et al. Atividade antibacteriana de óleos essenciais em cepas isoladas
de infecção urinária. Revista de Saúde Pública, v.38, n.2, p.326-8, 2004. Disponível em:
http://www.scielo.br. Acesso em: 18 abr. 2005.

Não citar resumos e relatórios de pesquisa a não ser que a informação seja muito
importante e não tenha sido publicada de outra forma. Comunicações pessoais devem ser
colocadas no rodapé da página onde aparecem no texto e evitadas se possível. Devem
ser, também, evitadas citações do tipo Almeida (1994) citado por Souza (1997).

TABELAS: Devem ser inseridas no texto, com letra do tipo Arial 10, espaço simples. A
palavra TABELA (Arial 12) deve ser em letras maiúsculas, seguidas por algarismo
arábico, quando citadas no texto devem ser em letras minúsculas (Tabela).

FIGURAS: As ilustrações (gráficas, fotográficas,desenhos, mapas) devem ser em letras

maiúsculas seguidas por algarismo arábico, Arial 12, inseridas no texto. Quando citadas
no texto devem ser em letras minúsculas (Figura). As legendas e eixos devem ser em
Arial 10, enviadas em arquivos separados, com resolução 300 DPI, 800 x 600, com
extensão JPEG, para impressão de publicação.

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