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COLEGIO NACIONAL DE
EDUCACIÓN
PROFESIONAL TÉCNICA
[MANUAL DE PRÁCTICAS DE
ANÁLISIS BIOQUÍMICOS]
REVISÓ: I.B.Q. Ma. del Carmen Domínguez Reyes; Q.B.P. Félix Enrique Tovar Ávila; Q.B.P. Elizabeth Mercado
Herrera.
COLEGIO NACIONAL DE EDUCACIÓN PROFESIONAL TÉCNICA
PLANTEL No. 184 COACALCO
ACADEMIA DE QUÍMICA
MANUAL DE PRÁCTICAS
ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
PRÁCTICA No. 1
IDENTIFICA BIOMOLÉCULAS Y BIOELEMENTOS EN UNA MUESTRA ORGÁNICA
POR MEDIO DE PRUEBAS ANALÍTICAS
COMPETENCIA:
El alumno identifica la presencia de biomoléculas y bioelementos en una muestra orgánica para conocer su
comportamiento en los procesos bioquímicos.
MARCO TEÓRICO:
Nota: Investiga que tipo de biomoléculas se encuentran en alimentos como la leche y la carne, las propiedades de
estas y su función. Con dicha información, más la lectura de abajo, realiza un mapa mental que incorporaras a
este reporte.
Las biomoléculas son la materia prima con que se encuentran construidos los seres vivos; siendo la base
esencial y fundamental de la vida y de la salud, presentan una armónica y común afinidad entre las distintas especies
vivas, los alimentos naturales y el cuerpo humano. Entender la relación entre la especificidad biomolecular, su
organización y su función, es una necesidad fundamental para comprender su comportamiento en los procesos
bioquímicos.
De los elementos químicos de la tabla periódica, sólo se encuentran unos 20 en los seres vivos, a éstos
elementos los llamamos bioelementos, y no todos ellos son igualmente abundantes. Ciertos elementos llamados
oligoelementos por estar presentes en pequeñísimas cantidades (menos del 0,01%).
La mayoría de los átomos no poseen una configuración estable, y se unen entre sí mediante enlaces para
formar biomoléculas, las que constituyen los seres vivos las podemos agrupar en dos grandes grupos:
Biomoléculas inorgánicas: se encuentran en los seres vivos , pero no son exclusivas de ellos, y son agua y
sales minerales.
Biomoléculas orgánicas: son exclusivas de los seres vivos, y siempre presentan carbono en su composición.
Son glúcidos, lípidos, proteínas y ácidos nucléicos.
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PLANTEL No. 184 COACALCO
ACADEMIA DE QUÍMICA
MANUAL DE PRÁCTICAS
ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
MATERIALES:
MATERIALES REACTIVOS
3 vasos de precipitado Ácido nítrico
3 matraces o probetas de vidrio Ácido acético
3 placas petri Solución molibdato amónico al 1%
3 embudos con papel de filtro Solución de nitrato de plata al 1%.
3 Gradillas Solución de oxalato amonio al 1%
12 tubos de ensayo
3 pinzas para calentar tubos
3 mecheros
1 balanza analítica
Estufa a temperatura de 1050C
PROCEDIMIENTO:
1. Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica. Prepara el equipo y los materiales
en las mesas de trabajo.
Preparación de la muestra:
Notas para la interpretación de resultados obtenidos en cada una de las reacciones de los tubos de ensayo.
La reacción en el tubo de ensayo número 1 nos sirve para identificar los cloruros. La explicación es la siguiente:
los cloruros en contacto con una solución de nitrato de plata forman cloruro de plata, que da lugar a un
precipitado blanco de aspecto lechoso.
La reacción en el tubo de ensayo número 2 nos va a permitir identificar la presencia de fosfatos. La explicación es
la siguiente: los fosfatos en presencia de molibdato amónico, forman un precipitado amarillo de fosfomolibdato
amónico.
La reacción en el tubo de ensayo número 3 nos sirve para identificar el calcio. Esto es debido a que el calcio, al
reaccionar con el oxalato amónico forma un precipitado blanco cristalino de oxalato amónico.
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MANUAL DE PRÁCTICAS
ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
OBSERVACIONES Y RESULTADOS:
Realiza los dibujos de los pasos realizados, generando con esto un diagrama de flujo de lo realizado y anota tus
observaciones.
Nota: El contenido de agua se obtendrá por diferencia, entre el peso de la muestra hidratada y el peso de la muestra
seca, al haber perdido el agua por evaporación.
Procedimiento:
1. Pesa una muestra pequeña de materia orgánica (10g) en una placa petri previamente tarada.
2. Coloca la muestra a deshidratar en una estufa a temperatura de 105°C por 2 horas.
3. Controla el peso hasta que se mantenga constante.
4. Relaciona la diferencia de peso con respecto al peso inicial (peso húmedo) expresarlo en porcentaje y
explicar los resultados
OBSERVACIONES Y RESULTADOS:
Realiza los dibujos de los pasos realizados, generando con esto un diagrama de flujo de lo realizado y anota tus
observaciones.
Experimento 3: Reconocimiento de C, H, O y N.
Nota: Toda materia orgánica presenta los elementos C, H, O y N en su composición, los cuales se ponen de
manifiesto al calentar materia orgánica hasta combustión completa. El agua (H y O) se presenta al principio como
gotas de agua evaporadas de la muestra, el nitrógeno (N) como vapores blanquecinos con olor característico y el
carbono (C), como residuo.
Procedimiento:
OBSERVACIONES Y RESULTADOS:
Realiza los dibujos de los pasos realizados, generando con esto un diagrama de flujo de lo realizado y anota tus
observaciones.
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
CONCLUSIONES:
REFERENCIAS EMPLEADAS:
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
PRÁCTICA No. 2
DETERMINA LA ACIDEZ DE UNA MUESTRA DE AGUA POR TITULACIÓN
COMPETENCIA:
El alumno determina la acidez en una muestra de agua por medio de técnicas analíticas de titulación para
conocer sus propiedades de corrosión.
MARCO TEORICO:
Los métodos volumétricos son métodos de análisis que consisten en la medición precisa del volumen de un
reactivo en disolución de concentración perfectamente conocida, necesario para reaccionar estequiométricamente
con el analito contenido en la muestra. Los participantes de esta determinación son:
El agente valorante se dispone en una bureta y el analito se dispone junto con el indicador en el matraz
Erlenmeyer.
Para poder determinar la normalidad de una solución sin un alto riesgo de error se usan estándares primarios.
Estos estándares son polvos finos, con alto grado de pureza, de composición conocida, estables a temperaturas de
100-110°C y pueden pesarse fácilmente. La humedad es un agente que alteraría los resultados, por tal razón deben
secarse antes de pesar, a una temperatura de 100 a 110°C, por lo que deben ser estables a estas temperaturas.
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
MATERIALES:
MATERIALES REACTIVOS
1 pipeta volumétrica de 10 mL
1 pìpeta graduada de 10 mL Agua destilada exenta de CO2 y pH no menor a
1 vaso de precipitados de 200 mL 6.
1 bureta de 250 mL Solución valorada de NaOH 0.02 N
1 agitador. Indicador de fenolftaleína
1 matraz erlenmeyer de 250 mL Indicador anaranjado de metilo
1 matraz aforado de 250 mL Tiosulfato de sodio 0.1 N
1 vidrio de reloj NaOH
1 espátula Tiosulfato de sodio
PROCEDIMIENTO:
RESULTADOS Y CÁLCULOS:
Realice los esquemas del procedimiento realizado, generando un diagrama de flujo de la determinación. A
continuación realice los cálculos correspondientes.
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
Análisis de resultados:
Conclusiones:
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
Cuestionario:
Referencias empleadas.
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
PRÁCTICA No. 3
IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
COMPETENCIA:
El alumno identifica la presencia de proteínas en una muestra biológica por medio de pruebas bioquímicas
para su cuantificación química.
MARCO TEÓRICO:
Las proteínas son biopolímeros (macromoléculas orgánicas), de elevado peso molecular, constituidas
básicamente por carbono (C), hidrógeno (H), oxígeno (O) y nitrógeno (N); aunque pueden contener también azufre
(S) y fósforo (P) y, en menor proporción, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (Y), etc...
Estos elementos químicos se agrupan para formar unidades estructurales (monómeros) llamados
AMINOACIDOS, a los cuales podriamos considerar como los "ladrillos de los edificios moleculares protéicos". Estos
edificios macromoleculares se construyen y desmoronan con gran facilidad dentro de las células, y a ello debe
precisamente la materia viva su capacidad de crecimiento, reparación y regulación.
Las proteínas determinan la forma y la estructura de las células y dirigen casi todos los procesos vitales. Las
funciones de las proteínas son específicas de cada una de ellas y permiten a las células mantener su integridad,
defenderse de agentes externos, reparar daños, controlar y regular funciones, etc.... Todas las proteínas realizan su
función de la misma manera: por unión selectiva a moléculas. Las proteínas estructurales se agregan a otras
moléculas de la misma proteína para originar una estructura mayor. Sin embargo, otras proteínas se unen a
moléculas distintas: los anticuerpos a los antígenos específicos, la hemoglobina al oxígeno, las enzimas a sus
sustratos, los reguladores de la expresión génica al ADN, las hormonas a sus receptores específicos, etc...
Las proteínas son constituyentes químicos fundamentales e imprescindibles en la materia viva porque:
a) son los "instrumentos moleculares" mediante los cuales se expresa la información genética; es decir, las
proteínas ejecutan las órdenes dictadas por los ácidos nucleícos.
b) son sustancias "plásticas" para los seres vivos, es decir, materiales de construcción y reparación de sus
propias estructuras celulares. Sólo excepcionalmente sirven como fuente de energía.
c) muchas tienen "actividad biológica" (transporte, regulación, defensa, reserva, etc...). Esta característica
diferencia a las proteínas de otros principios inmediatos como glúcidos y lípidos que se encuentran en las
células como simples sustancias inertes.
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MANUAL DE PRÁCTICAS
ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
MATERIALES:
Tubos de ensayo
Gradilla
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas
Solución de HCl concentrado
Alcohol etílico
Solución de CuSO4 al 1%
NaOH al 20%
Clara de huevo o leche
Solución de albúmina al 2%
PROCEDIMIENTO:
1. Coloca en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua
para obtener una mezcla espesa) o 2-3 ml de leche.
2. Calienta uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2 mL de HCl concentrado y al tercero 2mL de alcohol
etílico.
3. Observa los resultados y realiza los esquemas correspondientes.
Nota: Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden
precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones,
salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su
desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus
estructuras secundaria y terciaria.
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
Nota: Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia
del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre
(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo
de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.
CONCLUSIONES:
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CUESTIONARIO:
REFERENCIAS EMPLEADAS:
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PRÁCTICA No. 4
IDENTIFICACIÓN DE ENZIMAS
COMPETENCIA:
El alumno identifica la presencia de las enzimas en muestras biológicas por medio de ensayos enzimáticos
para su cuantificación en determinados productos.
MARCO TEÓRICO:
Las enzimas son proteínas que catalizan todas las reacciones bioquímicas. Además de su importancia como
catalizadores biológicos, tienen muchos usos médicos y comerciales. Un catalizador es una sustancia que disminuye
la energía de activación de una reacción química. Al disminuir la energía de activación, se incrementa la velocidad de
la reacción.
La mayoría de las reacciones de los sistemas vivos son reversibles, es decir, que en ellas se establece el
equilibrio químico. Por lo tanto, las enzimas aceleran la formación de equilibrio químico, pero no afectan las
concentraciones finales del equilibrio.
Iones metálicos: Favorecen la actividad catalítica general de la enzima, si no están presentes, la enzima no
actúa. Estos iones metálicos se denominan activadores. Ejemplos: Fe2+, Mg2+, Cu2+, K+, Na+ y Zn2+
La mayoría de los otros cofactores son coenzimas las cuales generalmente son compuestos orgánicos de
bajo peso molecular, por ejemplo, las vitaminas del complejo “B” son coenzimas que se requieren para una
respiración celular adecuada.
Actividad enzimática
La sustancia sobre la cual actúa una enzima se llama sustrato. Los sustratos son específicos para cada
enzima: La sacarosa es el sustrato de la sacarasa que actúa rompiéndola en sus componentes.
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MANUAL DE PRÁCTICAS
ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
Las enzimas actúan de acuerdo con la siguiente secuencia: La enzima (E) y el sustrato
(S) se combinan para formar un complejo intermedio enzima sustrato (E-S), el cual se descompone formando un
producto y regenerando la enzima.
El grado de especificidad de las enzimas es muy alto, pueden distinguir incluso entre diferentes tipos de
isómeros. Se cree que la especificidad de la enzima es debido a la forma particular de una pequeña parte conocida
como sitio activo, la cual se fija a la contraparte complementaria en el sustrato.
1. Concentración del sustrato.- A mayor concentración del sustrato, a una concentración fija de la enzima se
obtiene la velocidad máxima. Después de que se alcanza esta velocidad, un aumento en la concentración del
sustrato no tiene efecto en la velocidad de la reacción.
2. Concentración de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato disponible, un aumento en la concentración
de la enzima aumenta la velocidad enzimática hacia cierto límite.
3. Temperatura.- Un incremento de 10°C duplica la velocidad de reacción, hasta ciertos límites. El calor es un
factor que desnaturaliza las proteínas por lo tanto si la temperatura se eleva demasiada, la enzima pierde su
actividad.
4. pH.- El pH óptimo de la actividad enzimática es 7, excepto las enzimas del estómago cuyo pH óptimo es
ácido.
5. Presencia de cofactores.- Muchas enzimas dependen de los cofactores, sean activadores o coenzimas para
funcionar adecuadamente. Para las enzimas que tienen cofactores, la concentración del cofactor debe ser
igual o mayor que la concentración de la enzima para obtener una actividad catalítica máxima.
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MATERIAL:
Tubos de ensayo
Gradilla
Pipeta volumétrica
Plancha de calentamiento
Termómetro
Solución de peroxido de hidrógeno
Solución de almidón al 2%
Tejidos vegetas ( papa, zanahoria, lechuga) o animales ( carne, pescado, etc)
Lugol
Muestra de saliva
PROCEDIMIENTO:
1. Prepara una solución patrón 2 ml. de una disolución de almidón al 2 % y unas gotas de disolución de yodo
(lugol) en un tubo, observar el resultado.
2. Calienta suavemente el tubo hasta que la mezcla pierda el color.
3. Enfría el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos, anotar lo sucedido.
4. Coloca en un segundo tubo 2 ml. de la disolución de almidón y una cierta cantidad de saliva, mezclar bien la
saliva con la disolución y calentar muy suavemente durante unos segundos.
5. Añade unas gotas de lugol.
6. Anota los resultados y dar una explicación a lo ocurrido
7. Realiza los dibujos correspondientes.
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ANÁLISIS BIOQUÍMICOS
1. Pone en varios tubos de ensayo previamente numerados distintos tejidos (más o menos el mismo peso de
cada tejido).
2. Añade 5 ml. de agua oxigenada a cada tubo y anotar lo que sucede.
3. Explica lo ocurrido y ordenar los tejidos según su actividad.
4. Repite el proceso anterior, pero hierve antes los tejidos durante diez minutos. Explica los resultados
obtenidos.
5. Realiza los dibujos correspondientes.
1. Coloca en un tubo de ensayo un trozo de hígado (o 1 ml. de extracto de hígado) y 10 ml. de agua
oxigenada.
2. Cierra el tubo con un tapón, que se deja algo flojo para el escape de los gases producidos en la reacción, en
cuyo centro exista un orificio por el cual se pueda introducir un termómetro. Así, hemos hecho un
calorímetro.
3. Anota la temperatura ambiente, que se toma como temperatura inicial de la reacción, y después se va
anotando las variaciones de temperatura que se producen en el interior del calorímetro cada treinta
segundos durante un período de cinco minutos.
4. Elabora la gráfica de la reacción en papel milimétrico y explica los resultados.
5. Anota tus conclusiones.
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