Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán

Bioquímica Diagnóstica
Grupo: 1351
Reporte de la práctica No. 7
Reacción de identificación de carbohidratos
Equipo: 4
-González Vela Francisco
-Franco Martínez Miguel
-Paniagua Gómez Daniela
-Lezama Perez Enrique (EQUIPO 3)
Asesores:
-Q. Yesica Nataly Alvarez Pacheco
-QFB. Luis Alberto Parra Oaxaca
Fecha de realización de la práctica: 10-10-16
Fecha de entrega del reporte: 17-10-16

Introducción:

Los carbohidratos (también llamados “hidratos de carbono”) son compuestos

polihidroxilados derivados de aldehídos y cetonas, también son uno de los tres tipos
de macronutrientes y biomoléculas presentes en nuestra alimentación (los otros dos
son los lípidos y las proteínas). Son las biomoléculas más abundantes de forma
natural y existen en multitud de formas, están formados por tres elementos básicos:
Carbono, Hidrógeno y Oxígeno.
Se encuentran principalmente en los alimentos tipo almidón, como el pan, la pasta,
el arroz, etc. Así como en algunas bebidas, como los zumos de frutas y las bebidas
endulzadas con azúcares. Los carbohidratos constituyen la fuente energética más
importante del organismo y resultan imprescindibles para una alimentación variada y
equilibrada.
Todos los carbohidratos están formados por unidades estructurales de azúcares,
que se pueden clasificar según el número de unidades de azúcar que se combinen
en una molécula. La glucosa, la fructosa y la galactosa son ejemplos destacados de
los azúcares constituidos por una sola unidad (de azúcar); dicho tipo de azúcares se
conocen también como “monosacáridos”. A los azúcares constituidos por dos
unidades se le denomina “disacáridos”; los disacáridos más ampliamente conocidos
son la sacarosa (“azúcar de mesa”) y la lactosa (el azúcar de la leche).
Los Oligosacáridos están constituidos de tres a ocho monosacáridos, como la
Dextrina. Por último están los polisacáridos, los cuales están formados por más de
ocho unidades de monosacáridos.
Estos forman parte e intervienen en una gran cantidad de procesos de los seres
vivientes. Los más importantes son de tres tipos: energéticos, de reserva y
estructurales. Desde el punto de vista energético uno de los carbohidratos más
sencillos, la glucosa constituye el material de más rápido aprovechamiento en el
organismo y su oxidación satisface las necesidades energéticas y calóricas del
mismo.
Como materiales de reserva, los carbohidratos existen en reino
vegetal en forma de almidones y en el reino animal en forma de
glucógenos. Y en el aspecto estructural, los carbohidratos llevan a
cabo una importante función en los vegetales debido a que la
célula, que es su estructura leñosa o esqueleto, está constituida
por cadenas de azúcares simples.
Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos (excepto la
sacarosa) son azucares reductores debido a la presencia de un
grupo carbonilo libre capaz de oxidarse y pasar a ácido. En medio
alcalino, reducen con facilidad a agentes oxidantes suaves como
los iones metálicos Cu2+, Fe3+, Ag+. Las reacciones de Molish,
Bial, Fehling, con Fenilhidrazina y de yodo permiten identificar, e
incluso cuantificar, la presencia de azúcares en un material
biológico.
Estas reacciones nos ayudaran a saber si estamos en presencia de
algún tipo de carbohidrato en una solución, ya que estas los hacen
notar por distintos cambios de color en una solución preparada .

Objetivos:

● Identificar la presencia de carbohidratos en muestras puras y en productos

que los contengan (como algunos alimentos) a través de distintas reacciones
químicas de identificación, y así poder demostrar su presencia son estos
métodos de identificación.

Metodología:

La indicada en el manual de Bioquímica, correspondiente a la práctica 7

“Reacciones de identificación de carbohidratos”, página 71 a 72.

Resultados y conclusiones:

Tabla 1. Reacciones de carbohidratos.

Carbohidrato Prueba de Prueba de bial Prueba de Prueba de

molish Fehling lugol

Almidón + + +

Sacarosa + .

Glucosa + - +

Manosa +

Galactosa +

Ribosa + + +

Suero de +
leche

Papa + +

Miel karo + +

Miel natural + +

Hidrolizado de + -
papa

hidrolizado de +
sacarosa

hidrolizado de + -
almidón

(+) Reacción positiva.

(-) Reacción negativa.

Tabla 2. Formación de osazonas.

Carbohidrato Cristales de osazonas Fórmula de osazonas

Glucosa

Manosa

Xilosa

Ribosa

Fructosa

Análisis de resultados:

Reacción Fehling
El catión cúprico (Cu++) del reactivo de Fehling reacciona con los glúcidos
reductores pasando a óxido cuproso, que es un precipitado de color rojo ladrillo.
Esta es una reacción que resulta positiva sólo si el glúcido es reductor. Los glúcidos
reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu++ en ese medio tiende a
precipitar espontáneamente como óxido cúprico (que en esa forma no reacciona),
de manera que es necesaria la presencia de tartrato doble de sodio y potasio en el
reactivo para "secuestrar" al catión Cu++, a fin de evitar la formación del óxido
cúprico, y permitir que reaccione con los glúcidos reductores.

Reacción de Lugol
El color que dan los polisacáridos con el lugol (solución de I2 y de IK) se debe a que
el I2 ocupa espacios vacíos en las hélices de la cadena de unidades de glucosa,
formando un compuesto de inclusión que altera las propiedades físicas razón por la
cual el azúcar no reaccionó ni con el reactivo Fehling del polisacárido,
especialmente la absorción lumínica. Esta unión del I2 a la cadena es reversible, y
por calentamiento desaparece el color, que al enfriarse reaparece. El lugol da con el
almidón color azul y con el glucógeno color rojo caoba.
Reactivo de Molish
Fue la primera prueba realizada para la identificación de los carbohidratos es la
prueba de Molish. Se basa en teñir de un color violeta intenso cualquier tipo de
carbohidrato presente en las muestras, ya que los azúcares por acción de ácido
sulfúrico concentrado se terminan deshidratando formando compuestos conocidos
como furfurales. Mezclamos 2ml de la solución a determinar la presencia de
carbohidratos con 2 gotas del reactivo de Molish (alfa naftol al 10%) recién
preparado y 2ml de H2SO4 concentrado, el cual causa hidrólisis de los enlaces
glucosídicos del disacárido o polisacárido presente. La aparición de un anillo de rojo
violeta es indicativo de la presencia de carbohidratos en la muestra (Flores, 2002).

Reacción de Bial:
se emplea para diferenciar hexosas y pentosas. Mezclamos la muestra a identificar
caliente con 5ml del reactivo, el cual se encuentra constituido por el compuesto
fenólico Orcinol (3,5-dihidroxitolueno), disuelto en HCl concentrado y cloruro férrico.
La aparición de un color o precipitado verde, indica que existen pentosas en la
muestra. La identificación para las pentosas se fundamenta, en que estas se
deshidratan más rápidamente por la acción del HCl, que las hexosas, debido a que
estas se tiene que isomerizar en las primeras. El furfural generado reacciona con el
Orcinol para dar compuestos de color verde-azulado en un lapso de 2 a 5 minutos
(Velázquez, 2008).

Reacción de fenilhidracina:
Los compuestos que contienen los grupos CO y CHOH como los carbohidratos
pueden formar osazonas cristalinas con fenilhidrazina, con una forma y puntos de
fusión característicos para ayudar a la identificación de los azúcares reductores.
La fenilhidrazona reacciona con el grupo carbonilo de los carbohidratos dando la
fenilhidrazina que después reacciona con dos moléculas más de fenilhidrazina para
formar la osazona.

Conclusiones:

Gracias a los métodos de identificación químicos como la reacción de molish,

reacción de bial, reacción de fehling y de fenilhidracina pudimos identificar la
presencia de carbohidratos en las muestras de miel, papa y leche como la formación
de osazonas partiendo de una serie de carbohidratos proporcionados.

Referencias:

-Clark, J.M: (1996) Bioquímica Experimental, 1a Ed, Editorial Acribia,

Zaragoza.

-Stryer, L (1983) Bioquímica, 2a Ed, Editorial Reverté, Barcelona.

-Bryan L. Williams y Keith Wilson. (1981). Principios y técnicas de
bioquímica experimental . 1981: ediciones Omega.