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DEROULEMENT DU TD

Activit�s du Professeur Contenu du cahier de l��tudiant


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TD N� 3 : MEMBRANE PLASMIQUE,
HYALOPLASME ET CYTOSQELETTE
D�finir la membrane plasmique
Que repr�sente les figures 1 et 2 de la planche I La membrane plasmique
I- MEMBRANE PLASMIQUE
I-1. ULTRASTRUCTURE DE LA MEMBRANE PLASMIQUE
Quelle interpr�tation pouvez-vous faire � partir des micrographies 1 et 2 de la
planche I
I-1-1. Interpr�tation des micrographies de la planche 1
Micrographie 1 montre que la membrane plasmique est constitu�e de trois feuillets,
deux feuillets osmiophiles, opaques aux �lectrons, dispos�s de part et d�autre d�un
feuillet osmiophobe.
Micrographie 2. montre que la membrane plasmique est constitu�e par un assemblage
d�une double couche de lipides, des prot�ines membranaires intrins�ques ou
prot�ines transmembranaires et des prot�ines membranaires extrins�ques ou
p�riph�riques.
Quelle conclusion pouvez-vous tirer
I-1-2. Conclusion
La membrane plasmique est une bicouche lipidique. Elle comporte des prot�ines qui
sont soit dispos�e � la p�riph�rie soit int�gr�es dans la membrane.
Quelle sont les techniques utilis�es pour obtenir les micrographies ?
Decrire succinctement les techniques
I-1-3. Techniques utilis�es pour obtenir les micrographies de la planche I
Micrographie 1
Elle est obtenue � partir de techniques cytologiques : fixat
Micrographie 2
La cryofracture consiste � fracturer sous vide, � -100�C avec un couteau,
l��chantillon qui a �t� congel� � la temp�rature de l�azote liquide (- 160�C) en
utilisant une grande vitesse de refroidissement (cong�lation rapide) qui emp�che la
formation de cristaux de glace. Le plan de fracture suit pr�f�rentiellement les
lignes de moindre r�sistance et, de ce fait, passe souvent entre les deux couches
lipidiques des membranes mettant ainsi � nu l�int�rieur des membranes cellulaires.
Les surfaces fractionn�es restant �paisses, le mat�riel organique est �limin� par
dissolution apr�s ombrage, de sorte que seul subsiste la mince r�plique m�tallique
de la surface de l��chantillon. La r�plique est consolid�e par un film de carbone
et peut �tre ainsi plac�e une grille et observ�e au MET. Les r�pliques
sontparsem�es de petites particules intramembranaires qui repr�sentent de grosses
prot�ines membranaires.
Elle permet de visualiser la distribution de telles prot�ines dans le plan d�une
membrane.
I-2. CONSTITUANTS CHIMIQUES DE LA MEMBRANAIRE
Citez les principaux constituants de la membrane plasmique Les constituants
chimiques de la membrane plasmique sont : les lipides, les prot�ines et les
glucides
I-2-1. Les lipides membranaires
Sch�matiser l�organisation mol�culaire de la bicouche phospholipidique I-2-1-1.
Sch�ma de la bicouche phospholipidique
Qu�est-ce qu�un liposome
I-2-1-2. D�finition du liposome
Les liposomes sont de petites sph�res artificielles d�un diam�tre de 25 nm � 1 ?m,
constitu�es d�une bicouche phospholipidique de m�me nature que les �l�ments
membranaires et qui se sont form�es en milieu aqueux emprisonnant une goutte du
milieu..
Citez les principaux lipides membranaires
I-2-1-3. Les principaux lipides membranaires
les phospholipides,
Le cholest�rol. Dans les cellules eucaryotes il existe une mol�cule de cholest�rol.
Les glycolipides (ou c�r�brosides) r�sultent de l�association d�un sucre,
g�n�ralement le galactose,avec un acide gras de PM �lev� et la sphingosine. Ce sont
des esters de la sphingosine ou sphingoglycolipides qui regroupent les
galactosides, des gangliosides, des glycolipides neutres.
? Les phospholipides (figure 1, Planche II)
Les phospholipides sont les lipides membranaires les plus abondants. Ils r�sultent
de l�est�rification du glyc�rol par deux acides gras et par l�acide phosphorique.
Ils poss�dent une extr�mit� polaire form�e par un alcool azot�, de l�acide
phosphorique et du glyc�rol et deux cha�nes carbon�es. Les cha�nes carbon�es
g�n�ralement constitu�es d�acides gras sont de longueur variable. Elles contiennent
normalement 14 � 24 atomes de carbone. L�une d�elles contient habituellement une ou
plusieurs doubles liaisons ; elle est insatur�e contrairement � l�autre qui n�en
contient pas. Chaque double liaison cr�e un petit coude dans la queue. Ces
diff�rences dans la longueur et la saturation de la queue sont importantes car
elles ont une influence sur la capacit� des mol�cules de phospholipide � se serrer
les unes contre les autres et par cons�quent sur la fluidit� de la membrane.
Donner la formule chimique des
phospholipides
? Formule g�n�rale des phospholipides.
R1 =un acide gras
R2 = acide gras
Z = groupement amin� primaire
Observez la figure 1 de la planche II ? Les principaux phospholipides membranaires
Citez les diff�rents phospholipides
Phosphatidylcholine -(CH3)3N+CH2CH2OH-, quand le groupement amin� est la choline
Phosphatidyl-�thanolamine, quand le groupement amin� est l��thanolamine
Phosphatidyl -inositol, quand le groupement amin� est l�inositol
Phosphatidyl - s�rine ... quand le groupement amin� est la s�rine
Les sphingomy�line ; sphingosine + acides gras + acide phosphorique + choline
NB : La sphingosine, �galement appel�e sphing�nine, est un aminodiol poss�dant une
double liaison (�thyl�nique). Cet alcool gras poss�de dix-huit atomes de carbone,
deux groupements hydroxyle �OH, un groupement amine �NH2. C'est sur sa fonction
amine que viennent se fixer les acides gras via une liaison amide. Les groupements
hydroxyle ont leurs propres substitutions.
La sphingosine est � la base de la structure des sphingolipides.
Observez la figure 2 de la planche
II I-2-1-3. Asym�trie de la membrane en fonction de la distribution des lipides
Que constater vous au niveau de la composition en phospholipides de la bicouche
entre la membrane extracellulaire et la membrane intracellulaire
La composition des deux moiti�s de la double couche est diff�rente. Dans la
membrane extracellulaire, on note la pr�sence de glycolipides alors qu�elles sont
absentes dans la membrane intracellulaire.
Quelles cons�quences cela a sur la taille de la membrane extracellulaire Cela fait
que la membrane extracellulaire est plus �paisse que la membrane intracellulaire.
D�duire la notion d�asym�trie de la membrane plasmique
La notion d�asym�trie de la membrane plasmique est due au fait que sur sa surface
extracellulaire se trouve des glucides associ�s � des prot�ines ou des lipides ce
qui cr�e une asym�trie par rapport au plan imaginaire passant au milieu du feuillet
claire.
I-2-1-4. Fluidit� membranaire
D�finir la notion de fluidit� membranaire La membrane plasmique est une mosa�que
fluide ; elle n�est pas fig�e. Ces diff�rents constituants sont en mouvement au
sein de la membrane.
Observez les figures 3 et 4 de la planche II ? Diff�rents mouvement des lipides
Quelles sont les diff�rents mouvements des
lipides dans la membrane plasmique
Mouvement de rotation
Les phospholipides peuvent tourner sur eux-m�mes sur place.
Mouvement de diffusion lat�rale
Un phospholipide peut changer de place avec son voisin sur le m�me feuillet.
Mouvement de Flip-Flop
Un phospholipide peut basculer d�un feuillet membranaire � l�autre, c�est ce que
l�on appelle le flip flop qui n�cessite des flipases.
Citez les facteurs influen�ant la fluidit� de la membrane plasmique et pr�cisez
l�impact de chacun
? Facteurs influen�ant la fluidit�
La temp�rature
La fluidit� augmente avec l�augmentation de la temp�rature.
La pr�sence de cholest�rol
La pr�sence de cholest�rol diminue la fluidit� de la membrane plasmique.
La nature des acides gras des phospholipides
Plus les cha�nes d�acide gras sont courtes plus la fluidit� est grande ; et
�galement plus les chaines d�acide gras sont insatur�s, plus la fluidit� est
grande.
I-2-2. Les prot�ines membranaires
I-2-2-1. Structures des prot�ines
Citez les diff�rentes structures des prot�ines
La structure primaire
La structure secondaire
Structure tertiaire
Structure quaternaire
Observez la figure 1 de la planche III
Quelles sont les caract�ristiques de chaque structure
? Structure primaire
C�est la structure lin�aire de la prot�ine dont les acides amin�s sont li�s que par
des liaisons peptidiques
? Structure secondaire
La prot�ine peut se plier mettant ainsi les acides amin�s en contact les uns avec
les autres. Les diff�rents acides amin�s de la prot�ine peuvent alors �tablir entre
eux des liaisons hydrog�nes entre les groupements amide (-NH) et carbonyle (-CO) du
squelette peptidique � tous les 4 acides amin�s et donn� naissance � des h�lices ?
qui a un aspect spiral� et des feuillets ? qui donne un aspect d�accord�on. Les
h�lices ? et feuillets ? constituent les structures secondaires
? Structure tertiaire
Les h�lices ? et des feuillets ? de la cha�ne polypeptidique se replient les unes
sur les autres et forment une mol�cule en forme de boule, ou mol�cule globulaire et
donn� naissance � une structure tertiaire. La structure tertiaire est maintenue par
des liaisons (covalentes, hydrog�ne, pont disulfure, ionique) entre des acides
amin�s souvent tr�s �loign�s sur la cha�ne primaire.
Cette structure est encore appel� domaine prot�ique et consid�r� comme l�unit�
structurale de base ou monom�re.
? Structure quaternaire
La structure quaternaire correspond � l�association sp�cifique de plusieurs cha�nes
peptidiques ou monom�res.
I-2-2-2. Diff�rents types de prot�ines membranaires
Citez les diff�rentes prot�ines de la membrane plasmique
Les diff�rentes prot�ines membranaires sont les glycoprot�ines, les lipoprot�ines,
les enzymes et les antig�nes ou anticorps membranaires. On peut les regrouper en
fonction de leur localisation et de leur rapport avec la bicouche lipidique.
Citez les groupes de prot�ine en fonction de leur localisation
? En fonction de leurs localisations
On distingue :
- les prot�ines extrins�ques ou p�riph�riques ;
- les prot�ines intrins�ques ou int�gr�es.
Citez les groupes de prot�ine en fonction de leur rapport avec la bicouche
? En fonction de leur rapport avec la bicouche lipidique
On distingue :
- les prot�ines transmembranaires
- les prot�ines ench�ss�es qui soit ancr�es dans la membrane externe soit ancr�es
dans la membrane interne
Annotez la figure 2 de la planche III
1 = prot�ine transmembranaire � travers�e unique en liaison covalente avec la
monocouche interne
2 = prot�ine int�gr�e � travers�e multiple avec formation de coude
3 = prot�ine p�riph�rique en liaison avec la monocouche interne
4 = glycoprot�ine extrins�que en liaison covalente avec la monocouche externe par
un oligosaccharide
5 = prot�ine transmembranaire � une h�lice et � structure quaternaire relier au
cytosquelette
Notez les particularit�s de la prot�ine de la
figure 3 planche III
La prot�ine de la figure 3 (planche III) est une glycoprot�ine transmembranaire �
traverser unique typique dont la cha�ne polypeptidique traverse la bicouche sous
forme d�une h�lice ?. La cha�ne oligosaccharidique et les liaisons disulfures sont
toutes sur la face non cystosolique de la membrane.
I-2-2-3. Technique de caract�risation des prot�ines de la membrane plasmique
Quelles sont les techniques qui permettent de caract�riser les prot�ines
membranaires
Electrophor�se
chromatographie
D�crire les techniques Voir fascicule de TD techniques d��tude de la cellule
I-2-2-4. Technique de localisation des prot�ines de la membrane plasmique
Quelles sont les techniques qui permettent de localiser les prot�ines membranaires
R�action � ninhydrine
R�action de Biuret
R�action xantoprot�ique
R�action immunocytochimie
Autoradiographie
Cryod�capage ou cryofracture
I-2-2-5. Exp�rience des v�sicules retourn�es
Interpr�tez les figures 2a et 2b � partir de l�exp�rience des v�sicules retourn�es
de la figure 1 de la planche IV
La figure 2a repr�sente une membrane normale car les �l�ments du cytosquelette sont
orient�s dans la zone cytoplasmique.
La figure 2b, elle repr�sente une membrane retourn�e.
I-2-2-5. Exp�rience de Frye et Edidin
? Proc�d�
D�crire l�exp�rience de Frye et Edidin On r�alise un h�t�rocaryon � partir d�une
cellule humaine, dont les antig�nes sont marqu�s par des anticorps anti-homme
fluorescents en rouge (rhodamine), et d�une cellule de souris, dont les antig�nes 8
sont marqu�s par des anticorps anti-souris fluorescent en vert (fluoresc�ine). Les
prot�ines de souris et les prot�ines humaines sont initialement restreintes � leur
propre moiti� de la membrane plasmique de l�h�t�rocaryon. Apr�s incubation de
l�h�t�rocaryon l�observation en microscopie � fluorescence r�v�le un red�ploiement,
avec m�lange, des complexes antig�nes-anticorps sur toute la membrane de la cellule
homme-souris.
Quel est son but
? But
Le but de l�exp�rience de Frye et Edidin est de localiser les prot�ines
membranaires et d��tudier la fluidit� de la membrane plasmique.
De quelle technique d�coule cette exp�rience C�est une technique d�hybridation
somatique et d�immunocytochimie
I-2-3. Les glucides membranaires
Quelles sont les glucides membranaires Les glucides membranaires sont des
polysaccharides et des oligosaccharides.
I-2-3-1. Localisation des glucides membranaire
Situez les glucides membranaires Les glucides membranaires sont localis�s � la face
extracellulaire de la membrane plasmique. Ils forment ainsi un rev�tement fibreux.
Quel non donne-t-on au rev�tement membranaire form� ?
Le rev�tement membranaire est appel� Cell coast ou glycol�mme.
Que peut-on en d�duire quant � l�asym�trie de la membrane Elles participent de ce
fait � l�asym�trie de la membrane plasmique
I-2-3-2. Nature des glucides membranaires
Sous quelle forme les glucides se pr�sentent-ils ? ou quelle est la nature de
glucide membranaire
Les glucides membranaires sont des polysaccharides et des oligopolysachharides.
A quelle type de mol�cule sont-ils li�s et comment
Les glucides membranaires sont li�s aux prot�ines et aux lipides membranaires par
des liaisons covalentes.
I-2-3-3. Technique d��tude des glucides membranaires
Citer les r�actions histo ou cytochimiques qui permettent de les d�tecter
Les r�actions histo ou cytochimique qui permettent de les d�tecter sont les
r�actions de Biuret, xanthoprot�ique et APS (R�action de l�acide p�riodique Schiff
(APS ou PAS))
I-2-3-4. R�les des glucides membranaires
? R�le des glucides membranaires dans la d�termination des groupes sanguin du
syst�me ABO
Annotez la figure 1 de la planche V Voir planche V
Quelle est la nature des glucides impliqu�s dans la d�termination du groupe sanguin
Le N ac�tyl glucosamine ; le galactose ; le fucose et le N ac�tyl galactosamine
Les Glycosyltransf�rases sont des enzymes permettant le transfert d'arborescences
sucr�es sur des prot�ines. Dans le cas du syst�me ABO, la transf�rase A transf�re
le N-ac�tylgalactosamine et la transf�rase B transf�re le galactose par une liaison
a 1,3 sur le galactose de la cha�ne osidique H, et elles induisent respectivement
l'appartenance d'un individu au groupe A ou B. Lorsque les deux
glycosyltransf�rases sont pr�sentes, l'individu est de groupe AB. Et quand les deux
enzymes sont absentes, l�individu est du groupe O.
Faites le sch�ma de la transfusion sanguine
? Sch�ma
O
SHEMA DE LA TRANSFUSION SANGUINE
D�gagez le r�le sp�cifique des glucides apr�s cette �tude Les glucides
interviennent dans la formation des groupes sanguins dans le syst�me ABO.
Citez les autres r�les des glucides ? Autres r�les des glucides
- Protection m�canique et chimique de la cellule
- Filtre et pi�ge � ions
- Reconnaissance et adh�sivit� cellulaire
I-3. Mod�le membranaire
Annotez et sch�matisez la figure 2 de la
planche V
Annotation
1= Bicouche phodspholipidique ; 2 = Phospholipide
3= Cholest�rol ; 4 = Glycolipide
5 = Glycoprot�ine globulaire et transmembranaire ;
6 = Glycoprot�ine transmembranaire en h�lice ? � travers�e unique
7 = Glycoprot�ine ench�ss�e ; 8 = Prot�ine ench�ss�e
9 = Prot�ine p�riph�rique ; 10 = Groupements glucidiques
I-4. Sp�cialisations de la membrane plasmique
Quelles sont les sp�cialisations de la membrane plasmique
Les sp�cialisations de la membrane plasmique sont :
- Les microvillosit�s
- les invaginations
- les st�reocils
A
AB
B
- les interdigitations
- espace intercellulaire
- les complexes jonctionnels
? les complexes jonctionnels
Quelles sont les crit�res de classification
des complexes jonctionnels
Les complexes jonctionnels peuvent �tre class�s selon trois crit�res :
- en fonction de leur aspect ;
- en fonction de l��paisseur de l�espace intercellulaire
- en fonction de leur fonction
Expliquez les diff�rents crit�res de
classification
- en fonction de leur aspect
on distingue :
la Zonula : correspond � une bande qui encercle la cellule ;
la Fascia = c�est une plaque � contour irr�gulier
la Macula = c�est une plaque � contour arrondi.
- En fonction de l��paisseur de l�espace intercellulaire
On distingue les jonctions de type :
Occludens = ce sont les jonctions qui se caract�risent par une soudure de deux
membranes plasmiques sur leur face extracellulaire. Ces jonctions sont �tanches et
ne permettent pas d��change entre les deux cellules. (Tight junction) exemple
zonula occludens
GAP = elles se caract�risent par une r�duction de l�espace intercellulaire qui
passe d�environ 150 � � 20 �. On note la pr�sence de particules intramembranaires
qui permettent les �changes entre les deux cellules. Jonction de type fascia
Adherens = elles sont caract�ris�es par un �largissement de l�espace
intercellulaire. C�est de type macula (macula adherens ou desmosome
- Selon leur fonction :
? les jonctions imperm�ables, elles r�unissent les cellules entre elles en
emp�chant le transit de substances dans les espaces intercellulaires qui les
s�parent ;
? les jonctions de communication, elles contr�lent le passage de petites mol�cules
d�une cellule � l�autre ;
? Les jonctions d�adh�rence, elles sont m�caniquement r�sistantes et interviennent
dans la coh�sion des cellules entre elles.
Observez la planche VI
Identifiez les diff�rents types de jonctions
de la figure 1
Voir planche
Quelles sont les techniques qui ont permis d�obtenir les micrographies 2 et 3 de la
planche VI
Les techniques sont le cryofracture et le cryod�capage plus ombrage coupes mince
I-5. R�les physiologiques de la membrane plasmique
1-5-1. Propri�t�s de la membrane plasmiques
Indiquer les propri�t�s de la membrane plasmique
- perm�abilit� s�lective
- Les activit�s physiologiques li�es aux particularit�s de la construction
mol�culaire de la membrane plasmique
1-5-2. Les ph�nom�nes de transports membranaires
Quels sont les deux principaux groupes de ph�nom�nes de transport membranaire
- Le transport avec mouvement de la membrane plasmique : transport des
macromol�cules ;
- Les transports sans mouvement de la membrane plasmique : perm�abilit� s�lective
1-5-2-1. transport avec mouvement de la membrane plasmique
D�finir les termes endocytose et exocytose
- L'endocytose est un processus au cours duquel la membrane d'une cellule enveloppe
et absorbe une particule.
- L'exocytose est le processus au cours duquel les substances contenues dans le
cytoplasme d'une cellule sont envelopp�es par la membrane de cette cellule, pour
�tre ensuite rejet�es vers l'ext�rieur.
? Endocytose
Quels sont les diff�rents types de d�endocytose
Les diff�rents types d�endocytose sont :
- La pinocytose : Ingestion, par toutes les cellules, de fluides ou de particules
(liquides & solut�s) de petite taille par formation de v�sicules lisses (50 � 150
�m) qui seront dirig�es vers les endosome ;
- La phagocytose : Endocytose de particules volumineuses (sup�rieure � 1�m)
(bact�ries, organites) dans une vacuole de phagocytose : phagosome.
- Endocytose par r�cepteur : v�sicule de 100 � 150 nm
Expliquez leur m�canisme
? La pinocytose
La pinocytose se fait par une invagination de la membrane cytoplasmique gr�ce au
r�seau de filament d'actine, suivit d'une modification de la bicouche P-lipidique.
La membrane plasmique finit par se refermer en une v�sicule lise englobant la
substance � capturer.
? La phagocytose Les particules sont pi�g�es par les mol�cules
mucopolysaccharidiques de la surface cellulaire. Puis la membrane plasmique va
s�invaginer avec l�aide des prot�ines du cytosquelette et former une
v�sicule(phagosome)
? Endocytose par r�cepteur La membrane plasmique est tapiss�e du c�t� interne par
un rev�tement fibreux pour l�essentiel de clathrine (complexe prot�ique organis�e
en une structure � trois branches courbes ou triskelion) on parle de puits
recouvert qui sont associ� � des r�cepteurs. Les triskelions s�assemblent en un
r�seau sous membranaire qui finit par former une sph�re.
Les particules � capturer qui sont associ�es � des prot�ines formant un complexe
appel� LDL (low Density lipoprot�ine) vont se fixer sur les r�cepteurs.
La sph�re va finir par se fermer et former une v�sicule recouverte qui est
internalis�e.
Une fois internalis�es, les v�sicules perdent leur rev�tement de clathrine,
fusionnent pour constituer des endosomes.
1-5-2-2. transport sans mouvement de la membrane plasmique
Quels sont les types de transport faisant appel � la seule perm�abilit� de la
membrane plasmique
Les diff�rents types de transport faisant appel � la seule perm�abilit� de la
membrane sont :
- le transport passif
- Transport actif
Quel sont les crit�res distinctifs Le transport actif se fait avec utilisation
d��nergie alors que le transport passif se fait sans apport �nergetique.
? Transport passif
La diffusion simple et la diffusion facilit�e sont le d�placement de solut�
Indiquez et expliquez la loi du transport du solvant puis dites dans quel type de
transport on peut les classer
Le d�placement de l�eau � travers la membrane plasmique est l�osmose
Le transport du solvant se fait du milieu le moins concentr� en solut� (milieu
hypotonique) vers le milieu le plus concentr� en solut� (hypertonique).
L�osmose est class�e dans le transport passif
D�finissez le solut� Le solut� est un corps ou solution qui peut se dissoudre dans
le solvant.
Indiquez la loi de diffusion et expliquez les diff�rents types de diffusion puis
dites dans quel type de transport on peut les classer
Les solut�s se d�placent dans le sens de son gradient de concentration et gradient
�lectrique du milieu hypertonique vers le milieu hypotonique.
Les diff�rents types de diffusion sont la diffusion simple et la diffusion
facilit�e.
La diffusion simple est le transport des mol�cules � travers les canaux
membranaires pour les mol�cules lipophobes et � travers les phospholipides pour les
substances lipophiles.
La diffusion facilit�e se fait gr�ce � des prot�ines de transport appel�e
perm�ases.
La diffusion simple et la diffusion facilit�e sont des transports passifs.
Donnez la repr�sentation graphique de la vitesse d��volution des diff�rents types
de diffusion
? Transport actif
Expliquez le fonctionnement de la pompe
L�ATPase ou pompe Na/K transporte les ions Na vers l�ext�rieur et les ions K vers
l�int�rieur d�une cellule contre leurs gradients �lectrochimiques gr�ce �
l�hydrolyse de l�ATP � l�int�rieur de la cellule.
Trois ions Na sont pomp�s contre deux ions de K pour l�hydrolyse d�un ATP.
Apr�s fixation des ions Na et K, l�hydrolyse de l�ATP va favoriser le changement de
conformation de la prot�ine de transport. La pompe permet de maintenir le potentiel
de membrane.
D�finissez les termes d�uniport, symport,antiport et expliquez le m�canisme par un
sch�ma
? Notion d�uniport, symport, antiport
Uniport =transport d�une et une seulemol�cile
Symport = transport de deux mol�culesdans le m�me sens
Antiport = transport de deux mol�cules dans les sens oppos�s
REPRESENTATION GRAPHIQUE DE LA VITESSE DES DIFFUSIONS EN FONCTION DE LA
CONCENTRATION DE LA MOLECULE TRANSPORTEE
Vmax est la vitesse quand tous les transporteurs sont occup�s Km est voisin de la
constante. Il exprime l�affinit� du transporteur pour le solut�
1-5-2-1. Les �changes d�information entre les cellules
Citer les diff�rentes strat�gies de transmission chimique d�information entre les
cellules
Les diff�rentes strat�gies de transmission chimique de l�information sont :
- La transmission nerveuse et la transmission humorale
Expliquez ces diff�rentes strat�gies
La transmission nerveuse se fait suivant deux voies :
- la conduction neuronique se fait par signaux �lectriques. le signal (potentiel
d�action) est transmis par polarisation puis d�polarisation de la membrane
plasmique
- et la transmission synaptique qui se fait entre deux cellules. La transmission
synaptique se fait suivant deux modalit�s. Par les synapses �lectriques par un
m�canisme de couplage �lectrique au niveau des jonctions de type GAP et par les
synapses chimiques avec des neurom�diateurs comme signal chimique.la transmission
humorale se fait par lib�ration d�un messager chimique de nature hormonale qui est
v�hicul� jusqu�� la cellule cible par le syst�me circulatoire. Elle n�cessite un
second messager qui est l�AMPc. Une fois que l�hormone atteint la cellule cible,
elle se fixe sur un r�cepteur membranaire qui se fixe � son tour sur l�ad�nyl
cyclase qui est coupl� � un transducteur (de nature lipidique). La fixation de
l�hormone sur l�ad�nyl cyclase provoque la formation d�un second messager AMPc par
hydrolyse de l�ATP. L�AMPc transporte alors l�information vers les prot�ines
kinases AMPc d�pendant.
Faites le sch�ma montrant le m�canisme de transfert d�information � travers la
membrane plasmique � partir d�une hormone
Expliquez le m�canisme
II- Hyaloplasme et cytosquelette
II-1. Quelques d�finitions
D�finir le Hyaloplasme Le hyaloplasme ou cytosol est la substance fondamentale du
cytoplasme constitu�e d'un gel riche en eau (aspect hyalin), ainsi qu'en substances
prot�iques et en ions, dans le lequel baigne les organites.
Donnez la d�finition du cytoplasme Cytoplasme est l�espace comprise en la membrane
plasmique et le noyau. Il est constitu� du cytosol, des organites cellulaires et du
cytosquelette.
D�finir la notion du cytosquelette Le cytosquelette est un r�seau complexe de
filaments prot�iques qui s��tend � travers le cytoplasme. Il conf�re aux cellules
eucaryotes leur aptitude � prendre des formes diff�rentes et � se d�placer. Il est
�galement appel� cytomusculature car responsable des mouvements amibo�des, cili�s
et flagell�s de la cellule. Il maintient aussi les diff�rents organites en
suspension dans le cytoplasme.
II-2. Constituants du cytosquelette
Citez les �l�ments du cytosquelette et Le cytosquelette est constitu� de :
donnez leurs caract�ristiques structurales :
forme et diam�tre
- Microtubules : ce sont des tubes creux de 25 nm de diam�tre ext�rieur ;
- Filaments ou microfilaments d�actine : ce sont des cylindre pleins de 5 � 6 nm de
diam�tre ;
- Filaments interm�diaires : ce sont des cylindres pleins de 7 � 11 nm de diam�tre.
Identifiez les �l�ments du cytosquelette sur les figures 1 et 2 de la planche VIII
Voir planche
II-2-1. Les microtubules
? R�les des microtubules et prot�ines associ�es
Citez les r�les des microtubules et des prot�ines associ�es
Les microtubules et leurs prot�ines associ�es jouent un r�le :
- dans la division cellulaire par formation de la plaque �quatoriale et le
d�placement polaire des chromosomes pendant la mitose.
- Dans la mobilit� cellulaire gr�ce aux flagelles et la formation de cils et de
pseudopode
- Transport cytoplasmique : Ils servent de route pour le transport intracellulaire
de certains organites, v�sicules et granules de pigments.
- Maintien de la forme cellulaire
? Les poisons des microtubules
Citez deux poisons des microtubules. L�un d�eux agit sur la cellule en division,
lesquel, pr�cisez l��tape de la mitose
- Effet inhibiteur de la polym�risation :
La colchicine (alcalo�de extrait de Colchicum autumnale). En se liant � la tubuline
elle emp�che la polym�risation. L'absence ou l'insuffisance de microtubules lors de
la mitose a pour cons�quence de bloquer la division cellulaire au stade m�taphase,
ce qui explique son action anti-tumorale.
Le nocadazole. Il se lie � la tubuline et pr�vient la polym�risation.
La vinblastine et vincristine (alcalo�de extraits de la pervenche) se lient aux
dim�res de tubuline et forment des agr�gats.
- Effet inhibiteur de la d�polym�risation :
Le taxol (extrait de l��corce d�if) en se fixant sur la tubuline � induit la
formation de microtubules stables. La persistance du r�seau lors de la mitose
emp�che la cellule de se diviser car la d�polym�risation des microtubules (au
niveau des kin�tochores) qui est une �tape cruciale lors de la s�paration des
chromosomes ne peut avoir lieu.
Faites le sch�ma de la coupe longitidunale d�un cil
II-2-2. Les microfilaments d�actine
Quelle est la prot�ine associ�e � l�actine etqui permet les mouvements contractiles
La prot�ine associ�e � l�actine et qui permet les mouvements contractiles est la
myosine
Citez d�autres prot�ines associ�es
D�autres prot�ines sont associ�es � l�actine, ce sont :
La tropomyosine et la troponine qui assurent la consolidation des filaments
d�actine
La profiline qui emp�che la polym�risation de l�actine G.
La gelsoline qui fragmente les filaments d�actine
La fimbrine et la filamine qui jouent un r�le dans la formation de microvillosit�s
La spectrine qui permet l�ancrage des filaments d�actine � la membrane plasmique
D�crire le m�canisme de la contraction musculaire ? Description du m�canisme de
contraction musculaire
Les fibres musculaires du muscle squelettique sont d��normes cellules dont le
cytoplasme est occup� par des myofibrilles parall�les dont l�unit� structurale est
le sarcom�re
Lors d�un potentiel d�action induisant la contraction, les t�tes des mol�cules de
myosine (myofilament�pais) gr�ce � l��nergie produit par l�hydrolyse de l�ATP et Ca
vont se fix�es sur les filaments fins
d�actine (myofilament fin) puis les faire glisser l�un vers l�autre. Ce mouvement
se traduit par un raccourcissement des bandes I et H. c�est la contraction
musculaire.
? Inhibiteur de la polym�risation des microfilaments
Citez un inhibiteur de la polym�risation des microfilaments
La cytochalasine B, D et E
Cytochalasine D : se lie aux extr�mit�s (+) et emp�che la polym�risation. Toxine
fongique. L'additionde cytochalasine � faible concentration g�le instantan�ment des
mouvements comme la reptation d'un fibroblaste, montrant l'implication de l'actine
dans de tels mouvements1
. Origine = Moisissure (Helminthosporium Dermatioideum)
? Phallo�dine : se lie aux filaments d'actine et s'oppose � leur d�polym�risation.
Toxine fongique pr�sente notamment dans l'ammanite phallo�de. Origine = Amanite
Phallo�de
? Latrunculine A : se lie au monom�re d'actine-G et inhibe la polym�risation en
filaments.
Origine = Eponge de feu ramifi�e Latrunculia Magnifica)
? Jasplakinolide : induit une polym�risation amorphe avec une nucl�ation tous les 3
actine-G :le filament s'en trouve alors d�sorganis�.
II-2-3. Les filaments interm�diaires
Par quelle technique peut-on mettre en
�vidence les filaments interm�diaires Technique immunocytochimique
Quelle est leur caract�ristique structurale Ils sont constitu�s de prot�ines
fibreuses organis�es dans la r�gion centrale en h�lice a de 300 acides amin�s. Deux
prot�ines s�associent pour former une double h�lice puis deux doubles h�lices
s�associent en anti parall�le pour former un t�traplex. Le t�traplex est unit�
fondamentale des filaments interm�diaires. Le huit t�traplex s�associent pour
former un filament interm�diaire. De 10 nm de diam�tre.
? Familles et lieux de synth�se des filaments interm�diaires
Citez les quatre familles de filament
interm�diaire et les cellules qui les fabriquent
Les quatre grandes familles de filaments interm�diaires sont :
Les lamines : noyau
Les k�ratines : cellules �pith�liales
La vimentine : cellules conjonctives
Les neurofilaments : celleules nerveuses