U.N.A.
M Castellanos Villegas Ashley Estefanía
Facultad de Química
Laboratorio de Inmunología General
Diagrama de Flujo
Grupo: 3
Para evitar la mezcla de reacciones
Dado que el factor de dilución es 1:2
y los títulos son: 1:20, 1:40, 1:80,
1:160 y 1:320 respectivamente.
Inmediatamente para evitar la
desecación y utilizando el aplicador
para evitar contaminación.
La iluminación y el fondo son para
observar la aglutinación correctamente
y evitar dar falsos negativos.
En estas técnicas se hacen visibles los
complejos Ag-Ac por la aglutinación que
producen los anticuerpos cuando el Ag
forma parte o se ha unido artificialmente
a la superficie de glóbulos rojos,
plaquetas, leucocitos, partículas de
látex, etc.
Normalmente se utilizan glóbulos rojos
(hemoaglutinación) o partículas de látex.
Significa que el título de
anticuerpos es igual o mayor de
1:320, y se debe diluir el suero para
llegar a la dilución donde ya no se
observe aglutinación.
Dado que el factor de dilución es 1:2
y los títulos son: 1:400, 1:800,
1:1600, y 1:3200 respectivamente.
Ortega Ramírez Sergio Rene
Ramírez Rubio Janet Guadalupe
Ruiz Pichardo Guy Jonathan
Equipo: 7
PRÁCTICA No. 8. AGLUTINACIÓN EN PLACA
Titulación de sueros anti-bacterianos
Dividir la placa de vidrio en
cuadros de 4 columnas por 5
filas, con un lápiz de cera.
Con pipeta de 0.2 mL en la primera
columna de 5 cuadros adicionar 0.08
mL, 0.04 mL, 0.02 mL, 0.01 mL y 0.005
mL del suero problema de arriba a abajo
Agregar inmediatamente una gota de
la suspensión bacteriana previamente
homogeneizada a cada cuadro y mezclar
utilizando un aplicador de madera
perfectamente formando un círculo.
Dar a las reacciones movimientos de
rotación suave durante 2 minutos y
leer el resultado con iluminación
indirecta y sobre fondo obscuro.
Las reacciones positivas dan
acúmulos gruesos mientras que las
negativas quedan homogéneas.
Si con las diluciones anteriores se
obtuvieron reacciones positivas se procede
a diluir el suero 1:10 con SSI (0.1
mL de antisuero y 0.9 de SSI)
En la segunda columna se agregan los
volúmenes 0.04, 0.02, 0.01 y 0.005
mL en los cuadros correspondientes, y
se repiten los pasos 3 y 4.
1
 1

Significa que el título de Si todas las reacciones son positivas

anticuerpos es igual o mayor de Se procede a realizar una dilución
1:3200., el suero aún está concentrado y 1:50 del suero (0.1 mL de antisuero
se debe diluir para llegar a la dilución diluído 1:10 y 0.4 mL de SSI)
donde ya no se observe aglutinación.

Dado que el factor de dilución es 1:2 Se agregan a los cuadros de la

y los títulos son: 1:4000, 1:8000 y tercera columna 0.02 mL, 0.01 mL y
1:16000 respectivamente. 0.005 mL. Se repiten los pasos 3 y 4

Significa que el título de Si todas las reacciones anteriores

anticuerpos es igual o mayor de
1:16000, el suero aún está concentrado y
se debe diluir para llegar a la dilución
donde ya no se observe aglutinación o
al título límite en la cuantificación.
fueron positivas procedemos a realizar
la última dilución del suero 1:100
(haciendo una dilución 1:2 de la
dilución 1:50 o si se prefiere hacer
una dilución 1:10 de la de 1:10 para
obtener en cualquier caso 1:100).

Dado que el factor de dilución es 1:2 Agregando de esta solamente en un cuadro

y el título es 1:3200. de la cuarta columna la cantidad de
0.005 y repetir los pasos 3 y 4

El título del antisuero será la máxima

dilución del suero en donde se observe
aglutinación franca.

REFERENCIAS

 Calderón Pascacio, R. (2007). Curso de inmunología [Ebook] (1st ed., pp. 25-
27). Cuernavaca, Morelos: UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO. Retrieved
from http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf

 Ministerio de Salud Peruano. (2005). NORMA TÉCNICA DE DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO

DE BRUCELOSIS (1st ed., pp. 14-15). Lima.

 Universidad Complutense de Madrid. (2013). : TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS IV.

Reacciones secundarias. Precipitación. Inmunodifusión. Aglutinación.
Inhibición de la hemaglutinación. Fijación del complemento. Neutralización y
seroneutralización. [Ebook]. Madrid. Retrieved from
http://webs.ucm.es/info/saniani/troncales/inmunologia/documentostemas/Tema%20
13.pdf