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material genético
Mediante la técnica de difracción de rayos X
COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
ácidos desoxirribonucleicos (ADN) es la 2-desoxi-D-ribosa
ácidos ribonucleicos (ARN) es la D-ribosa.
Ácido fosfórico.
Las bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos nucleicos son de dos tipos
La Citosina (2-hidroxi-6-aminopirimidina)
Uracilo (2,6-dihidroxipirimidina).
La unión del nucleósido con el ácido fosfórico se realiza a través de un enlace de tipo éster entre
el grupo OH del carbono 5’ de la pentosa y el ácido fosfórico, originando un nucleótido.
La unión se realiza a través del carbono 1’ de la pentosa y los nitrógenos de las
posiciones 3 (pirimidinas) o 9 (purinas) de las bases nitrogenadas
mediante un enlace de tipo N-glucosídico.
9
3
Los nucleótidos se unen entre si para formar largas cadenas de polinucleótidos, esta unión
entre nucleótidos se realiza mediante enlaces
fosfodiéster entre los carbonos
de las posiciones 3’ de un OH de una pentosa y 5’ de la siguiente
azucar.
3’
5’
Las dos hélices se mantienen unidas mediante
puentes o enlaces de hidrogeno producidos
entre las bases nitrogenadas de cada hélice.
Siguiendo la regla de Chargaff
Las bases púricas y pirimidínicas se encuentran unas sobre otras, apiladas a lo largo del eje del
polinucleótido a una distancia de 3,4 Amstrongs. Las bases son estructuras planas
orientadas de forma perpendicular al eje (Astbury, 1947).
La denominada forma B ó ADN-B es la que presenta el ADN en interacción con las proteínas
nucleares.
ADN-A: ADN con 75% de humedad, requiere Na, K o Cs como contraiones, presenta 11 pares de
bases por giro completo y 23 A de diámetro.
ADN-Z: doble hélice sinistrorsa (enrollamiento a izquierdas), 12 pares de bases por giro
completo, 18 A de diámetro.
ADN-B: ADN en disolución, 92% de humedad relativa, se encuentra en soluciones con baja
fuerza iónica la Doble Hélice.
PROPIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS
Densidad: existe una relación lineal entre el contenido en G+C y la densidad del ADN
determinada en un gradiente de densidad.
100
Porcentaje G + C
80
60
40
20
70 80 90 100 110
Temperatura de fusión (desnaturalización) 18
Absorbancia a 2.600 A (260 nm): El estado físico de los ácidos nucleicos está relacionado con su
capacidad de absorción de la luz ultravioleta (UV) a 2.600 A.
Dicho modelo recibió el nombre de Semiconservativo, ya que las dos dobles hélices
recién sintetizadas poseen una hebra vieja (una mitad vieja) y otra hebra nueva (mitad
nueva).
Cairns en 1963
Demostro que la replicación el ADN de la bacteria E. coli se ajustaba al
modelo Semiconservativo propuesto por Watson y Crick .
ORIGENES DE REPLICACION
En las bacterias existe un solo origen de replicación, denominado Ori C y, a partir de
este único punto de origen, la replicación progresa en dos direcciones, de manera que existen
dos puntos de crecimiento (PC) u horquillas de replicación.
El cromosoma bacteriano ser una unidad de replicación se le denomina replicón.
Burbuja
Las ADN polimerasas necesitan un extremo 3' OH al que añadir nucleótidos trifosfato para
comenzar la síntesis de ADN.
El replisoma
Complejo enzimático de la replicación que coordina la síntesis de
las dos cadenas, maquinaria molecular
•Dímero de la DNA polimerasa III
•DNA Polimerasa I
Primosoma: formado por enzimas
•Primasa o ARN pol
•Helicasa
•Proteínas de unión a cadena sencilla, ssbp (Unión y, estabiliza el
DNA de cadena sencilla)
•Topoisomerasas tipo I
• TopoisomerasasTipo II
•DNA ligasa
La ADN Pol III y la ADN Pol I son las enzimas que intervienen
directamente en la replicación del ADN de E. coli.
ENZIMA FUNCIÓN