Lampiran 1.

Flowsheet

Pembuatan Media Lactose Broth Double

Ditimbang seksama media Lactose Broth Double sebanyak 52 gr.

Dimasukkan ke dalam beaker gelas.

Dilarutkan dalam 1 liter aquadest.

Dimasukkan magnetic stirrer.

Dipanaskan di atas hot plate sampai larut.

Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham

masing-masing 5 mL dalam 5 tabung.

Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121oC

selama 15 menit.

Setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.

Hasil

24
Universitas Sumatera Utara
Pembuatan Media Lactose Broth Single

Ditimbang seksama media Lactose Broth Single sebanyak 13 gr.

Dimasukkan ke dalam beaker gelas.

Dilarutkan dalam 1 liter aquadest.

Dimasukkan magnetic stirrer.

Dipanaskan di atas hot plate sampai larut.

Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham

masing-masing 10 mL dalam 10 tabung.

Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121oC

selama 15 menit.

Setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.

Hasil

25
Universitas Sumatera Utara
Pembuatan Media Brilliant Green Lactose Broth

Ditimbang seksama media Brilliant Green Lactose Broth

sebanyak 40 gr.

Dimasukkan ke dalam beaker gelas.

Dilarutkan dalam 1 liter aquadest.

Dimasukkan magnetic stirrer.

Dipanaskan di atas hot plate sampai larut.

Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham

masing-masing 10 mL.

Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121oC

selama 15 menit.

Setelah dingin disimpan di tempat yang bersih dan kering.

Hasil

26
Universitas Sumatera Utara
Uji Penduga (Presumtif Test)

Pada tes penduga digunakan media Lactose Broth. Tes penduga

dilakukan dengan 2 cara, yaitu single dan double.

Single: 13 gr Lactose Broth dalam 1 liter aquadest.

Caranya: Siapkan 10 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan

tabung durham dengan posisi terbalik. 10 tabung diisi dengan

masing-masing 10 mL media.

Double: 52 gr Lactose Broth dalam 1 liter aquadest.

Caranya: Siapkan 5 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan

tabung durham dengan posisi terbalik. 5 tabung diisi dengan

masing-masing 10 mL media.

Hasil

27
Universitas Sumatera Utara
Sampel

Masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam

masing-masing tabung media Lactose Broth, lalu goyang rak tabung

supaya sampel air dan media bercampur rata.

Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35oC selama 24 jam, jika

positif akan terbentuk gas atau asam.

Inkubasikan dilanjutkan sampai 48 jam bila tidak ada reaksi gas atau

asam. Bila tetap tidak terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka uji

penduga dinyatakan negatif.

Tabung-tabung yang positif dilanjutkan ke uji penegasan.

Hasil

28
Universitas Sumatera Utara
Uji Penegasan (Confirmed Test)

Setiap tabung yang positif pada uji penduga dikocok agar merata.

Kemudian dipindahkan dengan jarum ose ke dalam media

Brilliant Green Lactose Broth (BGLB).

Inkubasi pada inkubator pada suhu 35oC selama 24 jam. Reaksi

dinyatakan positif bila terbentuk gas atau asam dalam tabung.

Inkubasi dilanjutkan sampai 48 jam bila tidak ada reaksi gas. Bila

tetap tidak terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka uji penegasan

dinyatakan negatif.

Hitung MPN total koliform dengan menggunakan tabel MPN dari

jumlah tabung Brilliant Green Lactose Broth (BGLB) yang

positif.

Hasil

29
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Tabel nilai MPN

Nilai jumlah perkiraan terdekat (MPN) koliform untuk kombinasi bila digunakan

5 buah tabung dari 10 mL, 5 buah tabung dari 1 mL, dan 5 buah tabung dari 0,1

mL dengan 95% batas kepercayaan.

Jumlah tabung yang positif MPN / 95%Batas kepercayaan

5 tabung 5 tabung 5 tabung 100 mL Lebih rendah Lebih tinggi
10 mL 1 mL 0,1 mL

0 0 0 <1,8 - 6,8
0 0 1 2 0,5 7
0 1 0 2 0,5 7
0 2 0 4 0,5 11
1 0 0 2 0,5 7
1 0 1 4 0,5 11
1 1 0 4 0,5 11
1 1 1 6 0,5 16
1 2 0 6 0,5 15
2 0 0 5 0,5 13
2 0 1 7 1 17
2 1 0 7 1 17
2 1 1 9 2 21
2 2 0 9 2 21
2 3 0 12 3 28
3 0 0 8 1 19
3 0 1 11 2 26
3 1 0 11 2 25
3 1 1 14 4 35
3 2 0 14 4 34
3 2 1 17 5 46
3 3 0 17 5 46
4 0 0 13 3 31
4 0 1 17 5 46
4 1 0 17 5 46
4 1 1 21 7 63
4 1 2 26 9 78
4 2 0 22 7 67
4 2 1 26 9 78
4 3 0 27 9 80
4 3 1 33 11 93
4 4 0 34 12 96
5 0 0 23 7 70
5 0 1 31 11 89

30
Universitas Sumatera Utara
5 0 2 43 15 114
5 1 0 33 11 93
5 1 1 46 16 120
5 1 2 63 21 154
5 2 0 49 17 126
5 2 1 70 23 168
5 2 2 94 28 219
5 3 0 79 25 187
5 3 1 109 31 263
5 3 2 141 37 343
5 3 3 176 44 503
5 4 0 130 35 302
5 4 1 172 43 486
5 4 2 221 57 698
5 4 3 278 90 849
5 4 4 345 117 999
5 5 0 240 68 754
5 5 1 348 118 1005
5 5 2 542 180 1405
5 5 3 918 303 3222
5 5 4 1609 635 5805
5 5 5 >1600 700 -

31
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Tabel Baku Mutu Mikrobiologi Air

Nomor: 416/MENKES/PER/IX/1990

Tanggal: 3 September 1990

No Jenis Satuan Kadar maksimal Keterangan

parameter yang diperbolehkan

1. Total Jumlah per 100 50 Bukan Air

koliform mL sampel Perpipaan

10 Air Perpipaan

32
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4. Alat Percobaan

Timbangan Analitik Hot Plate

Inkubator Oven

33
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Media Percobaan

Media BGLB Media LB

Media Lactose Borth (double strength – single strength)

yang telah diencerkan

34
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Hasil Uji Bakteri Koliform

Hasil Uji Pendugaan

Hasil Uji Penegasan dan Media BGLB

35
Universitas Sumatera Utara