4 Informe de Analisis

“AÑO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO”
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA PESQUERA Y ALIMENTOS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA DE ALIMENTOS
Practica N° 4:
“ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA)”
Asignatura: Análisis de Alimentos
Profesora: Ana Lancho Ruiz
Grupo: 90G
Integrantes: Código
 Clemente Calderón, Keythlyn Rubí 1524120377
 Martínez Pujalla, Caroline Lisseth 1524120323
 Padilla Velasquez, Julissa Margarita 1524120163
 Padilla Villalobos, Melissa Katherine 1524120305
 Taya Sifuentes, Antuanet Aurora 1524110076

Facultad de Ingeniería Pesquera y de Alimentos
INDICE
INTRODUCCIÓN .................................................................................................................................. 3
OBJETIVOS........................................................................................................................................... 4
MARCO TEORICO ................................................................................................................................ 5
MUESTRAS, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS ............................................................................ 9
MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO............................................................................................................ 10
RESULTADOS ...................................................................................................................................... 12
DISCUSIÓN ......................................................................................................................................... 17
CONCLUSIONES .................................................................................................................................. 18
BIBLIOGRAFÍA..................................................................................................................................... 18
ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 2 | 18

INTRODUCCIÓN
En 1910, el botánico ruso M. Tswett describió por vez primera esta técnica, que fue aplicada a la
separación de pigmentos de plantas, dándole el nombre de cromatografía en referencia a las
bandas coloreadas de pigmentos que se separaban por su adsorción selectiva sobre columnas de
yeso. Tras su descubrimiento, la cromatografía quedo prácticamente olvidada hasta 1930 año en
que fue redescubierta por Kuhn y Lederer, quienes la aplicaron para la separación de
carotenoides; a partir de este momento, el uso de esta técnica se fue extendiendo cada vez
más, al tiempo que se desarrollaban diferentes versiones de la misma: cromatografía de reparto
(Martin y Synge, 1941), de papel (Consden, Gordon y Martin, 1944), de capa fina (Stahl, 1958),
etc.

OBJETIVOS
 Determinar cromatografía de papel y cromatografía de capa fina para una muestra de

chicha morada ´´NEGRITA´´.
 Entender la importancia de la cromatografía en el área de Análisis de Alimentos.
 Relacionar todos los conceptos relacionados a la cromatografía para entender el proceso
de separación del color en una muestra de chicha artificial.

MARCO TEORICO
Cromatografía
 Tswett (1906). Método de cromatografía en el cual
los componentes de una mezcla son separados en
una columna adsorbente dentro de un sistema
fluyente.
 Método usado principalmente para la separación
de los componentes de una muestra, en el cual los
componentes son distribuidos entre dos fases, una
de las cuales es estacionaria, mientras que la otra
es móvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o
un líquido soportado en un sólido o en un gel
(matriz). La fase estacionaria puede ser
empaquetada en una columna, extendida en una
capa, distribuida como una película, etc. (I.U.P.A.C)
Figura N°1, Cromatografía en papel
Actualmente la Cromatografía es el nombre que se le da a un grupo de técnicas utilizadas en la

determinación de la identidad de sustancias, en la separación de componentes de las mezclas y en
la purificación de compuestos. Esta técnica es muy efectiva por lo tanto se utilizada tanto a nivel
de investigación como nivel industrial. (Textos Científicos, 2007)
Este método puede variar, pero siempre se basa en un principio: Todos los sistemas
cromatograficos contienen una fase estacionaria y una fase móvil.
Figura N°2, Tabla de fases móviles y estacionarias, Cromatografía

Tipos de Cromatografía:
Clasificación atendiendo al fundamento de separación
 Cromatografía de Líquidos:
_ Fase móvil líquido y fase estacionaria sólida
1. Cromatografía de adsorción: La fase estacionaria sólida retiene a los

solutos por un doble efecto de adsorción física y química. Las
interacciones implicadas son del tipo de Van Der Waals.
2. Cromatografía de cambio iónico: El sólido retiene a los solutos gracias a
las atracciones electrostáticas. La fase estacionaria sólida lleva en las
superficies cargas electrostáticas fijas, que retienen contra iones
Figura N°3
móviles que pueden intercambiarse por iones de la fase móvil.
3. Cromatografía de exclusión: La fase estacionaria es un material
poroso, que retiene a las moléculas en función de su tamaño, en
ocasiones se denomina también cromatografía de filtración sobre
geles o permeabilidad de geles (GPC).
_ Fase estacionaria líquida
1. Cromatografía de reparto: La fase estacionaria es un líquido

inmovilizado sobre un material inerte sólido que solo actúa de
Figura N°4
soporte.
2. Cromatografía de afinidad o fases enlazadas: La fase estacionaria generalmente es un
polímero de tipo líquido inmovilizado sobre un sólido inerte por enlaces covalentes.
Figura N°5, Cromatografía de reparto, Slide Player
 Cromatografía de Gases:
_ Fase móvil gaseosa
1. Cromatografía de adsorción: Llamado también cromatografía gas- sólido, la fase

estacionaria es un sólido finamente dividido, que retiene a los solutos por adsorción.
2. Cromatografía de partición o reparto: La fase estacionaria es un líquido retenido por
impregnación o por enlace sobre un sólido inerte. Se basa en equilibrios de distribución.

Figura N°6, Modelo de Cromatografía de gas, Emase
 Cromatografía de Fluidos Supercríticos:

Un fluido supercrítico es un fluido calentado a T° y P superiores a las críticas. Posee
algunas características propias de un gas y alagunas propias de un líquido. La fase
estacionaria puede ser líquida o sólida.
Clasificación atendiendo al modo que se lleva a cabo una separación
1. Cromatografía en columna: La fase estacionaria se introduce en un tubo estrecho a través

del cual se hace pasar por una fase móvil. Esta se desplaza por capilaridad, gravedad o
presión. Pueden emplearse fases móviles líquidas, gaseosas o fluidos supercríticos.
 Cromatografía de Líquidos
 Cromatografía de gases
 Cromatografía de fluidos supercríticos
2. Cromatografía plana: La fase estacionaria se coloca en un soporte plano. En cromatografía

plana el flujo de fase móvil se consigue por capilaridad y gravedad. Solo pueden emplearse
fases móviles líquidos. Existen 2 tipos:
 Cromatografía de papel: La fase estacionaria está constituida por el agua retenida

en celulosa, también existen papeles cambiadores de iones.
 Cromatografía en capa fina: La fase estacionaria es un sólido adsorbente
finamente dividido o un líquido inmovilizado sobre un sólido colocado sobre una
placa plana.

Figura N°7, Cromatografía de papel Figura N°8, Cromatografía en capa fina
Funcionamiento de un Cromatógrafo de Gas
El esquema general:
_Fuente de gas
_Sistema de inyección
_Horno y Columna cromatográfica
_Sistema de detección
_Sistema de Registro
Figura N°9, Esquema de Cromatografía de Gas, ResearchGate
Funcionamiento de Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)
_Sistema de suministro de fase móvil
_Sistema de inyección de muestra
_Columna cromatográfica
_Detector
Figura N°10, Esquema de Cromatografía de HLPC, HPLC Química

MUESTRAS, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

A) Muestra
Chicha Morada “Negrita” MAIZENA “DURYEA”
B) Reactivos
Éter de Petróleo Agua Destilada Alcohol-Etanol
C) Materiales
Papel Filtro Placa Petri
Vaso precipitado de 250 ml Vaso Precipitado de 500 ml

MÉTODOS Y PROCEDIMIENTO
A) CROMATOGRAFIA DE PAPEL
 Se comenzara con un lavado analítico de los

materiales
 Se cortara el papel filtro en forma circular ,
donde se escogerá como molde el vaso
precipitado de 250 ml
 Se hará un huequito al centro del papel y se
le introducirá papel filtro como se muestra
en la imagen.
 Repetiremos el proceso en tres vasos
precipitados diferentes
 Se prepara una solución

concentrada de chicha morada
12 g ------------------ 50 ml
 Se mezclara hasta que quede

uniforme

 Se sembrara la muestra en el papel

filtro y se colocara encima del vaso
precipitado de 50 ml de alcohol ,
éter de petróleo y agua destilada y
seguidamente se tapara con un vaso
precipitado de mayor volumen
OTRO METODO DE CROMATOGRAFIA DE PAPEL
 Se cortara papel filtro en forma de

lápiz , donde colocaremos
nuevamente en un vaso precipitado
A) 50 ml de Alcohol , donde la siembra
B) será de 1 punto y veremos como la
C) muestra correrá de manera mas
D) rápida y visual .

E) COMRATOGRAFIA EN CAPA FINA
 Se formara el engrudo con un poco

de maizena en 125 ml de agua , la
mezcla se disolverá y debe quedar
espesa y homogénea
 Se colocara el engrudo en 3 placas

Petri donde se dejara secara
temperatura ambiente , dando
como resultado una base uniforme
 Una vez seca se sembrara en el

centro a su vez se echara una cierta
cantidad de agua destilada, etanol y
éter de petróleo respectivamente y
se tapara , luego de unos minutos se
observara el recorrido

RESULTADOS
 Cromatografía de Papel
En esta parte de la práctica se utilizó papel filtro (posee celulosa) como fase estacionaria y un
eluyente como fase móvil.
Los eluyentes utilizados fueron: Éter de petróleo, Agua destilada y Etanol.
Cada uno posee diferente polaridad que permitirá que el eluye se disperse en el papel filtro.
- ÉTER DE PETRÓLEO
Utilizamos éter de petróleo, pero no se presenció la dispersión de los componentes de la
muestra, debido a su baja polaridad.
FIGURA Nº1. Eluyente Éter de Petróleo en cromatografía de papel
FIGURA Nº2. Tiempo de espera

para éter de Petróleo

- ETANOL
Al utilizar etanol como eluyente no se evidenció mayor corrimiento de los componentes, sabiendo
que el etanol es uno de los más polares por debajo del agua, llegamos a la conclusión de que no
fue etanol puro, sino un alcohol isopropílico el que utilizamos.
FIGURA Nº3. Eluyente Etanol en cromatografía de papel
FIGURA Nº4. Tiempo de espera para el Etanol FIGURA Nº5. Corrimiento de los componentes

- AGUA DESTILADA
Al usar agua destilada se evidenció claramente el arrastre de los componentes sobre el papel
filtro. Corroborando que el agua es un eluyente de alta polaridad. Se observó la separación de los
colores rojo por el centro y por el borde azul, indicando que el azul tiene más polaridad que el
color rojo. (Observar la Figura 8)
FIGURA Nº6. Eluyente Agua destilada en cromatografía de papel
FIGURA Nº7. Tiempo de espera para el agua FIGURA Nº8. Corrimiento de los componentes

 Cromatografía de Capa Fina
En esta parte de la práctica se utilizó a la placa petri con una capa de almidón como fase
estacionaria y un eluyente como fase móvil.
De igual manera los eluyentes utilizados fueron: Éter de petróleo, Agua destilada y Etanol.
- ÉTER DE PETRÓLEO
Al igual que en la cromatografía de papel que se utilizó el éter de petróleo, siendo un
eluyente de baja polaridad no hay arrastre de componentes.
FIGURA Nº9. Eluyente éter de petróleo en cromatografía de capa fina
- ETANOL
Se presencia la dispersión del colorante sobre la capa de almidón, indicando que es un
compuesto polar a pesar que el alcohol que no utilizamos no fue puro. Se observa
separación del color rojo y un punto azul.
FIGURA Nº10. Eluyente etanol en cromatografía de capa fina

- AGUA DESTILADA
Se presencia la dispersión del colorante sobre la capa de almidón, indicando que es uno de
los compuestos más polares. Se observa separación de los colores rojo y azul, siendo los
componentes de los ingredientes de la chica morada de sobre.
FIGURA Nº10. Eluyente agua destilada en cromatografía de capa fina
DISCUSIÓN
“La cromatografía de papel trabajo con el principio de que en un sistema de dos fases, los solutos
se mueven junto con la fase móvil a una velocidad que es dependiente de su distribución
diferencial entre las dos fases. La celulosa del papel es el medio de soporte en el que se mueven
los solventes”. (Vejar, 2005, p.147)
- “La explicación es el agua se une a la celulosa polar, mucho más fácilmente que el solvente
orgánico, de manera que esencialmente se puede decir que el solvente orgánico se mueve sobre
las fibras hidratadas de la celulosa”. (Vejar, 2005, p.147)
- “Las diferencias de retención se deben a afinidades de adsorción, de solubilidad de un medio fijo

o de fijación por enlaces iónicos; las diferencias de elución se deben, principalmente, a la mayor o
menor solubilidad en el disolvente que circula... en resumen: el balance (afinidad por el
soporte/afinidad por el eluyente) determina mayor o menor velocidad de elución de cada
componente, lo que permite separarlos”. (Primo, 1995, 1223)
Esto nos lleva a decir que es método muy indispensable para determinar pigmentos en colorantes.

CONCLUSIONES
Se observó en esta práctica que por medio de la cromatografía es posible la separación de

los colores, como la polaridad de solventes utilizados para la cromatografía determinan el
resultado mostrándonos sus diferentes compuestos.
En el caso del éter de petróleo no presento dispersión en ninguno de los dos casos a pesar
que es un líquido (fase móvil) por lo cual llegamos a la conclusión que se debe a su baja
polaridad.
El etanol a pesar de su alta polaridad no evidencio mayor corrimiento y se debe a que no
era etanol puro sino un alcohol isopropílico.
Al usar agua destilada se evidenció claramente el arrastre de los componentes sobre el
papel filtro. Comprobando que el agua es un eluyente de alta polaridad, observando la
separación de los colores rojo por el centro y por los bordes azules, indicando que el azul
tiene más polaridad que el color rojo.
BIBLIOGRAFÍA
CONCEPTOS FUNDAMENTALES DE CROMATOGRAFIA.MNCS Papers.

http://www.mncn.csic.es/docs/repositorio/es_ES/investigacion/cromatografia/principios_
de_cromatografia.pdf
Huertas Greco, Sánchez Medina (2012) ESQUEMA DE UN CROMATÓGRAFO DE GASES
https://www.researchgate.net/figure/316148428_fig11_Figura-12-Esquema-de-un-
cromatografo-de-gases-Tomado-de-Huertas-Greco-Sanchez
Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC). HPLC Química.
http://cromatografia.com.mx/
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA EFICACIA - CROMATOGRAÍA DE GASES Emaze.com
https://www.emaze.com/@AORWFTTW/Trabajo-Bioquimica
MURILLO CORREA, A. CROMATOGRAFÍA DE REPARTO O DE PARTICIÓN. Slideplayer.
http://slideplayer.es/slide/10434926/
CROMATOGRAFIA. Universidad Nacional del Santa.
http://biblioteca.uns.edu.pe/saladocentes/archivoz/curzoz/cromatografia.pdf
TÉCNICAS CROMATOGRAFICAS. Archivos de Química Analítica Ambiental. Universidad de
Jaén.
http://www4.ujaen.es/~mjayora/docencia_archivos/Quimica%20analitica%20ambiental/T
ema6.pdf
CROMATOGRAFÍA (2011) Blogspot.
http://angela-qumicaorgnica.blogspot.pe/2011/11/cromatografia.html
VEGA VIERA, J. MUÑOZ ROJAS A. CROMATOGRAFIA DE GASES EN
ALCOHOLES. Universidad Nacional del Santa.
https://es.slideshare.net/vegabner/cromatografia-de-gases-en-alcoholes
CROMATOGRAFÍA. Textos Cientificos.
https://www.textoscientificos.com/quimica/cromatografia

4 Informe de Analisis

Transféré par

Informations du document

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

4 Informe de Analisis

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

“AÑO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO”

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

“ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA)”

Asignatura: Análisis de Alimentos

Profesora: Ana Lancho Ruiz

 Clemente Calderón, Keythlyn Rubí 1524120377

 Martínez Pujalla, Caroline Lisseth 1524120323

 Padilla Velasquez, Julissa Margarita 1524120163

 Padilla Villalobos, Melissa Katherine 1524120305

 Taya Sifuentes, Antuanet Aurora 1524110076

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 2 | 18

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 3 | 18

 Determinar cromatografía de papel y cromatografía de capa fina para una muestra de

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 4 | 18

Figura N°1, Cromatografía en papel

Actualmente la Cromatografía es el nombre que se le da a un grupo de técnicas utilizadas en la

Figura N°2, Tabla de fases móviles y estacionarias, Cromatografía

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 5 | 18

Clasificación atendiendo al fundamento de separación

1. Cromatografía de adsorción: La fase estacionaria sólida retiene a los

1. Cromatografía de reparto: La fase estacionaria es un líquido

Figura N°5, Cromatografía de reparto, Slide Player

1. Cromatografía de adsorción: Llamado también cromatografía gas- sólido, la fase

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 6 | 18

Figura N°6, Modelo de Cromatografía de gas, Emase

 Cromatografía de Fluidos Supercríticos:

Clasificación atendiendo al modo que se lleva a cabo una separación

1. Cromatografía en columna: La fase estacionaria se introduce en un tubo estrecho a través

2. Cromatografía plana: La fase estacionaria se coloca en un soporte plano. En cromatografía

 Cromatografía de papel: La fase estacionaria está constituida por el agua retenida

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 7 | 18

Figura N°7, Cromatografía de papel Figura N°8, Cromatografía en capa fina

Funcionamiento de un Cromatógrafo de Gas

_Horno y Columna cromatográfica

Figura N°9, Esquema de Cromatografía de Gas, ResearchGate

Funcionamiento de Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC)

_Sistema de suministro de fase móvil

_Sistema de inyección de muestra

Figura N°10, Esquema de Cromatografía de HLPC, HPLC Química

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 8 | 18

MUESTRAS, MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Chicha Morada “Negrita” MAIZENA “DURYEA”

Éter de Petróleo Agua Destilada Alcohol-Etanol

Papel Filtro Placa Petri

Vaso precipitado de 250 ml Vaso Precipitado de 500 ml

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 9 | 18

 Se comenzara con un lavado analítico de los

 Se prepara una solución

 Se mezclara hasta que quede

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 10 | 18

 Se sembrara la muestra en el papel

OTRO METODO DE CROMATOGRAFIA DE PAPEL

 Se cortara papel filtro en forma de

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 11 | 18

E) COMRATOGRAFIA EN CAPA FINA

 Se formara el engrudo con un poco

 Se colocara el engrudo en 3 placas

 Una vez seca se sembrara en el

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 12 | 18

FIGURA Nº1. Eluyente Éter de Petróleo en cromatografía de papel

FIGURA Nº2. Tiempo de espera

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 13 | 18

FIGURA Nº3. Eluyente Etanol en cromatografía de papel

ANALISIS DE COLORANTES Y PIGMENTOS (CROMATOGRAFIA) 14 | 18