UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

PERÍODO ACADÉMICO: OCTUBRE 2018 - MARZO 2019

DOCENTE: LIC. ELENA BRITO

ASIGNATURA: ANÁLISIS CLÍNICO I

SEMESTRE: CUARTO SEMESTRE

FECHA DE LA PRÁCTICA: 12-10-2018 NÚMERO DE LA PRÁCTICA: 1

HORA: 17H00-20H00 DURACIÓN: 3 HORAS

NOMBRE DEL
ESTUDIANTE 23. ROMERO COLCHA ERIKA ESTHEFANÍA
TITULO DE LA UNIDAD 1. SERIE BLANCA
UNIDAD:
TEMA DE LA CONTEO DE LEUCOCITOS
PRÁCTICA:
OBJETIVO Determinar el recuento de leucocitos con cámara de Neubauer.
GENERAL:
OBJETIVOS - Conocer la importancia del recuento de Leucocitos en la determinación de
ESPECÍFICOS: enfermedades.
- Establecer el número de leucocitos presentes en un volumen determinado
de sangre.

FUNDAMENTO TEÓRICO :

Hay varios tipos de glóbulos blancos o leucocitos, clasificados según la presencia o ausencia de
gránulos y las características tintóreas de su citoplasma. Los granulocitos presentan grandes gránulos
en su citoplasma y el núcleo segmentado en varios lóbulos, por ello reciben el nombre de
polimorfonucleares. Se subdividen en neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Existen dos tipos de
agranulocitos (leucocitos sin gránulos en el citoplasma): linfocitos y monocitos. Los granulocitos y los
monocitos protegen al organismo frente a los microorganismos invasores de forma inespecífica,
principalmente mediante la ingestión por fagocitosis. Los linfocitos son las células efectoras de las
respuestas inmunitarias específicas frente a las sustancias reconocidas como extrañas, generando
reacciones destinadas a neutralizarlo o destruirlo.

TIPOS CELULARES. ÓRGANOS LINFÁTICOS

Los leucocitos son células de aspecto blanquecino, con núcleo y características específicas para realizar
funciones de defensa. En condiciones normales hay unos 4.000 – 11.000 leucocitos/mm3. Tienen una
vida media variable (días – años).

PROPIEDADES O CARACTERÍSTICAS GENERALES

- Quimiotaxis. Movimiento hacia una sustancia química. Es la atracción química de los fagocitos por
los microorganismos. Entre las sustancias químicas que atraen a los fagocitos se encuentran los
productos microbianos, los componentes de los leucocitos y de las células tisulares dañadas.

- Diapédesis: en respuesta a su contacto con los factores quimiotácticos, las células endoteliales y las
células fagocíticas incrementan la síntesis de sus proteínas de adhesión y se vuelven más “pegajosas”
entre sí. Esto propicia que los fagocitos se adhieran a las superficies de los endotelios y rueden sobre
ellos hasta procurarse una salida entre las uniones de las células endoteliales.

- Movimientos ameboides. Es un movimiento característico de las amebas. Se produce por la

formación de pseudópodos que se extienden y se retraen para desplazar la célula.

- Fagocitosis: los neutrófilos y macrófagos participan en la fagocitosis, pueden ingerir bacterias y

desechos de materia inanimada

PATOLOGÍAS. APLICACIÓN CLÍNICA

MATERIALES Y REACTIVO:

EQUIPO MATERIALES REACTIVO

Microscopio Cámara de Neubauer Liquido de Turk
Pipeta de Thoma para glóbulos Tubos de ensayos Sangre venosa
blancos (perla blanca) Pianos
Papel absorbentes

TÉCNICA UTILIZADA: CONTAJE EN PIPETA Y TUBO

1. Se requiere de sangre total con EDTA

2. Pipetear sangre con la pipeta de Thoma y la boquilla, hasta la marca de 0.5 evitando la
formación de burbujas.
3. Limpiar la pipeta para eliminar el exceso de sangre
4. Aspirar reactivo de Turk hasta la marca 11, evitando las burbujas.
5. Se retira la boquilla de la pipeta y esta se agita vigorosamente por 3 min.
6. Preparar la cámara de Neubauer.
7. Se eliminan las 3 primeras gotas de la dilución.
8. Colocar una gota en la cámara de Neubauer y dejar reposar por 3 min. para que se asienten los
leucocitos.
9. Leer al microscopio con objetivo de 10X y el contador celular, solo en los 4 cuadros grandes de
la cámara de Neubauer,
10. Realizar cálculos correspondientes.

CONCLUSIONES

- Se establecido que el recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de

sangre completa. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el
diagnóstico de enfermedades. Un bajo número de glóbulos blancos se denomina leucopenia
y puede deberse a: Insuficiencia de la médula ósea, enfermedades vasculares del colágeno
(como el lupus eritematoso sistémico), enfermedad del hígado o el bazo, radioterapia o
exposición a la radiación. Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis y
puede deberse a: anemia, tumores de la médula ósea, enfermedades infecciosas, enfermedad
inflamatoria (como artritis reumatoide o alergia), leucemia, estrés emocional o físico
intensos, o daño tisular (por ejemplo, quemaduras).
- Se determinó que el número de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre
de utilizada en la práctica fue de: en tubo: 62, 50, 62 y 64 y en pipeta: 21, 29, 22, y 23.
- Los leucocitos son las células sanguíneas que dentro del organismo participan desarrollando
diferentes funciones como son: fagocitosis, defensa inmunológica específica o inespecífica.
RECOMENDACIONES

- Tomar el volumen exacto con la pipeta, ya que de no hacerlo los leucocitos no se podrán
visualizar en el microscopio
- Al momento de tomar el volumen de sangre y proceder con el volumen de ácido acético se
debe limpiar el excedente que queda en la punta y así evitar tomar medidas erróneas
- Cuando cargamos la cámara de Neubauer, debemos percatarnos de colocar el volumen
suficiente como para que la solución se extienda en todo el cubreobjetos y nos facilite el
contaje de los leucocitos.

CUESTIONARIO:

1. ¿Qué fórmula se utiliza para el contaje de glóbulos blancos en neubauer?

Los recuentos de leucocitos, al igual que los eritrocitos, se expresan como concentraciones,
que en este caso serían número de células por unidad de volumen de sangre, que es 1mm.
Después de contar los glóbulos blancos de los 4 cuadrados angulares, se suman el total de
ellos y con dicha cantidad de hace el siguiente cálculo:

N° de leucocitos x mm3 = N° de leucocitos contados x 50

2. ¿Unidades en las que se reportan los leucocitos?

5,000 – 10,000/mm3 o 5.00 – 10.00 X109 /L

3. ¿Realice la dilución 1:20 para el contaje de glóbulos blancos?

Dilución 1:20 = 10ul sangre + 190ul líquido de Turk

4. ¿Qué técnica se utiliza para el contaje de glóbulos blancos utilizando la pipeta y el

cálculo?

5. ¿Enumere 8 causas de error en el estudio hematimétrico?

1. En algunas ocasiones, la muestra no se distribuye de forma regular en la cámara de

recuento, debido a inclinaciones de esta o a su manipulación.
2. Errores de hasta 20% y 30% son comunes con este método de recuento debido al
 pipeteo
3. Errores estadísticos por ser la muestra poco representativa
4. Errores de muestra (Ej. toma de muestra, agitación de la muestra )
5. Errores de técnica y errores de equipo .Se reducen con la experiencia y el uso de
pipetas y cámaras calibradas (Ej. contaminación del líquido diluyente, suciedad, restos
de glóbulos rojos, pipetas mal calibradas, mal llenado de la cámara, desintegración de
los leucocitos cuando se deja le muestra en reposo, burbujas en pipeta o cámara)
6. Error de recuento en los bordes
7. Error de dilución
8. Error de campo o variabilidad en la sedimentación al azar de las células en las
diferentes partes de la cámara (Ej. Apelotonamiento de los leucocitos que se produce
en sangre dejada varias horas antes de ser diluida)

6. ¿Dibuje y describa la cámara de neubauer?

Se trata de una gruesa placa de cristal con forma de portaobjetos, de unos 30 x 70 mm y

unos 4 mm de grosor. En una cámara simple, la porción central, que es donde se realiza el
conteo, está dividida en 3 partes. En la parte central se encuentra grabada una retícula
cuadrangular. En el caso de cámaras dobles, que son las más comunes, existen 2 zonas de
conteo, una superior y otra inferior al eje longitudinal de la cámara. La retícula completa
mide 3 mm x 3 mm de lado. Subdividida a su vez en 9 cuadrados de 1mm de lado cada uno.
En caso de recuento de sangre, los cuadrados de las esquinas son los destinados al recuento
de leucocitos. Al existir estos en menor número que los hematíes, se necesitan menos líneas
de referencia para realizar el conteo. El cuadrado central es el destinado al recuento de
hematíes y plaquetas. Se divide en 25 cuadrados medianos de 0,2 mm de lado, y cada uno de
estos cuadros se subdivide a su vez en 16 cuadrados pequeños. El cuadrado central está por
tanto formado por 400 cuadrados pequeños.

7. ¿Cómo se prepara el diluyente para el contaje de glóbulos blancos y cuál es su nombre?

Para el Recuento de Leucocitos se utiliza un líquido de dilución llamado líquido diluyente

de Túrk, que se compone de las siguientes sustancias: por cada 100 ml. De agua destilada: 2
ml de ácido acético glacial y 1 ml de solución acuosa de violeta de genciana al 1%.
 Función del líquido de Túrk: El ácido acético produce lisis de los eritrocitos sin alterar a
los leucocitos. El violeta de genciana tiñe el núcleo de los leucocitos para que estos puedan
observarse mejor. El violeta de genciana puede ser sustituido por azul de metileno.

BIBLIOGRAFÍA:

1. [Internet]. Enfervescente.com. 2018 [citado 6 Noviembre 2018]. Disponible en:

http://www.enfervescente.com/privado/wp-content/uploads/2013/02/Tema-23.-Glóbulos-
blancos-o-leucocitos.pdf
2. Recuento de leucocitos.pdf [Internet]. Scribd. 2018 [citado 6 Noviembre 2018]. Disponible en:
https://es.scribd.com/document/361459074/Recuento-de-leucocitos-pdf
3. [Internet]. Plerus.ac.cr. 2018 [citado 6 Noviembre 2018]. Disponible en:
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4. [Internet]. Clevelandclinic.org. 2018 [citado 6 Noviembre 2018]. Disponible en:
http://www.clevelandclinic.org/health/sHIC/doc/S11117.pdf

Mgs. Ximena Robalino Flores Mgs. Elena Brito Ing. Eliana de la Torre
DIRECTOR DE CARRERA DOCENTE RESPONSABLE DEL
LABORATORIO