UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
LAB. BIOQUÍMICA

TEMA Nº 11:

TÉCNICAS DE SIEMBRA

GRUPO N° 1

INTEGRANTES:
 Checa Daniel
 Muñoz Cristhian
 Pullutasig Tatiana
 Tipanta Michael

AYUDANTE:

Emerson Vizuete

SEMESTRE:
Cuarto

PARALELO:
1

QUITO- ECUADOR
2018-2018
 RESUMEN

Identificación de colonias de microorganismos formadas, y las distintas técnicas de siembra en

medios de cultivo. Para lo cual se preparó las respectivas soluciones de medio de cultivo y caldo de
cultivo con anterioridad, posteriormente se procedió a tomar una muestra que contenía organismos
microbiológicos y en los dos tubos de vidrio y con la ayuda del instrumentos adecuados y
esterilizados se colocó muestra en la superficie de nuestro medio de cultivo preparado, y en dos
recipientes circulares de vidrió los cuales contenían un medio de cultivo se procedió de la misma
manera que en los dos tubos de vidrio pero con una técnica de sembrado distinta, finalmente los
medios de cultivo sembrados fueron llevados a la incubadora. Se obtuvo medios de cultivo listos
para el desarrollo de microorganismos. Se concluyó que para sembrar organismos existen varias
técnicas, el cuál es difiere de acuerdo al tipo de instrumento y medio de cultivo que se utilice para
que el microorganismo pueda crecer.

PALABRAS CLAVE:

TÉCNICAS_DE_SIEMBRA/MEDIOS_DE_CULTIVOS/ESTERILIZACIÓN/
COLONIAS_DE_MICROORGANISMOS/
1. OBJETIVOS
 Aplicar varias técnicas de siembra en medios de cultivo.
 Identificar colonias de microorganismos formadas.

2. TEORÍA
2.1. Técnicas de siembra.
2.2. Técnicas de siembra para medio líquido.
2.3. Técnicas de siembra para medio sólido.
2.4. Técnicas de siembra para medio semisólido.
2.5. Unidad formadora de colonias.

3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Material y Equipos
 Varilla de vidrio
 Lámpara de alcohol
 Pipeta
 Caja Petri
 Hisopos
 Asas de cultivo.
 Aguja de cultivo

3.2. Sustancias y reactivos

 Medios de cultivo
 Agua destilada

3.3. Procedimiento

A) Técnica para siembra en medio líquido.

Asa en caldo:
3.3.1. Esterilizar el asa y tomar la muestra con la punta redondeada.
3.3.2. Antes dela siembra esterilizar la boca del tubo, posteriormente introducir
el asa con el inoculo y agitar homogéneamente.
3.3.3. Se saca el asa del tubo y se vuelve a esterilizar para eliminar el exceso de
microorganismo que haya quedado adherido.

B) Técnica para siembra en medios semisólidos.

Picadura y estriado superficial.

3.3.4. Con la aguja de cultivo, tomar la muestra que se desea sembrar.
3.3.5. Realizar una punción en el medio semisólido y retirar con la misma
trayectoria de punción.
3.3.6. En el momento que la aguja llegue a la superficie realizar una con la
misma, un estriado
3.3.7. Acabado el procedimiento llevar la siembra a la incubadora.
 C) Técnicas para medio sólido. (Caja Petri).

Por diseminación con hisopo.

3.3.8. Se sumerge en caldo de cultivo y se estrían ambas mitades de la caja Petri.
3.3.9. Se gira 90 grados y se estría nuevamente las dos mitades de caja Petri.
3.3.10. Se gira 45 grados y se estría nuevamente.

Por agotamiento de estría

3.3.11. Con ayuda del asa de cultivo, recoger un poco de muestra y por medio de
técnica de estriado realizar un estría.
3.3.12. Sin levantar el asa girar la caja Petri (cierto grado) en dirección opuesta
de las manecillas del reloj, y proceder a realizar el estriado seguido del
anterior.
3.3.13. Repetir el procedimiento 3.3.9. 4 veces hasta realizar 4 estrías
superficiales.
3.3.14. Acabado al siembra llevar a incubadora.

Por diseminación con espátula de Drigalsky.

3.3.15. Se deposita sobre el medio sólido una asada o una gota con pipeta el
material a sembrar.
3.3.16. Se extiende con la asa de Drigalsky por todo el medio.
3.3.17. Acabado la siembra llevar a incubadora.

Por agar volcado.

3.3.18. Se deposita el inóculo con pipeta en el centro de la caja Petri y luego se
vuelca el medio de cultivo.
3.3.19. Se homogeniza por rotación.

4. DATOS
4.1 Datos Experimentales.
Tabla 4.1-1
Observaciones en las técnicas de siembra
Técnica de siembra Observación
Asa en caldo

Picadura y estriado

Diseminación por
hisopo
 Agotamiento por estría

Diseminación con asa

de Digralsky

Agar volcado.

5. RESULTADOS
Tabla 5-1
Observaciones de crecimiento microbiano.
Muestras de: Observación
Asa en caldo

Picadura y
estriado

Diseminación
por hisopo

Agotamiento
por estría

Diseminación
con asa de
Digralsky

Agar volcado.

6. DISCUSIÓN

7. CONCLUSIONES

8. CUESTIONARIO.
8.1.Investigar morfología de UFC (forma, elevación, borde)
Una colonia es una agrupación de bacterias formada a partir de la reproducción de una
Unidad Formadora de Colonia (UFC) sobre un medio sólido; aunque varía de tamaño
generalmente es visible a simple vista. Una UFC puede ser un solo microorganismo o bien
un grupo de microorganismos de una misma especie como en el caso de bacterias que tienen
tendencia a permanecer unidas como los estafilococos o los estreptococos.

Fig. 8.1-1
Características morfológicas de la colonia (UFC)

Fuente: (Forbes, 2007)

8.2.Investigar 3 técnicas de siembra diferenciales, 3 técnicas de aislamiento.

Técnicas de aislamiento
Diseminación en volumen: Diluir un volumen de la muestra en un tubo con agar fundido a
40-45°C y realizar pases a otros tubos. Mezclar bien por rotación y verter cada tubo en una
placa Petri. Solo es útil cuando el germen que se quiere aislar es considerablemente más
abundante que el resto.

Diseminación en superficie de medios sólidos por agotamiento, tanto en tubo como en placa.
Se toma una colonia y, tras depositarla en un borde la placa, se siembra mediante estrías
muy juntas, en función del número de bacterias iniciales que se sospeche; al superponer la
estriación se esterilizara el asa. Es el método más utilizado

Diseminación por micro métodos: Mediante un microscopio y con técnicas muy especiales
se puede conseguir tomar una sola bacteria y sembrarla.

8.3.Para qué sirve la técnica de disolución múltiple.

8.4.Si usted tiene un medio con un indicador de ph, que podría inferir si este luego de su
siembra cambia su coloración.

9. ANEXOS
9.1.Diagramas de Técnicas de siembra utilizadas.
9.2.Evidencia del crecimiento microbiano en cada técnica de siembra.
ANEXO 1

Figura 1.

Diagrama Del Equipo

Vaso de precipitación

Caja Petri

Lámpara de
alcohol

Fuente: Grupo 1, Laboratorio de Bioquímica, Centro de Bioquímica. UCE

Nombre: Fecha: Universidad Central del Ecuador

Dibuja: GRUPO N°1 03/07/2018 Facultad de Ingeniería Química
Carrera de Ingeniería Química
Revisa: Vizuete E. 11/07/2018
Escala: Título: TÉCNICAS Lámina:1
DE SIEMBRA
ANEXO 2
Figura 3
Figura 2
Medio de cultivo general
Medio de cultivo general

Fuente: Laboratorio de
Bioquímica Fuente: Laboratorio de
Bioquímica
Figura 4
Caldo de cultivo sembrado

Fuente: Laboratorio de
Bioquímica

Nombre: Fecha: Universidad Central del Ecuador

Dibuja: GRUPO N°1 03/07/2018 Facultad de Ingeniería Química
Carrera de Ingeniería Química
Revisa: Vizuete E. 11/07/2018
Escala: Título: TÉCNICAS DE Lámina:2
SIEMBRA