Las Proteasas son enzimas que rompen los enlaces

peptídicos de las proteínas. Usan una molécula de agua

para hacerlo y por lo tanto se clasifican como hidrolasas.
Este proceso es conocido como corte proteolítico

Las proteasas actúan rompiendo los enlaces peptídicos de las proteínas para liberar
los aminoácidos. Las proteínas formadas por el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH)
se sintetizan como precursores en largas cadenas proteicas que deben ser cortadas para dar
lugar a los componentes proteicos activos del virus maduro, y en esta fase interviene la
proteasa VIH
 A

Su acción esta regulada por inhibidores ENDÓGENOS y son responsables de la

modulación de la reacción de diversas hormonas y neurotransmisores de naturaleza
peptídica como resultado de la hidrolisis selectiva de ciertos fragmentos de su estructura.

Los inhibidores de proteasas de mayor significancia terapéutica son

Inhibidores de ECA Inhibidores de la proteasa del virus

( enzima convertidora de angiotensina)
de inmunodeficiencia adquirida (VHI).
 Inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina (ECA)
El llamado sistema renina-angiotensina esta constituido por una cascada enzimática
de naturaleza proteolítica, cuyo papel fisiológico es el control de la presión
sanguínea y el balance electrolítico.
La renina es una enzima proteolítica altamente especifica que se libera a la Qué es y cómo
sangre cuando las células yuxtaglomerulares del riñón, que actúan a modo
de sensores, DETECTAN UNA DISMINUCIÓN DE LA PRESIÓN actúa la renina?
SANGUÍNEA.

La renina cataliza la conversión del péptido angiotensinogeno ( una alfa-

globulina que circula en la sangre y que se biosintetiza en hígado y riñón )
en angiotensina I, que carece de actividad

Esta a su vez (angiotensina I) es sustrato de la enzima convertidora de

angiotensina (ECA, biosintetizado en pulmón y riñón ) para dar lugar, por
hidrolisis parcial , al octapeptido angiotensina II.

Este (angiotensina II) es el responsable de la acción

vasoconstrictora y por tanto, del mantenimiento de la presión
sanguínea mediante su interacción con receptores de membrana
específicos localizadados en los vasos sanguíneos.
DETECTA UNA DISMINUCIÓN DE LA PRESIÓN SANGUÍNEA.

Hormona esteroidea
mineralocorticoides,
sintetizada enla zona
glomerular de la corteza
suprarrenal que actúa en la
conservación del sodio, en
la secreción de potasio y en
el incremento de la presión
sanguínea
 Es una proteína plasmática que participa en la
iniciación de coagulación de sangre, y en la
generación del vasodilatador bradiquinina

La bradiquinina es
un péptido fisiológico y
farmacológicamente activo que está
formado por NUEVE aminoácidos.
La bradiquinina causa
vasodilatación por medio de la
secreción de prostaciclinas
 DESARROLLO DE INHIBIDORES SELECTIVOS DEL ECA
El primer compuesto que se identificó como inhibidor selectivo del ECA fue el nonapéptido sintético teprótido,
que es un fragmento de la secuencia de ciertos péptidos aislados del veneno de la serpiente Bothrops
jararaca, originaria de Brasil.

El teprótido es un inhibidor competitivo del ECA, aunque la presencia de cuatro restos de prolina y uno
de acido pirogeglutámico (5-oxoprolina) le proporciona una cierta resistencia frente a la hidrolisis, por
lo que el teprótido no es lo suficientemente resistente como para poder ser administrado por vía oral.

Por consiguiente, el desarrollo de inhibidores selectivos del ECA se centró en el diseño de análogos que
mejorasen la biodisponibilidad del modelo y aunque se consiguió que fueran más eficaces como inhibidores
al incorporar el fragmento terminal Ala-Pro, en vez de Pro-Pro, no resultaron más resistentes frente a la
hidrolisis que la molécula original, sirviendo estos estudios solo como base para el diseño racional de los
inhibidores del ECA con utilidad terapéutica
 • La analogía entre el ECA y ciertas metaloproteasas como la carboxipeptidasa A bovina, permitió
plantear una hipótesis orientada hacia el diseño racional de inhibidores selectivos de este tipo de
enzimas.
Esto PERMITIÓ CONOCER EL MODELO del centro
activo de las carboxipeptidasas, en el que
desempeñan un papel importante los siguientes
elementos:

A) un centro con carga +, responsable de la

formación de un enlace iónico con el resto
anionico del acido carboxílico del sustrato.

B) un centro electrofilico, constituido por un

átomo de Zn2+ que actúa como un acido de Lewis
activando el grupo carbonilo del enlace peptídico a
hidrolizar.
A partir de análogos del teprótido y del conocimiento de que el ECA hidroliza el segundo
enlace peptídico a partir del resto de carboxilato terminal, se postuló el modelo de
centro activo del ECA.
 El cambio del enlace amida hidrolizable por
un enlace carbono-carbono, condujo a una
serie de N-SUCCINILPROLINAS (A, B y C)
que mostraron cierta actividad como
inhibidores competitivos de ECA.

Estos compuestos pueden interactuar con

las zonas complementarias del centro
activo postulado para el ECA, siendo
destacable la interacción entre el átomo de
Zn 2+ y el resto de carboxilato terminal.

Como era previsible, la diastereoselectividad en

la inhibición enzimática puede correlacionarse
con la configuración del centro estereogénico
en la cadena de succinilo.
Entre las diversas N-succinilprolinas, la estructura
A se eligió como cabeza de serie por tratarse del
inhibidor más potente, para mejorar su actividad
se introdujeron otros grupos funcionales capaces
de mejorar la coordinación con el átomo Zn2+, Un
ácido blando del centro activo de la enzima

El cambio de un grupo carboxilo por un grupo

mercapto, una base blanda, condujo al captopril,
un inhibidor selectivo del ECA cien veces más
potente que el prototipo.

El captopril es administrable por vía oral, dada la

resistencia a la hidrólisis del enlace peptídico de
la prolina
 Inhibidores del ECA análogos del
estado de transición

El estado de transición representa el estado de máxima energía del complejo enzima-sustrato de la

reacción, por lo que la elevada afinidad de fármacos diseñados en base a la estructura de este
estado de transición representa una elevada afinidad con el centro activo de la enzima y constituye
uno de los métodos de diseño racional más eficaces del que se dispone, los cuales exigen el
conocimiento previo del mecanismo exacto del proceso catalítico que se pretende inhibir.

Así en el caso de las metaloproteasas, entre las que se encuentra la ECA, el mecanismo de
hidrólisis, ácida de ésteres, implica la formación de un intermedio tetraédrico.
Inhibidores del ECA análogos del
estado de transición
• El FOSINOPRILO (profármaco) es un derivado de un ácido fosfónico que por
activación metabólica (hidrólisis) conduce al compuesto activo: el ácido
fosfínico, el cual presenta una geometría tetraédrica análoga a la del estado de
transición, a la vez que actúa como ligando del átomo de Zn2+ del centro activo
de la enzima.
• Además de los ácidos fosfínicos, otras agrupaciones funcionales de tipo aminoácido,
aminocetona o aminoalcohol, se han incorporado con éxito en el diseño de inhibidores
análogos del estado de transición de metaloproteasas en general y del ECA.
• Una de estas modificaciones es el ENALAPRILO, (profármaco que
requiere la hidrólisis del éster), así como diversas copias terapéuticas.
 INHIBIDORES DE LA PROTEASA DEL VIH
• Las Proteasas del virus de inmunodeficiencia adquirida (VIH) pertenecen a la familia de las
aspartil-proteasas y resultan FUNDAMENTAL en el proceso de replicación del virus del
SIDA, porque su función radica en la hidrólisis de la glicoproteína gp 160 que es un
precursor de otros péptidos de menor tamaño esenciales para la maduración del virus.

Por su papel clave en la replicación vírica, el diseño de inhibidores selectivos de esta

enzima es fundamental en el desarrollo de nuevos fármacos útiles contra el SIDA, por lo
que es esencial el conocimiento de la estructura tridimensional de la enzima, así como la
de varios complejos enzima-inhibidor, permitiendo conocer mejor su mecanismo de acción
Dímero: es una especie química que consiste en dos subunidades
estructuralmente similares denominadas monómeros unidas por enlaces que
pueden ser fuertes o débiles.
 MECANISMO DE HIDRÓLISIS
• El sustrato resulta “anclado” en el centro activo como
consecuencia de los enlaces de H que se establecen
entre los restos de Glicina y de Isoleucina y los grupos
carbonilo contiguos al enlace hidrolizable.

• La estabilización a través de los restos de Isoleucina

requiere de una molécula de H2O adicional.

• En la etapa de hidrólisis del enlace peptídico, dos

restos de Aspartato actúan como base arrancando un
protón de la molécula de H2O estabilizando la especie
tetraédrica que se desarrolla durante el estado de
transición de la reacción.
 La mayor parte de los inhibidores de la proteasa del VIH se basan en análogos del estado
de transición de la etapa de hidrólisis.

Los grupos isósteros (aquellas moléculas o iones con el mismo número de átomos y/o el mismo
número de electrones de valencia) más eficaces son el hidroxietileno y la hidroxietilamina

Son capaces de
mimetizar la
ordenación
tetraédrica del
estado de transición
generado en la
hidrólisis.
 Algunos
inhibidores
selectivos
de la
proteasas
del VIH
diseñados
según los
principios
estudiados

Estos compuestos administrados junto con inhibidores de la transcriptasa reversa del VHI, en forma
de asociaciones representan la aproximación más eficaz de que se dispone para el tratamiento y
control del SIDA.
✓ Surgen como resultado de los esfuerzos por mejorar la baja biodisponibilidad oral que presentan
algunos péptidomiméticos
✓ La estructura dímera simétrica de la proteasa VIH permitió el diseño de nuevos inhibidores basados
en su capacidad para interaccionar de forma complementaria con el centro activo de la enzima.

✓ Ello ha conducido a Inhibidores caracterizados por poseer

elementos de simetría equivalentes a los de la enzima
(simetría C2).
✓ Un ejemplo lo constituyen los análogos del estado de
transición derivados de la ureas cíclicas, en donde el
grupo carbonilo del sistema heterocíclico desempeña el
papel de la molécula de agua ubicada entre los restos de
Isoleucina y los grupos hidroxilo que interaccionan con los
restos de Aspartame del centro activo de la enzima.
 INHIBIDORES DE LAS ESTERASAS
Las ESTERASAS constituyen un grupo de enzimas que catalizan la hidrólisis de ésteres

Un tipo de esterasas son las LIPASAS GASTROINTESTINALES, que catalizan la hidrólisis

de los Triglicéridos como paso previo a su absorción intestinal.

ENZIMAS LIPOLÍTICAS
Que participan en la digestión de
los lípidos

LIPASA
PANCREÁTICA LIPASA CARBOXILESTER
FOSFOLIPASA A2
GÁSTRICA LIPASA
(más importante)
La reducción de
 Las fosfodiesterasas
(PDE) o nucleasas son enzimas hidrola
sas que catalizan la ruptura de
los enlaces fosfodiéster, como por
ejemplo los que se establecen en
los ácidos nucleicos entre la pentosa de
un nucleótido y el grupo fosfato de otro.
Su acción regula la concentración
dentro de las células del AMP cíclico y
del GMP cíclico (nucleótido cíclico
fosfodiesterasas).
Están descritas 5 isoenzimas. En la
actualidad hay fármacos usados
como inhibidores de las fosfodiesterasas
(cafeína, aminofilina, sildenafilo, etc.).
 INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA DE TIPO III

Que se emplean como cardiotónicos por aumentar los niveles de AMPc.

 INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA DE TIPO V
El sildenafilo
• Se trata de un análogo estructural de la cafeína
• Es un inhibidor selectivo de la fosfodiesterasa de tipo V, un tipo específico de fosfodiesterasas
del GMPc, que se localiza en células musculares lisas de los cuerpos cavernosos del pene, por
lo que se emplea en el tratamiento de la disfunción eréctil.
 INHIBIDORES DE LA NEURAMINIDASA
• La Neuraminidasa o Sialidasa es una de las
glicoproteínas de la cubierta de los virus de
la gripe (influenza A y B).

• Esta enzima cataliza la hidrólisis de los

residuos terminales de ácido siálico de los
glicoconjugados y glicolipidos.

• Debido a que la enzima no esta sujeta a

mutaciones se utilizó como diana para el
diseño de inhibidores selectivos como
fármacos antigripales.
Oseltamivir
Inhibe selectivamente las neuraminidasas del virus influenza, importantes para la entrada de
virus en células no infectadas y la liberación de partículas virales recién formadas.

Ácido siálico
Azúcar que se incorpora a proteínas o lípidos durante el proceso de glucosilación en las células.
Confiere carga negativa a las células y actúa como señalizador intercelular. También está
presente en la pared bacteriana. Recibe el nombre de ácido N-acetil-neuramínico.
GRACIAS
GRACIAS