UNIVERSIDAD DEL ATLANTICO - QUIMICA Y FARMACIA

DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOLECTRICO Y LA CAPACIDAD BUFFER DE

UN AMINO ACIDO
Laura Camargo, Jeison Suarez, kellys Sandoval, Maria Zabaleta
Farmacia
Laboratorio de bioquímica

Resumen
Un aminoácido es un compuesto nitrogenado que se caracteriza por presentar un grupo
amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-COOH) unidos al mismo carbono.
La única excepción a esta regla es la prolina, que es un aminoácido. Los aminoácidos son
compuestos anfóteros, lo que significa que muestran al mismo tiempo carácter ácido y básico. En el
punto isoeléctrico la carga neta de la molécula es cero (0). En los aminoáci-dos los grupos ionizables
corresponden a grupos carboxilos, amino, fenólicos y tiólicos. en esta práctica se hizo una medición
de cada sustancia del pH del aminoácido glicina, realizando titulaciones con (NaOH) y H2O

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Introducción  Clasificación:
Un aminoácido es una molécula
orgánica con un grupo amino (-NH2) y
un grupo carboxilo (-COOH).1 Los
aminoácidos más frecuentes y de
mayor interés son aquellos que forman
parte de las proteínas, juegan en casi
todos los procesos biológicos un papel
clave. Los aminoácidos son la base de
las proteínas.

Dos aminoácidos se combinan en una

reacción de condensación entre el
grupo amino de uno y el carboxilo del  Propiedades acido-base
otro, liberándose una molécula de agua
Los aminoácidos son compuestos
y formando un enlace amida que se
nitrogenados que se caracterizan por presentar
denomina enlace peptídico; estos dos
un grupo amino (-NH2) y un grupo carboxilo
"residuos" de aminoácido forman un di
(-COOH) unidos al mismo carbono. Estos dos
péptido, si se une un tercer aminoácido
grupos se pueden ionizar en medio acuoso,
se forma un tri péptido y así,
siendo los responsables del anfoterismo de los
sucesivamente, hasta formar un
aminoácidos, es decir, pueden actuar como
polipéptido. Esta reacción tiene lugar
ácidos o como bases, en función del pH del
de manera natural dentro de las células,
medio (los compuestos que son capaces de
en los ribosomas. (1)
aceptar o ceder protones se denominan
anfóteros o anfolitos): el grupo -carboxilo se
comporta como un ácido débil y el grupo
amino, como una base débil. Por ello, la carga
de los aminoácidos varía en función del pH.
Además, cinco de los aminoácidos
proteinógenos presentan otro grupo ionizable
en su cadena lateral: Lys, Arg, His
(aminoácidos con carga positiva o básicos),
Asp y Glu (Aminoácidos con carga negativa o
ácidos). Tal y como se ha descrito
previamente, la relación cuantitativa entre la
concentración de un ácido débil (HA) y su
base conjugada (A-) viene definida por la
ecuación de Henderson-Hasselbalch.

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En el caso de los aminoácidos neutros, se

establecen dos equilibrios en solución acuosa
entre tres formas iónicas distintas. Dichos
equilibrios vienen determinados por las
constantes de equilibrio del grupo carboxilo
(KC) y del grupo amino (KN):

El enlace peptídico, es un enlace especial,

 Punto isoeléctrico
aminoácidos
que tiene cierto carácter de doble enlace ya
que los electrones tienen cierta resonancia, lo
que le otorga rigidez. Esto limita las
posibilidades de conformación del polipéptido,
(pI) de y por ende de la proteína.

pH en que la carga neta del aminoácido es

nula; en este punto el aminoácido se encuentra
en forma de ion dipolar, así como en pequeñas
cantidades equimolares de aniones y cationes y
una pequeña fracción de aminoácido no
ionizado. El pI de los aminoácidos neutros se
localiza a pH ≈ 6-8
El pI se calcula como la media aritmética
de los pKC y pKN. (2)
 Enlace peptídico
Según las posiciones de los carbonos α
existen dos tipos de configuración, cis y trans.
En la configuración cis los carbonos α se
encuentran en su forma más acercada,
mientras que en la forma trans los carbonos se
encuentran en su forma más alejada, y por
tanto más estable. Suele ser la configuración
trans la favorecida en la conformación de la
estructura de las proteínas, aunque si participa
prolina, suele ser la configuración cis.

El enlace que se forma entre 2 aminoácidos se

llama enlace peptídico, y ocurre entre el grupo
amino (-NH2) de uno de los aminoácidos y el
grupo carboxilo (-COOH) del otro, perdiendo
una molécula de agua, y formando un enlace
(CO-NH). El polipéptido se nombra desde el
extremo aminoterminal al carboxiterminal, y
se pueden añadir más aminoácidos, pero
siempre por el extremo carboxiterminal.

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RESULTADOS se realizó con 25 ml H2O determinando

el comportamiento anfótero y el punto
isoeléctrico del aminoácido
Titulaci Titulaci Glicina PH
ón con ón con PH Referencias
NaOH H2O inicial:
Ph PH 6.622 (1) https://sites.google.com/site/bq2014i
inicial: inicial: ruizcruzmariaconcepcion/i-
7.219 7.219 fundamentos-de-la-
VOLU VOLU VOLU VOLU bioquimica/proteinas/1-2-1-1-
MEN MEN MEN MEN aminoacidos-estructura-
clasificacion-propiedades-
0.5 ML 25 ML 5 ML 9.240
estereoquimica-y-metodos-de-
1.0 ML 25 ML 5 ML 9.706
1.5 ML 25 ML 5ML 10.090 obtencion
2.0 ML 25ML 5ML 10.451 (2) http://ocw.usal.es/ciencias-
2.5 ML 25ML 5ML 10.858 biosanitarias/bioquimica-ph-
3.0 ML 25ML 5ML 11.280 equilibrios-acido-2013-
3.5 ML 25ML 5ML 11.454 base/contenidos/3%20Aminoacidos
4.0 ML 25ML 5ML 11.600 PropiedadesAcidoBase_2012.pdf

cuestionario
14000
12000 1. Representar las formas iónicas y calcular el pI
10000 para los aminoácidos arginina, ácido aspártico
y cisteína.
8000
6000
4000 En el caso del AA arginina existen dos grupos
básicos y uno ácido. La disociación de la
2000
arginina se esquematiza del siguiente
0 modo, donde pK1=2,2; pK2=9,2 y
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0
ML ML ML ML ML ML ML ML
pK3=12,5:

Arginina
TABLA N°1 GRAFICA DE GLICINA Vs (NaOH) pI= 2.2 + 9.2/2= 5.7

CONCLUSION.

En esta experiencia se trabajó con el

aminoácido glicina, realizando medidas
de titulación y se logró observar
variación de Ph a medida que se le Ácido Aspártico:
agregaban 0.5 ml de NaoH hasta llegar pI= 2.0 + 10.0/2=6
a un Ph entre 11.500 y 12.000 todo esto

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Cisteína:
pI= 1.8+10.8/2= 6.3

2. ¿Qué formas iónicas presentarían los

aminoácidos del punto anterior si se
colocan en una solución que tenga un pH
similar al pH sanguíneo: 7,35?

Resultan como productos sustancias que no

provocan cambios en el pH celular y lo
mantienen en su valor normal, actuando
como un sistema buffer.