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El almidón total, método colorimétrico

Número de catalogo: AK00291, 100 pruebas

a través de la acción combinada de glucosa oxidasa y peroxidasa.


Solicitud

Este método colorimétrico simple, precisa y conveniente se utiliza para la


determinación de almidón total en cereales, harinas y otros productos alimenticios y especificidad
piensos.
El ensayo es específico para α- glucanos (incluyendo almidón, glucógeno,
Introducción
fitoglicógeno y maltodextrinas no resistentes).

determinación de almidón es esencial en varias industrias de alimentos y piensos. Los


métodos enzimáticos se usan comúnmente para determinar el almidón. Sin embargo, La sensibilidad y la detección de límite
los procedimientos difieren en el pre
La sensibilidad del ensayo se basa en 0.010 UA. Esto corresponde a una
etapas de tratamiento, gelatinización del almidón, licuefacción y
concentración de D-glucosa de 1,0 mg (o 0,9 mg de almidón) / solución de la
dextrinización, la hidrólisis de las dextrinas en glucosa y la medición de la glucosa.
muestra L para un volumen máximo de muestra de 1,00 ml. El límite de
detección de 2,0 mg (o 1,8 mg de almidón) / L se deriva de la diferencia de
Este simple, sin embargo, cuantitativa y fiable, el procedimiento para la absorbancia de 0,020 y un volumen máximo de muestra de 1,00 ml.
medición de almidón total se basa en el uso de termoestable α- amilasa y Si el GodPod
amiloglucosidasa. Este método ha sido adoptado por la AOAC (Método absorbancia está por encima de 1,1 AU, diluir la muestra y repetir el análisis.
Oficial 996.11) y la AACC (Método 76.13). El uso de un termoestable α- amilasa
que es activa y estable a pH bajo permite que tanto el termoestable α- amilasa
y amiloglucosidasa de incubación pasos a realizar al mismo pH (pH 5,0), lo Linealidad y precisión
que simplifica el ensayo.
Linealidad de la determinación existe de 5 a 100 g D-glucosa por ensayo. En un
ensayo doble usando una solución de la muestra, se puede producir una diferencia
de 0,005 a 0,010 unidades de absorbancia. Con un volumen de muestra de 1,00 ml,
esto corresponde a una concentración de D-glucosa de aprox. 0,5 a 1,0 mg / L. Si,
principios
en la preparación de muestras, la muestra se pesa, por ejemplo, 10 g / L, una
diferencia de 0,02 a 0,05 g / 100 g se puede anticipar.

α- amilasa
Los gránulos de almidón + H 2 O maltodextrinas
composición del kit

AMG Suspensión 1: termoestable •• amilasa (12 ml, 8300U / ml) en 25% de glicerol Estable
Las maltodextrinas + H 2 O D-glucosa
durante 3 años a 4 ° C.

en Diluir 1,0 ml de los contenidos de la botella 1 a 30 ml con el reactivo 1 (tampón de


GOx
D-glucosa + O 2 + H 2 O D-gluconato + H 2 O 2 acetato de sodio mM 100, pH 5.0; no suministrado). Dividir en alícuotas de tamaño
adecuado y se guardan en tubos de PP a -20 ° C entre uso y mantener fresco

a + 4-aminoantipirine durante el uso si es posible. Estable durante> 3 años a -20 ° C.


2 H 2 O 2 + pag- ácido hidroxibenzoico

VAINA
quinonaimina + 4 H 2 O Nota: Si la muestra se va a analizar siguiente ensayo II (AOAC Método Oficial
996.11), la enzima debe me diluye en el Reactivo 4 (MOPS 50 mM, pH 7,0)
a

termoestable α- hidrólisis de amilasa almidón en maltodextrinas ramificados y Suspensión 2: Amiloglucosidasa (10 ml, 3300U / ml) en 50% de glicerol Estable

no ramificados solubles. Amiloglucosidasa (AMG) hidroliza maltodextrinas a durante 3 años a 4 ° C.

D-glucosa. D-glucosa obtenida se determina directamente con goPod


Utilizar como fue suministrado. Esta solución es viscosa y por lo tanto debe ser dispensado con
Reactivo por conversión en un compuesto coloreado rojo colorante
un dispensador de desplazamiento positivo.
quinoneimina
Solución 3. tampón reactivo GOD-POD (30 ml, pH 7,4), pag- Reactivo 4. tampón MOPS (50 mM, pH 7,0) más cloruro de calcio (5 mM) y
ácido hidroxibenzoico y azida de sodio (0,64% w / v) como conservante. Estable azida sódica (0,02% w / v).
durante 3 años a 4 ° C.
Opcional: Sólo es necesario si las muestras se analizaron de acuerdo con Ensayo II.

Diluir el contenido de la botella a 1,0 L con agua destilada y usar


inmediatamente.
Disolver 11,55 g de sal sódica MOPS en 900 ml de agua destilada y ajustar
Nota: En el almacenamiento, los cristales de sal se pueden formar en el tampón el pH a pH 7,0. Añadir 0,74 g de cloruro de calcio dihidrato y 0,2 g de azida
concentrado. Estos deben disolverse completamente cuando este tampón se diluye a 1 L de sodio y disolver. Ajustar el volumen a 1 L. estable durante 6 meses a 4 °
con agua destilada. C.

Mezcla 4. enzimas de reactivos GOD-POD. polvo de glucosa oxidasa (GOD), Reactivo 5. tampón de acetato sódico (200 mM, pH 4,5) más azida de sodio
peroxidasa (POD) y 4aminoantipyrine liofilizadas. Estable durante 5 años a (0,02% w / v).
-20 ° C.
Opcional: Sólo es necesario si las muestras se analizaron de acuerdo con Ensayo II.

Disolver el contenido de un frasco de 4 en aprox. 20 ml de solución 3 y


transferir cuantitativamente esta a la botella que contiene el resto de la
Añadir 11,6 ml de ácido acético glacial (1,05 g / ml) a 900 ml de agua
solución 3. Cubrir esta botella con papel de aluminio para proteger el reactivo
destilada. Ajustar el pH a 4,5. Añadir 0,2 g de azida de sodio y disolver.
cerrado de la luz. Estable durante 3 meses a 2-5 ° C o 12 meses a -20 ° C.
Ajustar el volumen a 1 L. estable durante 6 meses a 4 ° C.

Solución 5. D-glucosa solución patrón (5 ml, 1,0 mg / ml) en ácido benzoico


Advertencia : Azida de sodio no se debe añadir hasta que se ajustó el pH. La
0,02%. Estable durante 2 años a temperatura ambiente.
acidificación de azida de sodio libera un gas venenoso.

Powder 6. Control de almidón de maíz regular. El contenido de almidón se muestra en vial


etiqueta. Estable durante> 5 años en la habitación Precauciones y controles
temperatura.
Incluir espacios en blanco de reactivos y controles de D-glucosa (100 • g, por cuadruplicado)

con cada conjunto de ensayos. Analizar al menos un extracto a partir del almidón de maíz de
La seguridad
control con cada conjunto de ensayos.
Los reactivos que se utilizan en la determinación del almidón no son materiales peligrosos
El tiempo de incubación con el reactivo de GOD-POD no es crítica, pero debe
(ver Reglamento de Sustancias Peligrosas). Sin embargo, el tampón concentrado
ser al menos 20 min. Sin embargo, el tiempo para la formación de color máxima
contiene azida sódica como conservante. Las medidas generales de seguridad que se
con 100 g de estándar D-glucosa se debe comprobar, para cada nuevo lote de
aplican a todos los productos químicos
reactivo GodPod (por lo general 15 min). El color formado a través de la
sustancias deben ser seguidas. Para más
reacción es estable a temperatura ambiente durante al menos 2 horas después
información sobre el uso seguro de este kit, consulte las MSDS disponibles
de desarrollo.
en www.nzytech.com.

preparación Buffers (no suministrado)


Procedimiento (análisis de punto final)
Reactivo 1. tampón de acetato sódico (100 mM, pH 5,0) más cloruro de calcio
Longitud de onda: 510 nm
(5 mM)
Cuvette: trayectoria de la luz 1 cm (vidrio o plástico)
Añadir 5,8 ml de ácido acético glacial (1,05 g / ml) a 900 ml de agua
destilada. Ajustar el pH a 5,0 Estable durante aprox. 2 meses a 4 ° C. Temperatura: 50 ° C

Volumen final: 3,10 ml


Añadir 0,74 g de cloruro de calcio dihidrato y disolver. Añadir
Solución de muestra: 10-100 g de D-glucosa por cubeta
0,2 g de azida de sodio. Ajustar el volumen a 1 L y almacenar el tampón a 4 ° C.
Estable durante aprox. 2 años a temperatura ambiente. Leer contra el blanco de reactivo.

Advertencia : Azida de sodio no se debe añadir hasta que se ajustó el pH. La


acidificación de azida de sodio libera un gas venenoso. Pipetear en cubetas (mL) Blanco Patrón Muestra

reactivo GOD-POD 3.00 3.00 3.00


El reactivo 2. tampón de acetato de sodio (1,2 M, pH 3,8)
estándar D-glucosa - 0.10 -
Añadir 69,6 ml de ácido acético glacial (1,05 g / ml) a 800 ml de agua
destilada y ajustar el pH a 3,8. Ajustar el volumen a 1 L con agua destilada. Muestra - - 0.10

Estable durante 12 meses a temperatura ambiente. Buffer o agua 0.10 - -

Mix, se incuba a 50 ° C durante 20 min y leer absorbancias a 510 nm frente


Reactivo 3. solución de hidróxido de potasio (2 M) al blanco de reactivo para obtener? A muestra y? A norma D-glucosa *

Añadir 112,2 g de KOH a 900 ml de agua desionizada y se disuelven mediante agitación.

Ajustar el volumen a 1 L. tienda en un recipiente sellado. Estable durante> 2 años a

temperatura ambiente.
Las mezclas se pueden obtener con una espátula de plástico o por inversión suave después

del sellado con un tapón de cubeta o Parafilm®.


interferencias Nota:

Peso en seco = peso fresco x contenido 100 de humedad (% w • w)


Si la conversión de D-glucosa se completa dentro del tiempo especificado en el ensayo, 100
podemos ser generalmente la conclusión de que no se ha producido interferencia. Sin
El contenido de humedad es generalmente determinada por NIR de reflectancia. Alternativamente,
embargo, un estándar interno debe ser incluido durante el análisis de la muestra si se
esta se puede determinar mediante el registro de la pérdida de peso en el almacenamiento de
sospecha de la presencia de sustancias interferentes. Una recuperación cuantitativa de
muestras de harina (0,5 g) a 80 ⁰ C durante 20 h. o hasta la estabilización de Peso. El contenido de
esta norma se debe esperar. Identificación de las pérdidas en la manipulación de muestras
humedad de las muestras de harina de cereales es regularmente en el rango de 10-14%.
y la extracción puede ser identificado mediante la realización de experimentos de
recuperación, es decir, mediante la adición de D-glucosa a la muestra en los pasos
iniciales de la extracción.
Las muestras líquidas

La concentración de almidón de muestras líquidas se calculan como sigue:


Cálculo

Las muestras sólidas


Almidón, mg / 100 ml
La concentración de almidón de muestras sólidas se puede calcular como
1 1000 X 162
sigue: = • A x F x 100
0.1 X 180 x 2xD

Almidón,% w / w = • A x F x D x 1,8

= • A x F x ••
0.1 X 1 1000 X 100 W X 162180
Dónde,

• A= muestra GOD-POD se leyó la absorbancia frente al blanco de


=•Ax•
Wx FV x 0,9 reactivo

F = factor de convertir de absorbancias a • g de glucosa


Dónde,

100 ( • • •• • - •••••••) absorbancia de


• A= muestra GOD-POD se leyó la absorbancia frente al blanco de
=
reactivo
100 • g de D - glucosa

100 = conversión a un volumen de 100 ml de muestra


F = factor de convertir de absorbancia a • g de glucosa

0.1 = Volumen de muestra analizada


100 ( • • •• • - •••••••) absorbancia de
=
100 • g de D - glucosa 1 = Conversión de • g a mg
1000
FV = volumen final (es decir, Ensayo I y Ensayo II - 100 ml o 10
ml; Ensayo III - 100 ml o 10,4 ml; Ensayo IV y V- 100 ml o 162 = factor para convertir libre de D-glucosa, como
10 ml;
180 determina, a anhidro-D-glucosa, como ocurre en •• glucanos
0.1 = Volumen de muestra analizada

2 = Dilución de la solución de muestra en incubación


1 = Conversión de • g a mg
con AMG
1000
re = dilución adicional previo a la incubación con ••
100 = factor a expresar almidón como un porcentaje del peso de la
glucosidasa, si es necesario
W muestra

W = peso de la muestra analizada en mg ( “tal cual”) Información general sobre la preparación de la muestra

La cantidad de D - glucosa presente en la cubeta debe variar entre 5 y 100 g.


162 = factor para convertir libre de D-glucosa, como
Así, si un volumen de muestra de
180 determina, a anhidro-D-glucosa, como ocurre en •• glucanos
0,10 ml se utiliza la solución de muestra debe ser diluida para dar una
concentración de D-glucosa entre 0,05 y 1,0 g / L.

blancos de muestra pueden determinarse usando el procedimiento de ensayo I,


con las modificaciones que en el paso 4, (3) ml de agua destilada se utiliza tres y
Almidón,% w / w (en base a peso seco) en el Paso 5, AMG se sustituye por agua.
En su lugar, la necesidad de realizar análisis en blanco de la muestra puede
100
= •• Glucanos,% w / w ( “tal cual”) x ser evitado por pre-extracción de muestras con etanol acuoso (80% v / v) [ver Ensayo
contenido 100 de humedad (% ww)
V].
Ejemplos de preparación de la muestra Incubar el tubo en un baño de agua hirviendo durante 6 min (Agitar el tubo
vigorosamente después de 2, 4 y 6 min).

YO. Método de ensayo para la determinación de almidón en el cereal


El tubo debe agitó vigorosamente para asegurar la homogeneidad completa de
y productos alimenticios que no contienen almidón resistente, D-glucosa y /
la suspensión (eliminación de grumos). También, revolviendo después de 2 min
o maltodextrinas
impide la posibilidad de algunos de la muestra expulsando desde la parte
(Procedimiento recomendado; todas las incubaciones a pH 5,0)
superior del tubo cuando el alcohol se evapora. Si se utilizan tubos de PP,
aumentar el tiempo de incubación a 12 min, con agitación después de 4, 8 y 12
1. muestra Molino (cereales, plantas o alimentos producto; aprox. 50 g)
min.
para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo.

2. Con precisión muestra de harina de peso ( • 100 mg) a un vaso


5. Se coloca el tubo en un baño a 50 ° C; añadir 3 ml de reactivo 5
tubo de centrífuga (17 ml de capacidad). Toca el tubo para asegurar que toda la
(Tampón de acetato de sodio 200 mM, pH 4,5). Luego añade
muestra cae a la parte inferior del tubo.
Suspensión 2 ( AMG). Agitar el tubo en un mezclador de vórtice y se incuba a 50 ° C
3. Añadir 0,2 ml de etanol acuoso (80% v / v) para humedecer la muestra y
durante 30 min.
dispersión de ayuda. Agitar el tubo en un mezclador de vórtice.
6. proceder de Paso 6 de Ensayo I.

4. Inmediatamente añadir 3 ml de diluido termoestable α- amilasa ( suspensión 1 diluido


III. Método de ensayo para la determinación de almidón total
1:30 en el Reactivo 1; pH 5,0). Incubar el tubo en un baño de agua hirviendo contenido de las muestras que contienen almidón resistente, pero no
durante 6 min (Agitar el tubo vigorosamente después de 2, 4 y 6 min). D-glucosa y / o maltodextrinas
(Formato de KOH - Recomendado)

El tubo debe agitó vigorosamente para asegurar la homogeneidad completa de


1. muestra Molino (cereales, plantas o alimentos producto; aprox. 50 g)
la suspensión (eliminación de grumos). También, revolviendo después de 2 min
para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo.
impide la posibilidad de algunos de la muestra expulsando desde la parte
superior del tubo cuando el alcohol se evapora. 2. Con precisión muestra de harina de peso ( • 100 mg) a un vaso
tubo de centrífuga (17 ml de capacidad). Toca el tubo para asegurar que toda la

5. Se coloca el tubo en un baño a 50 ° C. Añadir 0,1 ml de muestra cae a la parte inferior del tubo.

Suspensión 2 ( AMG). Agitar el tubo en un mezclador de vórtice y se incuba que a 50 ° 3. Wet con 0,2 ml de etanol acuoso (80% v / v) para ayudar
C durante 30 min. dispersión y se agitó el tubo en un mezclador de vórtice.
6. Transferir todo el contenido del tubo de ensayo a un 100 ml 4. Añadir una barra magnética de agitación y 2 ml de Reactivo 3 (2 M
matraz aforado (con un embudo para ayudar a la transferencia). Utilice una botella
KOH) a cada tubo y resuspender los gránulos (y se disuelve el almidón
de lavado para enjuagar el contenido del tubo a fondo. Ajustar el volumen con agua
resistente) por agitación durante aprox. 20 min en un baño de hielo / agua
destilada. Mezclar bien.
durante un agitador magnético.
7. Centrifugar una alícuota de esta solución a 3000 rpm durante 10
min. Utilice el filtrado claro, sin diluir para el ensayo, por duplicado.
Nota:
- No mezclar en un vórtex para evitar el almidón para emulsionar.

Nota:
Como alternativa, en el paso 6, si el contenido de almidón es desconocida y se - Asegúrese de que el contenido del tubo se agitó vigorosamente a medida

supone que es menos de 10% w / w, ajustar el volumen a 10 ml (10 g) con agua que se añade la solución de KOH. Esto evitará la formación de una masa de

destilada y después centrifugar los tubos a 3000 rpm durante 10 min. Para las material de almidón que será entonces difícil de disolver.

muestras que contiene 1-10% w / w contenido de almidón, utilizar esta solución


directamente para el análisis. Para las muestras que contienen 10,100% de
almidón, diluir 1,0 ml de esta solución a 10 ml con agua destilada antes del 5. Añadir 8 ml de reactivo 2 (1,2 M tampón de acetato sódico pH

análisis. 3,8) a cada tubo con agitación en el agitador magnético. Inmediatamente


añadir 0,1 ml de Suspensión 1 ( termoestable
α- amilasa) y 0,1 ml de Suspensión 2 ( AMG), mezclar bien y colocar los tubos

II. Método de ensayo para la determinación de almidón en el cereal en un baño de agua a 50 ° C.

y productos alimenticios que no contienen almidón resistente, D-glucosa y / 6. Incubar los tubos durante 30 min con intermitente de mezcla en

o maltodextrinas un mezclador de vórtice.

(Método Oficial de la AOAC 996.11) 7. Para las muestras que contienen almidón total> 10%: cuantitativamente

transferir el contenido del tubo a un matraz volumétrico ml 100 (usando una


1. muestra Molino (cereales, plantas o alimentos producto; aprox. 50 g) botella de lavado de agua). Ajuste a 100 ml con agua destilada y mezclar

para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo. bien. Centrifugar una alícuota de la solución a 3.000 rpm durante 10 min.

2. Con precisión muestra de harina de peso ( • 100 mg) a un vaso


8. Para las muestras que contienen <10% de almidón total: directamente
tubo de centrífuga (17 ml de capacidad). Toca el tubo para asegurar que toda la
centrifugar los tubos a 3000 rpm durante 10 min (sin dilución). Usualy, el
muestra cae a la parte inferior del tubo.
volumen final en el tubo es de aprox. 10,4 ml (sin embargo, este volumen
3. Añadir 0,2 ml de etanol acuoso (80% v / v) para mojar el puede variar especialmente si se analizan muestras húmedas, y previsión
muestra y dispersión de ayuda. Agitar el tubo en un mezclador de vórtice. apropiada para el volumen debe ser hecha en los cálculos).

4. Inmediatamente añadir 3 ml de termoestable α- amilasa 9. proceder de Paso 6 de Ensayo I.


( suspensión 1 diluido 1:30 en el Reactivo 4; pH 7,0).
IV. Método de ensayo para la determinación de almidón total temperatura durante 30 min y se centrifuga a 3000 rpm durante 10 min.
contenido de las muestras que contienen almidón resistente pero no
D-glucosa y / o maltodextrinas 3. Rechazar la solución sobrenadante y volver a disolver el almidón
(Formato DMSO - AOAC Método Oficial 996.11) que contiene pellet en 1 ml de agua. Si es necesario, calentar el

tubo y los contenidos en un baño de agua hirviendo para ayudar a la


1. muestra Molino (cereales, plantas o alimentos producto; aprox. 50 g) redisolución. Ajustar el volumen a 3,9 ml (3,9 g) con el Reactivo 1
para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo.
(tampón de acetato 100 mM, pH 5,0), teniendo en cuenta el peso original
2. Con precisión muestra de harina de peso ( • 100 mg) a un vaso del tubo.
tubo de centrífuga (17 ml de capacidad). Toca el tubo para asegurar que toda la 4. Si necesario, repetir la precipitación con etanol y
muestra cae a la parte inferior del tubo. etapas de centrifugación (por ejemplo, para muestras que contienen altos
3. Añadir 0,2 ml de etanol acuoso (80% v / v) para mojar el niveles de libre D-glucosa y / o maltodextrinas). Descartar la solución
muestra y dispersión de ayuda. Agitar el tubo en un mezclador de vórtice. sobrenadante y volver a disolver el almidón que contiene pellet en 1 ml de
agua. Si es necesario, calentar el tubo y los contenidos en un baño de
4. Inmediatamente añadir 2 ml de sulfóxido de dimetilo (DMSO) ebullición para ayudar a la redisolución. Ajustar el volumen a 3,9 ml (3,9 g) con
y agitar el tubo en un mezclador de vórtice. Colocar el tubo en un baño de agua agua, teniendo en cuenta el peso original del tubo.
hirviendo vigorosamente y eliminar después de 5 min.

5. proceder de Etapa 4 de Ensayo YO. 5. Añadir 0,1 ml de Suspensión 2 ( AMG) diluido 50 veces en
Reactivo 1 y se incuba en un baño de agua a 50 ° C durante 30 min.
V. Método de ensayo para la determinación de almidón en muestras
que también contienen D-glucosa y / o maltodextrinas 6. Si la solución es turbia, Centrifugar el tubo a 12.000 rpm
durante 10 min. Utilice el filtrado transparente para el ensayo. Por lo general, ya sea
1. muestra Molino (cereales, plantas o alimentos producto; aprox. 50 g)
sin dilución, o una dilución de 10 veces podrían ser necesarias.
para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo.

2. Con precisión muestra de harina de peso ( • 100 mg) a un vaso


tubo de centrífuga (17 ml de capacidad). Toca el tubo para asegurar que toda la
referencias
muestra cae a la parte inferior del tubo.
3. Añadir 5,0 ml de etanol acuoso (v / v 80%), e incubar Luego, (1987). Medida de el contenido de almidón de

el tubo a 80-85 ° C durante 5 min. Mezclar el contenido en un agitador almidones comerciales. Almidón, 39, 414-416.

vortex y añadir otros 5 ml de 80% v en etanol acuoso / v.


Karkalis, J. (1985). Un método enzimático mejorado para la determinación de
almidón nativo y modificado. J. Sci. Fd. Agric.,
4. Centrifugar el tubo durante 10 min a 3000 rpm en un banco
36, 1019-1027.
centrífugo. Rechazar el sobrenadante.
5. Resuspender el precipitado en 10 ml de 80% v / v acuosa Asociación Americana de Químicos de Cereales: “Los métodos aprobados de la AACC”.

etanol y agitación en un mezclador de vórtice. Centrífuga como antes y se vierte Método 76-11, Aprobado en octubre 1976.

cuidadosamente el sobrenadante.
Batey, IL (1982). análisis almidón utilizando alfa-amilasa termoestable. Almidón,
6. proceder de Etapa 4 de Ensayo I.
34, 125-128
Alternativamente: Comience a partir del Paso 4 de Ensayo III si la muestra contiene

almidón resistente. Englyst, HN y Cummings, JH (1988). Método mejorado para la medición de la fibra
dietética como polisacáridos no amiláceos en alimentos vegetales. J. AOAC Int., 71,

VI. Método de ensayo para la determinación de almidón en muestras 808-814.


en la que el almidón está presente en una forma soluble y D-glucosa y
McCleary, BV, Solah, V. & Gibson, TS (1994). La medición cuantitativa de almidón
maltodextrinas no están presentes
total en las harinas y productos de cereales. J. Cereal Science, 20, 51-58.

1. Filtrar una parte alícuota de la solución de muestra a través de Whatman

No. 1 papel de filtro (o papel de filtro de fibra de Whatman GF / A de vidrio si es McCleary, BV, Gibson, TS y Mugford, DC (1997). Medida de
necesario). Utilice el filtrado transparente para el ensayo. total almidón en productos de cereales por
2. Añadir 10 ml de este filtrado a un tubo de vidrio. Añadir 2 ml de amiloglucosidasa - α- amilasa método: Estudio Colaborativo. J. AOAC Int., 80,
Reactivo 1 (tampón de acetato 100 mM, pH 5,0) más 0,1 ml de 571-579.
Suspensión 2 ( AMG) diluido 10 veces en el Reactivo 1 y se incuba en un
McCleary, BV, McNally, M., Monaghan, D. & Mugford, DC (2002). Medida de α- Actividad
baño de agua a 50 ° C durante 30 min. Ajustar el volumen a 20 ml (o 20 g)
de la amilasa en harina blanca de trigo, molidos de malta, y preparaciones
con agua destilada.
microbianas enzimáticos utilizando el ensayo de Ceralpha: Collaborative Study. J.
3. Utilice el filtrado claro, sin diluir para el ensayo.
AOAC Int., 85, 1096-1102.

VII. Método de ensayo para la determinación de almidón en muestras


en la que el almidón está presente en una forma soluble y D-glucosa y McCleary, BV, McNally, M. & Rossiter, P. (2002). Medición de almidón resistente por
maltodextrinas están presentes digestión enzimática en muestras de almidón y materiales vegetales seleccionados:
Collaborative Study. J. AOAC Int., 85, 1103-1111.
1. Filtrar una parte alícuota de la solución de muestra a través de Whatman

No. 1 papel de filtro (o papel de filtro de fibra de Whatman GF / A de vidrio si es

necesario). Utilice el filtrado transparente para el ensayo.


McCleary, BV y Monaghan, DA (2002). Medición de almidón resistente. J.

2. Añadir 2 ml de la solución a analizar a un ml de vidrio 17 AOAC Int., 85, 665-675.

tubo de ensayo. A continuación, añadir 8 ml de 95% v / v de etanol y se mezcla

vigorosamente en un mezclador de vórtice. Dejar reposar en la sala Lanzamiento 12/16


Prueba criterios Resultado

Eficacia de la prueba Reacción completada dentro del tiempo declaró Cumple con la especificación

Valor objetivo para material estándar recomendado +/- 10% Cumple con la especificación

absorbancia de reacción en blanco + / - 10% del valor en blanco Cumple con la especificación

Aprobado por:
José Prates
Gerente Senior de Sistemas de Calidad

Por favor, pregunte info@nzytech.com para obtener cualquier información adicional acerca de este kit,

incluyendo aplicaciones específicas adicionales.

Estrada do Paço do Lumiar, 22 Campus do


Lumiar - Edificio E, R / C 1649-038 Lisboa,
Portugal Tel.:+351.213643514 Fax:
351.217151168

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