Espectroscopia de absorción molecular

Benavides, M.1; Carriel, A.1; Gómez, A.1; Panchi, M.1; Rodríguez, A.1; Torres, N.1

1: Universidad Central del Ecuador, Facultad de Ciencias Químicas, Laboratorio de Química de Coordinación.

Resumen

En el presente informe se tuvo como objeto el estudio, el análisis y la correcta manipulación del
espectrofotómetro UV-VIS, para lo cual se siguió un procedimiento el mismo que consistió en calibrar el
espectrofotómetro con agua destilada, para el control de la exactitud de la longitud de onda se realiza un barrido
espectral de una solución acida y una solución básica del indicador rojo Congo seguidamente se observa el
punto isosbéstico, también se realizó el control de la estabilidad de las lecturas para ello también se realizó su
debido procedimiento. Tras la realización del procedimiento experimental se logró con los datos obtenidos la
realización de una curva mediante el punto isosbéstico, a partir de la cual se determinó que el punto donde se
cortan la solución acida y alcalina es a una longitud de onda de 370 nm y 390 nm. Así también se realizó un
control de la precisión fotométrica, y se obtuvo un coeficiente de variación (CV) de 2,29 %.

Palabras clave: Espectrofotómetro, onda, punto isosbéstico

Abstract

The objective of this report was the study, analysis and correction of the UV-VIS spectrophotometer, for which
a procedure was followed that consisted of calibrating the spectrophotometer with distilled water, for the control
of the accuracy of the a specific sweep of a solution and a basic solution of the red indicator has been reached,
the country is still seeing the focus and the speed control of the readings has also been tested. After carrying
out the experimental procedure, the obtained data was obtained by making a curve using the isosbetic point of
view, from which the point where the acid and alkaline solution was cut at a wavelength of 370 nm and 390 nm
was determined. . In this way, a photometric precision control was carried out, and a coefficient of variation
(CV) of 2.29% was obtained

Keywords: Spectrophotometer, wave, isosbestic point

1. Introducción En la práctica la polarimetría es un método muy

La polimetría se basa principalmente en medir o
determinar ‘rotación óptica producida sobre un haz
de luz polarizada al pasar por una sustancia
ópticamente activa’, es importante estudiar este
fenómeno ya que permite realizar estudios acerca
de sustancias que poseen una actividad óptica esto
se debe a la presencia de una asimetría estructural
en las moléculas, se puede observar que las
sustancias que tiene un ‘’plano de polarización y
este se desvía, respecto de la dirección inicial en el
sentido de las agujas de un reloj la sustancia se
denomina dextrógira (+) y si es en sentido contrario
levógira (-)’’ (Hernández. 2016).
utilizado para la determinación de la concentración
de soluciones de solutos ópticamente activos, muy
empleado en la industria farmacéutica, química y
alimenticia; especialmente en la industria
azucarera. El grado de polarización aumenta al
aumentar la temperatura. En los laboratorios de
azúcar, la temperatura, la longitud de onda, y la
longitud de polarímetro se mantienen constantes;
además se usan reactivos que permiten aclarar la
solución sacarina, precipitando las impurezas. Por
lo tanto, el grado de polarización se relaciona
directamente con la concentración de sacarosa
aparente, presente en la muestra (FFYB, 2014)
Es así el caso de la sacarosa que presenta actividad Proceso
DETERMINACION ABSORBANCIA óptica la
1 0,098 cual en
el
2 0,100 Espectros de absorción de
‘plano
3 0,096 forma ácida y básica
de
4 0,100
0.6

Longitud de onda
5 0,101
0.4
6 0,095
0.2
7 0,100
0
8 0,101
0 100 200 300 400 500 600
9 0,096 Absorbancia
10 0,100
x 0,0987 Forma básica Forma ácida

n-1 2,2632X10-3
CV 2,2930 3. Resultados y discusión
polarización hacia la derecha (a=66,55°) y la
mezcla de los productos de la inversión hacia la
izquierda (af=-91,9°). Por ello a medida del
Puntos isosbésticos: 370nm y 390nm
transcurso de la inversión el ángulo de rotación del
plano de polarización disminuye, pasando por cero
y luego pasa a ser negativo llegando hasta un valor Tabla 5-2 Control de la estabilidad de lectura
constante’’ (Weininger, 1998)
fotométrica
La presente práctica tiene como objetivos:
Examinar el diseño y operación de los
polarímetros, determinar si una sustancia es
dextrógira o levógira o si es ópticamente inactiva,
medir el ángulo de rotación y evaluar la rotación
específica de los azúcares, también se tiene como
objetivos planteados estudiar la relación entre la
longitud del tubo del polarímetro y la
concentración con el ángulo de rotación y la
rotación específica, familiarizarse con los métodos
cuantitativos polarimétricos y por ultimo
determinar el contenido de lactosa en una muestra
de leche en polvo.

2. Sección Experimental

2.1. Reactivos y materiales

Para la presente práctica se utilizó: un polarímetro,

Técnicamente, la espectrometría de absorción se
agua destilada, tubos polarimètricos de 1 y 2dm, basa en la absorción de fotones por una o más
soluciones de sacarosa y lactosa (0,5; 1,0; 1,5; 3%) sustancias presentes en una muestra (que puede ser
y muestra un sólido, líquido, o gas), donde con el control de
linealidad se puede distinguir que las absorbancias de 370 nm y 390 nm, cabe mencionar que el punto
es directamente proporcional a la concentración. isosbestico es independiente de la concentración
absoluta de la solución.
Dado que la importancia del método resulta en que
el punto isosbéstico es independiente de la
concentración absoluta de la sustancia y de la Se realizó un control de la precisión fotométrica, y
temperatura entre 4 y 45 ºC. En la práctica al se obtuvo un coeficiente de variación (CV) de 2,29
determinar los espectros de absorción-emisión de %, lo que indica que no hay una precisión adecuada
las sustancias, en sus formas ácidas y alcalinas,
ya que el valor del coeficiente de variación (CV)
dieron puntos isosbésticos de 370nm y 390nm, los
mismos que se define gráficamente en la figura debe ser inferior al 1% para cubetas paralelas, estos
realizada. Cabe tener en cuenta que antes de la resultados pueden reflejar un bajo rendimiento en
realización de cada una de las lecturas, se debe el equipo por el intenso uso o envejecimiento.
establecer la longitud de onda a la que se va a
trabajar, por lo que es de suma importancia calibrar
el espectrofotómetro, verificando que la
absorbancia este en 0% y la transmitancia en 0%, 5. Referencias
para evitar errores experimentales y obtener
resultados más exactos.

En cuanto a la absorbancia en el control de la 6. Anexos

estabilidad de lectura, el valor promedio de las 10
leyendas que se obtuvo fue de 0,0987 UA. Dicha
estabilidad fotométrica es la capacidad del
instrumento de mantener constante la absorbancia
en función del tiempo. Y cuando se producen
variaciones constantes y contínuas hacia valores
superiores o inferiores de absorbancia se habla de
deriva fotométrica y cuando se producen
variaciones al azar se está en presencia de ruido
fotométrico. El ruido influye en el ajuste y esto, al
realizar las determinaciones, presentaría valores no
verdaderos; por lo tanto, se debe hacer el ajuste
tanto al 0 como 100% en una sola lectura, de modo
que no se altere la armonía y secuencia de medida
del espectrofotómetro.

Una de las causas importantes en la aparición de

errores analíticos es la falta de reproducibilidad de
los resultados, el valor hallado de CV fue de
2,2930%, y este debería ser inferior a 1 % para
cubetas paralelas y 2 % para tubos de
fotocolorimetría. Lo que se discute que el
espectrofotómetro puede contribuir a esa falta de
reproducibilidad cuando da lecturas inestables.

4. Conclusiones

Se logró examinar y operar correctamente el

espectrofotómetro, donde se obtuvieron datos para
realizar un control de la exactitud de la curva
mediante el punto isosbestico, al realizar la gráfica
se logró determinar que el punto donde se cortan la
solución acida y alcalina es a una longitud de onda