DIFUSIÓN

A
 dn
J definición
A dt

Primera ley de Fick gradiente de concentración

 C 2
J D
x
D, coeficiente de difusión
Relación de Stokes-Einstein unidades de D: cm2 s-1
RT en MM ≅ 10-6-10-7 cm2 s-1
D
NAv f
f, coeficiente de fricción
unidades de f: g s-1
en MM ≅ 10-8 g s-1
 Determinación de D
De acuerdo a la segunda ley de Fick

 C 2    2C 2 
  D  2 
 t  x  x  t
Se emplea el modelo de Difusión libre (Tiselius)
x
 C 2 
   f ( x,D)
 x  t
tiempo
 C 2   C 2   C 2   C 2 
       
 x  t  0  x  t 1  x  t 2  x  t

se estiman por
gradiente de absorbancia o gradiente de índice de
refracción (Sistema óptico de Schliëren)
 Instrumental
Antes......
Aparato de electroforesis
de frente móvil de Tiselius
(1930)

Ahora...... Ultracentrífuga (ver sedimentación)

 Metodología x giramos representamos
C 02
A nivel microscópico

x
t= 0 t= t1 t= t2 t= t∞

x
C2 C2 C2 C2

x x x x

C2 x C2 x C2 x C2 x

x x x x
Para cada t, se cumple

∂C2/∂x
 C 2  C 02  x2 4 D t
   e  f ( x,D) H
 x  t 2  D t 
12

A
Se demuestra x
2
 4  D t     4  D t  f ( t)
A 12 A
H  H
2
 A
 
 H
calculado
para cada t pend= 4  D D de la MM en una
sl de cc C 02

t
independizar de C2
 ¿Cómo independizar D de C2 (de las interacciones)?
Empíricamente
D  D0 1  k C2 
Determinando D a diferentes C2 y graficando
D
C02 D
D 0  lim D
C 02,1 D1 C2  0

C 02,2 D2
C 02,3 D3

C02
Ejs.:
molécula M2 D0 20,w107 (cm2/s)
ribonucleasa 13683 10,69
albúmina sérica 66500 6,03
ureasa 480000 3,46
DNA 6000000 0,13
colágeno 345000 0,69
metacrilato 410000 3,95
Factores que afectan f (D) forma
área expuesta al sv
tamaño
f para partículas esféricas y y elipsoides de revolución
Esféricas (Stokes)
R
fesf  6  R fesf ó f0, f en esferas

Elipsoides de revolución (Perrin)  f  f

Se relaciona con el f de una esfera (fesf)  
 fesf  6  R
de igual volumen que el elipsoide
 f  1  b 2
a 
2 12  f 
     F
 esf 
f
b a 23
ln

1 1 b a 2

2 12
 fesf 
ba cociente
friccional,
 
12
 f  a2 b2  1 medida de
 

 fesf  a b2 3 tg 1 a2 b2  1 1 2  asimetría
 2,0
Gráficamente
F prolato

oblato
1,6
1,5

1,1
1,0
1 10 20 30
esferas
a/b
Comparando partículas de igual volumen
4 4 4
Volesfera   R3 Voloblato   a2 b Volprolato 
 ab2
3 3 3
3 3
R3 a  R R3 a  R 
a ;    a 2;  
b b  b b b  b
Ej. R=2 b=1 b=1
a  2,82; a / b  2,82 a  8; a/b 8

f  fesf < foblato  11

, fesf < fprolato  16
, fesf
asimetría
 Interpretación de los valores de f (ó D) en MM
RT
D 
0
0
NAv f(exp)
RT
 f (exp)
0

NAv D 0 valor experimental cuando C2 = 0

0
El cociente friccional (F) en este caso se obtendrá relacionando el f(exp)
con el f de una esfera hipotética de igual volumen hidrodinámico, vh,
que la macromolécula considerada:
0
f(exp)
F
6  Rh
 f(exp)
0
 F 6  Rh

desvío de la forma de la MM
hidrodinámica respecto de una
esfera
 Cuánto vale Rh???
M2 _
v 2,h  v 2,h
NAv
4 M2  _ _

 Rh   v 2   1 v1 
3

3 NAv  
0
Despejando Rh y reemplazando en la expresión de fexp anterior:
0
3 M2  _ _
 fexp depende de:_
f 0
F 6   3  v 2   1 v1  vol. espec. (v 2)
4  NAv  
(exp)
peso molecular (M2)
solvatación (1)
asimetría F
0
Los valores de fexp se los compara con el fmin
¿Cuál es el fmin?
3 M2 _ fmin, aquel que corresponde
fmin  6   3 v2 a una esfera anhidra
4  NAv (F=1,  =0) 1
Haciendo el cociente
_ _
v 2   1 v1
0
f(exp)
 F 3
_
fmin
v2
asimetría solvatación

0
f(exp)
1 MM es una esfera anhidra
fmin
máxima  a
0
f(exp)
1  0 F  
asimetría fmin  b  max
_ _
máxima
0 0
f f(exp) v 2  1 v1
(exp)
1 F 1 3 1,max
fmin solvatación fmin _
v2
asimetría  a
1 y   intermedios
y/o solvatación  b
Ej.
0
molécula M2 D0 107 (cm2/s) f(exp) fmin.
20,w
ribonucleasa 13683 10,69 1,14
albúmina sérica 66500 6,03 1,35
ureasa 480000 3,46 1,20
DNA 6000000 0,13 15,00
colágeno 345000 0,69 6,80
metacrilato 410000 3,95 3,90

Bibliografía
-Physical Chemistry of Macromolecules Charles Tanford

-Physical Biochemistry. Applications to Biochemistry

and Molecular Biology David Freifelder

-Principles of Physical Biochemistry van Holde