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SECRETARÍA DE EDUCACIÓN PÚBLICA

SUBSECRETARÍA DE EDUCACIÓN SUPERIOR


TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLÓGICO DEL VALLE DE


MORELIA

Reproducción In-Vitro por embrión


Que Presenta:
Manuel Alejandro Rico Muñoz
Néstor Pérez
María Lizeth Villaseñor Talavera
Daniela Arroyo Luna
Edith Rojo Mondragón
Antonio Meza
Francisco Cruz Medina
MATERIA:

Fisiología Vegetal
INGENIERIA EN AGRONOMIA
PROFESOR: Cesar Lumbreras
MORELIA, MICHOACÁN, FEBRERO 2017
Introducción
El propaga miento de especie vegetales en el mundo es cada vez mayor ya que la
demanda de productos para la alimentación cada día crece más. Por esta razón se
buscan maneras más eficaces de poder reproducir plantas en los laboratorios de
una manera eficaz y segura. Por eso mismo gracias a la biotecnología se han
desarrollado nuevas técnicas de reproducción en las cuales se asegura una mayor
propagación. Una de estas nuevas técnicas en la reproducción in vitro la cual es
una opción, también conocida como micropropagación vegetal es utilizada en
cultivos de importancia económica. Aporta grandes logros a la agricultura.

Objetivos

• Aplicar las herramientas biotecnológicas para la producción de vegetales a partir de


biomasa viable para tal fin.
• Conocer las ventajas y desventajas de tal procedimiento.
• Aprender el uso correcto del instrumental de laboratorio para estas técnicas.
Marco Teórico
El cultivo in vitro consiste en tomar una porción de una planta (ej. el ápice, una hoja
o segmento de ella, segmento de tallo, meristemo, embrión, nudo, semilla, antera,
etc.) y colocarla en un medio nutritivo estéril (usualmente gelificado, semisólido)
donde se regenerará una o muchas plantas. Durante las últimas décadas, la técnica
del cultivo “in vitro” ha ganado especial interés para el establecimiento de diversas
plantas para la producción de compuestos o la obtención de cultivos más sanos y
con características genéticas específicas

Factores que le afectan el crecimiento y morfogénesis


• Ambiente aéreo
• Temperatura
• Luz
• Radiación térmica
• Presión
• Ambiente en el sustrato
Químico
• Composición orgánica e inorgánica
• Oxígeno y dióxido de carbono disuelto en el sustrato
• pH
Biológico
• Microorganismos simbióticos
• Microorganismos competitivos.
Beneficios
• Propagación masiva de plantas, especialmente para especies de difícil
propagación por otros
• métodos, o en vías de extinción
• Clonación de individuos de características agronómicas muy deseables
durante todo el año
• Obtención de plantas libres de virus
• Producción de semillas sintéticas
• Conservación de germoplasma (conjunto de individuos que representan la
variabilidad genética
• de una población vegetal)
• Obtención de metabolitos secundarios
• Producción de nuevos híbridos
• Mejora genética de plantas (incluyendo obtención de plantas transgénicas)
• Germinación de semillas.
• Producción de haploides.
• Estudios fisiológicos diversos.

Metodología
Materiales
Para la preparación de la solución
• Vaso de precipitado
• Tubos de ensayo
• Agitadora electrónica
• Papel filtro
• Tijeras
• Autoclave
• Reactivos:
o NH4 NO3 12ml
o KNO3 10ml
o Ca (NO3) 15ml
o Mg SO4 15ml
o QUETATOS 10ml
o MICROS 10ml
o KH2 PO4 5ml
o THIAMINA 5ml
o MIANIOSITOL 10mg
o SACAROSA 30grs
o pH 5.7
o PAPEL TORNASOL 100 pzas.
Para la siembra
• Pinzas de siembra
• Mechero
• Alcohol
• Semillas de chile
• Cámara de extracción
Pasos por seguir
Para preparar la solución
1. Medir y pesar reactivos
2. Mezclar reactivos en el siguiente orden
Sacarosa, soluciones, cisteína
3. Aforar a la cantidad a preparar y ajustar pH
4. Vaciar contenido en los frascos correspondientes.
Para la siembra

1.- Meter dos mecheros de bunsen a la cámara


2.- Esterilización del medio de la cámara biotecnológica con luz ultravioleta
20 minutos antes de comenzar la siembra.
3.- Después de los 20 minutos apagar la luz ultravioleta y prender el aire
dentro de la cámara.
◼ Para la siembra
4.- Desinfectar las manos con agua y alcohol y las pinzas con alcohol y
pasarlo por la flama, colocar las semillas cerca de la flama
5.- Tomar un tubo de ensaye previo con el medio de cultivo y destaparlo cerca
de la flama para evitar contaminación
6.- Colocar la semilla dentro de la cazuelita cerca de la flama y con la ayuda
de las pinzas bajar la cazuelita donde por capilaridad la semilla absorba las
sustancias.
7.- Cerrar cerca de la flama el tubo de ensaye.
8.-Sellar con cinta plástica mitad tapa y mitad tubo.
9.-Guardar en un lugar fresco y seco.

Pasos por seguir


• Lo primero que se realizo fue la solución con la cual se tuvo que realizar la
medición de cada uno de los reactivos que iba a llevar la mezcla
• Después se tuvieron que mezclar en un orden especifico ya que algunas
sustancias pueden reaccionar con otras y alterar la solución en primer lugar
se colocó la sacarosa, después las soluciones que era el conjunto de cada
uno de los demás reactivos y por último se agregó la cisteína.
• Después se aforo en la cual se le agrego agua destilada hasta un cierto
punto. Se lavaron y desinfectaron 100 tubos de ensayo, y se tomó el papel
tornasol y se recortó en cuadros los cuales se doblaron de forma que se
formara una cazuelita y se coloca en cada uno de los tubos Y se midieron 20
ml en cada uno de los tubos de ensayo
• Para la siembra se realizó en la camada biotecnológica la cual primero se
preparó antes dejándola con luz ultravioleta y se prendió el aire para eliminar
a todos los microorganismos perjudiciales.

• Después comenzamos la siembra, se preparó agua con alcohol en un


rociador con el cual nos desinfectamos las manos antes de tomar cualquier
material y se metieron dos mecheros de bunsen los cuales nos ayudaran con
la siembra para desinfectar los tubos, también se desinfectaron las pinzas
con alcohol y pasarlo por la flama, colocar las semillas cerca de la flama

• Tomar un tubo de ensaye previo con el medio de cultivo y destaparlo cerca


de la flama para evitar contaminación, se colocar la semilla dentro de la
cazuelita cerca de la flama y con la ayuda de las pinzas bajar la cazuelita
donde por capilaridad la semilla absorba las sustancias.

Conclusión
Los tubos de ensayo quedaron esterilizados y cargados del medio de cultivo para
recibir las semillas, las cuales fueron sembradas a pie de flama para evitar su
contaminación y para impedir el acceso de patógenos hacia su interior. Una vez
transportadas a su lugar de incubación, algunos medios de cultivo presentaban una
fungosas incipiente, la cual fue atacada con una nueva esterilización en la
autoclave. Algunas semillas comenzaban a germinar, puesto que la radícula o la
plúmula comenzaban a emerger.

Resultados
El uso de la biotecnología en la agricultura está considerado como una gran ventaja
frente a las condiciones adversas del medio ambiente en que pretendemos producir
plantas a partir de órganos vegetales o de semillas, ello observando los métodos
tradicionales o controlados que emplean sustratos naturales o que siguen un patrón
de producción más apegado a la naturaleza reproductiva vegetal. No obstante, tales
métodos implican mayores riesgos para asegurar el éxito de la producción agrícola,
tales como las adversidades climáticas o el ataque temprano de plagas y
enfermedades sobre nuestras semillas u órganos vegetales expuestos al medio
ambiente. Por tal motivo es que la biotecnología nos presenta sus herramientas
como una ventaja ante tales condiciones negativas del entorno, ayudándonos a
prevenir los riesgos latentes que comprometerían nuestra producción y la
encaminarían hacia el fracaso. La mayor ventaja de utilizar estas herramientas es
que favorecemos la germinación de las semillas o la división celular en tejidos
vegetales con totipotencia, estimulando su actividad metabólica y aumentando el
número de individuos producidos y su inocuidad al llegar al campo.

Bibliografía
• https://www.sabermas.umich.mx/archivo/articulos/75-numero-10/153-la-
propagacion-de-plantas-in-vitro-un-exito-biotecnologico.html

• https://revistas.unal.edu.co/index.php/biotecnologia/article/view/45692/5141
0
• https://inta.gob.ar/sites/default/files/script-tmp-md_0701.pdf

• http://www.scielo.org.co/pdf/biote/v19n1/0123-3475-biote-19-01-00007.pdf

Anexos

Materiales utilizados para realizar


la siembra en los tubos de ensayo