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Universidad Técnica del Norte

Facultad de Ingenierías en Ciencias Agropecuarias y Ambientales


Ingeniería en Biotecnología
Industria de Bioprocesos

PROPUESTAS PARA PRODUCCIÓN DE L – LISINA

Integrantes: Bastidas Lorena


Figueroa Lizbeth
González Gabriela
Martínez Alison
Ruiz Johanna

Fecha: 12 de noviembre de 2018

Nivel: 7mo Nivel


1. IDEAS Y BOSQUEJOS INICIALES PARA EL PROYECTO
Para comenzar a realizar la propuesta se planteo en primer lugar la siguiente interrogante
¿Cuáles serían las referencias bibliográficas adecuadas para el desarrollo de la
investigación?, posteriormente de la investigación de referencias bibliográficas
confiables se idea las siguientes propuestas.
PROPUESTA 1 PROPUESTA 2
Sustrato Miel final de caña de azúcar Lignocelulosa
(melasa) junto con harina de soya

Microorganismo Bacillus laterosporus o Corynebacterium glutamicum


Fuente de Agua amoniacal Sulfato de amonio
nitrógeno
Tabla 1. PROPUESTAS

- Se han planteado 2 propuestas diferentes usando diferentes sustratos , sin embargo


se podría comparar los niveles de lisina producido usando los 2 tipos de
microorganismos ya que Corynebacterium glutamicum debe ser modificada
genéticamente mientras que Bacillus laterosporus no se encuentra modificado
con cualquiera de los sustratos propuestos.
- La fuente de nitrógeno se escogerá dependiendo el valor comercial como el en el
catálogo de PanReac Aplichem.
- Se tiene claro que podría existir una dificultad al usar el sustrato de la propuesta
2 ya que no se exite una facilidad de separación de pentosas en la lignocelulosa
por lo que se tomaría un mayor tiempo para llevar a cambo la experimentación ,
además sería importante determinar ¿Cuál es la facilidad de separación de
pentosas de lignocelulosa para la obtención de Lisina?
Para elegir el microorganismo se toma en cuenta que Bacillus laterosporus se
debe aislar del suelo es decir que va a tener costos adicionales para el aislamiento
y crecimiento , además se deberá elegir ¿Cuál sería el medio de cultivo adecuado
para el crecimiento de Bacillus laterosporus?, mientras que al usar
Corynebacterium glutamicum se debe modificar genéticamente para la
producción de lisina lo cual trae consigo un costo adicional para la
experimentación.
Se deberá tener en cuenta ¿Cuál es la ruta metabólica de Bacillus laterosporus o
o para la fermentación de Lignocelulosa o melaza ?
- Para la producción de Lisina es necesario el uso de un biorreactor por ello es
importante determinar ¿Cuál será el tipo de biorreactor (feed-batch o batch)
adecuado para la obtención de Lisina?
- Cuáles son las condiciones óptimas para llevar a cabo el proceso de fermentación
de Lignocelulosa utilizando Bacillus laterosporus?
IDEAS A SEGUIR EN LA INVESTIGACIÓN
1. De acuerdo a la investigación bilbliográfica realizada tanto Bacillus laterosporus
asi como Corynebacterium glutamicum son capaces de degradar Lisina.
2. Modelar el medio de cultivo eficaz para la fermentación en el biorreactor electo.
3. Determinar qué factores pueden influir de manera negativa en la fermentación de
Lignocelulosa
4. Establecer las operaciones unitarias adecuadas en el proceso de fermentación.
5. Determinar la pureza del producto final obtenido.
6. Elegir los métodos que tengan un bajo costo económico para la producción de
Lisina teniendo en cuenta la calidad de los productos para llevar acabo la
experimentación
ELECCIÓN: De acuerdo a lo mencionado anteriormente sugerimos el uso de los dos
tipos de microorganismos ya que sería interesante analizar la diferencia en producción de
lisina usando como sustrato melaza junto con harina de soya porque la lignocelulosa de
acuerdo a las revisiones bibliográficas presentaría una mayor dificultad para la separación
de sus pentosas. Usando como fuente de nitrógeno cualquiera de las dos sustancias
mencionadas en la tabla 1 teniendo en cuenta sus valores comerciales.
2. Metodología Inicial

1. Para la obtención de la información bibliográfica se utilizará diferentes


plataformas como son Science Direct , Springer , PubMed siempre que sea
necesario .
2. El grupo de investigación se encuentra conformado por 5 estudiantes por lo que
se trabajara en 2 subgrupos, para la obtención de la información
3. La información recolectada por cada uno de los subgrupos acerca de los diferentes
temas que se llevará a cabo en el proyecto se expondrá para el grupo en general
para optimizar asi el tiempo.
4. La exposición de los grupos se realizará una vez por semana teniendo en cuenta
el cronograma adjunto.
5. La realización de cálculos se realizará el día posterior a la exposición de la
información.
6. Las asesorías con el docente se procurará realizarlas 1 o 2 veces por semana de
acuerdo a la dificultad del tema posteriormente de la exposición de los subgrupos
. Además para poder presentar avances del proyecto
7. Se utilizará Super Pro designer para la simulación del proceso de fermentación así
también programanas como Microsoft Excel.
8. Se realizará consultas en diferentes catálogos como en PanReac Aplichem,
Solvesa Ecuador S.A , Sartorius para realizar la evaluación técnica y financiera
de los compuestos químicos y proveedores de equipos
9. Se utilizarán diferentes plataformas para cálculos como equilibrator, KEGG,
NCBI, Brenda para la obtención de la información.
10. Se realizará cotizaciones acerca del valor de los microorganismos a través de
correo electrónico en empresas como Cirro cooper , Cientifica Cena.
3. Cronograma de elaboración de proyecto escrito.

TIEMPO Noviembre Diciembre Enero Febrero


RESPON-
SABLES
ACTIVIDADES 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

1.-Planificacion Todos

1.1-Eleccion del Todos


tema
1.2.-Ideas y Todos
bosquejos iniciales
1.3.- Elaboración Todos
del cronograma de
actividades
1.5.- Identificación Todos
de fuentes
confiables
2.-Propuesta Todos

2.1.-Investigar Todos
antecedentes
2.2.-Marco teórico Todos

2.3.- Proponer Todos


objetivos claros
2.4.-Descripción y Todos
caracterización
clara y precisa de
los materiales a
usar
2.5.- Todos
Caracterización del
microorganismo
2.6.-Diseño de Todos
procedimientos
2.7. Exposición Todos

3. Estructuración Todos
del informe final
3.1.-Introducción Todos

3.2.-Objetivos Todos

3.3.-Materiales y Todos
procedimiento
3.3.1- Todos
Caracterización del
Bacillus
laterosporus
3.3.1.1 Todos
Establecer
condiciones
óptimas para el
crecimiento de
Bacillus
laterosporus
3.3.2- Todos
Caracterización de
medio de cultivo en
el biorreactor
3.3.2.1 Todos
Mecanismo de
transporte

3.3.2.2 Todos
Diseño del proceso
de fermentación
3.3.2.3 Todos
Purificación del
producto
3.4.-Dibujos o Todos
diagramas
3.5.-Cálculos Todos

3.5.1- Establecer la Todos


estequiometría del
proceso
3.5.2- Determinar Todos
las propiedades
físico químicas de
los subproductos de
la fermentación
3.6.-Resultados Todos

3.7.-Discusión Todos

3.8.-Conclusiones Todos

4.-Documento final Todos


y exposición final

5.-Capacitación del Todos


Proyecto
4. REFERENCIAS
 Brautaset, T., Ellingsen, T. E., & Eggeling, L. (2017). Lysine Industrial Uses and
Production☆. In Reference Module in Life Sciences: Elsevier.
 Chen, Z., Liu, G., Zhang, J., & Bao, J. (2019). A preliminary study on l-lysine
fermentation from lignocellulose feedstock and techno-economic evaluation.
Bioresource technology, 271, 196-201.
 Hoffmann, S. L., Jungmann, L., Schiefelbein, S., Peyriga, L., Cahoreau, E.,
Portais, J.-C., . . . Wittmann, C. (2018). Lysine production from the sugar alcohol
mannitol: Design of the cell factory Corynebacterium glutamicum SEA-3 through
integrated analysis and engineering of metabolic pathway fluxes. Metabolic
Engineering, 47, 475-487. doi:https://doi.org/10.1016/j.ymben.2018.04.019
 Kelle, R., Hermann, T., & Bathe, B. (2005). 20 L-Lysine Production. Handbook
of Corynebacterium glutamicum, 465.
 Kiefer, P., Heinzle, E., & Wittmann, C. (2002). Influence of glucose, fructose and
sucrose as carbon sources on kinetics and stoichiometry of lysine production by
Corynebacterium glutamicum. Journal of Industrial Microbiology and
Biotechnology, 28(6), 338-343.
 Lee, H. W., Pan, J. G., & Lebeault, J. M. (1998). Enhanced l-lysine production in
threonine-limited continuous culture of Corynebacterium glutamicum by using
gluconate as a secondary carbon source with glucose. Applied Microbiology and
Biotechnology, 49(1), 9-15. doi:10.1007/s002530051130
 Plachý, J. (1970). Effect of medium composition on the production of lysine
byCorynebacterium sp. 9366-H-454. Folia microbiologica, 15(5), 347-349.
 Rabassa Olazábal, G., Pérez Sánchez, A., Crespo Zafra, L., & Pérez Martínez, A.
(2015). Estudio técnico-económico de la producción de l-lisina como oportunidad
de negocio en la industria azucarera. Centro Azúcar, 42(4), 75-84.
 SANO, K., & SHIIO, I. (1970). Microbial production of L-lysine. The journal of
general and applied microbiology, 16(5), 373-391.
 Schneider, J., Niermann, K., & Wendisch, V. F. (2011). Production of the amino
acids L-glutamate, L-lysine, L-ornithine and L-arginine from arabinose by
recombinant Corynebacterium glutamicum. Journal of biotechnology, 154(2-3),
191-198.
 Smirnova, T., Minenkova, I., Orlova, M., Lecadet, M., & Azizbekyan, R. (1996).
The crystal-forming strains of Bacillus laterosporus. Research in microbiology,
147(5), 343-350.
 Takahashi, E., Furui, M., Seko, H., & Shibatani, T. (1997). d-Lysine production
from l-lysine by successive chemical racemization and microbial asymmetric
degradation. Applied Microbiology and Biotechnology, 47(4), 347-351.
doi:10.1007/s002530050938

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