UNIVERSIDAD DE SUCRE - FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

ASIGNATURA. BIOQUIMICA
DOCENTES. Q.F. RINA MARTINEZ CARDEÑO - PhD NERLIS PAJARO

PRACTICA Nº 10
DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS

1. OBJETIVO:
 Caracterizar proteínas en la solución de albúmina mediante ensayos
químicos con reactivos específicos

2. INTRODUCCIÓN

Proteína, cualquiera de los numerosos compuestos orgánicos constituidos por

aminoácidos unidos por enlaces peptídicos que intervienen en diversas funciones
vitales esenciales, como el metabolismo, la contracción muscular o la respuesta
inmunológica.

Las moléculas proteicas van desde las largas fibras insolubles que forman el tejido
conectivo y el pelo, hasta los glóbulos compactos solubles, capaces de atravesar la
membrana celular y desencadenar reacciones metabólicas. Tienen un peso
molecular elevado y son específicas de cada especie y de cada uno de sus órganos.
Se estima que el ser humano tiene unas 30.000 proteínas distintas, de las que sólo
un 2% se ha descrito con detalle. Las proteínas sirven sobre todo para construir y
mantener las células, aunque su descomposición química también proporciona
energía, con un rendimiento de 4 kilocalorías por gramo, similar al de los hidratos
de carbono

3. MATERIALES Y REACTIVOS:
Tubos de ensayo, espátula, Beacker, Baño de María, plancha de calentamiento,
pinzas para tubo de ensayo, gradilla, Agua, Reactivo de Biureth, HNO3 concentrado,
alcohol absoluto, Solución de NaOH al 10%,

4. PROCEDIMIENTO
Preparación de la muestra
En un beacker de 100 mL coloque la clara de un huevo y adicione agua hasta
completar un volumen aproximado de unos 80 mL, mezcle la clara con el agua con
ayuda de un agitador y utilice esta solución para la realización de los diferentes
ensayos

Reacción Xantoproteica: En un tubo de ensayo adicione 2 mL de la solución de

ovoalbúmina y enseguida 5 gotas de HNO3 [ ], observar y explicar los cambios
observados por la adición del ácido a la proteína.
UNIVERSIDAD DE SUCRE - FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ASIGNATURA. BIOQUIMICA
DOCENTES. Q.F. RINA MARTINEZ CARDEÑO - PhD NERLIS PAJARO

Reacción de Biuret: En un tubo de ensayo adicione 2 mL de la solución de

ovoalbúmina y 1 mL del reactivo de Biuret. Anote las observaciones.

Solubilidad en etanol: En un tubo de ensayo adicione 2 mL de la solución de

ovoalbúmina y 3 mL de etanol. Observe lo ocurrido.

Desnaturalización: Tome tres tubos de ensayo, agregue 1 mL de solución de

ovoalbúmina y luego rotúlelos y proceda de acuerdo con el siguiente esquema

TUBO Nº Condición
A Calentamiento hasta coagulación
B 1 gota de HCL [ ]
C 1 gota de NaOH

Anote sus observaciones

5. CUESTIONARIO
 Define que es punto isoeléctrico de una proteína y que utilidad tiene este
 Describa el fundamento de la electroforesis y la cromatografía como método
de estudio de las proteínas y su utilidad en el campo de la medicina.
 Consulte de que manera se hace la determinación de proteínas en el
laboratorio clínico. Qué utilidad tiene esto como prueba diagnostica y cual es
el fundamento del método.

6. BIBLIOGRAFIA
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA MÉDICA. 2017.
Universidad Regional del Suroeste. Fecha de acceso: 08 de agosto de 2018.
Disponible en: http://www.urse.edu.mx/wp-content/uploads/2017/07/MANUAL-DE-
PR%C3%81CTICAS-DE-BQM-2017-2018.pdf
UNIVERSIDAD DE SUCRE - FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ASIGNATURA. BIOQUIMICA
DOCENTES. Q.F. RINA MARTINEZ CARDEÑO - PhD NERLIS PAJARO

PRACTICA Nº 11
ENZIMAS

1. OBJETIVO:
 Analizar los factores que afectan la velocidad de reacciones catalizadas por
la enzima catalasa

2. INTRODUCCIÓN
Todas las enzimas son proteínas globulares que se combinan con otras sustancias,
llamadas cofactores o grupos prostéticos, lo que las convierte en proteínas
conjugadas, para catalizar las numerosas reacciones químicas del organismo.

Las enzimas poseen un sitio activo en forma de hendidura donde posee los grupos
químicos específicos que reaccionan con el sustrato para generar un producto.
Estas moléculas, son las principales responsables del metabolismo y de su
regulación, tienen puntos catalíticos a los cuales se acopla el sustrato igual que una
mano a un guante para iniciar y controlar el metabolismo en todo el cuerpo.

3. MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, gradilla, Beacker, Baño de María, plancha de calentamiento,
pinzas para tubo de ensayo, gradilla, Agua, NaOH, HCl, H2O2, Cuchilla e hígado

4. PROCEDIMIENTO

El pH y la Actividad enzimática
Tome tres tubos de ensayo, agregue en cada uno una pequeña porción de hígado
y márquelos como ABC.
TUBO A: No se le adiciona nada
TUBO B: 2 mL de Solución de NaOH 1M
TUBO C: 2 mL de HCL 1 M
Mezclar bien el contenido de todos los tubos, adicionar a cada tubo 2 mL de H2O2.
Anote sus observaciones.

Influencia de la temperatura en la actividad de la amilasa

Tome 4 tubos de ensayo y agréguele una pequeña porción de hígado y distribúyalos
así:
UNIVERSIDAD DE SUCRE - FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ASIGNATURA. BIOQUIMICA
DOCENTES. Q.F. RINA MARTINEZ CARDEÑO - PhD NERLIS PAJARO

TUBO 1. Mezcla de agua y hielo por 5 min

TUBO 2: Temperatura ambiente por 5 min
TUBO 3: Baño de maría a 38ºC por 5 min
TUBO 4: Calentamiento a ebullición por 5 min
A cada tubo adicione 2 mL de H2O2. Anote sus observaciones.

5. CUESTIONARIO
1. Cuál es el pH óptimo para la actividad de la catalasa
2. Muestre con ejemplos la aplicación clínica de las enzimas
3. Consulte acerca de las aplicaciones clínicas de las enzimas
4. ¿Qué utilidad diagnóstica tiene el uso de las enzimas?

6. BIBLIOGRAFIA

BOHINSKI, R. C. Bioquímica, Bogotá. Fondo Educativo Interamericano

BOYER RODNEY. Conceptos de Bioquímica. Internacional Thompson Editores.

DEVLIN T. M. Bioquímica con Aplicaciones Clínicas. Editorial Reverté, S. A.

LEHNINGER, A. L. Bioquímica. Ediciones Omega.

MURRAY R. Granner, Mayes y Rodwell. Bioquímica de Harper. Editorial El Manual

Moderno.

LOZANO, J. Galindo J. García. M, Peñafiel. F solano. Bioquímica y Biología

Molecular para Ciencias de la Salud. Mc Graw – Hill Interamericana.

PEÑA, ARROYO, GOMEZ, TAPIA, GOMEZ. Bioquímica. Limusa Noriega Editores

ROSKOSKI ROBERT. Bioquímica. Mc Graw - Hill Interamericana.

STRYER, L. Bioquímica. Editorial Reverté.