El papel y la importancia de las células club (células Clara) en la patogenia de

algunas enfermedades respiratorias

Wojciech Rokicki​ , ​Marek Rokicki​ , ​Jacek Wojtacha​ y ​Agata Dżeljijli

Abstracto

El informe presenta la estructura celular del sistema respiratorio, así

como la historia de las células del club (células Clara), su ultraestructura y su
ubicación en las vías respiratorias y los órganos humanos. Los autores discuten la
estructura bioquímica de las proteínas secretadas por estas células y su importancia
para la integridad y la regeneración del epitelio de la vía aérea. Se enfatiza su papel
como células progenitoras para el epitelio de las vías respiratorias y su participación
en la biotransformación de xenobióticos tóxicos introducidos en los pulmones
durante la respiración.

Esto es seguido por una discusión de los aspectos clínicos asociados con las
células del club, lo que demuestra que el seguimiento de la concentración sérica de
proteínas secretadas por células club es útil en el diagnóstico de una serie de
enfermedades del tejido pulmonar. Finalmente, se brindan sugerencias con respecto
al posible uso de proteínas secretadas por células club en el tratamiento de
afecciones respiratorias graves.

Palabras clave: ​células del club, células Clara, desintoxicación xenobiótica, células
progenitoras

El sistema respiratorio de los mamíferos se compone de dos partes anatómicas: la

zona de conducción que transporta el aire a los pulmones y la zona respiratoria
responsable del intercambio de gases. La zona de conducción incluye la tráquea,
los bronquios (principal, lobar, segmentaria) y los bronquiolos.

La zona respiratoria es el parénquima pulmonar propiamente dicho, que consiste en

los bronquiolos respiratorios, los conductos alveolares y los alvéolos pulmonares.
Los bronquiolos respiratorios forman el margen entre las zonas de conducción y
respiratorias. Biológicamente, cada una de las tres regiones está construida con
diferentes células epiteliales que tienen diversas funciones fisiológicas.
El epitelio que recubre las vías respiratorias principales incluye los siguientes tipos
de células:

● células ciliadas con aproximadamente 250 cilios en la superficie apical,

● cubilete (o cubilete) células que producen y secretan moco,
● cepillar las células con numerosas microvellosidades en la superficie,
● células basales indiferenciadas con alto potencial mitótico,
● pequeñas células granulares que pertenecen al grupo de células APUD que
regulan la función secretora de las células caliciformes y las glándulas en la
membrana mucosa.

En los bronquiolos respiratorios, que forman el margen entre las zonas de

conducción y respiratorias, se pueden distinguir los siguientes tipos de células:

● células ciliadas (las más comunes),

● células microvillar (pocas),
● pequeñas células granulares (pocas),
● células bronquiolares conocidas como células club o células Clara (CC).

En el epitelio alveolar pulmonar, se pueden distinguir los siguientes tipos de células:

● neumocitos tipo I,
● neumocitos tipo II,
● neumocitos tipo III (raro),
● numerosos macrófagos pulmonares [ ​1​ ].

Las células bronquiolares fueron descritas por primera vez en 1881 por Rudolph
Albert von Kölliker, un médico, anatomista y fisiólogo suizo, pero su descubrimiento
fue olvidado durante décadas. Todavía en 1937, el anatomopatólogo austríaco Max
Clara describió un tipo específico de células presentes en el epitelio bronquial; las
células inicialmente se llamaron células Clara, pero ahora se conocen como células
del club (CC) o células exocrinas bronquiolares.

Max Clara fue un ardiente seguidor nazi y se unió al NSDAP ( ​Nationalsozialistische

Deutsche Arbeitpartei ) en 1935; los resultados de sus estudios se basaron en el
examen de muestras de pulmón obtenidas de prisioneros asesinados en campos de
concentración en Dresde. Después del final de la Segunda Guerra Mundial en 1945,
se convirtió en una ​persona non grata en los círculos científicos alemanes. En 1950,
se fue de Alemania a Turquía, donde se convirtió en profesor en la Universidad de
Estambul [ ​2​ ].

Las células del club (CC) tienen forma cúbica y su superficie que mira hacia la luz
bronquiolar está abultada; no tienen cilios ni secretan moco, por lo que también se
conocen como células bronquiolares o células secretoras no mucosas del epitelio
bronquiolar [ ​3].​] El examen con un microscopio electrónico revela el retículo
endoplasmático liso y rugoso localizado principalmente en la parte apical de la
célula. Un gran número de mitocondrias está presente, también se encuentra
principalmente en la parte apical de la célula. El número significativo de estos
orgánulos da fe del alto nivel de su actividad metabólica. Cada celda también
contiene aproximadamente 6 granularidades densas recubiertas de membrana,
aprox. 0.3 μm de tamaño, ubicado principalmente cerca de la membrana basal.
Químicamente, las granularidades son proteínas, glicoproteínas y lípidos. El aparato
de Golgi está bien desarrollado. El núcleo celular ubicado en el centro forma aprox.
30% de la celda; está muy arrugado y contiene muchos nucléolos. La parte apical
del citoplasma contiene pequeñas cantidades de granularidades secretoras.
Adicionalmente, Los CC contienen cantidades sustanciales de citocromo P-450 que
funcionan conjuntamente con oxidasas de función mixta. Los CC producen y
secretan varias sustancias tanto de forma apocrina como merocrina [​3 , ​4 ]. La
actividad secretora de CC es estimulada por fibras adrenérgicas [ ​5​ ].

En condiciones fisiológicas, las CC constituyen aproximadamente el 9% de la

población total de células epiteliales de las vías respiratorias en los pulmones
humanos; en términos de distribución, están prácticamente ausentes en la
membrana mucosa de los segmentos proximales del árbol bronquial (la tráquea y
los bronquios primarios, lobulares y segmentarios). Aproximadamente el 11-22% de
los CC se encuentran en los bronquiolos terminales. En condiciones fisiológicas,
constituyen aproximadamente 15-44% de todas las células proliferantes en esta
parte de los pulmones [ ​6​ ].

Además de los pulmones, en el cuerpo humano, los CC también están presentes en

el útero grávido, los riñones y la próstata [ ​7​ , ​8​ ].

El principal producto secretor de los CC es la uteroglobina / blastoquinina; su

composición es la misma que la de la proteína secretada por el endometrio grávido,
de ahí el nombre de uteroglobina. En la literatura científica, la proteína es conocida
por muchos nombres, incluyendo: uteroglobina, proteína secretora de células club
(CCSP), proteína 16 de células de club (CC16), proteína de célula de club 10
(CC10), secretoglobina (SCGB), proteína humana 1 y orina proteína 1.

La proteína humana CC16 (masa: 15,8 kDa) secretada por CC es un homodímero

sin restos de azúcar; cada unidad está compuesta de 70 residuos de aminoácidos
unidos con enlaces covalentes. Su estructura incluye un bolsillo hidrófobo para unir
ligandos lipofóbicos, tales como, por ejemplo, bifenoles. Es resistente a la acción de
proteasas, baja temperatura y cambios de pH. También se ha demostrado que,
debido a su masa molecular relativamente baja, la proteína se cataboliza en túbulos
distales renales [ ​9 ]. En humanos, el gen que codifica CCSP tiene 3 exones cortos y
2 intrones (4,1 kb de longitud). Sus genes se encuentran en el cromosoma
11q12.3-13.1 en la vecindad de otros genes asociados con procesos inflamatorios e
inmunes [ ​10​ , ​11​ ].

Además de esta proteína, los CC también secretan muchas sustancias esenciales,

incluida la proteína KL-6 y varias glicoproteínas, lípidos y proteínas que
proporcionan protección química y física tanto para el surfactante pulmonar como
para las vías respiratorias pequeñas.

El papel protector de la proteína CC16 se ha demostrado en estudios

experimentales en ratones. Según las observaciones, su deficiencia se asocia con
una mayor susceptibilidad de los pulmones a las infecciones virales y al estrés
oxidativo. El etiquetado de la concentración sérica de CC16 se ha empleado para
demostrar el daño CC en diversas enfermedades pulmonares agudas y crónicas [
12​ ].

Además, se ha demostrado que la expresión de la proteína se potencia

significativamente por algunos factores de transcripción estimulados por citocinas,
particularmente por interferón gamma. A su vez, en células neoplásicas del sistema
respiratorio y urinario, la proteína CC16 funciona como un antagonista del fenotipo
CC10 / UG, creando dos formas fuera y dentro del regulador celular que abarca
tanto la inflamación como la transformación neoplásica [ ​9​ ].

Un estudio en 2014 demostró que, en los recién nacidos prematuros, un aumento en

la concentración sérica de proteína KL-6 secretada por CC a más de 79 μg / ml es
un buen indicador de displasia broncopulmonar avanzada, mucho más sensible que
la concentración de proteína CC16 solo. Los resultados demuestran que el
etiquetado de la concentración de ambas proteínas al mismo tiempo da como
resultado un claro aumento en su valor predictivo en el diagnóstico de la displasia [
13​ ].

Además, se ha observado que la citoquina proinflamatoria TNF-α induce muy

claramente la producción y secreción de proteínas por CC, lo que modula
significativamente la respuesta inflamatoria en las vías respiratorias [ ​14​ ].

A pesar de los estudios a gran escala llevados a cabo constantemente que

involucran tanto condiciones fisiológicas como patológicas, el papel de los CC aún
no se entiende completamente. En condiciones fisiológicas, se cree que tienen las
siguientes funciones fundamentales:

● secretan los componentes primarios de la sustancia extracelular que recubre

los bronquiolos respiratorios,
● son células progenitoras tanto para ellos como para las células ciliadas,
● regulan el contenido de secreción (fluido) en los segmentos distales del tracto
respiratorio,
● en los pulmones, juegan un papel clave en la biotransformación de los
xenobióticos inhalados junto con el citocromo P-450 y las monooxigenasas
de función mixta.

Las células del club participan en la biotransformación de muchos compuestos

tóxicos y nocivos que se introducen en los pulmones con aire inhalado, incluyendo
furano, hidrocarburos (incluidos hidrocarburos aromáticos), naftaleno y sus
derivados, ozono, benzo [a] pireno, elementos del humo del tabaco, cumarinas,
óxidos nítricos y muchas otras sustancias demasiado numerosas para mencionar.
La destoxificación de los compuestos mencionados anteriormente se produce con la
participación de citocromo P-450, monooxigenasas y monooxigenasas que
contienen flavina. Tan pronto como durante la primera hora después de la
exposición a estos compuestos, se producen una serie de cambios estructurales en
los CC, incluyendo la marginación y aglomeración de la cromatina nuclear, la
hinchazón mitocondrial y la dilatación del retículo endoplasmático. Después de
aproximadamente 24 horas de la exposición, los CC se agrandan,​15 ]. Por esta
razón, se cree que los CC desempeñan un papel importante en la protección de las
vías respiratorias frente a la influencia nociva de un entorno externo tóxico [ ​5 ]. Por
lo tanto, se ha observado una reducción significativa en el número de CC en el
epitelio de la vía aérea de fumadores crónicos de tabaco (al menos 10
paquetes-años) [ ​16​ ].
En 1967, J. Niden publicó un artículo en ​Science , sugiriendo que los CC secretan
surfactante pulmonar. Esta investigación fue corregida en 1975 por Kuhn ​et al .
quien demostró que los lípidos surfactantes se producen principalmente en
neumocitos tipo II y no en CC. Sin embargo, resultó que los CC secretan tres tipos
de proteínas (conocidas como proteínas A, B y D) que unen el surfactante,
estabilizan su estructura y, por lo tanto, cumplen una función protectora para el
compuesto [ ​17​ , ​18​ ].

El sistema respiratorio de los mamíferos, compuesto por células altamente

especializadas, no solo forma una barrera física para el entorno externo, sino que
también, bajo la influencia de una serie de factores ambientales desfavorables,
secreta diversas sustancias biológicamente activas (factores inflamatorios y
antiinflamatorios, péptidos antibacterianos, células del sistema inmunitario, etc.) que
pueden reparar incluso daños importantes.

El epitelio de la vía aérea se renueva, mantiene y repara principalmente por células

madre endógenas (células progenitoras). Muchos estudios experimentales
realizados en segmentos de pulmón y cultivos de tejido del epitelio respiratorio
humano han demostrado inequívocamente que los CC constituyen una de las
principales fuentes de células madre. Sus autores concluyeron que, en los pulmones
de los recién nacidos, los CC pueden diferenciarse para formar neumocitos tipo I o II
y células ciliadas [ ​5​ , ​19​ ].

La señal para la diferenciación de CC es proporcionada por β-catenina, una

glicoproteína citoplásmica dependiente de iones de calcio, que pertenece a la familia
de las cadherinas, que a su vez son responsables de la estabilización de las
conexiones intercelulares y la morfogénesis.

Los estudios experimentales han demostrado que E-cadherina soluble (masa: 80

kDa), un producto de degradación proteolítica de la cadherina, estimula la
diferenciación de CC durante la regeneración y / o daño del epitelio bronquiolar [ ​19
- ​21​ ].

Se ha sugerido que los CC bronquiolares pueden ser tumorigénicos y, bajo la

influencia de la mutación que induce el gen KRAS (G-12 D), pueden comenzar
(inducir) procesos neoplásicos en los pulmones, lo que conduce al desarrollo de
adenocarcinoma [ ​22​ ].
A su vez, otros estudios experimentales han demostrado que la desregulación de la
señal de la ruta de la catenina da como resultado el desarrollo de diversas
patologías pulmonares; por lo tanto, se supone que los orígenes de la señal que
inicia la tumorigénesis (o incluso la carcinogénesis) en el tejido pulmonar pueden
incluir CC [ ​4 , ​5 , ​23 ]. Sin embargo, el mecanismo de diferenciación CC progenito
sigue siendo en gran parte desconocido.

Los aspectos clínicos asociados con los CC no se conocen por completo. Sin
embargo, se cree que los CC progenitores que participan en la reparación del daño
epitelial de las vías respiratorias constituyen factores causantes del desarrollo de las
entidades nosológicas enumeradas a continuación (probablemente al estimular el
desarrollo de fibroblastos mesenquimatosos):

● mucoviscidosis (fibrosis quística),

● ARDS,
● COPD,
● fibrosis pulmonar,
● enfisema pulmonar,
● hipertensión pulmonar,
● estenosis traqueal subglótica,
● traqueomalacia [ ​24​ ].

Se cree que los CC bronquiolares desempeñan un papel clave en la regulación de la

homeostasis pulmonar y las afecciones inflamatorias (tanto agudas como crónicas).
Sirven la función de células progenitoras, participan en el metabolismo xenobiótico y
regulan el sistema inmune pulmonar. Se destruyen tan pronto como 24 horas
después de la acción de un factor dañino y se reconstruyen después de
aproximadamente 30 días [ ​25​ ].

Como se demostró anteriormente, los CC secretan varias proteínas en el árbol

bronquial, la sangre y la orina; etiquetar estas proteínas ha encontrado su aplicación
en el diagnóstico de algunas afecciones. Se ha observado que su concentración
aumenta tanto en el líquido pulmonar como en el suero sanguíneo de pacientes con
sarcoidosis o fibrosis pulmonar y en pacientes sometidos a ventilación mecánica con
valores de presión positiva al final de la espiración positiva (PEEP) altos. Los
autores de este informe sugirieron que la concentración de la proteína CC16 es un
buen indicador no invasivo para la evaluación de la integridad del sistema
respiratorio [ ​12​ , ​26​ ].
Estas observaciones fueron confirmadas por Wutzler ​et al . en 2012; de acuerdo con
su informe sobre pacientes con lesiones múltiples, la concentración sérica de
proteína CC16 aumentaría rápidamente inmediatamente después de la lesión,
disminuiría dentro de las primeras 24 horas y volvería a aumentar sistemáticamente
a partir del 2º día en adelante. Los autores concluyeron que la proteína es un buen
indicador de insuficiencia pulmonar secundaria en pacientes con lesiones múltiples [
27 ]. La concentración elevada de la proteína CC16 en la secreción bronquiolar se
considera un buen marcador del aumento de la permeabilidad de la barrera
pulmonar-sanguínea [ ​12​ ].

Todavía otros autores han demostrado que la concentración sérica de la proteína

CC16 y el surfactante es un marcador útil para detectar la forma temprana de la
silicosis [ ​13 ]. También se ha propuesto etiquetar esta proteína en sangre y orina
como un buen marcador para los cambios fibróticos en pacientes con
neumoconiosis [ ​28​ ].

A su vez, un estudio a gran escala realizado en aproximadamente 1000 pacientes

con cáncer de pulmón avanzado demostró que la concentración sérica de la
proteína CC16 puede usarse para predecir un riesgo de mortalidad [ ​29​ ].

Desde hace muchos años, las proteínas secretadas por los CC han sido objeto de
estudios moleculares y clínicos. Las razones detrás de este interés incluyen sus
propiedades antiinflamatorias e inmunomoduladoras; además, los estudios sobre
líneas celulares de adenocarcinoma pulmonar humano han sugerido que también
poseen propiedades antineoplásicas. Aunque el mecanismo de este fenómeno aún
no se ha dilucidado por completo, se ha sugerido que la proteína CC10-CC16 es "un
buen candidato" para la inmunoterapia experimental contra el cáncer de pulmón [ ​30
].

Es de esperar que nuevos estudios sobre CC y sus proteínas secretoras den lugar a
su aplicación en la terapia para muchas afecciones pulmonares.