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1. Objetivos
Aprender y hacer uso de los métodos de cromatografía por columna y capa fina
Caracterizar al disolvente y a la capa adsorbente que permita obtener resultados
óptimos.
Comprobar mediante la separación la polaridad de cada componente de los
compuestos
Identificación de los compuestos naturales que se presentan en la experiencia.
2. Fundamento Teórico
a. La clorofila
Tipos de Clorofila:
Otros tipos de Clorofila son la clorofila C1y C2 que aparecen en algunas algas rojas y
en algunas más primitivas. La clorofila D es más exclusiva, apareciendo en la
cianobacteria (Acaryochloris marina) y una alga marina.
b. Los carotenoides
Los carotenoides son pigmentos liposolubles naturales que son sintetizados por las
plantas, algas y bacterias fotosintéticas. Los carotenoides son las fuentes de los
colores amarillo, naranja y rojo de muchas plantas, p. ej., el color rojo y anaranjado
de las naranjas, los tomates y las zanahorias y el amarillo de muchas flores.
Los carotenoides se pueden clasificar en general en dos tipos:
Carotenos, p. ej., el beta caroteno y el licopeno,
Xantofilas, p. ej., la luteína y la zeaxantina.
De esta forma tenemos esas bandas amarillentas por debajo, unas bandas
verdes encima de éstas, otra banda verde más intenso y una banda amarilla
arriba del todo.
3. Datos
Tabla 1 Propiedades del n-hexano
Propiedad
Punto de ebullición 69 °C
Punto de fusión -95°C
Densidad relativa respecto al agua 0.7
Solubilidad en agua 0.0013
Presión de vapor 17 kPa
Punto de inflamación -22 °C
Temperatura de autoignición 225 °C
Inflamable Altamente
Explosiva En mezclas
vapor / aire
Reacciona
Liquido Incolora
Volátil
Propiedad
Aspecto Liquido, incoloro
Punto de ebullición 56.5 °C
Punto de fusión -94 °C
Punto de inflamación -20 °C
Presión de vapor 233 hPa
Toxicidad 5800 mg/kg
Propiedad
Color Blanco
Olor Inodoro
Solubilidad Insoluble en agua
Estabilidad Temperaturas ambientales
Toxicidad No se considera peligroso
Reactividad No va a polimerizar
4. Diagrama de procesos
Aquí se observa
El agregado del Recolección del a la clorofila de
compuesto pigmento un color verde
orgánico para la amarillo al inicio oscuro. El cual
separación de los del descenso y el nos indica mayor
componentes concentrado. concentración
del tipo a
Preparación de papilla Adición de la papilla Calentamiento a T°
(silica de gel) en las placas constante
Preparación del
Enfriamiento a T° disolvente y añadido
ambiente Insertar las placas en
en un vaso de 250 mL
el vaso de 250 mL
a) Resultados obtenidos
- Para la relación de n-hexano puro
Componente Relación de
desplazamiento
Amarillo 9.9 ∗ 10−2
Componente Relación de
desplazamiento
Verde 0.1754
Gris oscuro 0.2631
Amarillo 0.9649
b) Observaciones
En la preparación de la silica de gel se observa que al añadir al solido una
cantidad pequeña de agua se muestra una formación de una masa viscosa, así
como el levantamiento de polvillo, la consistencia de la masa disminuye con la
adición del agua haciéndose una mezcla acuosa flexible. La cual es añadida a
unas pequeñas placas de vidrio de tal manera que resulte una capa uniforme
sin grumos. Luego de ello se lleva a la estufa de tal manera que se obtendrá
que la capa de gel se adhiere a la placa volviéndola una masa sólida. Se coloca
dos gotas de la muestra de pigmentos de tal manera que tenga una buena
concentración. Se continua con la adición de soluciones en vasos que incluyen
papel filtro del cual se observa que las soluciones suben por las paredes del
papel humedeciéndolos, entonces se inserta las placas en estos vasos y se
observa que luego de unos minutos se ve la formación de puntos coloreados
sobre la placa con separaciones entre ellas.
Notamos que la parte verde que no descendió se disolvió en cierta parte pero
permanece en la parte superior.
Al agregar hexano-diclorometano empezó a descender lentamente el color
verde quedando la parte superior poco a poco transparente y sin rastro del
compuesto orgánico. Se recolecto el color verde oscuro.
Al agregar acetona observamos un verde más claro que desciende también es
recolectado para nuestro dato
c) Explicaciones
Se usa la silica de gel como absorbente debido a que es inerte con la muestra y
no actúa como catalizador en reacciones de descomposición. El absorbente
funciona debido a que interacciona con las sustancias mediante dipolo-dipolo
o por enlace de hidrogeno si lo presenta. Se puede usar otro tipo de
absorbentes, pero tiene que permitir separar sustancias más polares. Cuando
se hace uso de los solventes que funcionaran como la fase móvil este
ascenderá por capilaridad a través del absorbente, se produce un reparto
diferencial de los productos presentes entre el disolvente y el adsorbente.
La retención se puede explicar en base a la competencia que se establece
entre el soluto a separar y la fase móvil por adsorberse a los centros activos
polares de la fase estacionaria. Así, las moléculas de soluto se encuentran
adsorbidas en la fase estacionaria y a medida que se produce la elución van
siendo desplazadas por la fase móvil. La retención y la selectividad en la
separación dependen de los valores respectivos de las constantes de los
diferentes equilibrios químicos se toma en cuenta la polaridad del compuesto
y la naturaleza del disolvente.
6. Cálculos
distancia recorrida por el compuesto
𝑅𝑓 =
distancia recorrida por el solvente
0.5
Componente amarillo= 5.5 = 9.9 ∗ 10−2
b) Para la relación de n-hexano con acetona de 5 a 1
Componente(color) Desplazamiento(cm)
Verde 0.5
Gris oscuro 1.4
Amarillo 4.5
Solvente 5.5
0.5
Componente verde=5.5 = 9.9 ∗ 10−2
1.4
Componente Gris oscuro =5.5 = 0.2545
4.5
Componente Amarillo =5.5 = 0.8181
Componente(color) Desplazamiento(cm)
Verde pálido 1
Verde oscuro 1.5
Amarillo 5.5
Solvente 5.7
1
Componente verde=5.7 = 0.1754
1.5
Componente Gris oscuro = = 0.2631
5.7
5.5
Componente Amarillo = = 0.9649
5.7
7. Bibliografía
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/FISQ/Ficheros/20
1a300/nspn0279.pdf
http://docs-europe.electrocomponents.com/webdocs/0d27/0900766b80d27aae.pdf
https://www.vix.com/es/imj/salud/2010/04/19/propiedades-y-beneficios-de-la-clorofila
https://www.botanical-online.com/clorofila.htm
https://permian.wordpress.com/2007/11/23/cromatografia-en-papel/