Compartimentos intracelulares y clasificación de proteínas

A diferencia de una bacteria, que generalmente consiste en un único compartimento intracelular

rodeado por una membrana plasmática, una célula eucariota se subdivide elaboradamente en
compartimientos funcionalmente distintos, cerrados por membrana. Cada compartimento, u
orgánulo, contiene su propio conjunto característico de enzimas y otras moléculas especializadas, y
los complejos sistemas de distribución transportan productos específicos de un compartimento a
otro. Para comprender la célula eucariota, es esencial saber cómo la célula crea y mantiene estos
compartimentos, qué ocurre en cada uno de ellos y cómo se mueven las moléculas entre ellos.
Las proteínas confieren a cada compartimento sus propiedades estructurales y funcionales
características. Catalizan las reacciones que ocurren allí y transportan selectivamente moléculas
pequeñas dentro y fuera del compartimento. Para los orgánulos envueltos en membranas en el
citoplasma, las proteínas también sirven como marcadores de superficie específicos de orgánulos
que dirigen nuevas entregas de proteínas y lípidos al orgánulo apropiado.
Una célula animal contiene aproximadamente 10 mil millones (1010) de moléculas de proteína de
tal vez 10,000 clases, y la síntesis de casi todas ellas comienza en el citosol, el espacio del
citoplasma fuera de los orgánulos encerrados en la membrana. Cada proteína recién sintetizada se
entrega luego específicamente al orgánulo que la requiere. El transporte intracelular de proteínas es
el tema central tanto de este capítulo como del próximo. Al rastrear el tráfico de proteínas de un
compartimiento a otro, uno puede comenzar a dar sentido al laberinto de membranas intracelulares
que de otro modo sería desconcertante.
LA COMPARTIMENTACIÓN DE CÉLULAS
En esta breve descripción de los compartimentos de la célula y las relaciones entre ellos,
organizamos los orgánulos conceptualmente en un pequeño número de familias discretas,
discutimos cómo se dirigen las proteínas a orgánulos específicos y explicamos cómo las proteínas
cruzan las membranas de los orgánulos.
Todas las células eucariotas tienen el mismo conjunto básico de orgánulos cerrados por
membranas
Muchos procesos bioquímicos vitales tienen lugar en las membranas o en sus superficies. Las
enzimas unidas a la membrana, por ejemplo, catalizan el metabolismo de los lípidos; y la
fosforilación oxidativa y la fotosíntesis requieren una membrana para acoplar el transporte de H + a
la síntesis de ATP. Además de proporcionar un área de membrana aumentada para albergar
reacciones bioquímicas, los sistemas de membrana intracelular forman compartimentos cerrados
que están separados del citosol, creando así espacios acuosos funcionalmente especializados
dentro de la célula. En estos espacios, subconjuntos de moléculas (proteínas, reactivos, iones) se
concentran para optimizar las reacciones bioquímicas en las que participan. Debido a que la bicapa
de lípidos de las membranas celulares es impermeable a la mayoría de las moléculas hidrófilas, la
membrana de un orgánulo debe contener proteínas de transporte de membrana para importar y
exportar metabolitos específicos. Cada membrana de orgánulo también debe tener un mecanismo
para importar e incorporar en el orgánulo las proteínas específicas que hacen que el orgánulo sea
único.
La figura 12-1 ilustra los principales compartimentos intracelulares comunes a las células
eucariotas. El núcleo contiene el genoma (aparte del ADN mitocondrial y del cloroplasto) y es el
sitio principal de la síntesis de ADN y ARN. El citoplasma circundante consiste en el citosol y los
orgánulos citoplásmicos suspendidos en él. El citosol constituye un poco más de la mitad del
volumen total de la célula, y es el sitio principal de síntesis y degradación de proteínas. También
realiza la mayor parte del metabolismo intermediario de la célula, es decir, las numerosas
reacciones que degradan algunas moléculas pequeñas y sintetizan otras para proporcionar los
bloques de construcción para las macromoléculas (discutidas en el Capítulo 2).
Aproximadamente la mitad del área total de la membrana en una célula eucariótica encierra los
espacios laberínticos del retículo endoplásmico (RE). El ER rugoso tiene muchos ribosomas unidos
a su superficie citosólica. Los ribosomas son orgánulos que no están encerrados en la membrana;
sintetizan proteínas de membrana tanto solubles como integrales, la mayoría de las cuales están
destinadas a la secreción al exterior de la célula u otros orgánulos. Veremos que, mientras que las
proteínas se transportan a otros orgánulos encerrados en la membrana solo después de que se
completa su síntesis, se transportan a la ER a medida que se sintetizan. Esto explica por qué la
membrana ER es única al tener ribosomas unidos a ella. El ER también produce la mayor parte de
los lípidos para el resto de la célula y funciona como una reserva de iones Ca2 +. Las regiones de
ER que carecen de ribosomas unidos se denominan ER lisas. El ER envía muchas de sus proteínas
y lípidos al aparato de Golgi, que a menudo consiste en montones organizados de compartimentos
discales llamados cisternas de Golgi. El aparato de Golgi recibe lípidos y proteínas de la sala de
emergencias y los envía a varios destinos, usualmente modificando covalentemente en el camino.
Las mitocondrias y los cloroplastos generan la mayor parte del ATP que las células usan para
generar reacciones que requieren una entrada de energía libre; Los cloroplastos son una versión
especializada de plastidios (presentes en plantas, algas y algunos protozoos), que también pueden
tener otras funciones, como el almacenamiento de alimentos o moléculas de pigmentos. Los
lisosomas contienen enzimas digestivas que degradan orgánulos intracelulares difuntos, así como
macromoléculas y partículas tomadas desde fuera de la célula por endocitosis. En el camino a los
lisosomas, el material endocitado debe pasar primero a través de una serie de orgánulos llamados
endosomas. Finalmente, los peroxisomas son pequeños compartimentos vesiculares que contienen
enzimas utilizadas en diversas reacciones oxidativas.
En general, cada organelo incluido en la membrana realiza el mismo conjunto de funciones básicas
en todos los tipos de células. Pero para servir a las funciones especializadas de las células, estos
orgánulos varían en abundancia y pueden tener propiedades adicionales que difieren del tipo de
célula al tipo de célula.
En promedio, los compartimentos encerrados en la membrana juntos ocupan casi la mitad del
volumen de una celda (Tabla 12-1), y se requiere una gran cantidad de membrana intracelular para
fabricarlos. En las células hepáticas y pancreáticas, por ejemplo, el retículo endoplasmático tiene
un área de superficie total de la membrana que es, respectivamente, 25 veces y 12 veces mayor
que la de la membrana plasmática (cuadro 12-2). Los orgánulos encerrados en la membrana están
empaquetados herméticamente en el citoplasma, y, en términos de área y masa, la membrana
plasmática es solo una membrana menor en la mayoría de las células eucarióticas (Figura 12-2).
La abundancia y la forma de los organelos encerrados en la membrana están regulados para
satisfacer las necesidades de la célula. Esto es particularmente evidente en células que son
altamente especializadas y, por lo tanto, se basan desproporcionadamente en orgánulos
específicos. Las células plasmáticas, por ejemplo, que secretan su propio peso todos los días en
moléculas de anticuerpos en el torrente sanguíneo, contienen cantidades ampliamente amplificadas
de ER rugosa, que se encuentra en láminas grandes y planas. Las células que se especializan en
la síntesis de lípidos también expanden su ER, pero en este caso el orgánulo forma una red de
túbulos contorneados. Además, los organelos encerrados en la membrana a menudo se
encuentran en posiciones características en el citoplasma. En la mayoría de las células, por
ejemplo, el aparato de Golgi se encuentra cerca del núcleo, mientras que la red de túbulos de ER
se extiende desde el núcleo a lo largo de todo el citosol. Estas distribuciones características
dependen de las interacciones de los orgánulos con el citoesqueleto. La localización tanto del RE
como del aparato de Golgi, por ejemplo, depende de una matriz de microtúbulos intacta; si los
microtúbulos se despolimerizan experimentalmente con un fármaco, el aparato de Golgi se
fragmenta y dispersa por toda la célula, y la red de ER se colapsa hacia el centro celular (discutido
en el Capítulo 16). El tamaño, la forma, la composición y la ubicación son todas características
importantes y reguladas de estos orgánulos que, en última instancia, contribuyen a la función del
orgánulo.
Los orígenes evolutivos pueden ayudar a explicar las relaciones topológicas de los orgánulos
Para comprender las relaciones entre los compartimentos de la célula, es útil considerar cómo
pudieron haber evolucionado. Se cree que los precursores de las primeras células eucariotas
fueron células relativamente simples que, como la mayoría de las bacterias y

las células arqueales tienen una membrana plasmática pero no membranas internas. La membrana
plasmática en tales células proporciona todas las funciones dependientes de la membrana, incluido
el bombeo de iones, la síntesis de ATP, la secreción de proteínas y la síntesis de lípidos. Las
células eucariotas típicas actuales son 10-30 veces más grandes en dimensión lineal y 1000-10,000
veces mayores en volumen que una bacteria típica tal como E. coli. La profusión de membranas
internas se puede considerar, en parte, como una adaptación a este aumento de tamaño: la célula
eucariota tiene una relación mucho menor de área superficial a volumen, y su membrana
plasmática, por lo tanto, presumiblemente tiene un área demasiado pequeña para sostener los
muchos funciones vitales que realizan las membranas. Los extensos sistemas de membrana
interna de una célula eucariota alivian este problema.
La evolución de las membranas internas evidentemente fue mano a mano con la especialización de
la función de la membrana. En la Figura 12-3 se ilustra un esquema hipotético de cómo las
primeras células eucariotas, con un núcleo y RE, pudieron haber evolucionado por la invaginación y
el pellizco de la membrana plasmática de una célula ancestral. Este proceso crearía organelos
rodeados de membrana con un interior o lumen que es topológicamente equivalente al exterior de
la celda. Veremos que esta relación topológica se mantiene para todos los orgánulos implicados en
las vías secretoras y endocíticas, que incluyen ER, aparato de Golgi, endosomas, lisosomas y
peroxisomas. Por lo tanto, podemos pensar en todos estos orgánulos como miembros del mismo
compartimento topológicamente equivalente. Como discutiremos en detalle en el próximo capítulo,
sus interiores se comunican ampliamente entre sí y con el exterior de la celda a través de vesículas
de transporte, que brotan de un orgánulo y se fusionan con otro (figura 12-4).
Como se describe en el Capítulo 14, las mitocondrias y los plástidos difieren de los otros orgánulos
encerrados en la membrana porque contienen sus propios genomas. La naturaleza de estos
genomas, y la gran semejanza de las proteínas en estos orgánulos con las de algunas bacterias
actuales, sugieren fuertemente que las mitocondrias y los plástidos evolucionaron a partir de
bacterias que fueron engullidas por otras células con las que inicialmente vivieron en simbiosis (ver
Figuras). 1-29 y 1-31): la membrana interna de las mitocondrias y los plástidos corresponde
supuestamente a la membrana plasmática original de la bacteria, mientras que la luz de estos
orgánulos evolucionó a partir del citosol bacteriano. Al igual que la bacteria de la que se derivaron,
tanto las mitocondrias como los plástidos están encerrados por una doble membrana y permanecen
aislados del extenso tráfico vesicular que conecta el interior de la mayoría de los otros organelos
rodeados de membrana entre sí y con el exterior del celda.
Los esquemas evolutivos que acabamos de describir agrupan los compartimentos intracelulares en
células eucariotas en cuatro familias distintas: (1) el núcleo y el citosol, que se comunican entre sí a
través de complejos de poro nuclear y son así topológicamente continuos (aunque funcionalmente
distintos); (2) todos los orgánulos que funcionan en las vías secretoras y endocíticas, que incluyen
el RE, el aparato de Golgi, los endosomas y los lisosomas, las numerosas clases de productos
intermedios de transporte, como las vesículas de transporte que se mueven entre ellos, y los
peroxisomas; (3) las mitocondrias; y (4) los plástidos (solo en plantas).
Las proteínas pueden moverse entre compartimentos de diferentes maneras
La síntesis de todas las proteínas comienza en los ribosomas en el citosol, a excepción de los
pocos que se sintetizan en los ribosomas de las mitocondrias y los plástidos. Su destino posterior
depende de su secuencia de aminoácidos, que puede contener señales de clasificación que dirigen
su entrega a lugares fuera del citosol o a las superficies de los orgánulos. Algunas proteínas no
tienen una señal de clasificación y, en consecuencia, permanecen en el citosol como residentes
permanentes. Sin embargo, muchos otros tienen señales de clasificación específicas que dirigen su
transporte desde el citosol al núcleo, la ER, las mitocondrias, los plástidos o los peroxisomas; las
señales de clasificación también pueden dirigir el transporte de proteínas desde el ER a otros
destinos en la célula.
Para comprender los principios generales por los cuales funcionan las señales de clasificación, es
importante distinguir tres formas fundamentalmente diferentes mediante las cuales las proteínas se
mueven de un compartimento a otro. Estos tres mecanismos se describen a continuación, y los
pasos de transporte en los que operan se describen en la Figura 12-5. Discutimos los primeros dos
mecanismos (transporte controlado y transporte transmembrana) en este capítulo, y el tercero
(transporte vesicular, flechas verdes en la Figura 12-5) en el Capítulo 13.
1. En el transporte cerrado, las proteínas y las moléculas de ARN se mueven entre el
citosol y el núcleo a través de complejos nucleares de poro en la envoltura nuclear. Los complejos
de poro nuclear funcionan como compuertas selectivas que soportan el transporte activo de
macromoléculas específicas y ensamblajes macromoleculares entre los dos espacios
topológicamente equivalentes, aunque también permiten la difusión libre de moléculas más
pequeñas.
2. En la translocación de proteínas, los translocadores de proteínas transmembrana
transportan directamente proteínas específicas a través de una membrana desde el citosol a un
espacio que es topológicamente distinto. La molécula de proteína transportada generalmente debe
desplegarse para atravesar el translocador. El transporte inicial de proteínas seleccionadas desde
el citosol al lumen del RE o mitocondrias, por ejemplo, ocurre de esta manera. Las proteínas de
membrana integrales a menudo usan los mismos translocadores pero se translocan solo
parcialmente a través de la membrana, de modo que la proteína se integra en la bicapa lipídica.
3. En el transporte vesicular, los productos intermedios de transporte incluidos en la
membrana, que pueden ser vesículas de transporte esféricas pequeñas o fragmentos de orgánulos
de forma irregular más grandes, transportan proteínas de un compartimiento topológicamente
equivalente a otro. Las vesículas y fragmentos de transporte se cargan con un cargamento de
moléculas derivadas del lumen de un compartimento a medida que brotan y se desprenden de su
membrana; descargan su carga en un segundo compartimento fundiéndose con la membrana que
rodea ese compartimiento (Figura 12-6). La transferencia de proteínas solubles del ER al aparato
de Golgi, por ejemplo, ocurre de esta manera. Debido a que las proteínas transportadas no cruzan
una membrana, el transporte vesicular puede mover proteínas solo entre compartimentos que son
topológicamente equivalentes (vea la Figura 12-4).
Cada modo de transferencia de proteína generalmente se guía por señales de clasificación en la
proteína transportada, que son reconocidas por receptores de clasificación complementarios. Si se
va a importar una gran proteína en el núcleo, por ejemplo, debe poseer una señal de clasificación
que reconozcan las proteínas receptoras para guiarla a través del complejo de poro nuclear. Si una
proteína se va a transferir directamente a través de una membrana, debe tener una señal de
clasificación que reconozca el translocador. Del mismo modo, si una proteína se va a cargar en un
cierto tipo de vesícula o se retiene en ciertos orgánulos, un receptor complementario en la
membrana apropiada debe reconocer su señal de clasificación.
Secuencias de señal y receptores de clasificación Dirigen las proteínas a la dirección correcta de la
célula
La mayoría de las señales de clasificación de proteínas implicadas en el transporte transmembrana
residen en un tramo de secuencia de aminoácidos, típicamente de 15-60 residuos de longitud.
Dichas secuencias señal se encuentran a menudo en el extremo N de la cadena polipeptídica, y en
muchos casos las peptidasas señalizadas especializadas eliminan la secuencia señal de la
proteína terminada una vez que se ha completado el proceso de clasificación. Las secuencias de
señal también pueden ser tramos internos de aminoácidos, que permanecen como parte de la
proteína. Dichas señales se usan en el transporte cerrado en el núcleo. Las señales de clasificación
también pueden estar compuestas por múltiples secuencias internas de aminoácidos que forman
una disposición tridimensional específica de átomos en la superficie de la proteína; tales parches de
señal se utilizan a veces para la importación nuclear y en el transporte vesicular.
Cada secuencia de señal especifica un destino particular en la celda. Las proteínas destinadas a la
transferencia inicial a ER generalmente tienen una secuencia de señal en su extremo N que incluye
de forma característica una secuencia compuesta de aproximadamente 5-10 aminoácidos
hidrófobos. Muchas de estas proteínas pasarán a su vez del RE al aparato de Golgi, pero aquellas
con una secuencia señal específica de cuatro aminoácidos en su extremo C se reconocen como
residentes de ER y se devuelven al ER. Las proteínas destinadas a las mitocondrias tienen
secuencias señal de otro tipo, en el que los aminoácidos cargados positivamente se alternan con
los hidrofóbicos. Finalmente, muchas proteínas destinadas a peroxisomas tienen una secuencia
señal de tres aminoácidos característicos en su C-terminal.
La Tabla 12-3 presenta algunas secuencias de señales específicas. Los experimentos en los que el
péptido se transfiere de una proteína a otra mediante técnicas de ingeniería genética han
demostrado la importancia de cada una de estas secuencias señal para la selección de proteínas.
La colocación de la secuencia de señal de ER N-terminal al comienzo de una proteína citosólica,
por ejemplo, redirige la proteína al ER; eliminar o mutar la secuencia señal de una proteína ER
provoca su retención en el citosol. Las secuencias de señal son, por lo tanto, tanto necesarias
como suficientes para la selección de proteínas. Aunque sus secuencias de aminoácidos pueden
variar mucho, las secuencias de señal de las proteínas que tienen el mismo destino son
funcionalmente intercambiables; las propiedades físicas, tales como la hidrofobicidad, a menudo
parecen ser más importantes en el proceso de reconocimiento de señal que la secuencia de
aminoácidos exacta.
Las secuencias de señales son reconocidas por receptores de clasificación complementarios que
guían a las proteínas a su destino apropiado, donde los receptores descargan su carga. Los
receptores funcionan catalíticamente: después de completar una ronda de tar-geting, regresan a su
punto de origen para ser reutilizados. La mayoría de los receptores de clasificación reconocen
clases de proteínas en lugar de especies de proteínas individuales. Por lo tanto, pueden verse
como sistemas de transporte público, dedicados a entregar numerosos componentes diferentes a
su ubicación correcta en la celda.
La mayoría de los orgánulos no se pueden construir de novo: requieren información en el propio
organelo
Cuando una célula se reproduce por división, tiene que duplicar sus orgánulos, además de sus
cromosomas. En general, las células hacen esto incorporando nuevas moléculas en los orgánulos
existentes, ampliándolos de ese modo; los organelos agrandados se dividen y se distribuyen a las
dos células hijas. Por lo tanto, cada célula hija hereda un conjunto completo de membranas
celulares especializadas de su madre. Esta herencia es esencial porque una célula no podría
fabricar tales membranas desde cero. Si el ER se eliminó por completo de una célula, por ejemplo,
¿cómo podría la célula reconstruirlo? Como discutiremos más adelante, las proteínas de membrana
que definen el ER y realizan muchas de sus funciones son en sí mismas productos del ER. No se
podría hacer un nuevo ER sin un ER existente o, al menos, una membrana que contenga
específicamente los translocadores de proteínas necesarios para importar proteínas seleccionadas
en el ER del citosol (incluidos los propios translocadores específicos de ER). Lo mismo es cierto
para las mitocondrias y los plástidos.
Por lo tanto, parece que la información requerida para construir un orgánulo no reside
exclusivamente en el ADN que especifica las proteínas del orgánulo. También se requiere
información en forma de al menos una proteína distinta que preexista en la membrana del orgánulo,
y esta información se pasa de células parentales a células hijas en la forma del propio orgánulo.
Presumiblemente, dicha información es esencial para la propagación de la organización
compartimental de la célula, así como la información en el ADN es esencial para la propagación de
las secuencias de nucleótidos y aminoácidos de la célula.
Sin embargo, como discutimos con más detalle en el Capítulo 13, la ER genera un flujo constante
de vesículas de transporte que incorporan solo un subconjunto de proteínas ER y, por lo tanto,
tienen una composición diferente de la ER. Del mismo modo, la membrana plasmática
constantemente brota de varios tipos de vesículas endocíticas especializadas. Por lo tanto, algunos
orgánulos pueden formarse a partir de otros orgánulos y no tienen que ser heredados en la división
celular.
Resumen
Las células eucariotas contienen organelos encerrados en la membrana intracelular que
constituyen casi la mitad del volumen total de la célula. Los principales presentes en todas las
células eucarióticas son el retículo endoplásmico, el aparato de Golgi, el núcleo, las mitocondrias,
los lisosomas, los endosomas y los peroxisomas; las células vegetales también contienen plástidos
tales como cloroplastos. Estos orgánulos contienen conjuntos distintos de proteínas, que median la
función única de cada orgánulo.
Cada proteína de organelo recién sintetizada debe encontrar su camino desde un ribosoma en el
citosol, donde se produce la proteína, hasta el orgánulo donde funciona. Lo hace siguiendo una ruta
específica, guiada por señales de clasificación en su secuencia de aminoácidos que funcionan
como secuencias de señal o parches de señal. Las señales de clasificación son reconocidas por
receptores de clasificación complementarios, que entregan la proteína al orgánulo objetivo
apropiado. Las proteínas que funcionan en el citosol no contienen señales de clasificación y por lo
tanto permanecen allí después de que se sintetizan.
Durante la división celular, los orgánulos como el ER y las mitocondrias se distribuyen a cada célula
hija. Estos orgánulos contienen información que se requiere para su construcción, por lo que no
pueden hacerse de novo.
EL TRANSPORTE DE MOLÉCULAS ENTRE EL NÚCLEO Y EL CITOSOL
La envoltura nuclear endosa el ADN y define el compartimento nuclear. Esta envoltura consiste en
dos membranas concéntricas, que son penetradas por complejos de poro nuclear (figura 12-7).
Aunque las membranas nucleares internas y externas son continuas, mantienen distintas
composiciones de proteínas. La membrana nuclear interna contiene proteínas que actúan como
sitios de unión para los cromosomas y para la lámina nuclear, una red de proteínas que
proporciona soporte estructural para la envoltura nuclear; la lámina también actúa como un sitio de
anclaje para los cromosomas y el citoesqueleto citoplásmico (a través de complejos proteicos que
abarcan la envoltura nuclear). La membrana interna está rodeada por la membrana nuclear
externa, que es continua con la membrana del ER. Al igual que la membrana ER (discutido más
adelante), la membrana nuclear externa está salpicada de ribosomas dedicados a la síntesis de
proteínas. Las proteínas fabricadas en estos ribosomas se transportan al espacio entre las
membranas nucleares internas y externas (el espacio perinuclear), que es continuo con la luz del
RE (véase la figura 12-7).
El tráfico bidireccional ocurre continuamente entre el citosol y el núcleo. Las numerosas proteínas
que funcionan en el núcleo -incluidas las histonas, las ADN polimerasas, las ARN polimerasas, los
reguladores de la transcripción y las proteínas de procesamiento del ARN- se importan
selectivamente en el compartimento nuclear desde el citosol, donde se fabrican. Al mismo tiempo,
casi todos los ARN, incluidos los ARNm, ARNr, ARNt, miARN y snARN, se sintetizan en el
compartimento nuclear y luego se exportan al citosol. Al igual que el proceso de importación, el
proceso de exportación es selectivo; Los ARNm, por ejemplo, se exportan solo después de haber
sido modificados adecuadamente por reacciones de procesamiento de ARN en el núcleo. En
algunos casos, el proceso de transporte es complejo. Las proteínas ribosomales, por ejemplo, se
producen en el citosol y se importan al núcleo, donde se ensamblan con el ARN ribosómico recién
hecho en partículas. Las partículas se exportan al citosol, donde se ensamblan en ribosomas. Cada
uno de estos pasos requiere un transporte selectivo a través de la envoltura nuclear.
Complejos de Poro Nuclear Perfórate el Sobre Nuclear
Los complejos de poro nuclear grandes y elaborados (NPC) perforan el sobre nuclear en todos los
eucariotas. Cada NPC está compuesto por un conjunto de aproximadamente 30 proteínas
diferentes, o nucleoporinas. Como reflejo del alto grado de simetría interna, cada nucleoporina está
presente en múltiples copias, resultando en 500-1000 moléculas de proteína en el NPC
completamente ensamblado, con una masa estimada de 66 millones de daltons en levadura y 125
millones de daltons en vertebrados (Figura 12-8 ) La mayoría de las nucleoporinas son
compuesto por dominios de proteínas repetitivas de solo unos pocos tipos diferentes, que han
evolucionado a través de la duplicación de genes extensa. Algunas de las nucleoporinas de los
andamios (véase la Figura 12-8) están estructuralmente relacionadas con los complejos proteicos
de la cubierta vesicular, como la clatrina y el coatómero COPII (discutidos en el Capítulo 13), que
dan forma a las vesículas de transporte; y una proteína se usa como un bloque de construcción
común tanto en NPC como en capas de vesículas. Estas similitudes sugieren un origen evolutivo
común para NPC y capas de vesículas: pueden derivarse de un módulo de proteína de doblado de
membrana que ayudó a formar los elaborados sistemas de membrana de células eucariotas, y en
las células actuales estabiliza las curvas cerradas de membrana necesarias para formar un poro
nuclear.
La envoltura nuclear de una célula de mamífero típica contiene 3000-4000 NPC, aunque ese
número varía ampliamente, de unos pocos cientos en células gliales a casi 20,000 en neuronas de
Purkinje. El tráfico total que pasa a través de cada NPC es enorme: cada NPC puede transportar
hasta 1000 macromoléculas por segundo y puede transportarse en ambas direcciones al mismo
tiempo. Cómo se coordina el flujo bidireccional de las macromoléculas para evitar la congestión y
las colisiones frontales no se conoce.
Cada NPC contiene pasajes acuosos, a través de los cuales las pequeñas moléculas solubles en
agua pueden difundirse pasivamente. Los investigadores han determinado el tamaño efectivo de
estos pasajes inyectando moléculas marcadas solubles en agua de diferentes tamaños en el citosol
y luego midiendo su velocidad de difusión en el núcleo. Las moléculas pequeñas (5000 daltons o
menos) se difunden tan rápido que podemos considerar la envoltura nuclear libremente permeable
a ellas. Las proteínas grandes, sin embargo, se difunden mucho más lentamente, y cuanto más
grande es una proteína, más lentamente pasa a través del NPC. Las proteínas de más de 60,000
daltons no pueden ingresar por difusión pasiva. Se cree que este corte de tamaño a la difusión libre
es el resultado de la estructura de NPC (consulte la Figura 12-8). Las nucleoporinas del canal con
extensas regiones no estructuradas forman un enredo desordenado (muy parecido a un lecho de
algas en el océano) que restringe la difusión de macromoléculas grandes al tiempo que permite el
paso de moléculas más pequeñas.
Debido a que muchas proteínas celulares son demasiado grandes para difundirse pasivamente a
través de los NPC, el compartimento nuclear y el citosol pueden mantener diferentes
composiciones de proteínas. Los ribosomas citosólicos maduros, por ejemplo, tienen
aproximadamente 30 nm de diámetro y, por lo tanto, no pueden difundirse a través del NPC,
limitando la síntesis de proteínas al citosol. Pero, ¿cómo exporta el núcleo las subunidades
ribosómicas recién creadas o importa moléculas grandes, como las ADN polimerasas y las ARN
polimerasas, que tienen masas moleculares de subunidades de 100.000 a 200.000 daltons? Como
discutiremos a continuación, estas y la mayoría de las otras moléculas de proteína y ARN
transportados se unen a proteínas receptoras específicas que transportan activamente moléculas
grandes a través de NPC. Incluso pequeñas proteínas como las histonas frecuentemente usan
mecanismos mediados por receptores para cruzar el NPC, aumentando así la eficiencia del
transporte.
La localización nuclear indica proteínas nucleares directas al núcleo
Cuando las proteínas se extraen experimentalmente del núcleo y se reintroducen en el citosol,
incluso las muy grandes se vuelven a acumular de manera eficiente en el núcleo. Las señales de
clasificación llamadas señales de localización nuclear (NLS) son responsables de la selectividad de
este proceso activo de importación nuclear. Las señales se han definido con precisión usando
tecnología de ADN recombinante para numerosas proteínas nucleares, así como para proteínas
que ingresan al núcleo solo de forma transitoria (figura 12-9). En muchas proteínas nucleares, las
señales consisten en una o dos secuencias cortas que son ricas en los aminoácidos cargados
positivamente, lisina y arginina (ver Tabla 12-3, página 648), con la secuencia precisa que varía
para diferentes proteínas. Otras proteínas nucleares contienen diferentes señales, algunas de las
cuales aún no están caracterizadas.
Las señales de localización nuclear pueden localizarse casi en cualquier parte de la secuencia de
aminoácidos y se cree que forman bucles o parches en la superficie de la proteína. Muchos
funcionan incluso cuando se unen como péptidos cortos a cadenas laterales de lisina en la
superficie de una proteína citosólica, lo que sugiere que la ubicación precisa de la señal dentro de
la secuencia de aminoácidos de una proteína nuclear no es importante. Además, siempre que una
de las subunidades de proteínas de un complejo multicomponente muestre una señal de
localización nuclear, todo el complejo se importará al núcleo.
Uno puede visualizar el transporte de proteínas nucleares a través de NPC recubriendo partículas
de oro con una señal de localización nuclear, inyectando las partículas en el citosol, y luego
siguiendo su destino mediante microscopía electrónica (Figura 12-10). Las partículas se unen a las
fibrillas en forma de tentáculos que se extienden desde las nucleoporinas del andamio en el borde
del NPC al citosol, y luego pasan por el centro del NPC. Presumiblemente, las regiones no
estructuradas de las nucleoporinas que forman una barrera de difusión para las moléculas grandes
(mencionadas anteriormente) son empujadas para permitir que las partículas de oro recubiertas se
escurran.
El transporte macromolecular a través de NPC difiere fundamentalmente del transporte de
proteínas a través de las membranas de otros orgánulos, en el sentido de que ocurre
a través de un poro acuoso grande, expandible, en lugar de a través de un transportador de
proteínas que abarca una o más bicapas lipídicas. Por esta razón, las proteínas nucleares plegadas
por completo se pueden transportar al núcleo a través de un NPC, y las subunidades ribosómicas
recién formadas se transportan fuera del núcleo como una partícula ensamblada. Por el contrario,
las proteínas tienen que desplegarse extensamente para ser transportadas a la mayoría de los
otros orgánulos, como veremos más adelante.
Los receptores de importación nuclear se unen a señales de localización nuclear y proteínas NPC
Para iniciar la importación nuclear, la mayoría de las señales de localización nuclear deben ser
reconocidas por receptores de importación nuclear, a veces llamados importinas, la mayoría de los
cuales están codificados por una familia de genes relacionados. Cada miembro de la familia
codifica una proteína receptora que puede unir y transportar el subconjunto de proteínas de carga
que contienen la señal de localización nuclear apropiada (figura 12-11A). Los receptores de
importación nuclear no siempre se unen directamente a las proteínas nucleares. Las proteínas
adaptadoras adicionales pueden formar un puente entre los receptores de importación y las
señales de localización nuclear en las proteínas que se transportarán (figura 12-11B). Algunas
proteínas adaptadoras están estructuralmente relacionadas con los receptores de importación
nuclear, lo que sugiere un origen evolutivo común. Mediante el uso de una variedad de receptores
de importación y adaptadores, las células pueden reconocer el amplio repertorio de señales de
localización nuclear que se muestran en las proteínas nucleares.
Los receptores de importación son proteínas citosólicas solubles que se unen tanto a la señal de
localización nuclear de la proteína de la carga y a la fenilalanina-glicina (FG) se repite en los
dominios no estructurados de las nucleoporins de canal que bordean el poro central. FG-repite
también se encuentran en las fibrillas citoplasmáticas y nucleares. Se cree que FG-repite en la
maraña no estructurada del poro para hacer una doble función. Ellos interactúan débilmente, lo que
da las propiedades de tipo gel enredo proteína que imponen una barrera de permeabilidad a
macromoléculas grandes, y sirven como sitios de atraque para los receptores nucleares de
importación. FG-repite la línea de la trayectoria a través de los NPC tomadas por los receptores de
importación y sus proteínas de carga consolidados. De acuerdo con un modelo de transporte
nuclear, los complejos receptor-carga mueven a lo largo del recorrido de transporte mediante la
unión repetida, disociar,y luego re-unión a secuencias FG-repetición adyacentes. De esta manera,
los complejos pueden saltar de una a otra nucleoporin para atravesar el interior enmarañada de la
APN en un paseo aleatorio. Como los receptores de importación se unen a FG-repite durante este
viaje, que interrumpirían la interacción entre las repeticiones y disolver localmente la fase de gel de
la maraña proteína que llena los poros, permitiendo el paso del complejo receptor-carga. Una vez
dentro del núcleo, los receptores de importación se disocian de su carga y vuelven al citosol. Como
veremos más adelante, sólo que esta disociaciónque interrumpirían la interacción entre las
repeticiones y disolver localmente la fase de gel de la maraña proteína que llena los poros,
permitiendo el paso del complejo receptor-carga. Una vez dentro del núcleo, los receptores de
importación se disocian de su carga y vuelven al citosol. Como veremos más adelante, sólo que
esta disociaciónque interrumpirían la interacción entre las repeticiones y disolver localmente la fase
de gel de la maraña proteína que llena los poros, permitiendo el paso del complejo receptor-carga.
Una vez dentro del núcleo, los receptores de importación se disocian de su carga y vuelven al
citosol. Como veremos más adelante, sólo que esta disociación se produce en el lado nuclear de la
APN y por lo tanto confiere direccionalidad al proceso de importación.
Exportación Nuclear Funciona como la importación nuclear, pero a la inversa
La exportación nuclear de moléculas grandes, como las nuevas subunidades ribosomales y
moléculas de ARN, se produce a través de NPC y también depende de un transporte selectivo
sistema. El sistema de transporte se basa en señales de exportación nuclear en las
macromoléculas a ser exportados, así como sobre los receptores de exportación nuclear
complementarias, o exportinas. Estos receptores se unen tanto a la señal de exportación y las
proteínas de la APN para guiar su carga a través de la APN para el citosol.
Muchos receptores de exportación nuclear están estructuralmente relacionados con los receptores
nucleares de importación, y están codificadas por el mismo familia de genes de receptores de
transporte nuclear, o karyopherins. En la levadura, hay 14 genes que codifican karyopherins; en
células animales, el número es significativamente mayor. A menudo no es posible saber a partir de
su secuencia de aminoácidos solamente si un miembro de la familia en particular funciona como
una importación nuclear o receptor de exportación nuclear. Como era de esperar, por lo tanto, los
sistemas de transporte de importación y exportación funcionan de manera similar pero en
direcciones opuestas: los receptores de importación se unen a sus moléculas de carga en el
citosol, los liberan en el núcleo, y después se exportan al citosol para su reutilización, mientras los
receptores de exportación funcionan de la manera opuesta.
La GTPasa Ran impone direccionalidad de transporte a través de CPN
La importación de proteínas nucleares a través de CPN concentra proteínas específicas en el
núcleo y por lo tanto aumenta el orden en la célula. Los combustibles de células este proceso de
pedido mediante el aprovechamiento de la energía almacenada en los gradientes de concentración
de la forma unida a GTP de la Ran GTPasa monomérica, que se requiere tanto para la importación
nuclear y exportación.
Al igual que otras GTPasas, Ran es un interruptor molecular que pueden existir en dos estados de
conformación, dependiendo de si el PIB o GTP se une (discutido en el capítulo 3). Dos proteínas
reguladoras-RAN específica desencadenan la conversión entre los dos estados: un citosólica
proteína GTPasa de la activación (GAP) que desencadena la hidrólisis de GTP y por lo tanto
convierte Ran-GTP a Ran-PIB, y un factor de intercambio de guanina nuclear (GEF) promueve el
intercambio de GDP por GTP y por lo tanto convierte Ran-PIB a Ran-GTP. Debido a Ran-GAP se
encuentra en el citosol y Ran-GEF se encuentra en el núcleo donde está anclado a la cromatina, el
citosol contiene Ran-PIB principalmente, y el núcleo contiene principalmente Ran-GTP (Figura
12-12).

Este gradiente de las dos formas conformacionales de Ran impulsa el transporte nuclear en la
dirección apropiada. Docking de los receptores nucleares de importación a FG-repite en el lado
citosólico de la NPC, por ejemplo, se produce o no estos receptores son cargados con la carga
apropiada. receptores de importación, facilitadas por FG-repetición de unión, a continuación, entran
en el canal. Si alcanzan el lado nuclear del complejo de poro, Ran-GTP se une a ellos, y, si los
receptores llegan cargan con moléculas de carga, la unión Ran-GTP hace que los receptores para
liberar su carga (Figura 12-13a). Debido a que el Ran-PIB en el citosol no se une a importar (o
exportación) receptores, la descarga se produce sólo en el lado nuclear de la NPC. De esta
manera, la localización nuclear de Ran-GTP crea la direccionalidad del proceso de importación.
Después de haber descargado su carga en el núcleo, el receptor de importación vacío con Ran-
GTP unido es transportado de vuelta a través del complejo de poro al citosol. Allí, Ran-GAP
desencadena Ran-GTP para hidrolizar su GTP unido, convirtiendo de este modo a Ran-PIB, que se
disocia del receptor. El receptor está listo para otro ciclo de importación nuclear.
Exportación nuclear se produce por un mecanismo similar, excepto que Ran-GTP en el núcleo
promueve carga unión al receptor de la exportación, en lugar de promover la disociación de carga.
Una vez que el receptor de exportación se mueve a través del poro de la cito-sol, que encuentra
Ran-GAP, que induce el receptor de hidrolizar su GTP a GDP. Como resultado, las emisiones de
los receptores de exportación tanto su carga y Ran-PIB en el citosol. Receptores libres de
exportación se devuelven luego al núcleo para completar el ciclo (Figura 12- 13B).
Transporte a través de CPN puede regularse controlando el acceso a la Machinen Transporte /
Algunas proteínas contienen tanto señales de localización nuclear y señales de exportación
nuclear. Estas proteínas lanzadera continuamente hacia atrás y adelante entre el núcleo y el
citosol. Las tasas relativas de su importación y exportación determinar la localización estacionario
de tales proteínas shuttling: si la tasa de importación excede la tasa de exportación, una proteína se
encuentra principalmente en el núcleo; a la inversa, si la tasa de exportación excede la tasa de
importación, una proteína se localiza principalmente en el citosol. Por lo tanto, el cambio de la tasa
de importación, exportación, o ambos, puede cambiar la ubicación de una proteína.
Algunas proteínas se mueven continuamente yendo y viniendo dentro y fuera del núcleo. En otros
casos, sin embargo, el transporte se controla estrictamente. Como se discutió en el Capítulo 7, las
células de control la actividad de algunos reguladores de la transcripción por mantenerlos fuera del
núcleo hasta que se necesiten allí (Figura 12-14). En muchos casos, las células de control de
transporte mediante la regulación de la localización y de exportación nuclear señales
convirtiéndolas en o fuera, a menudo por la fosforilación de aminoácidos cerca de las secuencias
de señales (Figura 12-15).
Otros reguladores de la transcripción se unen a proteínas citosólicas inhibidoras que, o bien las
anclan en el citosol (a través de interacciones con el citoesqueleto o orgánulos específicos) o
enmascaran sus señales de localización nuclear de manera que no pueden interactuar con los
receptores nucleares de importación. Un estímulo apropiado libera la proteína reguladora de genes
a partir de su anclaje citosólico o máscara, y a continuación se transporta en el núcleo. Un ejemplo
importante es la proteína reguladora de genes latente que controla la expresión de proteínas
implicadas en el metabolismo del colesterol. La proteína se hace y se almacena en una forma
inactiva como una proteína de transmembrana en el ER. Cuando una célula se ve privado de
colesterol, la proteína se transporta desde el ER al aparato de Golgi, donde se encuentra con
proteasas específicas que escinden fuera del dominio citosólico, su liberación en el citosol.Este
dominio se importa a continuación en el núcleo, donde activa la transcripción de genes necesarios
tanto para la absorción de colesterol y síntesis (Figura 12-16).
Como veremos en detalle en el capítulo 6, las células controlan la exportación de ARN desde el
núcleo de una manera similar. ARNsn, miRNAs, y tRNAs se unen a la misma familia de receptores
de exportación nuclear acabamos de discutir, y que utilizan el mismo gradiente Ran-GTP para
alimentar el proceso de transporte. Por el contrario, la exportación de ARNm fuera del núcleo utiliza
un mecanismo diferente. mRNAs se exportan como conjuntos grandes, que pueden ser tan
grandes como 100 millones de daltons (ver Figura 6-37) y puede contener cientos de proteínas de
unas pocas docenas de diferentes tipos. Estos complejos de mRNA de ribonucleoproteína
(mRNPs) primero muelle en el lado nuclear de la APN, donde son remodelados extensivamente.
Aunque Ran-GTP está implicada indirectamente en la exportación (porque importa las proteínas
que se unen a las moléculas de ARNm), se piensa que la translocación a través de la APN para ser
accionado por la hidrólisis de ATP.Cómo direccionalidad de exportación está asegurada no está
claro. Es probable que las muchas proteínas accesorias atados a fibrillas nucleares y
citoplasmáticos de la APN tienen un papel importante en la remodelación de las mRNPs medida
que pasan a través de los poros, en particular, quitando las proteínas nucleares como la salida
mRNPs en el lado citosólico de la APN, asegurando de esta manera que el transporte es
unidireccional. A la entrada en el citosol, estas proteínas mRNP nucleares se devuelven
rápidamente al núcleo.A la entrada en el citosol, estas proteínas mRNP nucleares se devuelven
rápidamente al núcleo.A la entrada en el citosol, estas proteínas mRNP nucleares se devuelven
rápidamente al núcleo.
Durante la mitosis desmonta el sobre nuclear
La lámina nuclear, situado en el lado nuclear de la membrana nuclear interna, es una malla de
subunidades de proteínas interconectados llamados laminas nucleares. Las laminas son una clase
especial de proteínas de filamentos intermedios (discutido en el capítulo 16) que se polimerizan en
una red bidimensional (Figura 12-17). La lámina nuclear da forma y estabilidad a la envoltura
nuclear, a la que está anclado por unión a ambos los NPC y proteínas transmembrana de la
membrana nuclear interna. La lámina también interactúa directamente con la cromatina, que a su
vez interactúa con las proteínas transmembrana de la membrana nuclear interna. Junto con la
lámina, estas proteínas de la membrana interna proporcionan enlaces estructurales entre el ADN y
la envoltura nuclear.
Cuando un núcleo se desmonta durante la mitosis, los NPCs y lámina nuclear desmontan y los
fragmentos de la envoltura nuclear. El proceso de desmantelamiento es al menos en parte, una
consecuencia de la fosforilación directa de nucleoporins y laminas por la proteína quinasa
dependiente de ciclina (CDK) que se activa en el inicio de la mitosis (discutido en el capítulo 17).
Durante este proceso, algunas proteínas de la APN se convierten une a los receptores nucleares de
importación, que desempeñan una parte importante en el reensamblaje de CPN al final de la
mitosis. envoltura nuclear de membrana proteínas ya no atados a los complejos de poro, lámina, o
la cromatina se dispersan a lo largo de la membrana del ER. La proteína motor dineína, que se
mueve a lo largo de los microtúbulos (discutido en el capítulo 16), participa activamente en
desgarro de la envoltura nuclear de la cromatina. Juntos, estos procesos romper las barreras que
normalmente separan el núcleo y el citosol, y las proteínas nucleares que no están unidos a las
membranas o cromosomas entremezclan completamente con las proteínas de citosol (Figura
12-18).
Más adelante en la mitosis, la envoltura nuclear vuelve a montar en la superficie de los
cromosomas hijos. Además de su papel crucial en el transporte nuclear, la GTPasa Ran también
actúa como un marcador de posición para la cromatina durante la división celular, cuando el
entremezclan nuclear y componentes citosólicos. Debido a Ran-GEF permanece unida a la
cromatina cuando la envoltura nuclear se rompe, moléculas Ran cerca de la cromatina se
encuentran principalmente en su conformación unida a GTP. Por el contrario, las moléculas Ran
más lejos tienen una alta probabilidad de encontrar Ran-GAP, que se distribuye en todo el citosol;
estas moléculas Ran son principalmente en su conformación unida a GDP. Como resultado, los
cromosomas en las células mitóticas están rodeados por una nube de Ran-GTP. Ran-GTP libera
las proteínas de la APN en la proximidad de los cromosomas de los receptores nucleares de
importación. Las proteínas libres de la APN se unen
a la superficie de cromosoma, donde se ensamblan en nuevos NPC. Al mismo tiempo, proteínas de
la membrana nuclear interna y laminas desfosforilado se unen de nuevo a la cromatina. ER
membranas envuelven alrededor de grupos de cromosomas hasta que formen una envoltura
nuclear sellado (Película 12.2). Durante este proceso, los NPC comienzan de forma activa las
proteínas que contienen señales de localización nuclear volver a importar. Debido a que la
envoltura nuclear está inicialmente estrechamente aplica a la superficie de los cromosomas, el
núcleo recién formado excluye todas las proteínas excepto los inicialmente unido a los cromosomas
mitóticos y las que se importan selectivamente a través de NPC. De esta manera, todas las otras
proteínas grandes, incluyendo los ribosomas, se mantienen fuera del núcleo recién ensamblado.
Como se discute en el capítulo 17, la nube de Ran-GTP que rodea la cromatina también es
importante en el ensamblaje del huso mitótico en una célula en división.
Resumen
La envoltura nuclear consiste en un interior y una membrana nuclear externa que son continuas
entre sí y con la membrana del ER, y el espacio entre la membrana nuclear interna y externa es
continua con la luz del RE. moléculas de ARN, que se hacen en el núcleo, y las subunidades
ribosómicas, que se ensamblan allí, se exportan al citosol; por el contrario, todas las proteínas que
funcionan en el núcleo se sintetizan en el citosol y después se importan. El extenso tráfico de
materiales entre el núcleo y el citosol se produce a través de complejos de poro nuclear (NPC), que
proporcionan una vía de paso directo a través de la envoltura nuclear. Las moléculas pequeñas
difundirse pasivamente a través de los NPC, pero macromoléculas grandes tienen que ser
transportados activamente.
Las proteínas que contienen señales de localización nuclear son transportados activamente en el
núcleo a través de CPN, mientras que las proteínas que contienen señales de exportación nuclear
son transportados fuera del núcleo al citosol. Algunas proteínas, como la nuclear
receptores de importación y exportación, Traslado continuamente entre el citosol y el núcleo. El
Ran GTPasa monomérica proporciona tanto la energía libre y la direccionalidad de transporte
nuclear. Células regulan el transporte de proteínas nucleares y las moléculas de ARN a través de
los NPC mediante el control del acceso de estas moléculas a la maquinaria de transporte. Recién
transcrito de ARN mensajero y RNA ribosómico se exportan desde el núcleo como piezas oflarge
complejos de ribonucleoproteína. Dado que las señales de localización nuclear no se quitan,
proteínas nucleares se pueden importar repetidamente, como se requiere cada vez que el núcleo
vuelve a montar después de la mitosis.
EL transporte de proteínas a la mitocondria y los cloroplastos
Las mitocondrias y los cloroplastos (una forma especializada de plástidos en las células de algas y
plantas verdes) son orgánulos dobles-rodeados de membrana. Se especializan en la síntesis de
ATP, utilizando la energía derivada de transporte de electrones y la fosforilación oxidativa en la
mitocondria y de la fotosíntesis en los cloroplastos (discutido en el capítulo 14). Aunque ambos
orgánulos contienen su propio ADN, ribosomas, y otros componentes requeridos para la síntesis de
proteínas, la mayor parte de sus proteínas están codificadas en el núcleo celular y importados
desde el citosol. Cada proteína importada debe llegar al subcompartimento orgánulo particular en el
que funciona.
Hay diferentes subcompartimentos en mitocondrias (Figura 12-19A): el espacio de la matriz interna
y el espacio intermembrana, que es continuo con el espacio crestas. Estos compartimentos están
formados por las dos membranas mitocondriales concéntricos: la membrana interna, que encierra
el espacio de la matriz y forma extensas invaginaciones denominadas crestas, y la membrana
externa, que está en contacto con el citosol. Complejos de proteínas proporcionan límites en las
uniones donde el invaginate crestas y dividir la membrana interna en dos dominios: un dominio de
membrana interna rodea el espacio crestas, y el otro dominio se apoya en la membrana externa.
Los cloroplastos también tienen una membrana externa e interna, que encierran un espacio
intermembrana, y el estroma, que es el cloroplasto equivalente del espacio de la matriz mitocondrial
(Figura 12-19B). Tienen un subcompartimento adicional, el espacio tilacoide, que está rodeado por
la membrana tilacoide. La membrana tilacoide deriva de la membrana interna durante el desarrollo
de plástidos y se pellizca apagado para hacer discontinua con él.Cada uno de los
subcompartimentos en la mitocondria y los cloroplastos contiene un conjunto distinto de proteínas.
Nuevos mitocondrias y cloroplastos son producidos por el crecimiento de los orgánulos
preexistentes, seguido por fisión (discuten en el Capítulo 14). El crecimiento depende
principalmente de la importación de las proteínas del citosol. Las proteínas importados deben ser
transportados a través de una serie de membranas en sucesión y terminan en el lugar apropiado. El
proceso de movimiento de la proteína a través de membranas se llama translocación de proteínas.
En esta sección se explica cómo se produce.
Translocación a la mitocondria Depende de secuencias señal y traslocadores de proteínas
Las proteínas importados en las mitocondrias se toman generalmente hacia arriba desde el citosol
en cuestión de segundos o minutos de su liberación de los ribosomas. Por lo tanto, en contraste
con la translocación de proteínas en el ER, que a menudo tiene lugar simultáneamente con la
traducción por un ribosoma atracado en la membrana del ER rugoso (descrito más adelante), las
proteínas mitocondriales son primero totalmente sintetizadas como proteínas precursoras
mitocondrial en el citosol y luego trasladadas a la mitocondria mediante un mecanismo post-
traduccional. Una o más secuencias señal directa todas las proteínas precursoras mitocondriales a
su subcompartimento mitocondrial apropiado. Muchas proteínas que entran en el espacio de la
matriz contienen una secuencia señal en su extremo N-terminal que una peptidasa señal elimina
rápidamente después de la importación. Otras proteínas importadas,incluyendo toda la membrana
externa, y muchas proteínas de la membrana interna y el espacio intermembrana, tienen
secuencias de señales internas que no se eliminan. Las secuencias señal son ambos necesarios y
suficientes para la importación y correcta localización de las proteínas: cuando se utilizan técnicas
de ingeniería genética para vincular estas señales a una proteína citosólica, las señales dirigen la
proteína al subcompartimento mitocondrial correcta.
Las secuencias señal que las proteínas precursoras directas en el espacio matriz mitocondrial se
entienden mejor. Todos ellos forman una hélice anfifílica, en la que residuos cargados
positivamente se agrupan en un lado de la hélice, mientras que los residuos hidrofóbicos no
cargados se agrupan en el lado opuesto. Las proteínas específicas de receptores que inician la
translocación de proteínas reconocer esta configuración en lugar de la secuencia de aminoácidos
precisa de la secuencia señal (Figura 12-20).
complejos de proteínas de múltiples subunidades que funcionan como traslocadores proteínas
median el movimiento de proteínas a través de membranas mitocondriales. Los TOM complejas
transferencias de proteínas a través de la membrana externa, y dos TIM complejos (Tim23 y TIM22)
proteínas de transferencia a través de la membrana interna (Figura 12-21). Estos complejos
contienen algunos componentes que actúan como receptores para las proteínas precursoras
mitocondriales, y otros componentes que forman los canales de translocación.
Se requiere que el complejo TOM para la importación de todas las proteínas mitochon-drial núcleo
codificada. Inicialmente transporta sus secuencias señal en el espacio intermembrana y ayuda a
insertar proteínas transmembrana en la membrana externa. proteínas P-barril, que son
particularmente abundantes en la membrana externa, se pasan a un translocador adicional, el
complejo de SAM, que les ayuda a pliegan correctamente en la membrana externa. El complejo
TIM23 transporta algunas proteínas solubles en el espacio de la matriz y ayuda a insertar proteínas
transmembrana en la membrana interna. El complejo TIM22 media la inserción de una subclase de
proteínas de la membrana interna, incluyendo el transportador que se mueve ADP, ATP, y fosfato
en y fuera de la mitocondria. Sin embargo, otro translocador de proteína en la membrana
mitocondrial interna, el complejo de OXA, media la inserción de
aquellas proteínas de la membrana interna que se sintetizan dentro de la mitocondria. También
ayuda a insertar algunas proteínas de la membrana interna importados que son transportadas
inicialmente en el espacio de la matriz por los otros complejos.
Las proteínas mitocondriales precursores se importan como cadenas polipeptídicas de desplegado
Hemos aprendido casi todo lo que sabemos sobre el mecanismo molecular de la importación de
proteínas en las mitocondrias de los análisis de los sistemas de translocación libres de células,
reconstituido, en la que purifica mitocondrias en un tubo de ensayo radiomarcados importación
proteínas precursoras mitocondrial. Al cambiar las condiciones en el tubo de ensayo, es posible
establecer los requisitos bioquímicos para la importación.
proteínas precursoras mitocondriales no se pliegan en sus estructuras nativas después de que se
sintetizan; en cambio, permanecen desplegadas en el citosol a través de interacciones con otras
proteínas. Algunas de estas proteínas que interactúan son proteínas chaperonas generales de la
familia hsp70 (discutido en el capítulo 6), mientras que otros están dedicados a proteínas
precursoras mitocondriales y se unen directamente a sus secuencias señal. Todas las proteínas
que interactúan ayudan a evitar que las proteínas precursoras de la agregación o doblando de
manera espontánea antes de que se acoplan con el complejo de TOM en la membrana
mitocondrial externa. Como primer paso en el proceso de importación, los receptores de
importación del complejo TOM unirse a la secuencia señal de la proteína precursor mitocondrial.
Las proteínas que interactúan entonces se despojaron de,y la cadena polipeptídica no plegada es
secuencia-señal alimentada primera-en el canal de translocación.
En principio, una proteína podría alcanzar el espacio de la matriz mitocondrial por cualquiera de
cruzar las dos membranas de una sola vez o cruzando una a la vez. Uno puede distinguir entre
estas posibilidades por enfriamiento de un sistema de importación mitocondrial libre de células para
detener a las proteínas en un paso intermedio en el proceso de translocación. El resultado es que
las proteínas detenidos ya no contienen su secuencia de señal N-terminal, lo que indica que el
N-terminal debe estar en el espacio de la matriz donde se encuentra la peptidasa señal, pero la
mayor parte de la proteína todavía puede ser atacado desde fuera de la mitocondria por enzimas
proteolíticas añadidas externamente. Claramente, las proteínas precursoras pueden pasar a través
de ambas membranas mitocondriales a la vez para entrar en el espacio de la matriz (Figura
12-22).El complejo TOM transporta primero la secuencia de señal a través de la membrana externa
al espacio intermembrana, donde se une a un complejo TIM, abriendo el canal en el complejo. La
cadena de polipéptido se transloca entonces o bien en el espacio de la matriz o se inserta en la
membrana interna.
Aunque el TOM y TIM complejos generalmente trabajan juntos para translocar proteínas
precursoras a través de ambas membranas, al mismo tiempo, pueden trabajar
independientemente. En membranas externas aislados, por ejemplo, el complejo TOM puede
translocar la secuencia señal de proteínas precursoras a través de la membrana. Del mismo modo,
si la membrana exterior se interrumpe experimentalmente en mitocondrias aisladas, el complejo
TIM23 expuesta puede importar de manera eficiente las proteínas precursoras en el espacio de la
matriz.
La hidrólisis de ATP y un potencial de importación de proteínas de membrana de accionamiento en
el espacio de la matriz
transporte direccional requiere energía, que en la mayoría de los sistemas biológicos es
suministrada por la hidrólisis de ATP. ATP combustibles de hidrólisis importación proteína
mitocondrial en dos sitios discretos, uno fuera de las mitocondrias y uno en el espacio de la matriz.
Además, la importación de proteínas requiere otra fuente de energía, que es el potencial de
membrana a través de la membrana mitocondrial interna (Figura 12-23).
El primer requisito para la energía se produce en la etapa inicial del proceso de translocación,
cuando la proteína precursor desplegada, asociado con proteínas chaperonas, interactúa con los
receptores de importación del complejo TOM. Como se ha discutido en el capítulo 6, la liberación
de unión y de polipéptidos recién sintetizados a partir de las proteínas chaperonas requiere la
hidrólisis de ATP.
Una vez que la secuencia de señal ha pasado a través del complejo TOM y está unido a un
complejo TIM, más translocación a través del canal de translocación TIM requiere que el potencial
de membrana, que es el componente eléctrico de la H + electroquímica gradiente a través de la
membrana interna (véase la figura 11-4 ). Bombeo de H + desde el espacio de la matriz al espacio
intermembrana, impulsado por los procesos de transporte de electrones en la membrana interna
(discutido en el capítulo 14), mantiene el gradiente electroquímico. La energía en el electroquímica
H + gradiente a través de la membrana interna, por tanto, no sólo las potencias la mayoría de la
síntesis de ATP de la célula, sino que también impulsa la translocación de las secuencias de señal
de carga positiva a través de los complejos de TIM por electroforesis.
hsp70 mitocondrial también juega un papel crucial en el proceso de importación. Las mitocondrias
que contienen las formas mutantes de la proteína fallan para importar proteínas precursoras. El
hsp70 mitocondrial es parte de un conjunto de proteínas de múltiples subunidades que está unido a
la banda de matriz del complejo TIM23 y actúa como un motor para tirar de la proteína precursora
en el espacio de la matriz. Como su primo citosólica, hsp70 mitocondrial tiene una alta afinidad por
cadenas polipeptídicas desplegadas, y se une fuertemente a una cadena de proteína importado tan
pronto como la cadena emerge del translocador de TIM en el espacio de la matriz. El hsp70
entonces sufre un cambio conformacional y libera la cadena de proteína en un paso dependiente de
ATP, ejerciendo una / fuerza de tracción de trinquete en la proteína que se importa. Este ciclo
impulsado por la energía de unión y liberación posterior proporciona la fuerza motriz final necesario
para completar la importación de proteínas después de una proteína ha insertado inicialmente en el
complejo TIM23 (ver Figura 12-23).
Después de la interacción inicial con hsp70 mitocondrial, muchas proteínas de la matriz importados
se transmiten a otra proteína chaperona, hsp60 mitocondrial. Como se discutió en el Capítulo 6,
hsp60 ayuda a la cadena polipeptídica no plegada para doblar por la unión y la liberación a través
de ciclos de la hidrólisis de ATP.
Las bacterias y las mitocondrias utilizan mecanismos similares para insertar Porins en su
membrana externa
La membrana mitocondrial externa, como la membrana externa de las bacterias Gram-negativas
(ver Figura 11-17), contiene abundantes proteínas P-barril formadores de poros llamados porinas, y
es por lo tanto libremente permeable a los iones inorgánicos y los metabolitos (pero no a la mayoría
proteínas). En contraste con otras proteínas de membrana externa, que están anclados en la
membrana a través de las regiones a-helicoidales transmembrana, el complejo TOM no puede
integrar porinas en la bicapa lipídica. En cambio, las porinas son primero transportadas
desplegadas en el espacio intermembrana, donde transitoriamente se unen proteínas chaperonas
especializadas, que mantienen las porinas de la agregación (Figura 12-24A). A continuación, se
unen al complejo de SAM en la membrana externa, que tanto los inserta en la membrana externa y
les ayuda a pliegan correctamente.
Una de las subunidades centrales del complejo SAM es homóloga a una proteína de membrana
externa bacteriana que ayuda a proteínas inserto P-cañón en la externa bacteriana
membrana desde el espacio periplásmico (el equivalente del espacio intermembrana de las
mitocondrias) (Figura 12-24B). Esta vía conservada para la inserción de las proteínas P-barril
subraya aún más el origen endosimbiótica de las mitocondrias.
Transporte en el espacio interior de la membrana mitocondrial y intermembrana produce a través
de varias rutas
El mismo mecanismo que transporta las proteínas en el espacio de la matriz usando los
traslocadores Tom y Tim23 (ver Figura 12-22) también media la translocación inicial de muchas
proteínas que están destinados a la membrana mitocondrial interna o el espacio intermembrana. En
la ruta de translocación más común, sólo la secuencia de señal N-terminal de la proteína
transportado realmente entra en el espacio de la matriz (Figura 12-25A). Una secuencia de
aminoácido hidrófobo, colocados estratégicamente después de la secuencia señal N-terminal,
actúa como una secuencia de parada de transferencia, evitando

más translocación a través de la membrana interna. El resto de la proteína luego cruza la

membrana externa a través del complejo TOM en el espacio intermembrana; la secuencia señal se
escinde en la matriz, y la secuencia hidrófoba, liberado de TIM23, permanece anclado en la
membrana interna.
En otra ruta de transporte a la membrana interna o el espacio intermembrana, el complejo se
transloca TIM23 inicialmente toda la proteína en el espacio de la matriz (Figura 12-25B). Una
peptidasa señal de matriz a continuación, elimina la secuencia señal N-terminal, la exposición de
una secuencia hidrófoba en el nuevo N-terminal. Esta secuencia de señal guía la proteína al
complejo OXA, que inserta la proteína en la membrana interna. Como se mencionó anteriormente,
el complejo OXA se utiliza principalmente para insertar las proteínas que se codifican y se traducen
en la mitocondria en la membrana interna, y sólo unas pocas proteínas importados utilizan esta vía.
Traslocadores que están estrechamente relacionados con el complejo OXA se encuentran en la
membrana plasmática de las bacterias y en la membrana de los tilacoides de los cloroplastos,
donde se insertan las proteínas de membrana por un mecanismo similar.
Muchas proteínas que utilizan estas vías a la membrana interna permanecen anclados allí a través
de su secuencia de señal hidrófoba (ver Figura 12-25A, B). Otros, sin embargo, se liberan en el
espacio intermembrana por una proteasa que elimina el anclaje a la membrana (Figura 12-25C).
Muchas de estas proteínas escindidas permanecer unidos a la superficie exterior de la membrana
interna como subunidades periféricas de complejos de proteínas que también contienen proteínas
transmembrana.
Ciertas proteínas intermembrana-espaciales que contienen motivos de cisteína se importan por una
ruta aún diferente. Estas proteínas forman un enlace disulfuro covalente transitorio a la proteína
Mia40 (Figura 12-25D). Las proteínas importadas son entonces liberados en una forma oxidada que
contiene enlaces disulfuro intracatenarios. Mia40 se reduce en el proceso, y luego se vuelve a
oxidar mediante el paso de electrones a la cadena de transporte de electrones en la membrana
mitocondrial interna. De esta manera, la energía almacenada en el potencial redox en la cadena de
transporte de electrones mitocondrial es aprovechado para conducir la importación de proteínas.
Las mitocondrias son los sitios principales de la síntesis de ATP en la célula, pero también
contienen muchas enzimas metabólicas, tales como las del ciclo del ácido cítrico. Por lo tanto,
además de las proteínas, las mitocondrias también deben transportar pequeños metabolitos través
de sus membranas. Aunque la membrana externa contiene porinas, que hacen que la membrana
libremente permeable a tales moléculas pequeñas, la membrana interior no lo hace. En su lugar,
una familia de transportadores-metabolito específico transfiere un gran número de pequeñas
moléculas a través de la membrana interna. En células de levadura, estos transportadores
comprenden una familia de 35 proteínas diferentes, los más abundantes de los cuales ATP
transporte, ADP y fosfato. Estas son proteínas transmembrana multipaso, que no tienen secuencias
señal escindibles en sus extremos N-terminales, pero en vez contienen secuencias de señal
internas.Atraviesan el complejo TOM en la membrana externa, y chaperones intermembrana-
espaciales ellos guían al complejo TIM22, que los inserta en la membrana interna por un proceso
que requiere el potencial de membrana, pero no hsp70 mitocondrial o ATP (Figura 12-25E) . Una
partición energéticamente favorable de las regiones transmembrana hidrófobas en la membrana
interior es probable que la unidad este proceso.
Dos proteínas de señal secuencias dirigen a la membrana tilacoide de los cloroplastos
el transporte de proteínas a los cloroplastos se asemeja a los transportes dentro de la mitocondria.
Ambos procesos se producen después de la traducción, utilizan complejos de translocación
separadas en cada membrana, requieren de energía, y el uso de secuencias de señal N-terminal
anfifílicos que se retiran después de su uso. Con la excepción de algunas de las moléculas
chaperonas, sin embargo, los componentes de las proteínas que forman los complejos de
translocación difieren. Además, mientras que las mitocondrias aprovechar el H electroquímica +
gradiente a través de su membrana interna para conducir de transporte, cloroplastos, que tienen un
H electroquímica + gradiente a través de su membrana tilacoide pero no su membrana interna,
utilizan GTP y la hidrólisis de ATP a la importación de energía a través de su
doble membrana. Las similitudes funcionales pueden por lo tanto ser el resultado de la evolución
convergente, lo que refleja los requisitos comunes para la translocación a través de una membrana
doble.
Aunque las secuencias de señal para la importación en los cloroplastos superficialmente se
parecen a los de importación en mitocondrias, las mismas células de plantas tienen ambos
mitocondrias y cloroplastos, por lo que las proteínas deben particionar apropiadamente entre los
dos orgánulos. En las plantas, por ejemplo, una enzima bacteriana puede ser dirigido
específicamente a las mitocondrias si experimentalmente se une a una secuencia señal N-terminal
de una proteína mitocondrial; la misma enzima unida a una secuencia señal N-terminal de una
proteína de cloroplasto termina en cloroplastos. Por lo tanto, los receptores de importación en cada
orgánulo distinguen entre las diferentes secuencias de señal.
Los cloroplastos tienen un compartimiento cerrado membrana extra, el tilacoide. Muchas proteínas
de cloroplastos, incluyendo las subunidades de proteínas del sistema fotosintético y de la ATP
sintasa (discutido en el capítulo 14), se encuentran en la membrana tilacoide. Al igual que los
precursores de algunas proteínas mitocondriales, los precursores de estas proteínas son
trasladadas desde el citosol a su destino final en dos pasos. En primer lugar, que pasan a través de
la membrana doble en el espacio de la matriz (llamado el estroma en los cloroplastos), y entonces
o bien se integran en la membrana tilacoide o translocan en el espacio tilacoide (Figura 12-26A).
Los precursores de estas proteínas tienen una secuencia de señal hidrófoba tilacoide siguiendo la
secuencia señal de cloroplasto N-terminal. Después de la secuencia de señal N-terminal se ha
utilizado para importar la proteína en el estroma,una peptidasa señal estromal lo quita,
desenmascarando la secuencia señal tilacoide que inicia el transporte
través de la membrana tilacoide. Hay por lo menos cuatro rutas por las cuales las proteínas se
cruzan o se integran en la membrana tilacoide, distinguido por su necesidad de diferentes
chaperones del estroma y fuentes de energía (Figura 12-26B).
Resumen
Aunque las mitocondrias y cloroplastos tienen sus propios sistemas genéticos, producen sólo una
pequeña proporción de sus propias proteínas. En su lugar, los dos orgánulos importan la mayor
parte de sus proteínas del citosol, utilizando mecanismos similares. En ambos casos, las proteínas
se transportan en un estado desplegado a través de ambas membranas interior y exterior
simultáneamente en el espacio de la matriz o estroma. Tanto la hidrólisis de ATP y un potencial de
membrana a través de la translocación unidad de membrana interna en las mitocondrias, mientras
que la translocación unidad de hidrólisis de GTP y ATP en cloro-plastos. Las proteínas chaperonas
de la familia hsp70 citosólica mantienen las proteínas precursoras en un estado desplegado, y un
segundo conjunto de proteínas hsp70 en el espacio de la matriz o estroma tira de la cadena de
polipéptido en el orgánulo. Sólo las proteínas que contienen una secuencia de señal específica se
translocan. La secuencia señal puede o bien estar situada en el extremo N-terminal y se escindió
misma después de importación o ser internos y retenido. Transporte en la membrana interna veces
usa una segunda secuencia, señal hidrófobo que es desenmascarado cuando se retira la primera
secuencia señal. En los cloroplastos, la importación del estroma en el tilacoide puede ocurrir por
varias vías, que se distinguen por los chaperones y fuente de energía utilizada.
PEROXISÜMES
Los peroxisomas son diferentes de mitocondrias y cloroplastos de muchas maneras. Más
notablemente, que están rodeados por una única membrana, y que no contienen ADN o ribosomas.
Así, debido a los peroxisomas carecen de un genoma, la totalidad de sus proteínas están
codificadas en el núcleo. Los peroxisomas adquieren la mayor parte de estas proteínas por
importación selectiva desde el citosol, aunque algunos de ellos entran en la membrana de
peroxisoma a través de la ER.
Debido a que no hablamos de los peroxisomas en otro lugar, vamos a hacer una digresión para
considerar algunas de las funciones de esta diversa familia de orgánulos, antes de discutir su
biosíntesis. Prácticamente todas las células eucariotas tienen peroxisomas. Contienen enzimas
oxidativas, tales como la catalasa y la urato oxidasa, en concentraciones tan altas que, en algunas
células, los peroxisomas se destacan en micrografías electrónicas debido a la presencia de un
núcleo de proteína cristaloide (Figura 12-27).
Al igual que las mitocondrias, los peroxisomas son sitios importantes de la utilización de oxígeno.
Una hipótesis es que los peroxisomas son un vestigio de un antiguo orgánulo que lleva a cabo todo
el metabolismo del oxígeno en los antepasados primitivos de células eucariotas. Cuando el oxígeno
producido por las bacterias fotosintéticas acumula primero en la atmósfera, que hubiera sido
altamente tóxico para la mayoría de las células. Los peroxisomas podrían haber bajado la
concentración intracelular de oxígeno, mientras que también la explotación de su reactividad
química para llevar a cabo reacciones de oxidación útiles. De acuerdo con este punto de vista, el
desarrollo posterior de las mitocondrias prestados peroxisomas en gran medida obsoletos porque
muchas de las mismas reacciones que-bioquímicos anteriormente habían sido llevadas a cabo en
los peroxisomas sin producir energía se acopla ahora a la formación de ATP por medio de la
fosforilación oxidativa.Por tanto, las reacciones de oxidación realizadas por los peroxisomas en las
células actuales podrían ser en parte aquellos cuyas funciones no han sido tomado por las
mitocondrias.
Oxígeno peroxisomas Uso molecular y peróxido de hidrógeno a realizarse reacciones de oxidación
Los peroxisomas son llamados así porque por lo general contienen una o más enzimas que utilizan
oxígeno molecular para eliminar los átomos de hidrógeno a partir de sustratos orgánicos
específicos (designados aquí como R) en una reacción de oxidación que produce peróxido de
hidrógeno (H2O2):
RH2 + O2 - R + H2O2
Catatase utiliza el H2O2 generado por otras enzimas en el orgánulo para oxidar una variedad de
otros sustratos, incluyendo ácido fórmico, formaldehído y alcohol por la reacción "peroxidación":
H2O2 + R'H2 ^ R' + 2H2O. Este tipo de reacción de oxidación es particularmente importante en las
células del hígado y el riñón, donde los peroxisomas desintoxican diversas moléculas nocivas que
entran en el torrente sanguíneo. Alrededor del 25% del etanol que bebemos es oxidado a
acetaldehído de esta manera. Además, cuando el exceso de H2O2 se acumula en la célula, la
catalasa convierte en H2O a través de la reacción
2H2O2 ^ 2H2O + O2
Una función importante de las reacciones de oxidación realizadas en los peroxisomas es la
descomposición de moléculas de ácido graso. El proceso, llamado ¡3 oxidación, acorta las cadenas
de alquilo de ácidos grasos secuencialmente en bloques de dos átomos de carbono a la vez,
convirtiendo de este modo los ácidos grasos a acetil CoA. Los peroxisomas luego exportar la acetil
CoA al citosol para su uso en reacciones biosintéticas. En células de mamíferos, la oxidación P se
produce tanto en las mitocondrias y los peroxisomas; en células de levadura y de la planta, sin
embargo, esta reacción esencial se produce exclusivamente en los peroxisomas.
Una función biosintética esencial de peroxisomas animales es catalizar las primeras reacciones en
la formación de ptasmatogens, que son la clase más abundante de los fosfolípidos en la mielina
(Figura 12-28). plasmalógeno deficiencias causan profundas alteraciones en la mielinización de los
axones de las células nerviosas, lo cual es una de las razones por las que muchos trastornos
peroxisomales conducen a la enfermedad neurológica.
Los peroxisomas son inusualmente diversos orgánulos, e incluso en los diversos tipos celulares de
un organismo único que pueden contener distintos conjuntos de enzimas. También se adaptan
notablemente a las condiciones cambiantes. Las levaduras cultivadas en azúcar, por ejemplo,
tienen unos pequeños peroxisomas. Pero cuando algunas levaduras se cultivan en metanol, se
forman numerosos peroxisomas grandes que oxidan metanol; y cuando se cultivan en ácidos
grasos, se desarrollan numerosas grandes peroxisomas que descomponen los ácidos grasos a
acetil CoA por oxidación P.
Los peroxisomas son también importantes en las plantas. Hay dos tipos de peroxisomas de plantas
han sido ampliamente estudiados. Uno es presente en las hojas, en donde participa en la
fotorrespiración (discutido en el capítulo 14) (Figura 12-29A). El otro tipo de peroxisoma está
presente en la germinación de semillas, donde convierte los ácidos grasos almacenados en los
lípidos de semillas en los azúcares necesarios para el crecimiento de la planta joven. Debido a esta
conversión de las grasas a los azúcares se logra mediante una serie de reacciones conocidas
como la cycte gtyoxytate, estos peroxisomas son también llamados gtyoxysomes (Figura 12-29B).
En el ciclo del glioxilato, dos moléculas de acetil CoA producido por la descomposición de ácidos
grasos en el peroxisoma se utilizan para hacer el ácido succínico, que luego sale del peroxisoma y
se convierte en glucosa en el citosol. El ciclo del glioxilato no se produce en células animales,y los
animales son por lo tanto incapaces de convertir los ácidos grasos en las grasas en hidratos de
carbono.
Una secuencia señal corto Dirige la importación de proteínas en peroxisomas
Una secuencia específica de tres aminoácidos (Ser-Lys-Leu) situados en el extremo C-terminal de
muchas funciones proteínas peroxisomales como una señal de importación (véase la Tabla 12-3, p.
648). Otras proteínas peroxisomales contienen una secuencia señal cerca de la N-terminal. Si
cualquiera de secuencia se une a una proteína citosólica, la proteína se importa en los
peroxisomas. Las señales de importación se primera reconocidos por proteínas receptoras solubles
en el citosol. Numerosas proteínas distintas, llamados peroxins, participan en el proceso de
importación, que es accionado por la hidrólisis de ATP. Un complejo de al menos seis peroxins dif
rentes forma un translocador de proteínas en la membrana de peroxisomas. Incluso las proteínas
oligoméricas no tienen que desarrollarse para ser importados. Para permitir el paso de tales
moléculas de carga compacta cruzados, el poro formado por el transportador se piensa que es
dinámico en sus dimensiones,adaptar en tamaño a las moléculas de carga particular para ser
transportado. En este sentido, el mecanismo difiere de la utilizada por las mitocondrias y
cloroplastos. Un receptor de importación soluble, la Pex5 peroxin reconoce la señal de importación
peroxisomal C-terminal. Se acompaña su carga hasta el final en los peroxisomas y, después de la
liberación de carga, ciclos de vuelta al citosol. Después de entregar su carga a la luz del
peroxisoma, Pex5 se somete a la ubiquitinación. Esta modificación se requiere para liberar Pex5 de
nuevo en el citosol, donde se elimina la ubiquitina. Una ATPasa compuesto de Pex1 y Pex6
aprovecha la energía de hidrólisis de ATP para ayudar a liberar Pex5 de peroxisomas.la Pex5
peroxin reconoce la señal de importación peroxisomal C-terminal. Se acompaña su carga hasta el
final en los peroxisomas y, después de la liberación de carga, ciclos de vuelta al citosol. Después
de entregar su carga a la luz del peroxisoma, Pex5 se somete a la ubiquitinación. Esta modificación
se requiere para liberar Pex5 de nuevo en el citosol, donde se elimina la ubiquitina. Una ATPasa
compuesto de Pex1 y Pex6 aprovecha la energía de hidrólisis de ATP para ayudar a liberar Pex5
de peroxisomas.la Pex5 peroxin reconoce la señal de importación peroxisomal C-terminal. Se
acompaña su carga hasta el final en los peroxisomas y, después de la liberación de carga, ciclos de
vuelta al citosol. Después de entregar su carga a la luz del peroxisoma, Pex5 se somete a la
ubiquitinación. Esta modificación se requiere para liberar Pex5 de nuevo en el citosol, donde se
elimina la ubiquitina. Una ATPasa compuesto de Pex1 y Pex6 aprovecha la energía de hidrólisis de
ATP para ayudar a liberar Pex5 de peroxisomas.Una ATPasa compuesto de Pex1 y Pex6
aprovecha la energía de hidrólisis de ATP para ayudar a liberar Pex5 de peroxisomas.Una ATPasa
compuesto de Pex1 y Pex6 aprovecha la energía de hidrólisis de ATP para ayudar a liberar Pex5
de peroxisomas.
La importancia de este proceso de importación y de los peroxisomas se demuestra por la
enfermedad humana hereditaria síndrome de Zellweger, en el que un defecto en la importación de
proteínas en los peroxisomas conduce a una profunda deficiencia peroxisomal. Estos individuos,
cuyas células contienen los peroxisomas "vacías", tienen graves anomalías en el cerebro, el hígado
y los riñones, y mueren poco después del nacimiento. Una mutación en el gen que codifica peroxin
Pex5 hace que una forma de la enfermedad. Un defecto en Pex7, el receptor para la señal de
importación N-terminal, causa una enfermedad peroxisomal más suave.
Durante mucho tiempo se ha debatido si surgen nuevas peroxisomas de los preexistentes por un
crecimiento orgánulo y la fisión-como se mencionó anteriormente para las mitocondrias y los
plástidos-o si se derivan como un compartimiento especializado desde el retículo endoplasmático
(ER). Aspectos de ambos puntos de vista son verdaderas (Figura 12-30). La mayoría de las
proteínas de la membrana peroxisomal se hacen en el citosol y se insertan en la membrana de los
peroxisomas preexistentes, pero otros se integran en primer lugar en la membrana del RE, donde
son empaquetadas en vesículas especializadas precursoras peroxisomales. Nuevas vesículas
precursoras pueden entonces fusionarse entre sí y comenzar a importar peroxisomal proteínas
adicionales, utilizando su propia maquinaria de importación de proteínas para crecer en los
peroxisomas maduras, que pueden someterse a ciclos de crecimiento y la fisión.
Resumen
Los peroxisomas son especializados para llevar a cabo reacciones de oxidación utilizando oxígeno
molecular. Generan peróxido de hidrógeno, que se emplean para fines oxidativos-y contienen
catalasa para destruir el exceso. Al igual que las mitocondrias y los plastos, los peroxisomas son
orgánulos auto-replicantes. Debido a que no contienen ADN o ribosomas, sin embargo, la totalidad
de sus proteínas están codificadas en el núcleo celular. Algunas de estas proteínas se transportan
a través de los peroxisomas vesículas precursoras peroxisomales que brotan de la ER, pero la
mayoría se sintetizan en el citosol y directamente importados. Una secuencia específica de tres
aminoácidos cerca del extremo C-terminal de muchas de las últimas funciones proteínas como una
señal de importación peroxisomal. El mecanismo de importación de proteínas difiere de la de las
mitocondrias y cloroplastos,en que las proteínas incluso oligoméricos son importados desde el
citosol sin desplegar.
El retículo endoplasmático
Todas las células eucariotas tienen una retículo endoplasmático (ER). Su membrana constituye
típicamente más de la mitad del total de la membrana de una célula animal promedio (véase la
Tabla 12-2, p. 643). La ER se organiza en un laberinto en forma de red de ramificación túbulos y
aplanado sacos que se extiende por todo el citosol (Figura 12-31 y de película 12.4). Los túbulos y
sacos de interconexión, y su membrana es continua con la membrana nuclear externa; el
compartimento que encierran por lo tanto también es continuo con el espacio entre las membranas
nucleares interior y exterior. Así, el ER y las membranas nucleares forman una lámina continua que
encierra un espacio interno, llamado el lumen del RE o el espacio ER cisternal, que a menudo
ocupa más de 10% del volumen total de células (véase la Tabla 12-1, p. 643) .
Como se mencionó al principio de este capítulo, el ER tiene un papel central tanto en la biosíntesis
de lípidos y proteínas, y que también sirve como un Ca2 + intracelular tienda que se utiliza en
muchas respuestas de señalización celular (discutido en el capítulo 15). La membrana ER es el
sitio de producción de todas las proteínas transmembrana y lípidos para la mayoría de los
orgánulos de la célula, incluyendo la ER en sí, el aparato de Golgi, lisosomas, endosomas,
vesículas secretoras, y la membrana plasmática. La membrana ER es también el sitio en el que
están hechos la mayoría de los lípidos para mitocondrial y membranas por-oxisomal. Además, casi
todas las proteínas que se secretan a la celda exterior-plus los destinados a la del lumen del ER,
aparato de Golgi, lisosomas o-son entregados inicialmente a la luz del RE.
El ER es estructural y funcionalmente diversas
Si bien las diversas funciones de la ER son esenciales para cada célula, su importancia relativa
varía mucho entre los tipos de células individuales. Para satisfacer las diferentes demandas
funcionales, regiones distintas de la sala de emergencias se convierten en altamente especializado.
Observamos tales especialización funcional cambios tan dramáticos en la estructura de ER, y por lo
tanto diferentes tipos de células pueden poseer característicamente diferentes tipos de membrana
del ER. Uno de los más notables especializaciones ER es el RE rugoso.
Las células de mamíferos empiezan a importar la mayoría de las proteínas en el ER antes de la
síntesis completa de la cadena-ese polipéptido es, importación es un proceso de co-traduccional
(Figura 12-32A). Por el contrario, la importación de proteínas en las mitocondrias, cloroplastos,
núcleos, y peroxisomas es un proceso posterior a la traducción (Figura 12-32B). En el transporte
co-traduccional, el ribosoma que está sintetizando la proteína se une directamente a la membrana
ER, lo que permite un extremo de la proteína a ser trasladadas en el ER mientras que el resto de la
cadena polipeptídica está siendo sintetizado. Estos unido a la membrana capa ribosomas la
superficie de la ER, las regiones que crean denomina retículo endoplasmático rugoso, o RE rugoso;
regiones de ER que carecen unían ribo-somes se llaman retículo endoplásmico liso, o RE liso
(Figura 12-33).
La mayoría de las células tienen regiones escasas de ER liso, y la ER es a menudo parcialmente
lisa y en parte áspera. Áreas de ER liso de la cual vesículas de transporte que transportan proteínas
y lípidos recién sintetizados brotan fuera para el transporte al aparato de Golgi se denominan ER de
transición. En ciertas células especializadas, el RE liso es abundante y tiene funciones adicionales.
Es prominente, por ejemplo, en células que se especializan en el metabolismo de lípidos, tales
como las células que sintetizan hormonas esteroides a partir del colesterol; el RE liso expandido
acomoda las enzimas que hacen que el colesterol y lo modifican para formar las hormonas (ver
Figura 12-33B).
El tipo de célula principal en el hígado, el hepatocito, también tiene una cantidad sustancial de ER
liso. Es el sitio principal de producción de partículas de lipoproteínas, que transportan los lípidos a
través de la corriente sanguínea a otras partes del cuerpo. Las enzimas que sintetizan los
componentes lipídicos de las partículas se encuentran en la membrana de la ER liso, que también
contiene enzimas que catalizan una serie de reacciones para desintoxicar ambos fármacos
solubles en lípidos y diversos compuestos nocivos producidos por el metabolismo. El más
ampliamente estudiado de estas reacciones de desintoxicación se llevan a cabo por la familia del
citocromo P450 de enzimas, que catalizan una serie de reacciones en las que los fármacos o
metabolitos insolubles en agua que de otro modo se acumulan a niveles tóxicos en las membranas
celulares se representan suficientemente-solu- agua ble para salir de la celda y se excreta en la
orina.Debido a que el RE rugoso sí sola no puede albergar suficiente de estos y otros enzimas
necesarias, una parte sustancial de la membrana en un hepatocito normalmente consiste en RE
liso (ver Tabla 12-2).
Otra función crucial importancia de la ER en la mayoría de las células eucariotas es para secuestrar
Ca2 + desde el citosol. La liberación de Ca2 + en el citosol de la ER, y su posterior recaptación, se
produce en muchas respuestas rápidas a extracelular
señales, como se discute en el capítulo 15. Una Ca2 + bomba transporta Ca2 + desde el citosol en
el lumen del ER. Una alta concentración de Ca2 + proteínas de unión a en el ER facilita Ca2 +
almacenamiento. En algunos tipos de células, y tal vez en la mayoría, regiones específicas del ER
están especializadas en Ca2 + almacenamiento. Las células musculares tienen una abundante, RE
liso modificado llamado el retículo sarcoplásmico. La liberación y recaptación de Ca2 + por el
retículo sarcoplásmico gatillo contracción miofibrilla y relajación, respectivamente, durante cada
ronda de la contracción muscular (discutido en el capítulo 16).
Para el estudio de las funciones y la bioquímica de la sala de emergencias, es necesario aislarlo.
Esto puede parecer ser una tarea imposible debido a que el ER es intrincadamente intercalados
con otros componentes del citoplasma. Afortunadamente, cuando los tejidos o las células se
rompen mediante homogeneización, la ER se rompe en fragmentos, que vuelva a sellar para
formar pequeño (~ 100-200 nm de diámetro) cerrado vesículas llamadas microsomas. Microsomas
son relativamente fáciles de purificar. Para el bioquímico, microsomas representan pequeñas
versiones auténticas de la ER, todavía es capaz de translocación de proteínas, la glicosilación de
proteínas (discutido más adelante), Ca2 + captación y liberación, y la síntesis de lípidos. Los
microsomas derivados de ER en bruto están llenos de ribosomas y se llaman áspera
microsomas. Los ribosomas se encuentran siempre en la superficie exterior, por lo que el interior de
la microsoma es bioquímicamente equivalente al lumen del ER (Figura 12-34A).
Muchas vesículas de tamaño similar a los microsomas ásperas, pero que carecen adjunta ribo-
somes, también se encuentran en los homogeneizados celulares. Tales microsomas suaves se
derivan en parte de porciones lisas de la ER y en parte a partir de fragmentos vesiculadas de la
membrana plasmática, aparato de Golgi, los endosomas, y mitocondrias (la relación dependiendo
del tejido). Así, mientras que los microsomas en bruto se derivan claramente de porciones ásperas
de ER, no es fácil separar los microsomas suaves derivados de diferentes orgánulos. Los
microsomas suaves preparadas a partir de células hepáticas o musculares son una excepción.
Debido a las inusualmente grandes cantidades de ER liso o retículo sarcoplásmico,
respectivamente, la mayor parte de los microsomas suaves en homogeneizados de estos tejidos se
derivan de la ER liso o retículo sarcoplásmico.Los ribosomas adheridos a microsomas rugosas
hacen más densos que los microsomas lisos. Como resultado, podemos usar centrifugación de
equilibrio para separar los microsomas rugosas y lisas (Figura 12-34B). Los microsomas han sido
de gran valor en la aclaración de los aspectos moleculares de la función ER, como se discute a
continuación.
Las secuencias de señal ¿Se descubrió por primera vez en proteínas importadas en el áspero ER
El ER captura proteínas seleccionadas desde el citosol a medida que se sintetizan. Estas proteínas
son de dos tipos: las proteínas transmembrana, que son trasladadas sólo en parte a través de la
membrana del ER y se incrustan en ella, y proteínas de agua-sol-uble, que están completamente
translocan a través de la membrana del ER y se liberan en la luz del RE. Algunas de las proteínas
transmembrana de función en el ER, pero muchos están destinados a residir en la membrana
plasmática o la membrana de otro orgánulo. Las proteínas solubles en agua están destinados ya
sea para la secreción o para la residencia en el lumen del ER o de otro orgánulo. Todas estas
proteínas, independientemente de su destino posterior, están dirigidas a la membrana del ER por
una secuencia señal de ER, que inicia su translocación por un mecanismo común.
Las secuencias señal (y la estrategia de secuencia de señal de clasificación de proteínas) fueron
descubiertos por primera vez en la década de 1970 en las proteínas secretadas que se translocan a
través de la membrana del RE como un primer paso hacia su eventual descarga de la célula. En el
experimento clave, los ARNm que codifican una proteína secretada fue traducido por los ribosomas
in vitro. Cuando los microsomas se omitieron de este sistema libre de células, la proteína
sintetizada era ligeramente más grande que la proteína secretada normal. En presencia de
microsomas derivados del ER rugoso, sin embargo, se produjo una proteína del tamaño correcto.
De acuerdo con la hipótesis de la señal, la diferencia de tamaño refleja la presencia inicial de una
secuencia señal que dirige la proteína secretada
a la membrana ER y luego se escinde por una peptidasa señal en la membrana del ER antes de la
cadena polipeptídica se ha completado (Figura 12-35). sistemas libres de células en la que las
proteínas se importan en microsomas han proporcionado procedimientos potentes para la
identificación, purificación, y el estudio de los diversos componentes de la maquinaria molecular
responsable del proceso de importación ER.
Una partícula de señal-Reconocimiento (SRP) Dirige la secuencia señal de ER a un receptor
específico en la membrana Rough ER
La secuencia de señal de ER es guiado a la membrana ER por al menos dos compo-nentes: una
partícula de reconocimiento de señal (SRP), que los ciclos entre la membrana ER y el citosol y se
une a la secuencia señal, y un receptor de SRP en la membrana del ER. El SRP es un complejo
grande; en células animales, se compone de seis cadenas polipeptídicas diferentes unidos a una
única molécula de ARN pequeño. Mientras que la SRP y receptor SRP tienen menos subunidades
en las bacterias, los homólogos están presentes en todas las células, lo que indica que este
mecanismo de proteína de segmentación se levantó temprano en la evolución y se ha conservado.
secuencias de señal de ER variar mucho en secuencia de aminoácidos, pero cada uno tiene ocho o
más aminoácidos no polares en su centro (véase la Tabla 12-3, p. 648). ¿Cómo puede la SRP se
unen específicamente a tantas secuencias diferentes? La respuesta ha llegado a partir de la
estructura cristalina de la proteína de SRP, que muestra que el sitio de la señal de secuencia de
unión es un gran bolsillo hidrófobo revestido por metioninas. Debido metioninas tienen cadenas
laterales no ramificados, flexible, el bolsillo es suficientemente plástica para acomodar las
secuencias de señal hidrófobas de diferentes secuencias, tamaños y formas.
La SRP es una estructura en forma de varilla, que se envuelve alrededor de la subunidad
ribosómica grande, con un extremo de unión a la secuencia señal de ER a medida que emerge del
ribosoma como parte de la cadena de polipéptido recién hecho; los demás bloques de extremo el
sitio de unión en la interfaz entre las grandes y pequeñas subunidades ribosómicas factor de
elongación (Figura 12-36). Este bloque se detiene la síntesis de proteínas tan pronto como el
péptido señal ha surgido del ribosoma. La pausa transitoria presumiblemente da el tiempo
suficiente ribosoma para unirse a la membrana del ER antes de la terminación de la cadena
polipeptídica, asegurando de este modo que la proteína no se libera en el citosol. esta seguridad
dispositivo puede ser especialmente importante para las hidrolasas lisosomales secretadas y, lo
que podría causar estragos en el citosol; células que secretan grandes cantidades de hidrolasas,
sin embargo, tomar la precaución adicional de tener altas concentraciones de inhibidores de la
hidrolasa en su citosol. La pausa también asegura que grandes porciones de una proteína que
podría plegarse en una estructura compacta no se hacen antes de alcanzar el translocador en la
membrana del ER. Por lo tanto, en contraste con la importación postraduccional de las proteínas en
las mitocondrias y cloroplastos, proteínas chaperonas no son requeridos para mantener la proteína
desplegada.
Cuando una secuencia señal se une, SRP expone un sitio de unión para el receptor de SRP (ver
Figura 12-36B, C), que es un complejo de proteínas de transmembrana en la membrana del RE
rugoso. La unión de la SRP a su receptor lleva el complejo de SRP-ribosoma a un translocador de
proteína no ocupada en la misma membrana. La SRP y receptor de SRP son entonces liberados, y
el translocador transfiere la cadena creciente de polipéptido a través de la membrana (Figura
12-37).
Este proceso de transferencia co-traduccional crea dos poblaciones espacialmente separadas de
ribosomas en el citosol. ribosomas unidos a la membrana, que se adjunta a la
lado citosólico de la membrana del ER, se dedican a la síntesis de las proteínas que están siendo al
mismo tiempo transloca en el ER. ribosomas libres, sin ataduras a cualquier membrana, sintetizan
todas las otras proteínas codificadas por el genoma nuclear. Unidas a membrana y ribosomas libres
son estructural y funcionalmente idénticos. Sólo difieren en las proteínas que están haciendo en un
momento dado.
Dado que muchos ribosomas pueden unirse a una única molécula de ARNm, una polyribosome se
forma normalmente. Si el ARNm codifica una proteína con una secuencia señal de ER, la
polyribosome se une a la membrana del RE, dirigido allí por las secuencias señal en múltiples
cadenas polipeptídicas en crecimiento. Los ribosomas individuales asociados con una molécula de
ARNm tales pueden volver al citosol al terminar la traducción y se entremezclan con la piscina de
ribosomas libres. El propio ARNm, sin embargo, permanece unido a la membrana del ER por una
población cambiante de los ribosomas, cada uno de forma transitoria a cabo en la membrana por el
translocador (Figura 12-38).
La cadena polipeptídica pasa por un canal acuoso en el Translocator
Desde hace tiempo se ha debatido si cadenas polipeptídicas se transfieren a través de la
membrana del ER en contacto directo con la bicapa lipídica o a través de un canal en un
translocador de proteínas. El debate terminó con la identificación del translocador, que se muestra
para formar un canal lleno de agua en la membrana a través

que pasa a la cadena polipeptídica. El núcleo del translocador, llamado el Sec61 complejo, se
construye a partir de tres subunidades que son altamente conservadas de las bacterias a las
células eucariotas. La estructura del complejo Sec61 sugiere que una hélices aportados por la
subunidad más grande rodean un canal central a través del cual la cadena polipeptídica atraviesa la
membrana (Figura 12-39). El canal está cerrado por una corta una hélice que se cree que mantener
el translocador cerrado cuando está inactivo y se mueva a un lado cuando se dedica a hacer pasar
una cadena polipeptídica. De acuerdo con este punto de vista, el poro es un canal cerrado dinámico
que se abre sólo transitoriamente cuando una cadena polipeptídica atraviesa la membrana. En un
translocador de inactividad, es importante para mantener el canal cerrado, de modo que la
membrana permanece impermeable a los iones, tales como Ca2 +,que de otro modo sería salirse
de la sala de emergencias. Como una cadena de polipéptido se translocación, se cree que un anillo
de cadenas laterales de aminoácidos hidrófobos para proporcionar una junta flexible para evitar
fugas de iones.
La estructura del complejo Sec61 sugiere que el poro también puede abrir a lo largo de una costura
en su lado. De hecho, algunas estructuras del translocador muestran bajo llave en una
conformación de costura abierta. Esta abertura permite una cadena peptídica de translocación de
acceso lateral en el núcleo hidrófobo de la membrana, un proceso que es importante tanto para la
liberación de un péptido señal escindido en la membrana (véase la figura 12-35) y para la
integración de las proteínas transmembrana en el bicapa, como veremos más adelante.
En las células eucariotas, cuatro complejos SEC61 forman un conjunto translocador de gran
tamaño que puede ser visualizado en los ribosomas ER-ligado después de la solubilización de
detergente de la membrana del ER (Figura 12-40). Es probable que este conjunto incluye otros
complejos de membrana que se asocian con el translocador, tales como enzimas que modifican la
cadena polipeptídica en crecimiento, incluyendo transferasa oligosacárido y la peptidasa señal. El
montaje de un translocador con estos componentes accesorios se llama el translocon.
Translocación a través de la membrana ER no siempre requiere curso elongación de la cadena de
polipéptido
Como hemos visto, la translocación de las proteínas en las mitocondrias, cloroplastos, y
peroxisomas se produce después de la traducción, después la proteína se ha hecho y se libera en
el citosol, mientras que la translocación a través de la membrana ER por lo general ocurre durante
la traducción (co-traduccionalmente). Esto explica por qué los ribosomas se unen a la sala de
emergencias, pero no a otros orgánulos.
Algunas proteínas sintetizadas por completo, sin embargo, se importan en la sala de emergencias,
lo que demuestra que la translocación no siempre requiere traducción en curso. Postraduccional
translocación de proteínas es especialmente común través de la membrana de levadura ER y la
membrana plasmática bacteriana (que es pensado para ser evolutivamente relacionadas con el
ER). Para funcionar en la translocación post-traduccional, el translocador ER necesita proteínas
accesorias que alimentan la cadena de polipéptido en el poro y la unidad de translocación (Figura
12-41). En las bacterias, una proteína de motor de translocación, la SecA ATPasa, se conecta al
lado citosólico de la translocador, donde se somete a cambios conformacionales cíclicos
impulsados por la hidrólisis de ATP. Cada vez que un ATP se hidroliza, una parte de los insertos de
proteína seca en el poro de la trans-localizador, que empuja un segmento corto de la proteína de
pasajeros con ella. Como resultado de este mecanismo de trinquete, la SecA ATPasa empuja
progresivamente la cadena polipeptídica de la proteína transportada a través de la membrana.
Las células eucariotas utilizan un conjunto diferente de proteínas accesorias que se asocian con el
complejo Sec61. Estas proteínas abarcan la membrana del ER y el uso de un pequeño dominio en
el lado luminal de la membrana del RE para depositar una proteína chaperona hsp70-como
(llamado bip, para la proteína de unión) en la cadena de polipéptido a medida que emerge desde el
poro en el lumen del ER. ciclos de ATP-dependiente de la unión de BiP y liberación de la unidad
translocación unidireccional, como se describió anteriormente para las proteínas hsp70 mitocondrial
que tiran de proteínas a través de las membranas mitocondriales.
Las proteínas que se transportan en el ER mediante un mecanismo post-traduccional se liberan
primero en el citosol, donde se unen a proteínas chaperones para prevenir el plegado, como se
discutió anteriormente para las proteínas destinadas a mitocondrias y cloroplastos.
en una sola pasada proteínas transmembrana, una única secuencia de señal de ER interna
permanece en la bicapa de lípido como un membranespanning un Helix
La secuencia de señal de ER en la cadena polipeptídica en crecimiento se piensa para
desencadenar la apertura del poro en el translocador proteína Sec61: después de la secuencia
señal se libera de la SRP y la cadena en crecimiento ha alcanzado una longitud suficiente, el
secuencia señal se une a un sitio específico dentro de la propia poro, abriendo de este modo el
poro. Por tanto, una secuencia de señal de ER es reconocido dos veces: primero por un SRP en el
citosol y después por un sitio de unión en el poro del translocador de proteínas, donde sirve como
una señal de inicio de transferencia (o la puesta en transferencia de péptido) que se abre el poro
(por ejemplo, véase la figura 12-35 de cómo esto funciona para una proteína soluble).
reconocimiento Dual puede ayudar a garantizar que sólo las proteínas apropiadas entran en el
lumen del ER.
Si bien atado en el poro de translocación, una secuencia de señal está en contacto no sólo con el
Sec61 complejo, que forma las paredes de los poros, sino también, a lo largo de la costura lat-eral,
con el núcleo hidrófobo de la bicapa lipídica. Esto se demostró en experimentos de reticulación
químicas en las que la secuencia señal y las cadenas hidrocarbonadas de los lípidos fueron ligados
covalentemente entre sí. Cuando la cadena de polipéptido naciente creció el tiempo suficiente, la
señal peptidasa ER escinde la secuencia de señal y se libera desde el poro en la membrana, donde
se degradó rápidamente a los aminoácidos por otras proteasas en la membrana del ER. Para
liberar la secuencia señal en la membrana, el translocador abre lateralmente a lo largo de la
costura (véanse las figuras 12-35 y 12-39). Por consiguiente, el translocador es cerrada en dos
direcciones:se abre para formar un poro través de la membrana para permitir que las porciones
hidrófilas de las proteínas atraviesan la bicapa lipídica, y se abre lateralmente dentro de la
membrana para permitir que porciones hidrófobas de partición proteínas en la bicapa lipídica.
gating lateral del poro es un paso esencial durante la integración de proteínas transmembrana.
La integración de proteínas de la membrana requiere que algunas partes de la cadena de poli-
péptido se translocan a través de la bicapa lipídica, mientras que otros no lo son. A pesar de esta
complejidad adicional, todos los modos de inserción de las proteínas de membrana son
simplemente variantes de la secuencia de eventos se acaban de describir para la transferencia de
una proteína de sol-uble en el lumen del ER. Comenzamos con la descripción de las tres formas en
las
que las proteínas transmembrana de paso único (ver Figura 10-17) convertido insertados en la
membrana del ER.
En el caso más sencillo, una secuencia de señal N-terminal inicia la translocación, al igual que para
una proteína soluble, pero un segmento hidrófobo adicional en la cadena de polipéptido se detiene
el proceso de transferencia antes de que se transloca toda la cadena de polipéptido. Esta señal de
parada de transferencia de ancla la proteína en la membrana después de la secuencia señal de ER
(la señal de inicio de transferencia) se ha escindido y liberado del translocador (Figura 12-42). El
mecanismo de puerta lateral transfiere la secuencia de parada de transferencia en la bicapa, donde
permanece como un solo una helicoidal del segmento que abarca la membrana, con el N-terminal
de la proteína en el lado luminal de la membrana y el extremo C-terminal en el cara citosólica.
En los otros dos casos, la secuencia señal es interna, en lugar de en el extremo N-terminal de la
proteína. En cuanto a una secuencia de señal de ER N-terminal, la SRP se une a una secuencia
señal interna mediante el reconocimiento de sus características hidrófobas a-helicoidales. La SRP
trae el ribosoma haciendo que la proteína a la membrana del RE, y la secuencia señal de ER a
continuación, sirve como una señal de inicio de transferencia que inicia la translocación de la
proteína. Después de la liberación del translocador, la secuencia de inicio de transferencia interna
permanece en la bicapa lipídica como un solo abarca la membrana de una hélice.
secuencias de inicio de transferencia internos se pueden unir al aparato de translocación en
cualquiera de dos orientaciones; esto a su vez determina qué segmento de proteína (la anterior o el
siguiente de la secuencia de inicio de transferencia) se mueve a través de la membrana hacia el
lumen del ER. En un caso, la proteína de membrana resultante tiene su C-terminal en el lado
luminal (vía A en la Figura 12-43), mientras que en el otro, tiene su extremo N-terminal en el lado
luminal (vía B en la figura 12-43 ). La orientación de la secuencia de inicio de transferencia depende
de la distribución de aminoácidos en las inmediaciones cargadas, como se describe en la leyenda
de la figura.
Las combinaciones de Start-Stop-transferencia y transferir señales de determinar la topología de
proteínas transmembrana multipaso
En las proteínas transmembrana multipaso, la cadena polipeptídica pasa de ida y vuelta
repetidamente a través de la bicapa lipídica hidrófoba como hélices (véase la figura 10-17). Se cree
que una secuencia de señal interna sirve como una señal de inicio de transferencia en estas
proteínas para iniciar la translocación, que continúa hasta que el translocador se encuentra con una
secuencia de parada de transferencia; en proteínas transmembrana de doble paso, por ejemplo, el
polipéptido puede entonces ser liberado en la bicapa (Figura 12-44). En las proteínas multipaso
más complejos, en los que muchas hélices hidrófobas abarcan la bicapa, una segunda secuencia
de inicio de transferencia reinicia translocación más abajo en la cadena polipeptídica hasta la
siguiente secuencia de parada de transferencia provoca la liberación polipéptido, y así
sucesivamente para la posterior puesta en transferencia y detener secuencias -Traslado (Figura
12-45 y de película 12.5).
secuencias señal hidrófoba de inicio de transferencia y parada de transferencia de ambos actúan
para fijar la topología de la proteína en la membrana mediante el bloqueo de sí mismos en la
membrana como que abarcan la membrana hélices; y que pueden hacer esto en cualquier
orientación. Si un hidrófobos dadas funciones de secuencia señal como una puesta en
transferencia o secuencia de parada de transferencia debe depender de su ubicación en una
cadena de polipéptido, ya que su función se puede cambiar cambiando su ubicación en la proteína
mediante el uso de técnicas de ADN recombinante. Así, la distinción entre el inicio de transferencia
y las secuencias de detener-transferir los resultados de la mayoría de su orden relativo en la
cadena polipeptídica en crecimiento. Parece que la SRP comienza el escaneo de una cadena
polipeptídica no plegada para segmentos hidrófobos en su extremo N-terminal y procede hacia el
C-terminal, en la dirección que la proteína se sintetiza.Al reconocer el primero segmento hidrófobo
apropiado para salir de la ribosoma, la SRP establece el "marco de lectura" para la integración de
membrana: después de la SRP inicia la translocación, el translocador reconoce el siguiente
segmento hidrófobo apropiado en la dirección de transferencia como una secuencia de parada de
transferencia de , haciendo que la región de la cadena polipeptídica en el medio para ser roscado a
través de la membrana. Un similar
continúa proceso de exploración hasta que todas las regiones hidrofóbicas en la proteína se han
insertado en la membrana como transmembrana hélices.
Debido a que las proteínas de membrana siempre se insertan desde el lado citosólico de la ER de
esta manera programada, todas las copias de la misma cadena polipeptídica tendrán la misma
orientación en la bicapa lipídica. Esto genera una membrana ER asimétrico en el que los dominios
de proteínas expuestas en un lado son diferentes de aquellos expuestos en el otro lado. Esta
asimetría se mantiene durante los muchos eventos en ciernes y de fusión de membrana que
transportan las proteínas producidas en el ER a otras membranas celulares (discutido en el capítulo
13). Por lo tanto, la forma en la que se inserta una proteína recién sintetizada en la membrana ER
determina la orientación de la proteína en todas las otras membranas también.
Cuando las proteínas se extraen con detergente a partir de una membrana y luego reconstituirse en
vesículas lipídicas artificiales, una mezcla aleatoria de lado de salida derecha y proteínas insideout
orientaciones usualmente resulta. Por lo tanto, la asimetría de proteína observada en las
membranas celulares no parece ser una propiedad inherente de las proteínas, pero en cambio da
como resultado únicamente del proceso por el cual las proteínas se insertan en la membrana del
RE desde el citosol.
ER-proteínas de cola anclada están integrados en la membrana ER mediante un mecanismo
especial
Muchas proteínas de membrana importantes están anclados en la membrana por un
transmembrana C-terminal, hidrófobos una hélice. Estas proteínas de la cola anclada ER incluyen
un gran número de subunidades de la proteína SNARE que guían el tráfico vesicular (discutido en
el capítulo 13). Cuando una cola anclada a insertos de tales proteínas en la membrana del RE
desde el citosol, sólo unos pocos aminoácidos que siguen a la TRANSMEM-brana una hélice en su
lado C-terminal son trasladadas en el lumen del ER, mientras que la mayoría de la proteína
permanece en la citosol. Debido a la posición única de la transmembrana de una hélice en la
secuencia de la proteína, la traducción termina mientras que los aminoácidos C-terminal que
formarán la transmembrana una hélice aún no han emergido del túnel de salida ribosoma. El
reconocimiento por parte de SRP, por tanto, no es posible. Durante mucho tiempo se pensó que
estas proteínas se liberan de los ribosomas y la cola C-terminal hidrófobo particiones
espontáneamente en la membrana del ER.Tal mecanismo no podía explicar, sin embargo, ¿por qué
proteínas de la cola anclada a ER se insertan en la membrana del ER selectivamente y no también
en todas las otras membranas de la célula. Ahora está claro que una maquinaria especializada de
orientación está implicada que es alimentada por la hidrólisis de ATP (Figura 12-46). Aunque los
componentes y detalles difieren, este mecanismo de selección posterior a la traducción es
conceptualmente similar a la proteína de SRP dependiente de la orientación (véase la figura
12-37).este mecanismo de focalización postraduccional es conceptualmente similar a la proteína de
SRP dependiente de la orientación (véase la figura 12-37).este mecanismo de focalización
postraduccional es conceptualmente similar a la proteína de SRP dependiente de la orientación
(véase la figura 12-37).
No todas las proteínas de la cola anclada se insertan en el ER, sin embargo. Algunas proteínas
contienen un anclaje a membrana C-terminal que contiene información de clasificación adicional
que dirige la proteína a las mitocondrias o los peroxisomas. ¿Cómo se ordenan no estas proteínas
sigue siendo desconocido.
Transloca polipéptidos Cadenas Fold y reunir en el lumen del RE rugoso
Muchas de las proteínas en el lumen del ER están en tránsito, en el camino a otros destinos; Otros,
sin embargo, normalmente residen allí y están presentes en altas concentraciones. Estas proteínas
ER residentes contienen una señal de retención ER de cuatro aminoácidos en su extremo
C-terminal que es responsable para la retención de la proteína en el ER (véase la Tabla 12-3 p
648;.. Discutido en el capítulo 13). Algunas de estas proteínas funcionan como catalizadores que
ayudan a las muchas proteínas que se translocan en el lumen del ER para plegar y montar
correctamente.
Una proteína ER residente importante es la proteína disulfuro isomerasa (PDI), que cataliza la
oxidación de grupos sulfhidrilo libres (SH) en cisteínas para formar enlaces disulfuro (SS). Casi
todas las cisteínas en los dominios de proteínas expuestas a ya sea el espacio extracelular o el
lumen de los orgánulos en el secretora y vías endocítica son-con enlaces de disulfuro. Por el
contrario, los enlaces disulfuro se forman sólo muy raramente en los dominios expuestos al citosol,
debido a la ambiente reductor allí.
Otra proteína ER residente es la proteína chaperona BIP. Ya hemos discutido cómo Bip tira de
proteínas después de la traducción en la sala de emergencias a través del translocador Sec61 ER.
Al igual que otros chaperones (discutido en el capítulo 13), bip reconoce proteínas plegadas
incorrectamente, así como subunidades de proteínas que aún no se han reunido en sus complejos
oligoméricos finales. Lo hace mediante la unión a secuencias de aminoácidos expuestas que
normalmente serían enterrados en el interior de cadenas de polipéptido correctamente plegadas o
ensamblados. Un ejemplo de un sitio de BiP de unión es un tramo de alternancia de aminoácidos
hidrófobos e hidrófilos que normalmente serían enterrados en una hoja P con su lado hidrófobo
orientada hacia el núcleo hidrófobo de la proteína plegada.El límite de BiP tanto impide que la
proteína de agregación y ayuda a mantenerlo en el ER (y por tanto fuera del aparato de Golgi y las
partes posteriores de la vía secretora). Al igual que algunos otros miembros de la familia Hsp70 de
proteínas chaperonas, que se unen las proteínas no plegadas y facilitar su importación en
mitocondrias y cloroplastos, bip hidroliza ATP para transporte entre los estados de unión de baja
afinidad Highand, lo que le permite sostener y dejar de lado su proteínas sustrato en un ciclo
dinámico.
La mayoría de las proteínas sintetizadas en el áspero ER están glicosiladas por la adición de un
oligosacárido ligado a N Común
La adición covalente de oligosacáridos a proteínas es uno de los principales funciones biosintéticas
de la ER. Aproximadamente la mitad de las proteínas solubles y unidas a la membrana que se
procesan en el ER-incluyendo los destinados para el transporte al aparato de Golgi, lisosomas,
membrana plasmática, o extracelular espacio-son glicoproteínas que son modificados de esta
manera. Muchas proteínas en el citosol y el núcleo también están glicosilados, pero no con
oligosacáridos: que llevan una modificación azúcar mucho más simple, en el que se añade un solo
grupo N-acetilglucosamina a una serina o treonina de la proteína.
Durante la forma más común de la glicosilación de proteínas en el ER, un oligosacárido precursor
preformado (compuesto de N-acetilglucosamina, manosa y glucosa, y que contiene un total de 14
azúcares) se transfiere en bloque a las proteínas. Debido a que este oligosacárido se transfiere a la
lado- grupo NH2 de la cadena de una asparagina en la proteína, que se dice que está ligada a N o
ligada a asparagina (Figura 12-47A). La transferencia es catalizada por un complejo de enzima
unida a la membrana, una
oligosacariltransferasa transferasa, que tiene su sitio activo expuesto en el lado luminal de la
membrana del ER; esto explica por qué las proteínas citosólicas no están glicosiladas de esta
manera. Una molécula de lípido especial llamado dolicol ancla el oligosacárido precursor en la
membrana del ER. El oligosacárido precursor se transfiere a la asparagina diana en una sola etapa
enzimática inmediatamente después de que el ácido amino ha alcanzado el lumen del ER durante
la translocación de la proteína. El precursor de oligo-sacárido está ligado al lípido dolicol por un
enlace pirofosfato de alta energía, que proporciona la energía de activación que impulsa la reacción
de glicosilación (Figura 12-47B). Una copia de oligosacariltransferasa está asociado con cada
translocador de proteínas, lo que le permite escanear y glicosilar las cadenas polipeptídicas
entrantes de manera eficiente.
El oligosacárido precursor se construye azúcar por azúcar en el lípido dolicol unido a la membrana
y luego se transfiere a una proteína. Los azúcares se activan por primera vez en el citosol por la
formación de nucleótido (UDP o GDP) intermedios -azúcar, que luego donan su azúcar (directa o
indirectamente) al lípido en una secuencia ordenada. forma parte a través de este proceso, el
oligosacárido lípido ligado se da la vuelta, con la ayuda de un transportador, desde el citosol hasta
el lado luminal de la membrana ER (Figura 12-48).
Todo de la diversidad de las estructuras de oligosacáridos ligados a N en glicoproteínas maduras
resulta de la modificación posterior del oligosacárido precursor originales. Aunque todavía en la
sala de emergencias, tres glucosas (ver Figura 12-47) y una manosa se eliminan rápidamente de
los oligosacáridos de la mayoría de las glicoproteínas. Volveremos sobre la importancia de la
glucosa recorte en breve. Este oligosacárido "recorte" o "procesamiento", continúa en el aparato de
Golgi, como veremos en el capítulo 13.
Los oligosacáridos unidos a N son con mucho los oligosacáridos más comunes, siendo encontrado
en 90% de todas las glicoproteínas. Menos frecuentemente, los oligosacáridos están relacionados
con el grupo hidroxilo en la cadena lateral de una serina, treonina, o ácido amino hidroxilisina. Se
añade un primer azúcar de estos oligosacáridos O-ligados en el ER y el oligosacárido a
continuación, se extiende aún más en el aparato de Golgi (ver Figura 13-32).
Oligosacáridos se utilizan como etiquetas para marcar el estado de plegamiento de proteínas
Durante mucho tiempo se ha debatido por qué glicosilación es una modificación tan común de las
proteínas que entran en el ER. Una observación particularmente desconcertante ha sido que
algunas proteínas requieren glicosilación ligada a N para el plegamiento apropiado en el ER, sin
embargo, no parece que la ubicación precisa de los oligosacáridos unidos a la superficie de la
proteína a la materia. Una pista para el papel de la glicosilación en el plegamiento de proteínas
provino de los estudios de dos proteínas chaperonas ER, que se llaman calnexina y calreticulina, ya
que requieren de Ca2 + por sus actividades. Estas chaperonas son proteínas de unión a hidratos
de carbono, o lectinas, que se unen a oligosacáridos sobre las proteínas incompletamente plegadas
y retenerlos en el ER. Al igual que otros acompañantes, evitan de forma incompleta pliegan las
proteínas de la agregación irreversible.Tanto calnexina y calreticulina también promueven la
asociación de proteínas incompletamente plegadas con otra chaperona ER, que se une a las
cisteínas que aún no se han formado enlaces disulfuro.
Calnexina y calreticulina reconocer oligosacáridos unidos a N que contienen un único glucosa
terminal, y que por lo tanto se unen a proteínas sólo después de dos de las tres glucosas en el
oligosacárido precursores se han eliminado durante la glucosa recorte por glucosidasas ER.
Cuando la tercera glucosa se ha eliminado, la glicoproteína se disocia de su acompañante y puede
salir del ER.
Entonces, ¿cómo hacer calnexina y Calreticulin distinguir adecuadamente plegado de las proteínas
plegadas de forma incompleta? La respuesta está en otra enzima ER, una glucosil transferasa que
mantiene la adición de glucosa a los oligosacáridos que han perdido su última glucosa. Se añade la
glucosa, sin embargo, sólo a oligosacáridos que se unen a proteínas desplegadas. Por lo tanto, una
proteína desplegada se somete a ciclos continuos de glucosa de recorte (por glucosidasa) y adición
de glucosa (por glucosil transferasa), manteniendo una afinidad por calnexina y calreticulina hasta
que ha alcanzado su estado completamente plegada (Figura 12-49).
Las proteínas plegadas incorrectamente se exportan desde la sala de emergencia y degradadas en
el citosol
A pesar de toda la ayuda de chaperones, muchas moléculas de proteína (más de 80% para algunas
proteínas) translocados en el ER no logran alcanzar su estado correctamente plegado o
oligomérica. Tales proteínas se exportan desde el ER de nuevo en el citosol, donde se degradan en
proteasomas (discutido en el capítulo 6). En muchos sentidos, el mecanismo de retrotranslocación
es similar a otros después de la traducción
modos de translocación. Por ejemplo, como la translocación a la mitocondria o cloroplastos,
proteínas chaperonas son necesarios para mantener la cadena de polipéptido en un estado
desplegado antes de y durante la translocación. Del mismo modo, se requiere una fuente de
energía para proporcionar direccionalidad a la de transporte y para tirar de la proteína en el citosol.
Por último, un translocador es necesario.
Selección de las proteínas de la ER de la degradación es un proceso difícil: proteínas mal plegadas
o subunidades de la proteína sin montar deben ser degradados, pero los compuestos intermedios
de las proteínas recién hechas plegable no debe. Ayuda en hacer esta distinción proviene de los
oligosacáridos unidos a N, que sirven como temporizadores que miden el tiempo que ha pasado
una proteína en el ER. La guarnición lenta de una manosa particular, en el árbol de oligosacárido
de núcleo por una enzima (una manosidasa) en el ER crea una nueva estructura de oligosacárido
que las lectinas ER-lumenal del aparato retrotranslocación reconocen. Las proteínas que se pliegan
y salida de la ER más rápido que la manosidasa puede eliminar su manosa objetivo, por tanto,
escapan a la degradación.
Además de las lectinas en la ER que reconocen los oligosacáridos, acompañantes y disulfuro
isomerasas de proteínas (enzimas mencionadas anteriormente que catalizan la formación y ruptura
de enlaces SS) asociado con las proteínas que deben ser degradadas. Los chaperones impiden
que las proteínas desplegadas de la agregación, y las isomerasas disulfuro se rompen los enlaces
disulfuro que pueden haberse formado incorrectamente, de modo que una cadena polipeptídica
lineal puede ser translocado de nuevo en el citosol.
complejos translocadoras Múltiples mueven diferentes proteínas de la membrana del RE o lumen
en el citosol. Una característica común es que contienen cada uno una enzima ubiquitina ligasa E3,
que se inserta etiquetas de poliubiquitina a las proteínas desplegadas a medida que emergen en el
citosol, marcándolas para su destrucción. Impulsado por la energía derivada de la hidrólisis de ATP,
una ATPasa hexomeric de la familia de AAA-ATPasas (véase la figura 6-85) tira de la proteína
desplegada a través de la translocador en el citosol. Un N-glicanasa quita sus cadenas de
oligosacáridos en bloque. Guiado por su etiqueta de ubiquitina, el polipéptido desglicosilada se
alimenta rápidamente en proteasomas, donde es degradado (Figura 12-50).
Las proteínas mal plegadas en el RE activar una respuesta a proteínas desplegadas
Las células seguimiento cuidadoso de la cantidad de proteína mal plegada en varios
compartimentos. Una acumulación de proteínas mal plegadas en el citosol, por ejemplo,
desencadena una respuesta de choque térmico (discutido en el capítulo 6), que estimula la
transcripción de genes que codifican chaperones citosólicos que ayudan a replegar las proteínas.
Del mismo modo, una acumulación de proteínas mal plegadas en el RE desencadena una
respuesta de proteína no plegada, que incluye un aumento de la transcripción de genes que
codifican proteínas implicadas en retrotranslocación y la degradación de proteínas en el citosol,
chaperones ER, y muchas otras proteínas que ayudan a aumentar la proteína-plegable capacidad
de la ER.
Cómo hacer proteínas mal plegadas en la señal de ER en el núcleo? Hay tres vías paralelas que
ejecutan la respuesta proteína desplegada (Figura 12-51A). La primera vía, que se descubrió
inicialmente en células de levadura, es particularmente notable. proteínas mal plegadas en el RE
activan una proteína quinasa transmembrana en el ER, llamado IRE1, lo que provoca la quinasa
para oligomerizar y fosforilar sí mismo. (Algunas quinasas de receptores de la superficie celular en
la membrana plasmática se activan en una
de forma similar, como se discute en el capítulo 15.) La oligomerización y autofosforilación de IRE1
activa un dominio endoribonuclease en la parte citosólica de la misma molécula, que escinde una
molécula de ARNm específica citosólico en dos posiciones, la escisión de un intrón. (Esta es una
excepción única a la regla de que los intrones se empalman a cabo mientras que el ARN se
encuentra todavía en el núcleo). Los exones separados se unen entonces por una ligasa de ARN,
generando un ARNm cortado y empalmado, que se traduce para producir una proteína reguladora
activa la transcripción . Esta proteína activa la transcripción de genes que codifican las proteínas
que ayudan a mediar la respuesta de proteína no plegada (Figura 12-51B).
proteínas mal plegadas también activan una segunda quinasa transmembrana en el ER, PERK,
que inhibe un factor de iniciación de la traducción mediante la fosforilación de él, reduciendo de
este modo la producción de nuevas proteínas de toda la célula. Una consecuencia de la reducción
en la síntesis de proteínas es reducir el flujo de las proteínas en el ER, reduciendo así la carga de
proteínas que necesitan ser doblado allí. Algunas proteínas, sin embargo, se convierten
preferentemente cuando traducción factores de iniciación son escasos (discutido en el capítulo 7, p.
424), y uno de estos es un regulador de la transcripción que ayuda a activar la transcripción de los
genes que codifican proteínas activas en la respuesta proteína desplegada.
Finalmente, un tercer regulador de la transcripción, ATF6, se sintetiza inicialmente como una
proteína transmembrana ER. Debido a que está incrustado en la membrana del ER, no puede
activar la transcripción de genes en el núcleo. Cuando las proteínas mal plegadas se acumulan en
el ER, sin embargo, la proteína ATF6 se transporta al aparato de Golgi, donde se encuentra con las
proteasas que escinden fuera de su dominio citosólico, que ahora puede migrar al núcleo y ayudar
a activar la transcripción de genes que codifican proteínas implicadas en la respuesta de la proteína
desplegada. (Este mecanismo es similar al descrito en la figura 12-16 para la activación del
regulador de la transcripción que controla la biosíntesis del colesterol.) La importancia relativa de
cada una de estas tres vías en la respuesta proteína desplegada difiere en diferentes tipos de
células, que permita a cada tipo de célula a adaptar la respuesta a proteínas desplegadas a sus
necesidades particulares.
Algunas proteínas de membrana adquirir una unida covalentemente glicosilfosfatidilinositol (GPI) de
anclaje
Como se discutió en el Capítulo 10, varias enzimas citosólicas catalizan la adición covalente de un
solo grupo de cadena de ácido graso o de prenil a las proteínas seleccionadas. Los lípidos unidos
ayudan directa y se unen estas proteínas a las membranas celulares. Un proceso relacionado es
catalizada por enzimas ER que se unen covalentemente un anclaje de glicosilfosfatidilinositol (GPI)
para el C-terminal de algunas proteínas de la membrana destinadas a la membrana plasmática.
Este ligamiento formas en el lumen del ER, donde, al mismo tiempo, el segmento de
transmembrana de la proteína se escinde (Figura 12-52). Un gran número de proteínas de
membrana de plasma sean modificados de esta manera. Puesto que están unidos al exterior de la
membrana plasmática sólo por sus anclajes GPI,
que pueden en principio ser liberados de las células en forma soluble en respuesta a señales que
activan una fosfolipasa específica en la membrana plasmática. parásitos tripanosomas, por
ejemplo, utilizar este mecanismo para verter su capa de proteínas de superficie ancladas a GPI
cuando es atacado por el sistema inmune. anclajes GPI también se pueden utilizar para las
proteínas de membrana de plasma directa en las balsas de lípidos y por lo tanto se segregan las
proteínas de otras proteínas de la membrana (ver Figura 10-13).
Las ER monta mayoría de bicapa lipídica
La membrana ER es el sitio de síntesis de casi todas las clases principales de la célula de lípidos,
incluyendo tanto los fosfolípidos y colesterol, necesarios para la producción de nuevas membranas
celulares. La principal fosfolípido hecho es la fosfatidilcolina, que puede estar formado en tres
etapas a partir de colina, dos ácidos grasos y glicerol fosfato (Figura 12-53). Cada etapa está
catalizada por enzimas en la membrana del ER, que tienen sus sitios activos que se enfrenta el
citosol, donde todos los metabolitos necesarios se encuentran. Por lo tanto, la síntesis de
fosfolípidos se produce exclusivamente en el folleto citosólica de la membrana del ER. Debido a
que los ácidos grasos no son solubles en agua, que se guiaron de sus sitios de síntesis para el ER
por un ácido graso proteína de unión en el citosol. Después de la llegada en la membrana del ER y
la activación con CoA,aciltransferasas añaden sucesivamente dos ácidos grasos al fosfato de
glicerol para producir ácido fosfatídico. ácido fosfatídico es suficiente como para permanecer en la
bicapa lipídica insoluble en agua; no se puede extraer de la bicapa por el ácido graso proteínas de
unión. Es por lo tanto este primer paso que agranda la bicapa lipídica ER. Los pasos posteriores
determinan el grupo de cabeza de una molécula de lípido recién formado y por lo tanto la
naturaleza química de la bicapa, pero no resultan en el crecimiento de membrana neta. Los otros
dos principales de membrana fosfolípidos-fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina (ver Figura 10-3)
-así como el fosfatidilinositol fosfolípido menor (PI), están todos sintetizado de esta manera.no se
puede extraer de la bicapa por el ácido graso proteínas de unión. Es por lo tanto este primer paso
que agranda la bicapa lipídica ER. Los pasos posteriores determinan el grupo de cabeza de una
molécula de lípido recién formado y por lo tanto la naturaleza química de la bicapa, pero no resultan
en el crecimiento de membrana neta. Los otros dos principales de membrana fosfolípidos-
fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina (ver Figura 10-3) -así como el fosfatidilinositol fosfolípido
menor (PI), están todos sintetizado de esta manera.no se puede extraer de la bicapa por el ácido
graso proteínas de unión. Es por lo tanto este primer paso que agranda la bicapa lipídica ER. Los
pasos posteriores determinan el grupo de cabeza de una molécula de lípido recién formado y por lo
tanto la naturaleza química de la bicapa, pero no resultan en el crecimiento de membrana neta. Los
otros dos principales de membrana fosfolípidos-fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina (ver Figura
10-3) -así como el fosfatidilinositol fosfolípido menor (PI), están todos sintetizado de esta
manera.Los otros dos principales de membrana fosfolípidos-fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina
(ver Figura 10-3) -así como el fosfatidilinositol fosfolípido menor (PI), están todos sintetizado de esta
manera.Los otros dos principales de membrana fosfolípidos-fosfatidiletanolamina y fosfatidilserina
(ver Figura 10-3) -así como el fosfatidilinositol fosfolípido menor (PI), están todos sintetizado de esta
manera.
Debido a que la síntesis de fosfolípidos tiene lugar en el folleto citosólica de la bicapa de lípido ER,
es necesario que haya un mecanismo que transfiere algunas de las moléculas de fosfolípidos
recién formados al folleto lumenal de la bicapa. En bicapas de lípidos sintéticos, lípidos no “flip-flop"
de esta manera (ver Figura 10-10). En el ER, sin embargo, los fosfolípidos se equilibran a través de
la membrana dentro de minutos, que es casi 100.000 veces más rápido que puede ser explicado
por “flip-flop" espontánea Este rápido movimiento trans-bicapa está mediada por un translocador de
fosfolípido mal caracterizado llama un scramblase, que no selectiva equilibra fosfolípidos entre las
dos valvas de la bicapa lipídica (Figura 12-54). Por lo tanto, se cree que los diferentes tipos de
fosfolípidos para ser distribuido por igual entre las dos valvas de la membrana del ER.
La membrana plasmática contiene un tipo diferente de translocador de fosfolípido que pertenece a
la familia de bombas de tipo P (discutido en el capítulo 11). Estos flipasas reconocen
específicamente aquellos fosfolípidos que contienen grupos amino libres en sus grupos de cabeza
(fosfatidilserina y fosfatidiletanolamina-ver Figura 10-3) y los transfiere desde la extracelular para la
valva citosólica, utilizando la energía de hidrólisis de ATP. Por consiguiente, la membrana
plasmática tiene una altamente asimétrica composición de fosfolípidos, que se mantiene
activamente por los flipasas (ver Figura 10-15). La membrana plasmática también contiene un
scramblase pero, en contraste con la escramblasa ER, que siempre está activo, la enzima de la
membrana de plasma se regula y sólo se activa en algunas situaciones, tales como en la apoptosis
y en las plaquetas activadas, donde actúa para abolir el lípido asimetría bicapa; la exposición
resultante de fosfatidilserina en la superficie de las células apoptóticas sirve como una señal para
las células fagocíticas de ingerir y degradar la célula muerta.
El ER también produce colesterol y ceramida (Figura 12-55). Ceramide se hace mediante la
condensación del aminoácido serina con un ácido graso para formar la esfingosina alcohol amino
(ver Figura 10-3); un segundo ácido graso se añade entonces covalentemente para formar
ceramida. La ceramida se exporta al aparato de Golgi, donde sirve como un precursor para la
síntesis de dos tipos de lípidos: se añaden cadenas de oligosacáridos para formar
glicoesfingolípidos (glicolípidos; ver Figura 10-16), y grupos de cabeza fosfocolina se transfieren a
partir de fosfatidilcolina de otras moléculas de ceramida para formar esfingomielina (discutido en el
capítulo 10). Por lo tanto, ambos glicolípidos y esfingomielina se producen relativamente tarde en el
proceso de síntesis de la membrana. Debido a que son producidos por enzimas que tienen sus
sitios activos expuestos a la luz del Golgi,que se encuentran exclusivamente en el folleto
noncytosolic de las bicapas lipídicas que los contienen.
Como se ha discutido en el capítulo 13, la membrana plasmática y las membranas del aparato de
Golgi, lisosomas, endosomas y todos forman parte de un sistema de membrana que se comunica
con el ER por medio de vesículas de transporte, que transfieren ambas proteínas y lípidos. Las
mitocondrias y los plastos, sin embargo, no pertenecen a este sistema, y por lo tanto requieren
diferentes mecanismos para importar proteínas y lípidos para el crecimiento. Ya hemos visto que
importan la mayor parte de sus proteínas del citosol. Aunque las mitocondrias modifican algunos de
los lípidos que importan, que no sintetizan lípidos de novo; En cambio, sus lípidos tienen que ser
importados de la ER, ya sea directamente o indirectamente a través de otras membranas celulares.
En cualquiera de los casos, se requieren mecanismos especiales para la transferencia.
Los detalles de la distribución de la forma de lípidos entre las diferentes membranas es catalizada y
no se conocen regulados. Se cree que las proteínas portadoras solubles en agua llamadas
proteínas de cambio de fosfolípidos (o proteínas de transferencia de fosfolípidos) para transferir
moléculas de fosfolípidos individuales entre las membranas, funcionando como ácido graso de
proteínas que pastorean ácidos grasos a través de la citosol de unión (véase la figura 12-54).
Además, las mitocondrias se ven a menudo en estrecha yuxtaposición con membranas del RE en
micrografías electrónicas, y los complejos de unión específicos se han identificado que retienen la
ER y la membrana mitocondrial externa en las proximidades. Se cree que estos complejos de unión
proporcionan mecanismos de transferencia de lípidos dependientes del contacto específicos que
operan entre estas membranas adyacentes.
Resumen
La extensa red de ER sirve como una fábrica para la producción de casi todos los lípidos de la
célula. Además, una porción principal de la síntesis de proteínas de la célula se produce en la
superficie citosólica de la RE rugoso: prácticamente todas las proteínas destinadas para la
secreción o para la ER en sí, el aparato de Golgi, los lisosomas, los endosomas, y la membrana
plasmática se primera importados en el ER desde el citosol. En el lumen del RE, las proteínas se
pliegan y oligomerizar, se forman enlaces disulfuro, y se añaden los oligosacáridos N-ligados. El
patrón de glicosilación ligada a N se utiliza para indicar el grado de plegamiento de las proteínas de
modo que las proteínas dejan la sala de emergencias sólo cuando están correctamente plegadas.
Las proteínas que no se pliegan correctamente o oligomerizan son trasladadas de nuevo en el
citosol, donde son desglicosilada, polyubiquitylated y degradan en proteasomas.Si proteínas mal
plegadas se acumulan en exceso en el ER, desencadenan una respuesta de la proteína
desplegada, que activa genes apropiados en el núcleo para ayudar a la ER cope.
Sólo las proteínas que llevan una secuencia señal de ER especial se importan en la sala de
emergencias. La secuencia señal es reconocida por una partícula de reconocimiento de señal
(SRP), que se une tanto a la cadena creciente del polipéptido y el ribosoma y los dirige a una
proteína de receptor en la superficie citosólica de la membrana del RE rugoso. Esta unión a la
membrana del RE inicia el proceso de translocación que se enrosca un bucle de poli cadena
peptídica a través de la membrana del ER a través del poro hidrofílico de un translocador de
proteínas.
Solubles proteínas destinadas a la luz del RE, para la secreción, o para su transferencia al lumen
de otros orgánulos pasan-completamente en el lumen del ER. Proteínas transmembrana
destinados a la ER o por otras membranas celulares se translocan parcialmente a través de la
membrana del ER y permanecen anclados allí por uno o más segmentos a-helicoidales que
abarcan la membrana en sus cadenas de polipéptidos. Estas porciones hidrófobas de la proteína
pueden actuar ya sea como inicio de transferencia o señales de parada de la transferencia durante
el proceso de translocación. Cuando un polipéptido contiene múltiple, puesta en transferencia
alterna y detener de transferencia de señales, pasará hacia atrás y adelante a través de la bicapa
varias veces como una proteína de transmembrana multipaso.
La asimetría de la inserción de proteínas y la glicosilación en el ER establece la diferencia entre
caras de las membranas de todos los otros orgánulos que los suministros de ER con proteínas de
membrana.