Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
____________________________________
Maritza Reyes C.
Ing. Agrónomo, M. Sc. Dr. Cs. Agr.
Instituto de Producción y Sanidad Vegetal.
PROFESORES INFORMANTES:
___________________________________
_
Miguel Neira C.
Ing. Agrónomo.
Instituto de Producción y Sanidad Vegetal.
___________________________________
Laura Böhm S.
Ing. Agrónomo.
Instituto de Producción y Sanidad Vegetal.
i
INDICE DE MATERIAS
Capítulo Página
RESUMEN
SUMARY
1 INTRODUCCIÓN 1
2 REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 3
2.1.1 Morfología 3
2.4.1 Elaboración 12
3 MATERIAL Y MÉTODO 15
3.4 Dieta 16
3.5 Metodología 16
1 INTRODUCCIÓN
La sanidad es uno de los factores más importantes para el logro de una buena
producción en cualquier actividad agropecuaria. La apicultura no escapa a esta regla,
ya que son numerosas las enfermedades que afectan a las abejas en sus diferentes
estados, debilitando las poblaciones en las colmenas. Es fundamental conocer la
enfermedad y al agente causal de ésta, con el fin de evitarla o controlarla utilizando
medidas de manejo que aseguren colmenas sanas y por lo tanto una buena
producción.
Debido a la buena eficacia mostrada por los derivados de este árbol, su aplicación en
el control de Galleria mellonella es una interesante manera de avalar su utilización
como bioinsecticida.
Como objetivo general se plantea evaluar la acción del extracto de Neem sobre la
alimentación, desarrollo y mortalidad de Galleria mellonella L.
Los objetivos específicos de éste estudio son, aplicar distintas concentraciones del
extracto sobre las larvas de la polilla mayor de la cera, criadas en dieta artificial.
Analizar los efectos producidos en los estados larvales de G. mellonella, observando
alimentación, desarrollo y mortalidad de éstas y por ultimo analizar los efectos sub
letales en el estado adulto de la polilla mayor de la cera, a través del análisis de
fecundidad de los adultos emergidos de los distintos tratamientos.
3
2 REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
Sin embargo, la polilla mayor de la cera es por lejos la mayor peste de productos
apícolas, causando pérdidas mayores a los apicultores cada año. Infecta colonias de
Apis cerana F., A. dorsata F., y A. mellifera L. (Morse y Laigo ,1968; Shimanuki ,1981 y
Sigha ,1982 citado por WILLIAMS, 1990).
2.1.1 Morfología. WILLIAMS (1990), señala que los huevos por lo general son
blancos y lisos, algunos están cubiertos con fecas oscuras y excrementos, usualmente
miden de 12 a 20 mm de longitud y cerca de 5 a 7 mm de diámetro.
Una larva recién salida del huevo tiene un cuerpo de color blanco cremoso que se
vuelve gris a gris oscuro en la parte dorsal y lateral a medida que avanza en sus
estadíos, puede alcanzar hasta 28 mm de longitud y pesar sobre 240 mg (Hase ,1926
citado por WILLIAMS, 1990).
4
Según NEIRA (2006), las larvas de los estadíos siguientes presentan una coloración
amarillo grisáceo, con dos manchas en el primer anillo del tórax. La cabeza es de color
rojizo.
Los adultos son de contextura pesada y bastante pequeños. Las hembras alcanzan
una longitud de 20 mm y pueden pesar como mucho 169 mg. Los machos son
consideradamente más pequeños, las polillas macho también pueden ser distinguidas
de las hembras por su color más ligero y su claro margen apical dentado de sus alas
delanteras. También, los palpos labiales de las hembras se extiende hacia adelante
dándole a la cabeza una apariencia puntiaguda. Las dos terceras partes de las alas
delanteras de los adultos de ambos sexos son más bien uniformemente oscuras, pero
las posteriores tienen aéreas claras y oscuras intercaladas irregularmente con
manchas desiguales. Dorsalmente, el tórax y cabeza son de color claro. Sin embargo,
el tamaño y color de ambos sexos disienten considerablemente a merced de la dieta
de las larvas. Los adultos de G. mellonella pueden ser más pequeños que algunas
polillas menores de la cera sí las larvas se han desarrollado lentamente como resultado
de una escasa alimentación y bajas temperaturas (WILLIAMS, 1990).
El insecto pasa por los estados de huevo, larva, pupa y adulto. Su ciclo biológico es
variable, en óptimas condiciones de temperatura (26-38ºC) puede durar entre 39 a 60
días y hasta cinco meses con temperaturas más bajas (NEIRA, 2006).
5
30 días a 18ºC
Alimentación de
larvas y galerías en
los panales
Fecundación
7 – 28 días inmóvil en el capullo
2.1.3 Daño causado por G. mellonella L. Estos Lepidópteros causan todos los años
grandes estragos, al dañar los panales de las colmenas. La hembra adulta entra a la
colmena y oviposita en lugares inaccesibles a las abejas. Las lavas emergen y hacen
túneles en los panales al alimentarse de polen, néctar, miel o cera (NEIRA, 2006). Las
dos especies de polillas de la cera (estado adulto) no participan en la destrucción de
los panales, pues se lo impiden sus mandíbulas que están atrofiadas (LLORENTE,
2004).
Según Nilsen y Brister (1977), citado por WILLIAMS (1990), durante los meses mas
cálidos del año, cuando las poblaciones de G.mellonella son más grandes,
comúnmente se observa una aparente normal emergencia de las obreras y zánganos
de los panales en el núcleo de fecundación. Después de que se han liberado de la
celda operculada, las abejas quedan atrapadas en ellas por hilos de seda y que han
sido fabricados por las larvas de las polillas y puestos en la base de las celdillas. Esta
condición es llamada galeriosis.
La mayor proporción de los daños causados por las polillas de la cera ocurre en aquel
material que hallándose fuera de uso, ha sido guardado sin tener en cuenta las
precauciones necesarias, tendientes a preservarlo del ataque de la polilla. Según el
grado de intensidad de la invasión, variarán los daños experimentados por la colonia,
pudiendo llegar, en circunstancias extremas, al abandono de la colmena por parte de
las abejas (NEIRA, 2006).
LLORENTE (2004), señala que existen signos evidentes que corroboran la presencia
de estos enemigos de las abejas como la presencia de polillas adultas, larvas en
distinto estado de desarrollo, ninfas, deyecciones y cuadros destruidos. El diagnóstico
relativo a distinguir una u otra polilla, se realiza por el tamaño de los adultos y por la
disposición, galerías rectas y cría tubular, de los daños ocasionados, siendo mucho
más frecuente y más peligrosa G. mellonella que A. grisella.
colmenar, sacándolas del panal, tirándolas al piso y desde allí al exterior a través de la
piquera.
Estos insectos están bien adaptados para sobrevivir alrededor de las colonias, por lo
cual los apicultores no son capaces de combatirlas en un 100 %, es necesario estar
alerta para evitar que su ataque sea severo (MAAREC, 2000).
FAO (2006), señala que para prevenir o controlar la infestación de estos lepidópteros
en los panales almacenados o productos de la colmena que sean vulnerables, se
pueden tomar varias medidas. Existen métodos técnicos, físicos, biológicos y químicos
(Burges, 1978; Charriere y Imodorf, 1997; Feldlaufer et al, 1998 y Kochansky, 2002
citados por NEIRA, 2006).
Sin importar el producto a utilizar, es necesario airear los materiales por lo menos por
48 horas antes de ser introducidos en la colmena. Además ninguno de los estadíos de
estas polillas sobreviven a temperaturas superiores a 46 ºC por 80 minutos, por lo cual
se pueden utilizar tratamientos que no incluyen químicos (LLORENTE, 2004).
2.2.2 Control natural. Hasta ahora no se ha desarrollado una trampa efectiva contra
la polilla de la cera, ya que los machos no sólo se guían por las feromonas de las
hembras sino que, también usan el ultrasonido. Además se han encontrado
componentes de las hormonas femeninas en las ceras de abejas, lo que podría
explicar cómo encuentran la cera para oviponer (MAAREC, 2000).
Según FAO (2006), una vez que la infestación en las colonias se concreta, no existen
medidas quimioterapéuticas fáciles o económicas. Una solución es la utilización de una
solución acuosa de Bacillus thuringiensis L. la cual es asperjada en los panales y
permanece por varias semanas.
Las frutas son drupas en forma de aceitunas de 1,0 a 2,0 cm de largo, lisas de un color
amarillo verdoso a amarillo en la madurez (junio a agosto en Asia), por lo general,
poseen una sola semilla elíptica rodeada de una pulpa dulce con un fuerte olor
semejante al ajo. La producción de frutas comienza cuando los árboles tienen entre
tres a cinco años de edad y alcanzan su máxima producción a los 10 años. Lo usual
es encontrar entre 4,000 y 5,000 semillas por kilogramos de fruta y son diseminadas
principalmente por las aves (PARROTTA y CHATURVEDI, 1994).
2.3.2 Propiedades y utilización. El parecido que poseen los componentes del los
distintos extractos de Neem con las hormonas naturales de los insectos, hacen que
estos los absorban como si fueran las hormonas reales, afectando el normal
funcionamiento del insecto, bloqueando su sistema endocrino (RAMOS, s/f).
De las diferentes partes de Azadirachta indica se han asilado e identificado cerca de
100 compuestos, de los cuales 70 de ellos de origen triterpénico destacan por su
actividad insecticida y en especial la azadiractina (Koul et al., 1990. citado por
BURBALLA et al., 1995).
2.4.1 Elaboración. Las hojas y en especial los granos de la semilla del árbol de Neem
y sus extractos, han sido utilizados para el control de varios insectos plaga en India, sin
embargo existe la necesidad de estandarizar los productos naturales. La comunidad
internacional ha denominado al ingrediente activo de los extractos de Neem como
azadiractina, existiendo varios tipos, la más común es la de tipo A y el contenido de
esta y de otros tipos varia según la calidad de la semilla y en especial con el tipo de
extracción realizada para obtener la formulación final (KLEEBERG, 2004).
Basándose en los tres procesos básicos de extracción, todo ellos generan la aparición
de ciertas materias activas que varían según el proceso de extracción que se realice
(RAMOS s/f). En el cuadro 1 se puede observar la cantidad de azadiractina obtenida
utilizando diferentes solventes
CUADRO 1 Cantidad de azadiractina obtenida utilizando distintos solventes.
Solvente usado Azadiractina encontrada Unidad
Etanol (95 %) 2,80 µg/10µl
Metanol / Agua (85:15) 2,60 µg/10µl
Metanol 2,19 µg/10µl
Acetona 0,74 µg/10µl
Etil - eter 1,28 µg/10µl
FUENTE: adaptado de RAMOS s/f.
que son ricos en azadiractina libres de aceite. Estas especificaciones fueron creadas
para que las autoridades de cualquier país tomen las medidas necesarias en cuanto a
calidad y demanda de pesticidas.
MORDUE (1997), señala que existen dos categorías de efectos anti alimentarios
producidos por la azadiractina, el primero se relaciona con los quimiorreceptores del
gusto en las patas y aparato bucal de los insectos, en donde estimula la disuasión de
células e inhibe la células fagoestimulantes en los receptores. La segunda categoría
(anorexia) dice relación con el efecto fisiológico tóxico producido por la ingestión de la
azadiractina. Las larvas de Lepidópteros son el orden de insectos más
conductualmente sensibles a la azadiractina, los Coleópteros, hemípteros e
himenópteros son moderadamente sensibles y los Ortópteros tienen un amplio rango
de sensibilidad dependiendo de la especie. En el cuadro 2 se representan los rangos
de azadiractina a los cuales los distintos ordenes de insectos son sensibles, expresado
en su DL50 correspondiente.
Los extractos de Neem, en general no muestran efectos tóxicos para los enemigos
naturales de las plagas u otros organismos benéficos, mamíferos o humanos
(Schmutterer, 1990 y Larson, 1987. citados por BURBALLA et al., 1995).
β -caseína
Albúmina 3 MATERIAL Y MÉTODO
α -caseína
15
3.3 Dieta
La formulación de la dieta es una adaptación de la dieta utilizada en el INIA Quilamapu
para la mantención de larvas de Galleria mellonella, que a su ves es una adaptación de
la formula descrita por SINGH y MOORE (1985). Los ingredientes para su elaboración
se describen en el cuadro 3.
3.4 Metodología
Para evaluar los objetivos propuesto en este experimento se utilizó la siguiente
metodología
Según AFIPA (2006), la dosis recomendada para el producto comercial Neem.X está
en un rango de 2,5 a 5 cc/l de producto comercial, por lo que se considero un promedio
17
de 3,75 cc/l el cual se expresó en partes por millón para facilitar los procesos de
elaboración de las dosis, es decir la dosis recomendada a utilizar fue de 15 ppm de
azadiractina.
Los distintos tratamientos consistieron en dos dosis más bajas y dos dosis más altas a
partir de la dosis recomendada aumentando o disminuyendo a una razón de dos. Los
distintos tratamientos y dosis se describen en el cuadro 4.
Luego de la elaboración de la dieta ésta fue introducida en los 180 frascos de 8 cc que
contendrán, cada uno de ellos 4 cc de la dieta y se procederá a inocular cada frasco
con las distintas dosis para así conformar los distintos tratamientos con sus respectivas
repeticiones.
Durante los primeros cinco días desde la puesta en marcha del experimento se
observará diariamente si las larvas se están alimentando, se considerara como
indicador de alimentación la introducción de las larvas en la dieta, posteriormente cada
siete días y por un periodo de 60 días se observarán los distintos objetivos planteados
en este experimento, es decir, mortalidad, efecto anti alimentario y regulador del
crecimiento, para lo cual se asilaran a 4 ºC las larvas que presenten mortalidad para su
posterior análisis.
Para determinar los efectos sub letales se procederá a analizar la postura de huevos
de los adultos que se generen en el periodo experimental, ubicándolos en frascos
medianos con cintas de papel mantequilla y así analizar las diferencias entre la postura
de los distintos tratamientos.
4 BIBLIOGRAFÍA
KOUL, O y WAHAB, S. 2004. Neem: today and in the new millennium. Kluwer
academic publishers. USA. 276 p.
MORDUE, J. 1997. Azadirachtin a review of this mode of action in insects. In: Kleeberg
, H. Practice oriented results of use and production of Neem ingredients and
pheromones. Neem ingredients: toxicological results and posible medical uses.
Wetzlar. Germany. pp: 1 – 4,
RAMOS, R. s/f. Aceite de Neem un insecticida ecológico para la agricultura. (On line).
<http://www.zoetecnocampo.com/Documentos/Neem/neem01.htm> (15 jun.
2009).