Practica N°01

Microscopio: Reconocimiento Y Manejo Del Microscopio, Preparado Y Coloración

1. Introducción:

En el presente trabajo vamos a explicar y detallar la correcta utilización del

microscopio, añadiéndole claros ejemplos sobre la estructuración de dicho
instrumento. Trataremos sobre dos breves experimentos en los cuales logramos
evidenciar la presencia de seres microscópicos, células epiteliales labiales,
glóbulos rojos, entre otros.
Etimológicamente la palabra microscopio deriva de dos voces griegas Mikros-
pequeños y Scopium- ver u observar. Se le define pues como un instrumento de
óptica, que se utiliza para la observación de cuerpos pequeños que a simple vista
no se alcanza a distinguir.

2. Objetivos:
Al finalizar la practica el estudiante estará en condiciones de:
 Manejar correctamente el microscopio y reconocer sus partes, así como
observar preparados en fresco y seco.
 Obtener correctamente un preparado en fresco y en seco y usar
adecuadamente los colorantes ácidos, básicos y neutros en las
preparaciones microscópicas.
 Reconocer y diferenciar las bacterias, protozoarios y procariontes; así
como también saber la composición de los glóbulos rojos, entre otros.
 Aprender a realizar preparaciones para ser observadas en el microscopio
3. Materiales:
a. De laboratorio:
 Microscopio compuesto
 Azul de metileno
 Giemsa
 Pizeta
b. Del alumno:
 Agua estancada
 Laminas y laminillas
 Lanceta
 Fósforos
 Gotero de cuello largo
 Enchufe
 Extensión
 Bolsa para basura
 Agua destilada
4. Procedimiento:
A continuación, describiremos detalladamente la observación y reconocimiento
del microscopio, añadiéndole también la realización y explicación de los 03
experimentos realizados.

A. Descripción del microscopio:

a. Parte óptica:

_Ocular: Tiene forma cilíndrica

alargada de color negro, en la
parte frontal tiene un lente plano
y en la parte posterior tiene una
lente convexa.
Además, tiene un aumento de
10x, y es la parte más cercana al
ojo del observador.

_ Objetivos: Cilindros alargados con

diferentes aumentos en seco (0-90x)
y uno de inmersión (100x), todos
tienen un lente en la parte central
que es plano.
Está situado en el revólver, amplia la
imagen, es un elemento vital que
permite ver a través de los oculares.

_ Sistema de Iluminación:
 Espejo: Al ser un microscopio actualizado con el que hemos
trabajado; no podemos visualizar al espejo, ya que este se
encuentra dentro del microscopio.
 Diafragma: Pieza reguladora de luz incidente a la muestra.
Normalmente se encuentra
ubicado justo debajo la
platina. Regulando la luz, es
posible variar el contarte
con el que se muestra.
 Condensador: Elemento
encargado de concentrar los
rayos de la luz proveniente
 del foco a la muestra. En general, los rayos de la luz provenientes
del foco son divergentes.

 Porta filtro: Es el protector

del lente focal.

b. Parte mecanica: Su mision es sotener la parte optica y permitir los

dezplazmientos adecuados para el enfoque e iluminacion de la muestra,
esta constituida por:
 Pie: Pieza que se encuentra en la parte inferior del microscopio y
sobre la cual se montan el resto de elementos. Es la parte más
pesada ya que proporciona equilibrio y estabilidad del
microscopio.
 Brazo: Constituye el esqueleto del microscopio, es la pieza
intermedia que conecta todas sus partes. Principalmente conecta
la superficie donde se coloca la muestra con el ocular.
 Platina: Es la superficie donde se coloca la muestra que se quiere
observar, su posicion vertical con respecto a las lentes del
objetivo se puede regular mediante dos tornillos para generar una
imagen enfocada. La platina tiene un agujero en el centro a traves
del cual se ilumina la muestra.
 Tubo opctico: Es una pieza estructural unida al brazo del
microscopio, que conecta el ocular con los objetivos. Es un
elemnto esencial para mantener una correcta alineacion entre los
elementos opticos.
 Revolver: Es una pieza giratoria donde se montan los objetivoss.
Cada objetivo proporciona un aumento distinto. Permite utilizar
el objetivo mas adecuado para cada aplicación.
 Tornillo micrometrico: Se utiliza para conseguir un enfoque mas
preciso de la muestra, mediante este tornillo se ajusta de forma
lenta y con gran precision el desplazamiento vertical de la platina.
 Tornillo macrometrico: Permite ajustar la posicion vertical de la
muestra respecto al objetivo de forma rapida.
 Tornillo horizontal:
 Tornillo vertical

 Boton de energia: Es aquel que sirve para encender el

microscopio.
c. Iluminacion y enfque: La iluminacion y enfoque son dos condiciones
principales para realizar una buena observacion microscopica. La
 iluminacion se consigue utilizando fuentes luminosas adecuadas, que
pueden ser natural o artificial.
Los rayos de la luz son reflejados por el objeto hacia la muestra
preparada. Cuando los aumentos on mayores, la luz deber ser mas
intensa; en cambio cuando los aumentos son menores, la luz debe ser
menos intensa graduando la abertura del diafragma.
Ya una vez obtenida una iluminacion adecuada, se efectua o realiza el
ajusta adecuado que permite el enfoque perfecto.

B. Coloraciones.- Proceso donde un cuerpo toma color bajo la acción de otra

sustancia llamada colorante y que no se decolora con lavado de agua o
cualquier otro disolvente.
a. Preparado en Fresco
Son aquellos en donde la sustancia que se va a examinar no se encuentra
fija en la lámina, se encuentra sumergida en una sustancia liquida (en
este caso, hemos trabajado con agua estancada). Esta clase de preparados
se observa comúnmente con objetivos a seco, en otras palabras, con
aumentos de 0x a 40x.
b. Preparados en seco
Son aquellos en donde la sustancia que se va a examinar se encuentra fija
en la lámina. La observación de estos preparados se hace con el objetivo
de inmersión, es decir con un aumento de 100x.
Estos preparados se hacen por frotis o por extensión:
 1. Extensión. - Se extiende la sustancia en la lámina, tratando de hacerlo
en el centro.
2. Frotis. - Aquí se utilizan dos laminas portaobjetos y formando un
ángulo de 45° se extiende la sustancia por la lámina.

“Fijación. - Es la parte final donde se mata la célula para poder observar

su morfología.”

PANEL FOTOGRAFICO

Tornillo horizontal y tornillo vertical

Botón de energía

Revolver y Objetivos
 brazo

Tornillos micrométrico y micrométrico

5. Discusión:
a. Preparado en fresco:
1. Limpiar bien una lámina portaobjetos con un pedazo de lino o con papel
para lentes.
2. Con un gotero, colocar una gota de agua estancada en el centro de la
lámina y sobre la muestra la laminilla o cubreobjetos.
3. Efectuar la iluminación del microscopio.
4. Colocar la lámina en la platina del microscopio, fijarla con las pinzas. La
parte que contiene la laminilla y la preparación, deberá estar sobre el
orificio de la platina.
5. Enfocar adecuadamente, hasta visualizar el objeto o muestra.
6. Ajustar la intensidad de la luz con el diafragma.
7. Se gradúa con el tornillo micrométrico para obtener detalles en varios
niveles
8. Las observaciones se empiezan con el objetivo de menor aumento,
procurando enfocarlo bien.

Observación: Evidenciamos la presencia de varios microorganismos,

pero cabe resaltar la existencia y/o presencia de las bacterias, los
protozoarios y los procariontes. Donde los tres presentaban una forma
cilíndrica; sin embargo, las bacterias eran de menor tamaño, mientras que
 los protozoarios eran un tamaño medio, y los procariontes presentaban
un movimiento además eran de gran tamaño.

b. Preparado en seco:
_Coloración Simple. - Cuando se emplea un solo colorante, ácido o básico.
1. Extensión o frotis: Sustancia examen, mucosa labial
2. Colorear por 3’, con un colorante acido o básico (en este caso,
utilizamos el azul de metileno).
3. Lavar en agua corriente hasta que salga incolora.
4. Observar a objetivo a menor y mayor aumento (40x y 100x)

Observación: En este experimento logramos observar la presencia de

una sola célula epitelial de la mucosa labial debido a la poca
sustancia extraída, la cual tenía una forma de ovoide de gran tamaño.
Hemos podido realizar la observación gracias a la ayuda del azul de
metileno que al colorear la sustancia nos permitió poder identificar
los microorganismos presentes.

_Coloración neutra. - Cuando se emplea un colorante que se va a disociar en

su parte acida y básica.
1. Con una lanceta estéril realizar una punción en el dedo índice.
2. Frotis: Sustancia examen, sangre
3. Colorear y dejar reposar 3’: Colorante giemsa
4. Lavar con agua destilada
5. Observar a objetivo a mayor aumento (100x).

Observación: Hemos podido observar diversos tipos de organismos

microscópicos presentes en la sangre; logrando identificar con
certeza los glóbulos rojos que presentaban un color medio morado
rojizo debido a la presencia del colorante, la forma que estos
presentaban eran como tipo florecillas en donde se observaban el
tejido sanguíneo
 GLOBULOS ROJOS SIN
COLORANTE

GLOBULOS ROJOS CON

COLORANTE (GIEMSA)

6. Cuestionario:
1. ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio óptico y un microscopio electrónico?
2. ¿Por qué se utiliza el aceite de cedro en la observación con los objetivos de
inmersión?
3. ¿Qué tipo de imagen da el ocular y el objetivo?
4. ¿Cómo se calcula el número de aumentos de una muestra? Ejemplos.
5. Comparar la información del microscopio óptico con el microscopio electrónico.
6. ¿Qué pasos se siguen para realizar una coloración de Gram?
7. Para observar plasmodium falciparum, ¿Qué tipo de preparado emplearía?
8. Diferencias entre coloración de Gram positivo y negativo.
7. Conclusiones:
 Al finalizar la clase, hemos logrado reconocer y diferenciar las partes de la
estructura del microscopio compuesto. Así como sus funciones.
 Poder diferenciar los diferentes tipos de microrganismos compuestos y simples.
 Hemos llegado a la conclusión de que en nuestro ambiente existen o se
presentan diferentes tipos de seres que no se visualizan y que solo pueden ser
observados con instrumentos especializados, como el microscopio.
 Instrumentos
utilizados en el
laboratorio

Microscopio
Compuesto
utilizado para
la observación