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α- amilasa
Los gránulos de almidón + H 2 O maltodextrinas
composición del kit
AMG Suspensión 1: termoestable •• amilasa (12 ml, 8300U / ml) en 25% de glicerol Estable
Las maltodextrinas + H 2 O D-glucosa
durante 3 años a 4 ° C.
VAINA
quinonaimina + 4 H 2 O Nota: Si la muestra se va a analizar siguiente ensayo II (AOAC Método Oficial
996.11), la enzima debe me diluye en el Reactivo 4 (MOPS 50 mM, pH 7,0)
a
termoestable α- hidrólisis de amilasa almidón en maltodextrinas ramificados y Suspensión 2: Amiloglucosidasa (10 ml, 3300U / ml) en 50% de glicerol Estable
Mezcla 4. enzimas de reactivos GOD-POD. polvo de glucosa oxidasa (GOD), Reactivo 5. tampón de acetato sódico (200 mM, pH 4,5) más azida de sodio
peroxidasa (POD) y 4aminoantipyrine liofilizadas. Estable durante 5 años a (0,02% w / v).
-20 ° C.
Opcional: Sólo es necesario si las muestras se analizaron de acuerdo con Ensayo II.
con cada conjunto de ensayos. Analizar al menos un extracto a partir del almidón de maíz de
La seguridad
control con cada conjunto de ensayos.
Los reactivos que se utilizan en la determinación del almidón no son materiales peligrosos
El tiempo de incubación con el reactivo de GOD-POD no es crítica, pero debe
(ver Reglamento de Sustancias Peligrosas). Sin embargo, el tampón concentrado
ser al menos 20 min. Sin embargo, el tiempo para la formación de color máxima
contiene azida sódica como conservante. Las medidas generales de seguridad que se
con 100 g de estándar D-glucosa se debe comprobar, para cada nuevo lote de
aplican a todos los productos químicos
reactivo GodPod (por lo general 15 min). El color formado a través de la
sustancias deben ser seguidas. Para más
reacción es estable a temperatura ambiente durante al menos 2 horas después
información sobre el uso seguro de este kit, consulte las MSDS disponibles
de desarrollo.
en www.nzytech.com.
temperatura ambiente.
Las mezclas se pueden obtener con una espátula de plástico o por inversión suave después
Almidón,% w / w = • A x F x D x 1,8
= • A x F x ••
0.1 X 1 1000 X 100 W X 162180
Dónde,
W = peso de la muestra analizada en mg ( “tal cual”) Información general sobre la preparación de la muestra
5. Se coloca el tubo en un baño a 50 ° C. Añadir 0,1 ml de muestra cae a la parte inferior del tubo.
Suspensión 2 ( AMG). Agitar el tubo en un mezclador de vórtice y se incuba que a 50 ° 3. Wet con 0,2 ml de etanol acuoso (80% v / v) para ayudar
C durante 30 min. dispersión y se agitó el tubo en un mezclador de vórtice.
6. Transferir todo el contenido del tubo de ensayo a un 100 ml 4. Añadir una barra magnética de agitación y 2 ml de Reactivo 3 (2 M
matraz aforado (con un embudo para ayudar a la transferencia). Utilice una botella
KOH) a cada tubo y resuspender los gránulos (y se disuelve el almidón
de lavado para enjuagar el contenido del tubo a fondo. Ajustar el volumen con agua
resistente) por agitación durante aprox. 20 min en un baño de hielo / agua
destilada. Mezclar bien.
durante un agitador magnético.
7. Centrifugar una alícuota de esta solución a 3000 rpm durante 10
min. Utilice el filtrado claro, sin diluir para el ensayo, por duplicado.
Nota:
- No mezclar en un vórtex para evitar el almidón para emulsionar.
Nota:
Como alternativa, en el paso 6, si el contenido de almidón es desconocida y se - Asegúrese de que el contenido del tubo se agitó vigorosamente a medida
supone que es menos de 10% w / w, ajustar el volumen a 10 ml (10 g) con agua que se añade la solución de KOH. Esto evitará la formación de una masa de
destilada y después centrifugar los tubos a 3000 rpm durante 10 min. Para las material de almidón que será entonces difícil de disolver.
y productos alimenticios que no contienen almidón resistente, D-glucosa y / 6. Incubar los tubos durante 30 min con intermitente de mezcla en
(Método Oficial de la AOAC 996.11) 7. Para las muestras que contienen almidón total> 10%: cuantitativamente
para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo. bien. Centrifugar una alícuota de la solución a 3.000 rpm durante 10 min.
5. proceder de Etapa 4 de Ensayo YO. 5. Añadir 0,1 ml de Suspensión 2 ( AMG) diluido 50 veces en
Reactivo 1 y se incuba en un baño de agua a 50 ° C durante 30 min.
V. Método de ensayo para la determinación de almidón en muestras
que también contienen D-glucosa y / o maltodextrinas 6. Si la solución es turbia, Centrifugar el tubo a 12.000 rpm
durante 10 min. Utilice el filtrado transparente para el ensayo. Por lo general, ya sea
1. muestra Molino (cereales, plantas o alimentos producto; aprox. 50 g)
sin dilución, o una dilución de 10 veces podrían ser necesarias.
para pasar un tamiz de 0,5 mm usando un molino centrífugo.
el tubo a 80-85 ° C durante 5 min. Mezclar el contenido en un agitador almidones comerciales. Almidón, 39, 414-416.
etanol y agitación en un mezclador de vórtice. Centrífuga como antes y se vierte Método 76-11, Aprobado en octubre 1976.
cuidadosamente el sobrenadante.
Batey, IL (1982). análisis almidón utilizando alfa-amilasa termoestable. Almidón,
6. proceder de Etapa 4 de Ensayo I.
34, 125-128
Alternativamente: Comience a partir del Paso 4 de Ensayo III si la muestra contiene
almidón resistente. Englyst, HN y Cummings, JH (1988). Método mejorado para la medición de la fibra
dietética como polisacáridos no amiláceos en alimentos vegetales. J. AOAC Int., 71,
No. 1 papel de filtro (o papel de filtro de fibra de Whatman GF / A de vidrio si es McCleary, BV, Gibson, TS y Mugford, DC (1997). Medida de
necesario). Utilice el filtrado transparente para el ensayo. total almidón en productos de cereales por
2. Añadir 10 ml de este filtrado a un tubo de vidrio. Añadir 2 ml de amiloglucosidasa - α- amilasa método: Estudio Colaborativo. J. AOAC Int., 80,
Reactivo 1 (tampón de acetato 100 mM, pH 5,0) más 0,1 ml de 571-579.
Suspensión 2 ( AMG) diluido 10 veces en el Reactivo 1 y se incuba en un
McCleary, BV, McNally, M., Monaghan, D. & Mugford, DC (2002). Medida de α- Actividad
baño de agua a 50 ° C durante 30 min. Ajustar el volumen a 20 ml (o 20 g)
de la amilasa en harina blanca de trigo, molidos de malta, y preparaciones
con agua destilada.
microbianas enzimáticos utilizando el ensayo de Ceralpha: Collaborative Study. J.
3. Utilice el filtrado claro, sin diluir para el ensayo.
AOAC Int., 85, 1096-1102.
Eficacia de la prueba Reacción completada dentro del tiempo declaró Cumple con la especificación
Valor objetivo para material estándar recomendado +/- 10% Cumple con la especificación
absorbancia de reacción en blanco + / - 10% del valor en blanco Cumple con la especificación
Aprobado por:
José Prates
Gerente Senior de Sistemas de Calidad
Por favor, pregunte info@nzytech.com para obtener cualquier información adicional acerca de este kit,
www.nzytech.com