UNIVERSIDAD TÉCNICA DE

COTOPAXI

FACULTAD DE CIENCIAS
AGROPECUARIAS Y RECURSOS
NATURALES

GUÍA DE PRÁCTICA
DE LABORATORIO
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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y
RECURSOS NATURALES
CARRERA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

GUIA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

DATOS INFORMATIVOS

ASIGNATURA: Bioquímica

CICLO: Cuarto

FECHA: 11/06/2018

TEMA: IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS

I. OBJETIVOS:

General

 Demostrar la presencia de biomoléculas en distintos alimentos mediante la utilización

de reactivos de laboratorio.

Específico

 Examinar la presencia de biomoléculas orgánicas como lípidos y proteínas en los

distintos alimentos
 Determinar el color patrón de lípidos y proteínas presentes en los alimentos mediante
la utilización de reactivo Sudán III y Biuret.

II.INTRODUCCIÓN

Las biomoléculas son una parte indispensable para el funcionamiento de los organismos
vivos ya que son importantes para el nacimiento desarrollo y funcionamiento de cada
una de las células que componen los tejidos, órganos y aparatos del cuerpo, la falta de
ellas o la ineficiencia puede provocar problemas de salud. Están compuestas por algunos
elementos que constituyen los tejidos vivos como el carbono, el hidrogeno, el oxígeno,
el nitrógeno, el azufre y el fosforo. (Lopez, S.A)
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Dentro de las biomoléculas encontramos las inorgánicas y las orgánicas; Las inorgánicas
son aquellas que no son formadas por los seres vivos, entre estas se encuentran el agua,
gases y sales y por el contrario las orgánicas son las elaboradas en los diferentes
procesos fisiológicos.

Los lípidos son moléculas formadas principalmente por cadenas lineales de Carbono e
Hidrogeno y tienen como característica principal el ser insolubles en agua, su
clasificación general se basa en la consistencia a temperatura ambiente, de esta manera
están las grasas que son sólidas y los aceites que son líquidos. De la misma manera que
la glucosa es la unidad fundamental de los carbohidratos, en algunos lípidos la unidad
fundamental son ácidos grasos unidos a un glicerol. (Córdoba, 2010)

Según (Córdoba, 2010) Los lípidos son la segunda fuente de energía, y sus funciones
son variadas, se encuentran como barrera física en plantas y animales, son los
responsables de que hayaun equilibrio hídrico y térmico, están presentes como parte
estructural de las membranas celulares y son precursores de hormonas y vitaminas
liposolubles. Algunos ejemplos sonlos triglicéridos, fosfolípidos, ceramidas, colesterol,
testosterona y vitaminas A, D, K y E.

Las proteínas son moléculas de mayor tamaño formadas por aminoácidos, estos
poseenen su estructura química un grupo amino y uno carboxilo unidos mediante un
enlace peptídico; la organización de los aminoácidos puede ser sencilla o formar
estructuras mas complejas; toda proteína en su inicio consta de una secuencia de
aminoácidos dispuestos en forma lineal y va mostrando una mayor complejidad al
encontrar plegamientos continuos de los aminoácidos formando estructuras
tridimensionales conformadas por varias subunidades como es el caso de las enzimas.
(Córdoba, 2010)

La clasificación de las proteínas puede hacerse desde varios puntos de vista, estructural,
morfológica, por su composición o función biológica; todas las proteínas
independientemente de su clasificación son indispensables para los seres vivos.

Algunas de ellas hacen parte estructural de los tejidos, otras como la hemoglobina y
mioglobulina son proteínas que participan en el transporte de oxígeno en sangre y en
músculo respectivamente, de igual manera existen proteínas específicas para el
transporte de electrones en mitocondrias y cloroplastos, y las hay con función de
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catalizadores orgánicos , las cuales se conocen comúnmente como enzimas. (Córdoba,

2010)

Identificación de biomoléculas

En el estudio de las biomoléculas existen diferentes pruebas químicas que permiten

determinar su presencia (pruebas cualitativas, basándose principalmente en sus
propiedades fisico-químicas, como por ejemplo las pruebas colorimétricas. (González,
2006)

Proteínas

La prueba de Biuret es utilizada en la determinación de proteínas, en ella se utiliza el

reactivo Biuret, de color azul, que en presencia de enlaces peptídicos cambia a una
coloración violeta. La reacción Xantoprotéica permite evidenciar la presencia de
proteína de una forma indirecta, pues las proteínas al desnaturalizarse, es decir, perder su
estructura cuaternaria y terciaria precipitan en forma de un coloide fácilmente visible,
para esta prueba es usado el acido nítrico concentrado.

Lípidos

La determinación de lípidos se realiza mediante la prueba de Sudan III, que al igual de la

de polisacáridos con lugol no se trata de una reacción química sino de afinidad por los
grupos de ácidos grasos. Su coloración positiva se torna a un color naranja-rojizo.
(González, 2006)

III. MATERIALES Y MÉTODOS

 20 tubos de ensayo  1 gradilla para tubos

 Un vaso de precipitación de 250ml  1 navaja
 1 mortero con pistilo  Sudán III
 1 pinza para tubo de ensayo  Reactivo de Biuret
 1 mechero  Lámpara de alcohol
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 Clara de huevo
 Leche
 Naranja
 Manzana
 Papa
 Plátano
 Maní (en pasta)
 Aguacate
 Aceite de ensalada
 Gelatina al 1%
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IV. PROCEDIMIENTO / METODOLOGÍA

A. IDENTIFICACIÓN DE LIPIDOS
 Se añadió 4 gotas de Sudan III a 2ml de aceite de aceite de ensalada en un tubo de ensayo.
 Se agito moderadamente y observamos que la mezcla toma un color rojizo-naranja.

Identificar la presencia de lipidos en los sigueintes productos y registre los resultados:

 Aceite de oliva
 Maní
 Manzana
 Aguacate
 Manzana Verde
 Leche diluida
 Clara de huevo

RESULTADOS/DISCUSIÓN:
Tabla N. 1
Producto Gráficos Presencia de
lipidos Observaciones
SI NO
Aceite de oliva X Tomo un color rojizo-naranja,
estos nos indica que si hay
presencia de lipidos.

Mani Si existe un cambio de color,

podemos decir que si tiene
presencia de lipidos
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Manzana X No existe un cambio de color por

lo tanto esta no presenta lipidos en
su estructura.

Aguacate X Si tomo un cambio de color ligero

por lo que podemos decir que este
si contiene lipidos pero no en
mucha cantidad

Manzana Verde X No existe un cambio de color por

lo tanto esta no presenta lipidos en
su estructura.

Leche diluida X Si hubo un cambio de color, por lo

que podemos decir que esta si
presenta lipidos en su estructura

Clara de huevo X Si hubo un cambio de color

significativo, por lo que podemos
decir que esta si presenta lipidos en
su estructura

Fuente: Quispe 2018

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DISCUSIÓN
Al momento de realizar la práctica observamos en cada uno de éstos la presencia de alteraciones
de color.
Para la leche de oliva si hubo un cambio de color significativo, Según (Granados, 2000) De los
componentes químicos que posee el aceite de oliva son en su mayoría ácidos grasos, como son el
ácido oleico (casi un 75 %), siendo el siguiente el ácido palmítico, ácido linoleico. El aceite de
oliva posee una cantidad moderada de Vitamina E (principalmente α-Tocoferol) y a pesar de
poseer una baja cantidad de γ-Tocoferol el aceite de oliva es estable.
EL Maní como alimento tiene un gran porcentaje de grasas, Según (S., 2013) el mani contiene
51% de grasa vegetal. Esta grasa es considerada saludable, entre 52 a 80% es oleico del mismo
tipo que el aceite de oliva, las aceitunas o la palta y entre 7 a 22% de aceite linoleico que es
poliinsaturado.
En el caso de la manzana se puede visualizar que no existe cambio de coloración se tiene un color
rosado claro que es un indicador de la ausencia de Lípidos.
Para el aguacate al colocar las cuatro gotas de Sudan III, este reacciona con las grasas que
contiene y lo que permite el cambio de coloración y se torna de Salmón claro que se implica
presencia de Lípidos en un buen porcentaje.

En el caso de la leche si hubo cambios en el color esto se debe a que la leche contiene diferentes
moleculas llamadas triglicéridos, diglicéridos, monoglicéridos, ácidos grasos libres, fosfolípidos
y colesterol.

“El Sudán III es un colorante que se utiliza paraa detectar específicamente las grasas, porque es
insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve
tiñe las grasas de color rojo anaranjado” (Ramírez & Martinez, 2006)

Los lípidos, igual que los carbohidratos, son una fuente importante de
energía almacenada. Los lípidosson componentes importantes de las membranas
celulares, de algunas vitaminas, de ciertas hormonas ydel colesterol. Los
lípidos son solubles en solventes no polares y son muy poco solubles en
agua porque se componen principalmente de cadenas de hidrocarbonos.

Prueba de Sudán:

Detecta las cadenas de hidrocarbonos. El reactivo de Sudán produce una

reacción hidrofóbica donde los grupos no polares (los hidrocarbonos) se
agrupan y son rodeados por moléculas del reactivo. La prueba de Sudán tiñe
los hidrocarbonos o lípidos de rojo.
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B. IDENTIFICACIÓN DE PROTEINAS
 Vertimos 3ml de gelatina al 1% en un tubo de ensayo.
 Añadimos 3 gotas de reactibo de Biuret.}
 Observamos que la mezcla adquiere una coloración lila.

Identifique la presencia de proteinas en el siguiente material y anote los resultados que obtenga.

 Clara de huevo
 Leche
 Maní
 Gelatina sin sabor
 Clara de huevo sin diluir
 Leche diluida
 Leche sin diluir

V. RESULTADOS/DISCUSIÓN
Tabla N. 2
Producto Gráficos Presencia de Observaciones
Proteinas
SI NO
Clara de huevo X Si hay presencia de
proteinas, su color se
asemeja a la muestra
patrón.

Mani X Existe un bajo

contenido de proteínas
en el maní ya que su
color se aleja al color
del patrón.

Gelatina sin sabor X Si existe una gran

cantidad de proteinas,
su color se asemeja al
de la muestra patrón.

Clara de huevo sin X Si hay presencia de

diluir
Proteínas en el huevo ya
que su color se asemeja
al patrón.
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Leche diluida X Si hay presencia de

Proteínas en la leche
diluida ya que su color
se asemeja al patrón.

Leche sin diluir X Existe presencia de

Proteínas ya que su
color se asemeja al
patrón.

Fuente: Quispe, 2018

DISCUSIÓN

Para poder identificar las proteínas presentes en la leche, el huevo y el maní se utilizó el Reactivo
de Biuret.

El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros
compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. El
reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina
con polipéptidos de cadena corta. (Puerto, 2013)

Para identificar las proteínas en las muestras mencionadas se hizo por dos formas: aplicando el
reactivo en forma directa y disolviendo la muestras

En la clara de huevo , su color inicial fue transparente y aplicando el reactivo cambio a un color
azul claro, esto da entender la presencia de Proteínas ya que su color se asemeja al patrón.

En el caso del mani tuvo que disoñlverselo, ya que el contenido de maní fue pastosa se hizo por
esta única forma. Al inicio su color fue maíz y al agregar el reactivo de Biuret cambio a un color
turquesa, dando a entender que existe un bajo contenido de proteínas en el maní ya que su color se
aleja al color del patrón.

En la clara de huevo de forma directa, igual existe un cambio de color al aplicar el reactivo de
Biuret, al inicio tenía un color transparente cambiando su color a esmeralda; esto hace entender la
presencia de Proteínas en el huevo ya que su color se asemeja al patrón.
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En la leche disuelta de igual manera existe un cambio de color al reaccionar con el reactivo de
Biuret. Al inicio su color fue gris claro cambiando su color a azul claro, esto hace referencia a la
presencia de Proteínas ya que su color se asemeja al patrón.

En la leche por la forma directa, se pudo notar el cambio de color al añadir el reactivo de Biuret;
antes de la reacción tenía un color blanco, el cual cambio en color azul acero; esto nos indica que
existe presencia de Proteínas ya que su color se asemeja al patrón.

Las proteínas son moléculas compuestas por una o más cadenas de aminoácidos. Las proteínas
desempeñan muchas funciones; esta diversidad de funciones es posible gracias a la variedad de
estructuras proteínicas.
Las células contienen cientos de enzimas diferentes, que son proteínas
Importantes que dirigen casi todas las reacciones químicas que se dan en la célula.

Prueba de Biuret:
El reactivo de Biuret se compone de hidróxido de sodio y sulfato de cobre.
El grupo amino de las proteínas reacciona con los iones de cobre del reactivo de Biuret y el
reactivo cambia de azul a violeta. Este cambio de color se considera resultado positivo para
proteínas.

VI. CONCLUSIONES.
 Cuando observamos un cambió de coloración a color anaranjado es un indicador de la
presencia de lípidos. Entre más intenso el color mayor presencia de lípidos.
 El sudan III por su composición, solo es soluble en grasas lo que ayuda identificar las
grasas.
 Para la identificación de Proteínas en distintos alimentos se puede utilizar el Reactivo
de Biuret ya que este ayuda a detectar la presencia de proteínas cuando su color se
hace azul o violeta.
 Al realizar la práctica por las dos formas ya sea aplicando el reactivo directamente en
la muestra y diluyendo la muestra, esto no marca gran diferencia de colores entre sí,
para poder determinar la presencia de proteínas.
 Con el método de Biuret se identificó la presencia de proteínas en la leche y en el
huevo; mientras que en el maní dio a entender que presenta bajas concentraciones de
proteínas.
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VII. RECOMENDACIONES.

 Manipular el reactivo de Biuret de una manera adecuada para que existan problemas en el
momento de poner en el tubo de ensayo.
 Utilizar el mortero y pistilo correctamente en el momento de triturar los productos y
lavarlos cuando estos sean utilizados
 Tener cuidado con la lámpara de alcohol y usar todos los instrumentos necesarios para el
procedimiento.
 Para empezar a identificar la presencia de proteínas en las diferentes muestras se debe tener
un patrón como referencia.
 Al utilizar el reactivo de Biuret se debe tener claro que cantidad se debe añadir en cada una
de las muestras.
 Se debe seguir el procedimiento en orden y con cuidado para que nos dé un buen resultado
donde se pueda identificar con claridad los colores.
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VIII. ANEXOS/Cuestionario

Cuestionario

1.- COMO PODEMOS SABER QUE UNA SUSTANCIA ES DESCONOCIDA EN UNA

PROTEINA

Realizando sobre esta sustancia la reacción de Biuret para poder detectar si tiene presencia de
proteínas.

2.-QUE COLORACIÓN NOS DA LA REACCIÓN DE BIURET

Nos da una coloración violeta cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas

3.- EXPLIQUE QUÉ OCURRE CON LA MEZCLA DE ACEITE Y SUDAN III

El sudan III es un colorante lipófilo (soluble en grasa), por esta afinidad a los ácidos grasos hace
que la mezcla de estos con el colorante se ponga de color rojo, mezclándose totalmente y
convirtiéndose en un colorante especifico utilizado para revelar la presencia de grasas

4.- CUAL ES LA FUNCIÓN DE LOS LÍPIDOS

-Almacenar energía

-Regular la temperatura del cuerpo

-Transmisor de impulsos nerviosos

- Función estructural.

5.- CUAL ES LA FUNCIÓN DE LAS PROTEÍNAS

 Función defensiva, ya que crean los anticuerpos y regulan factores contra agentes extraños o
infecciones.
 Funciones reguladoras puesto que de ellas están formados los siguientes compuestos:
Hemoglobina, proteínas plasmáticas, hormonas, jugos digestivos, enzimas y vitaminas que
son causantes de las reacciones químicas.
 Funciones enzimática actúan como biocatalizadores acelerando las reacciones químicas
del metabolismo.
 La contracción de los músculos través de la miosina y actina es una función de las proteínas
contráctiles que facilitan el movimiento de las células.
 Función contráctil de las proteínas también está implicada la dineina que está relacionada
con el movimiento de cilios y flagelos.
 Función estructural de las proteínas también es de gran importancia ya que las proteínas
forman tejidos de sostén y relleno que confieren elasticidad y resistencia a órganos y tejidos
como el colágeno.
 Función de reserva de las proteínas son la lactoalbúmina de la leche o a ovoalbúmina de la
clara de huevo, la hordeina de la cebada y la gliadina del grano de trigo constituyendo estos
últimos la reserva de aminoácidos para el desarrollo del embrión.
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 Las proteínas realizan funciones de transporte. Como la hemoglobina y la mioglobina,

proteínas transportadoras del oxígeno en la sangre en los organismos vertebrados y en los
músculos respectivamente.

IX. Bibliografía
Córdoba, U. d. (10 de Febrero de 2010). Obtenido de Identificación de algunos grupos funcionales
orgánicos de interés bioquímico.: Recuperado de
http://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/19%20GRUPOS%20FUNCIONALES.pdf

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editorial, u. (4 de 5 de 2017). carbohidratos. Obtenido de

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González, T. P. (2006). Obtenido de Los Seres Vivos. Morfología,fisiología, genética, ecología y

Biotecnología: Recuperado de Universidad Nacional deColombia. Facultad de Ciencias.
Departamento de Biología. Pag 26.

Granados, J. Á. (22 de agosto de 2000). Obtenido de Enciclopedia Del Aceite De Oliva: Recuperado de
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Lopez, S. H. (S.A). Obtenido de Articulo Cientifico De Identificación De Biomoléculas : Recuperado de

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Ramírez, S., & Martinez, J. (2006). Identificacion del Almidon. Obtenido de

https://portalacademico.cch.unam.mx/materiales/prof/matdidac/sitpro/exp/quim/quim2/quimi
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e.pdf

S., S. A. (01 de Abril de 2013). Obtenido de El maní es rico en grasas saludables : Recuperado de
http://rpp.pe/lima/actualidad/el-mani-es-rico-en-grasas-saludables