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A avaliação citológica de fluidos corporais, tecidos e lesões tumorais tornou-se uma opção
muito importante na medicina veterinária, especialmente por quase 20 anos. Portanto, é necessário
conhecer as vantagens, as desvantagens e limites da citologia.
Vantagens
É uma ferramenta diagnóstica muito rápida, fácil de realizar, barata, com um mínimo de
riscos e que permite avaliar frequentemente as amostras e interpretá-las antes que o paciente saia
da sala de exame e identificar o processo como neoplásico. ou inflamatório. Em alguns casos, os
procedimentos indicados podem ser estabelecidos para chegar a um diagnóstico final, como a
realização de uma biópsia, uma avaliação microbiológica, um exame radiológico, etc. Com revisões
periódicas, a evolução do caso pode ser monitorada, bem como o controle do tratamento,
determinando se é efetivo ou se deve ser substituído por outro.
Em grande parte dos casos, a citologia permite chegar a um diagnóstico final sem recorrer
a outros métodos para diagnóstico e, finalmente, estabelecer um prognóstico.
Desvantagens
Os clínicos que são iniciados na amostragem citológica, freqüentemente obtêm amostras
não significativas, contaminadas com sangue ou outros tecidos ou por microrganismos, etc., isso
diminui o entusiasmo pelo uso da citologia. Embora não seja uma desvantagem da própria citologia,
uma causa para abandonar o uso desse método é que o veterinário muitas vezes não sabe se a
pessoa que realiza as avaliações citológicas é um patologista clínico ou se ele tem treinamento
profissional no campo, já que é comum que seus resultados não sejam convincentes.
Se não for realizada com assepsia adequada, existe a possibilidade de tecidos saudáveis
estarem contaminados com microrganismos, ou se um abscesso for perfurado, causando fístulas
ou outros abscessos.
Para os veterinários que não possuem ultrassom e desejam amostrar uma massa na
cavidade torácica, próstata ou outros locais, a técnica de obtenção da amostra é geralmente cega,
portanto, a porcentagem de falha é alta, mesmo se você tem experiência Uma limitação importante
é que, em alguns casos, é necessário recorrer a uma biópsia para avaliação histológica, uma vez
que é praticamente impossível distinguir um adenoma ou uma hiperplasia; o mesmo acontece
quando uma malignidade é bem diferenciada e citologicamente não podemos ver a estrutura
histológica ou a presença de invasão nos vasos ou tecidos circundantes.
A fim de realizar a avaliação e interpretação citológica de forma homogênea, propomos uma
revisão das técnicas de amostragem, preparo e coloração das lâminas, a classificação das
inflamações e neoplasias, os critérios de malignidade e os princípios de avaliação da medula óssea
e dos gânglios linfáticos.
A avaliação precisa das lesões no laboratório onde a citologia clínica é praticada requer uma
descrição apropriada das lesões, a localização anatômica, uma amostragem com a técnica
apropriada para o tipo de lesão e, finalmente, uma proteção dessas amostras para que elas atinjam
seu destino em bom estado.
Descrição clínica
Para qualquer caso clínico, é necessário incluir a revisão do animal (espécie, raça, gênero,
idade), uma vez que certas neoplasias não são encontradas em todas as espécies ou são
específicas de uma delas. Também é importante conhecer a raça, pois algumas são mais
propensas que outras a certos tumores; o mesmo acontece com gênero e idade. Os dados obtidos
da anamnese e exame físico do animal incluem:
Anamnese
a) Tempo de aparecimento da lesão (p. ex. observado desde 17 de agosto de 2000).
b) Modo de crescimento (rápido: dias ou semanas, lento: meses ou anos). Estes dados
clínicos
É importante porque existe uma certa relação entre a taxa de crescimento e malignidade.
c) Aumentar e diminuir de tamanho desde que foi observado pela primeira vez (sim ou não).
d) Apresenta regressão espontânea (sim ou não).
e) Presença de linfadenomegalia regional (sim ou não).
f) Aplicação de algum tratamento (médico ou cirúrgico).
g) Regressão com tratamento médico (sim ou não).
h) Recorrência (por exemplo, reapareceu após três meses da excisão).
i) Se é recorrente, diagnóstico citológico ou histológico prévio, se houver.
Exame físico
a) Distribuição da (s) lesão (s). Ou seja, a localização anatômica onde a lesão está localizada
(por exemplo, o nível ventral do terço cranial do pescoço). A localização exata da lesão tumoral é
muito importante, uma vez que os diferentes tipos de neoplasias cutâneas, benignas e malignas,
apresentam certas preferências em sua distribuição.
b) Situação nos tecidos (cutâneos, subcutâneos ou nos tecidos profundos).
c) Aparência e forma (lisa, rugosa, alopécica, nodular, pediculada, séssil ou ulcerada).
d) Qualidade (seca, úmida ou hemorrágica).
e) Cor (preta, eritematosa ou violácea).
f) Dimensões (inclua sempre todas as três: comprimento, largura e profundidade).
g) Palpação:
Consistência macia, flutuante ou dura
Áspero ou liso (quando são subcutâneos ou profundos).
Bem delimitado ou não.
Livre ou móvel (pele e tecidos subcutâneos ou profundos).
Fixo ou ancorado (à pele ou aos tecidos subcutâneos ou profundos).
Todos esses dados são úteis tanto para o diagnóstico como para o prognóstico, mas também
realizar estudos retrospectivos ou prospectivos.
Alguns exemplos de descrição:
Existem vários problemas que são encontrados diariamente na descrição dos tumores:
A) Quando o tumor é mencionado, nenhuma descrição é feita, ou é descrita, geralmente, como se
fosse esférica: "Massa com 10 cm de diâmetro ...", é importante mencionar as 3 dimensões: largura
e profundidade.
B) A localização dos tumores, quando realizada, é muito geral: "Massa em MPD ...".
É um requisito indispensável para colocar o tumor exatamente; eles são dados importantes para
saber seu grau de malignidade ou o prognóstico e a expectativa de vida. Existem carcinomas de
células escamosas in situ que não causam metástases e têm um prognóstico melhor do que
aqueles encontrados na cavidade oral ou dedos.
C) Outro problema é que a presença de uma massa é mencionada, mas não é esclarecida se é
superficial, subcutânea ou de tecidos profundos. Esta pode ser a diferença entre um cisto
epidérmico ou folicular ou um carcinoma de células escamosas.
Em resumo, o patologista clínico necessita de dados da anamnese e do exame físico para
compensar a falta de arquitetura, quando a celularidade é ruim e, dessa forma, tomar decisões
sobre os resultados da avaliação, que podem variar apenas a partir da inclusão. de uma descrição
deixando para uma melhor amostra uma interpretação da imagem citológica, até o diagnóstico
claro. A frequência de diagnósticos incorretos isso resulta de amostras inadequadas e a falta de
dados clínicos pode ter dimensões dramáticas.
É muito importante conhecer os princípios da amostragem para ter um maior sucesso no
diagnóstico citológico.
Recomenda-se que o médico examine as lâminas antes de enviá-las ao patologista clínico.
Você deve se acostumar a verificar a celularidade e ter em mente os tipos de alterações
encontradas com mais frequência e assim você pode fazer interpretações imediatas, pelo menos
daquelas de avaliação simples. Isso garante amostras de boa qualidade, diagnóstico rápido de
algumas lesões, melhora a seleção de casos que exigem uma avaliação citológica e desenvolve a
inclusão de dados clínicos relevantes para cada caso em particular.
Técnicas de coleta de amostras
a) aspiração por agulha fina.
b) Impressões. É muito útil em biópsias, em amostras trans-cirúrgicas de lesões de pele ou
tumores ulcerados
c) raspado. Ideal em lesões de consistência dura, como tumores mesenquimais ou tecidos
de granulação com reação cicatrizante significativa, pois outros métodos geralmente obtêm
amostras com celularidade muito ruim. Eles também podem ser usados em biópsias, amostragem
trans-cirúrgica, lesões de pele; no entanto, nesses casos, isso deve ser feito de maneira suave,
porque a raspagem per se é mais agressiva; portanto, um grande número de células destruídas
pode ser obtido, resultando em uma difícil identificação ou avaliação. Uma alternativa é a
amostragem por aspiração com agulha fina, onde uma pressão negativa de cerca de 8mL é
exercida e os movimentos são feitos para frente e para trás com a agulha, mantendo a pressão
negativa.
Fabricação de lâminas
Existem vários métodos de preparar as amostras para avaliação e cada uma tem sua
aplicação. Existe uma relação direta entre a viscosidade do líquido e a técnica de amostragem, no
caso de tumores ou lesões sólidas.
1. Esfregaço
É aplicado em líquidos com densidade semelhante ao sangue, também em material de lesões
tumorais aspiradas com agulha fina. A força de separação é moderada a leve, dependendo do
ângulo usado para sua preparação. Deve ser geralmente de cerca de 45 a fluidos, tais como
sangue,> 45 ° C durante pouco líquido de células ou tecidos delicados e <45, quando é desejada
uma maior força para separação de células adequada e avaliação prolongada confortável.
2. Impressões.
O tecido em que irá ser ensaiado deve ser seco com uma toalha de papel, bem como possível, de
modo que a aderência de células para a lâmina é amostras da lesão obtido adequado e
suficientemente celular e representativa.
3. raspado. A mesma técnica é usada em raspagens para coletar amostras. Eles são feitos com
uma lâmina de bisturi, de preferência; em geral, o lado da lâmina afiada é usado as biópsias,
trancirúrgicos, autópsias ou da pele, ao mesmo tempo em órgãos tais como a córnea do olho é
preferido fazer a raspagem com nenhuma ponta afiada. A amostra não deve ser manchada
agressivamente ou esmagada; delicadamente se estende no papel alumínio.
4. Impressões com cotonetes. Os cotonetes devem estar secos na amostra para que as células
adiram a eles; com a umidade dos tecidos é suficiente para obter uma boa celularidade na folha.
5. Cruz (squash). É uma técnica usada quando as amostras são muito viscosas ou densas, tal
como a medula óssea, glândulas salivares amostras, por vezes, em nódulos linfáticos e em lesões,
tais como cistos epidermóides, entre outros.
6. Preparação combinada. É útil quando não há experiência na preparação de esfregaços e teme-
se destruir as células ou não ser agressivo o suficiente para separá-las adequadamente. A amostra
é deixada intacta no centro para que, por sedimentação, adquira maior celularidade. Feito
principalmente para ensinar porque é impraticável.
7. Citocentrifugação. Adequado para qualquer tipo de líquido, especialmente naqueles com baixa
celularidade, como líquido cefalorraquidiano e transudatos.
8. esfregaços lineares. Quando uma citocentrífuga não está disponível, podem ser feitos
esfregaços nos quais a dispersão não está completa, mas ela é suspensa até a metade para
melhorar a concentração celular naquele local.
9. Sedimentação. Técnica utilizada quando a citocentrífuga não está disponível, principalmente
para líquidos com baixa celularidade, como líquido cefalorraquidiano e transudatos.
Quando a lesão tem várias consistências (duras, túrgidas, moles ou moles) aspirações é
realizada alterando a direção da agulha para extrair o material a partir do centro de um lado da
periferia das partes sólidas de macio, com o objetivo de obter uma visão completa da lesão.
Na maioria dos casos, não é necessário realizar esse tipo de manobra, pois o tecido para as
amostras em geral é homogêneo.
Impressões
Eles podem ser realizados diretamente a partir de uma lesão cutânea ou de um órgão interno
ou realizados a partir de biópsias.
Nas biópsias, as impressões são feitas com uma porção do tecido de interesse de uma
dimensão não maior que 1 cm3, é tomada com a pinça de dissecção e as impressões são feitas
em papel absorvente para eliminar o excesso de líquido e que há maior poder de adesão das
células ao vidro da folha.
As cópias são feitas em sequência no papel, cada vez que a quantidade de líquido que sai é
menor, até que esteja quase seca seguindo a direção das setas.
Identificação da amostra
No rótulo, o ano, o veterinário e o número de amostras enviadas por ele são anotados na
primeira linha.
Na segunda linha, a data.
Na terceira linha, o tipo de tecido.
Raspado
Eles são realizados em lesões duras, com uma lâmina de bisturi para obter um maior número
de células.
A raspagem é realizada com ligeiros movimentos curtos até se obter uma pasta celular.
Subsequentemente, a extensão desta "pasta celular" é levada a cabo, delicadamente, para
evitar danos nas células.
Raspagem prolongada
Cotonetes
Esta técnica é reservada para lesões fistulosas ou órgãos tubulares como vagina, útero,
canal auditivo, narinas; Ele foi usado até mesmo em amostragem de traqueia sob uma técnica
particular. Verifique se o cotonete estéril está bem aderido ao palito de dente para evitar que ele
seja deixado acidentalmente dentro da luz do órgão que está sendo amostrado, depois é
gentilmente introduzido e girado para as células em flocos do epitélio ou canal, removido e Ele é
depositado na folha, uma leve pressão é exercida com o índice e é rolada para a outra extremidade,
pode ser feita até 3 vezes na mesma lâmina.
Líquido sinovial, líquido cefalorraquidiano e líquidos de lavagem
Esses tipos de líquidos geralmente não são muito celulares; para sua avaliação, é necessário
um método eficaz de concentração, que não afeta a morfologia celular. A citocentrifugação é o
método de escolha usado para diferentes tipos de líquidos, exceto aqueles que são muito turvos
ou viscosos. A vantagem é que você pode concentrar as células em uma área aproximada à de um
confete, todos os elementos formados (células, microrganismos, corpos estranhos, etc.) que estão
em 0,3 a 0,5 ml de amostras, serão encontrados nos confetes. celular ", portanto, a avaliação
citológica completa ocorre em poucos minutos.
Envio
a) Proteção do esfregaço. Para o embarque é necessário que as lamelas estejam bem protegidas
da abrasão com superfícies ásperas, que podem arranhar a superfície onde está a amostra, é por
isso que um papel higiênico macio é apropriado, você pode até colocar outra lamela em cima para
proteger o esfregaço e depois embrulhe-os juntos, com papel.
b) Proteção das lamelas. Para evitar que quebrem, é necessário incluí-los (com bastante papel,
algodão, espuma de borracha, etc.) em um recipiente rígido que os proteja contrachoques.
c) Nunca os envie por correio somente embrulhados em papel ou papelão fino, pois são
manuseados como se fossem materiais resistentes como papel (mesmo se inscrevem a legenda
"Frágil"). Inclua os dados da anamnese e exame físico já mencionados, bem como os tratamentos
realizados.
COLORAÇÕES
Existem numerosas colorações que têm sua aplicação na citologia, as mais importantes são as
seguintes:
b) Novo azul de metileno. É o companheiro ideal Diff Quik, uma vez que é um corante solúvel em
água, por conseguinte, pode ser utilizado em materiais gordos sem dissolução da amostra, como
ocorre principalmente em lipomas-lipossarcoma. Também tem a vantagem de que as amostras não
precisam de ser fixas em álcool, em seguida, coradas imediatamente (não necessitam de mais do
que 5 segundos), que revela a nucléolos para avaliar os critérios de malignidade, mesmo em
amostras muito densas como a celularidade refere-se. Permite avaliar cada camada de células,
mesmo se elas estiverem sobrecarregadas nos esfregaços grossos. Seu uso em hematologia é
essencial. Uma grande desvantagem é que as amostras de citologia coradas com novo azul de
metileno não podem ser preservadas.
c) Gram. Essa cor é de grande apoio para os médicos, pois a distinção entre bactérias gram-
negativas e gram-positivas permite o tratamento antimicrobiano precoce, orientado para esses
grandes grupos de bactérias, enquanto os resultados do antibiograma são obtidos em dois dias, se
realizados; Um atraso no tratamento pode às vezes ser fatal.
d) azul da Prússia. É útil para avaliar os estoques de ferro na medula óssea ou nos casos em que
macrófagos com material escuro fagocitado precisava saber se hemossiderina ou não, como é em
hemorragia pulmonar induzida pelo exercício em cavalos de corrida.
e) Papanicolau. É a alternativa do Diff Quik, especialmente quando você tem tempo ou está
acostumado ao uso dessa mancha. Dispõe de uma definição de estruturas nucleares e permite a
avaliação de cada camada de células, embora Encimadas estão no meio estendido, no entanto, a
preparação da amostra requer fixação em álcool fresco, ou seja, antes de a amostra seco, é
necessário ter vários jarros Coplin e diferentes álcoois para coloração, também tem a desvantagem
de não tingir grânulos ou características do citoplasma. É evidente que o processo é muito mais
lento do que com o Diff Quik. Outra grande desvantagem para aqueles que querem começar a
aprender citologia é que as referências fotográficas em medicina veterinária são quase inteiramente
de Diff Quik ou outros corantes do tipo Romanowsky.
f) Imunocitoquica. É cada vez mais utilizado para conhecer a origem de algumas células
neoplásicas malignas, principalmente quando a anaplasia impede o reconhecimento.
g) Outras cores. Praticamente todas as manchas podem ser usadas para histologia, quando o
glicogênio é evidenciado, bactérias ácido-resistentes, leveduras, fungos e assim por diante.
Avaliações
O principal objetivo da avaliação citológica é determinar se as lesões são inflamatórias,
degenerativas ou neoplásicas; para isso, é necessário conhecer os diferentes
classificações e critérios para uma interpretação apropriada.
Classificação de inflamação
Classificação da inflamação de acordo com a duração
a) agudo. Quando os valores de neutrófilos são superiores a 70% das células.
b) Subaguda. Quando o valor dos neutrófilos é entre 50 e 70%.
c) Crônica ativa. Quando há valores de 50% de neutrófilos e 30 a 50% de macrófagos.
d) Crônica. Quando mais de 50% dos macrófagos são observados, eles geralmente são
acompanhados por plasmócitos.
Classificação de inflamação de acordo com o tipo de célula
a) supurativa ou purulenta. Com valores de neutrófilos superiores a 85%.
b) Piogranulomatose. Quando há predomínio de neutrófilos e são acompanhados por valores de
30-50% de macrófagos.
c) granulomatoso. Quando há uma predominância de macrófagos e na presença de células
epitelióides ou células gigantes.
d) Alérgico. Quando uma quantidade maior que 20% de eosinófilos ou 5% de mastócitos é
observada.