INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIÓLOGICAS

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
QUÍMICO BACTERIÓLOGO PARASITÓLOGO
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

DETERMIINACIÓN DE COLESTEROL EN LA YEMA DE HUEVO SECCIÓN: 2 GRUPO: 4QV1

OBJETIVO: Determinar la concentración de colesterol en la yema de huevo, por el método de Lieberman-Burchard.

INTRODUCCIÓN: El colesterol es una grasa presente en
todas las células del organismo se presenta en altas
concentraciones en la médula espinal, páncreas y
cerebro, pero se sintetiza principalmente en el hígado y
en el intestino delgado. La reacción de Lieberman-
Burchard se realiza en un medio ácido fuerte constituido
por ácido sulfúrico y anhídrido acético. En la reacción en
colesterol sufre una oxidación gradual. La etapa inicial de
la reacción consiste en la protonación del grupo –OH del
colesterol con la consiguiente pérdida de agua
obteniéndose el ion carbonio 3,5-colestadieno que
constituye el primer paso de la reacción de color. La
oxidación secuencial de este carbono alílico por el SO2-
produce el ácido colesta-sulfónico cromóforo.

RESULTADOS:

Tubo No. B 1 2 3 4 5 Pb
Estándar de 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 0.00
colesterol* (mL)
80 μg/mL
Cloroformo (mL) 1.25 1.00 0.75 0.50 0.25 0.00 1.25
Extracto de 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 5.00
lípidos (μL)
Anhídrido acético 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
(mL)
Agitar
Ácido sulfúrico
concentrado (μL) 50 50 50 50 50 50 50
Agitar e incubar a temperartura ambiente por 5 min
Leer a 640 nm
Absorbencia 0 0.09 0.11 0.23 0.33 0.43 0.16
μg de colesterol
en el tubo de 0 20 40 60 80 100 32
reacción

Curva tipo
0.5

0.4
Absorbancia

0.3

0.2

0.1

0
0 20 40 60 80 100
[Colesterol]

Gráfica 1. μg de colesterol vs absorbancia

CÁLCULOS: Para determinar la cantidad de µg de colesterol

tenemos que:

Prolongación de Carpio y Plan de Ayala s/n, Santo Tomás, 11340 Miguel Hidalgo, CDMX
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Para el tubo 1 80 µg de colesterol -– 1ml Por lo tanto, no debe limitar el consumo de huevos si no
x –------------- 0.25 ml x = 20 tiene una indicación médica que lo aconseje. El huevo es
un alimento muy nutritivo, fácil de preparar y digerir, que
Tubo 1 con 0.25 ml de colesterol µg de colesterol = 20
gusta a la mayoría de personas y que tiene una relación
Tubo 2 con 0.50 ml de colesterol µg de colesterol = 40 calidad nutricional/precio inmejorable.

Tubo 3 con 0.75 ml de colesterol µg de colesterol = 60
Tubo 4 con 1.00 ml de colesterol µg de colesterol = 80
Tubo 5 con 1.25 ml de colesterol µg de colesterol = 100
Para obtener los μg de colesterol hay que interpolar la
absorbancia del problema (0.16) en la curva tipo y eso
nos da una concentración de colesterol de 49 µg de
colesterol.
Los µg de colesterol obtenidos con la ecuación e
interpolados van a estar en 5 µl, entonces:
CONCLUSIÓNES: Los datos obtenidos de la absorbancia
nos dan una curva tipo con tendencia lineal debido a que
las absorbancias son proporcionales a la concentración
del colesterol determinadas por la reacción de
Lieberman-Burchard la cuál es inestable y no se puede
hacer una medición con mayor precisión esto podría
explicar en parte porque la concentración final de
nuestra yema de huevo es de 145.04 mg mientras que los
estándares normales indican que es alrededor de 200
mg.
BIBLIOGRAFÍA:

49 µg de colesterol –-------- 5 µL  C. K. Mathews, K. E. Van Holde, Dean R. Appling,

x –-------------------------------- 7400 µL Spencer J. Anthony-Cahill. Bioquímica, 4.a
x = 72520 µg de colesterol*2 x = 145040 µg de edición. PEARSON EDUCACIÓN, S.A., Madrid,
colesterol 2013. pp. 368
 http://www.institutohuevo.com
Para pasar a mg:

1 mg –------- 1000 µg
x--------------- 145040µg de colesterol x = 145.04 mg de
colesterol

DISCUSIÓN: Según la información extraída del instituto

del huevo: El huevo tiene colesterol entre sus
componentes, porque éste es necesario para la vida (y
por tanto para el desarrollo de un futuro embrión).
Múltiples estudios publicados en los últimos años
confirman que a pesar de su contenido en colesterol
(unos 200mg/unidad) el consumo de huevos no eleva el
riesgo cardiovascular en personas sanas, puesto que
aporta fosfolípidos y grasas insaturadas en su
composición, junto a algunas vitaminas y antioxidantes
que favorecen la prevención de la arterioesclerosis. Las
más recientes recomendaciones indican que consumir
un huevo por día no supone factor de riesgo alguno en
personas sanas.

Prolongación de Carpio y Plan de Ayala s/n, Santo Tomás, 11340 Miguel Hidalgo, CDMX